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同济大学学报（医学版） 2022年第6期43卷 855-860页

作者：雷笑霄闫香珍罗礼君同济大学附属口腔医院牙周病科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

牙周炎是成年人失牙的首要原因。目前的治疗方法能有效阻止炎症进一步发展,但牙周组织再生仍然是临床亟待解决的难题。研究表明干细胞移植可以促进牙周组织再生。与传统的二维细胞培养技术相比,三维培养细胞的形态及分子调控与体内细胞... 详细信息

牙周炎是成年人失牙的首要原因。目前的治疗方法能有效阻止炎症进一步发展,但牙周组织再生仍然是临床亟待解决的难题。研究表明干细胞移植可以促进牙周组织再生。与传统的二维细胞培养技术相比,三维培养细胞的形态及分子调控与体内细胞更接近。本文就牙周组织再生中细胞治疗策略的细胞应用种类、应用方式及其优缺点,以及三维多细胞球体培养技术在牙周组织再生中的研究进展进行综述。

关键词：牙周组织再生干细胞三维细胞培养多细胞球体

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炎性牙周膜干细胞影响T细胞迁移及活化的初步研究

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口腔颌面外科杂志 2023年第3期33卷 148-154页

作者：任乐魏玉马鹏飞易紫媚赵洁晨吴珺华上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:初步探讨炎性牙周膜干细胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)在牙周炎中对T细胞免疫的影响及可能机制。方法:使用磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激PDLSCs模拟健康及炎性环境下的PDLSCs,收集2组PDLSCs条件培养液(conditioned medium,CM),即健康PDLSCs条件培养液(CON-CM组)和炎性PDLSCs条件培养液(LPS-CM组),并收集同批次培养液为阴性对照(NC组),分别将其作用于人正常T淋巴细胞系H9细胞,观察不同CM对T细胞增殖和迁移能力的作用。进一步采用植物血凝素-L(phytohemagglutinin-L,PHA-L)刺激T细胞免疫活化,采用CM作用于活化状态下的H9细胞,并检测T细胞免疫活化相关基因白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、CC趋化因子受体6(CC chemokine receptor 6,CCR6)表达的变化,同时观察LPS刺激对PDLSCs分泌CC趋化因子配体20(CC chemokine ligand 20,CCL20)的影响。结果:与NC组和CON-CM组相比,LPS-CM组能促进T细胞的增殖、迁移,及IL-2、IFN-γ、IL-17和CCR6的表达(P<0.05),且在LPS的刺激下,PDLSCs分泌的CCL20含量明显增多(P<0.001)。结论:正常PDLSCs具有一定免疫调节作用,而炎性PDLSCs可能通过CCL20-CCR6轴促进了T细胞的增殖、迁移和活化等免疫生物学行为。

关键词：牙周炎牙周膜干细胞 T细胞免疫 CC趋化因子配体20 CC趋化因子受体6

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静电纺丝取向纳米纤维作为组织工程生物支架的优势与特征

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中国组织工程研究 2021年第16期25卷 2575-2581页

作者：解健苏俭生同济大学口腔医学院•同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海市200072

背景:组织工程技术依赖生物材料支架作为组织修复及再生的支撑结构。在这些生物支架中,静电纺丝纤维支架因其能够模拟细胞外基质天然结构等优点被广泛应用于再生医学。目的:综述目前静电纺丝取向纳米纤维在组织工程领域的应用。方法:由... 详细信息

背景:组织工程技术依赖生物材料支架作为组织修复及再生的支撑结构。在这些生物支架中,静电纺丝纤维支架因其能够模拟细胞外基质天然结构等优点被广泛应用于再生医学。目的:综述目前静电纺丝取向纳米纤维在组织工程领域的应用。方法:由第一作者检索PubMed数据库2010年1月至2020年3月收录的相关文献,英文检索词为"electrospinning;aligned nanofibers;tissue engineering;regenerative medicine;bioactive materials",检索CNKI中国期刊全文数据库及万方数据库2010年1月至2020年3月收录的相关文献,关键词为"静电纺丝;取向纤维;有序纤维;组织工程;组织再生",最终纳入67篇文献进行归纳总结。结果与结论:静电纺丝是一种简便有效的纳米材料制备技术,近年来学者们通过静电纺丝技术将多种具有良好生物相容性及生物降解性的天然材料或聚酯材料制备成具有不同结构的电纺纳米纤维支架,并广泛应用于组织工程及再生医学等领域。其中,受天然细胞外基质高度定向特征启发而设计的静电纺丝取向纳米纤维支架,具有高度一致的纤维排列方向,可通过接触指导促进细胞黏附、迁移,而与细胞或生长因子的结合可进一步促进细胞的增殖、分化,最终实现组织再生,在神经、心肌、肌腱、骨组织再生及伤口愈合等领域中展现了其巨大的应用潜能及广阔的的应用前景。

关键词：材料静电纺丝纳米纤维生物材料组织工程再生医学综述

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Zfp260对牙周炎破骨细胞分化影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2025年第2期35卷 91-97页

作者：贡若男王佐林上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究锌指蛋白260(zinc finger protein 260,Zfp260)对牙周炎破骨细胞分化的影响。方法:将Zfp260小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染进单核/巨噬细胞系RAW264.7,转染后的细胞在核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)诱导7 d后,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察破骨细胞的形成,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测破骨细胞分化标志基因的表达水平。基于Zfp260 flox/flox小鼠(对照组)及基因型为Zfp260 flox/flox Lyz2-cre-的髓系细胞条件性敲除Zfp260基因(Zfp260 conditional knockout,Zfp260 CKO)小鼠(实验组)构建牙周炎模型,通过Micro-CT和组织学染色评价牙槽骨骨质破坏情况。结果:Zfp260在RAW264.7细胞向破骨细胞分化过程中表达上调;沉默Zfp260表达后,RAW264.7细胞破骨分化能力下降,破骨分化标志基因表达下调(P<0.05);Zfp260 CKO组小鼠牙周炎侧骨吸收程度较轻。结论:Zfp260正向调控破骨细胞形成促进骨吸收,提示Zfp260可能成为牙周炎骨吸收的防治靶点。

关键词：牙周炎牙槽骨吸收破骨细胞锌指蛋白260

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Lmo7对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2025年第1期35卷 7-13页

作者：陶然王佐林上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究Lmo7(LIM domain 7)基因对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移的影响。方法:体外培养ATDC5细胞,通过免疫荧光染色观察Lmo7在细胞中的分布。对细胞进行成软骨诱导,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymeras... 详细信息

目的:探究Lmo7(LIM domain 7)基因对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移的影响。方法:体外培养ATDC5细胞,通过免疫荧光染色观察Lmo7在细胞中的分布。对细胞进行成软骨诱导,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)观察分化过程中Lmo7表达水平的变化。转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)以干扰Lmo7基因在ATDC5细胞的表达水平,通过RT-qPCR检测成软骨分化标志物的基因表达变化,CCK8法和划痕实验分别检测Lmo7敲低对ATDC5细胞增殖、迁移能力的影响。结果:Lmo7分布于细胞核及细胞质内。在体外诱导ATDC5细胞成软骨分化后,成软骨分化标志物表达上调,Lmo7的表达也随之上调。使用siRNA敲降Lmo7后,成软骨分化标志物SRY相关高迁移率族盒蛋白9(SRY-related high mobility group-box gene9,Sox9)、Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,Col2)表达显著上升。CCK8实验显示敲降组的增殖水平高于对照组。在划痕实验中,敲降组的划痕愈合率低于对照组。结论:Lmo7基因在ATDC5细胞成软骨分化期间上调,干扰Lmo7基因表达可以促进ATDC5细胞的成软骨分化和增殖能力,并可抑制ATDC5细胞的迁移能力。

关键词： Lmo7 ATDC5细胞分化增殖迁移

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LincRNA-EPS对RANKL和LPS诱导RAW264.7细胞破骨分化影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2024年第3期34卷 163-169页

作者：张栩王雅冰苏俭生同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究长链非编码RNA-EPS(long non-coding RNA-EPS,lincRNA-EPS)对核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞破骨分化的影响。方法:构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株,然后用RANKL诱导法和LPS诱导法(RANKL预刺激后行LPS诱导)同时进行破骨分化诱导,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase staining,TRAP staining)观察产生破骨细胞数量和形态的差异,鬼笔环肽染色评估所产生破骨细胞功能的差异,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测诱导后破骨相关基因mRNA表达量的差异。结果:成功构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株;不论是RANKL法诱导还是LPS法诱导,lincRNA-EPS过表达株和阴性对照株的细胞增殖情况均无显著差异(P>0.05);LPS法诱导下,TRAP染色显示lincRNA-EPS过表达株分化出的破骨细胞数量显著少于阴性对照株(P<0.05),鬼笔环肽染色显示lincRNA-EPS过表达株产生的F-肌动蛋白环体积显著小于阴性对照株,RT-q PCR显示linc RNA-EPS过表达株的破骨相关基因TRAP、CTSK、DC-STAMP、ATP6v0d2 mRNA表达均显著低于阴性对照株(P<0.05);但在RANKL法诱导下,二者各项表达均无显著差异(P>0.05)。结论:lincRNA-EPS的过表达对LPS诱导的破骨分化有明显的抑制作用,而且对诱导出的破骨细胞功能也起到负向调节作用,但lincRNA-EPS过表达对RANKL诱导的破骨分化及产生的破骨细胞的功能无显著影响。

关键词：长链非编码RNA 牙周炎破骨分化脂多糖

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基于支撑结构位置的骨增量方法分类及应用展望

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国际口腔医学杂志 2025年

作者：杨博范震董强杨晓喻陈明首都医科大学附属北京口腔医院种植科上海市同济口腔医院种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所贵州医科大学附属口腔医院修复种植科南方医科大学口腔医院种植中心

骨增量在口腔种植患者中应用广泛，严重萎缩的牙槽嵴骨增量效果较差。本文通过文献总结及回顾，基于支撑结构位置的不同，将常用的骨增量手术分为4类，归纳各骨增量技术的优势和不足，并结合临床工作中所做的探索对其应用展望等方面进... 详细信息

骨增量在口腔种植患者中应用广泛，严重萎缩的牙槽嵴骨增量效果较差。本文通过文献总结及回顾，基于支撑结构位置的不同，将常用的骨增量手术分为4类，归纳各骨增量技术的优势和不足，并结合临床工作中所做的探索对其应用展望等方面进行阐述，笔者认为第二类第二亚类的间接中央支撑方式前景广阔，考虑基于“间接中央支撑”理念设计新的骨增量术式。对中央支撑式骨增量技术理念的探索、发展和应用，将有望增加骨增量术式，为骨增量的临床决策提供全新思路。

关键词：骨增量支撑结构中央支撑口腔种植

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Prrx2对小鼠磨牙胚发育的影响研究

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口腔颌面外科杂志 2023年第3期33卷 131-137页

作者：朱辙文韩雪刘力维王佐林上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔种植科上海200072

目的:探究配对相关同源框2(paired related homeobox 2,Prrx2)在小鼠磨牙胚不同发育时期的表达及其对磨牙胚发育的影响。方法:利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析配对相关同源框1... 详细信息

目的:探究配对相关同源框2(paired related homeobox 2,Prrx2)在小鼠磨牙胚不同发育时期的表达及其对磨牙胚发育的影响。方法:利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析配对相关同源框1(paired related homeobox 1,Prrx1)和Prrx2在小鼠胚胎12.5 d(E12.5)至E18.5,出生后1、3、7 d(P1、P3、P7)磨牙牙胚中的表达,以及其在E13.5磨牙、毛发、脑、心脏、结肠、肾、肺、唾液腺等组织中的相对表达情况;使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默Prrx2基因的表达,通过对牙胚行体外器官培养,观察牙胚发育情况;并利用CCK8实验、细胞划痕实验观察牙胚间充质细胞的增殖和迁移能力。结果:RT-qPCR结果显示,相比其他组织,Prrx2在E13.5小鼠胚胎的磨牙、毛发、唾液腺中的表达量更高;相比于Prrx1,Prrx2磨牙胚发育后期(E16.5~E18.5)的表达水平仍高于初始阶段(E13.5);牙胚体外培养结果显示,沉默Prrx2后,牙胚宽度、高度及牙尖高度分别减少了(21.11±3.49)%、(12.08±5.30)%和(22.34±7.56)%(均P<0.05);CCK8实验、细胞划痕实验结果显示,沉默Prrx2后,牙胚间充质细胞增殖能力无变化(P>0.05)、迁移能力降低(P<0.05)。结论:Prrx2在牙胚形态成形的过程中,承担着重要的作用;Prrx2通过促进磨牙胚间充质细胞的迁移能力,进而影响磨牙胚生长和牙尖发育的进程。

关键词：牙胚发育 Prrx2 体外培养小鼠

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阿奇霉素辅助Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者非手术治疗的临床疗效及其对唾液微生物群落的影响

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口腔医学 2022年第7期42卷 609-616页

作者：杨若渠霍芃呈胡琮佼施明妍罗礼君同济大学附属口腔医院牙周病科·上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的评价全身应用阿奇霉素辅助治疗对Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者非手术治疗的临床疗效及其对唾液微生物群落的影响。方法纳入40例Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者作为研究对象,随机分为常规非手术治疗组(SRP组)和阿奇霉素辅助非手术治疗组(AZI组)。在基线、SR... 详细信息

目的评价全身应用阿奇霉素辅助治疗对Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者非手术治疗的临床疗效及其对唾液微生物群落的影响。方法纳入40例Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者作为研究对象,随机分为常规非手术治疗组(SRP组)和阿奇霉素辅助非手术治疗组(AZI组)。在基线、SRP后第3天和第6周3个时点进行临床检查和唾液采集。通过临床检查分析两组患者临床治疗效果;通过16S rRNA测序分析唾液微生物组,确定各分类单元丰富度、多样性和相对丰度的差异。结果与基线相比,两组患者治疗后所有临床指数均显著改善(P<0.001)。与SRP组相比,在治疗后第3天和第6周,AZI组的临床附着丧失(clinical attachment loss,CAL)和探诊出血(bleeding on probing,BOP)的改善更显著(P<0.05),但探诊深度(probing depth,PD)的改善仅在治疗后第6周时更明显(P<0.05)。位点水平分层统计结果显示,AZI组治疗后位点水平牙周指标优于SRP组。AZI组治疗后所有α多样性指数均显著降低(P<0.05),而SRP组仅Sobs指数治疗后第3天有短暂降低。治疗后,两组乳杆菌菌群比例均有所增加,但AZI组较高。AZI组密螺旋体和梭杆菌比例显著降低(P<0.05);治疗后第3天,卟啉单胞菌的比例显著降低,普雷沃菌的比例显著增加(P<0.05),但在治疗后第6周,两者占比均回归接近基线水平(P>0.05)。结论阿奇霉素结合常规的牙周非手术治疗,能改善Ⅲ/Ⅳ期牙周炎患者的临床治疗效果,改变其唾液微生物菌群的组成,抑制牙周红、橙复合体中的密螺旋体、梭杆菌和卟啉单胞菌。

关键词：阿奇霉素龈下刮治及根面平整牙周炎 16S rRNA测序

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小鼠早期牙胚发育的三维结构重建研究

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口腔颌面外科杂志 2023年第5期33卷 285-291页

作者：张晗孙瑶同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:三维重建小鼠牙发育早期牙胚的形态结构,对比无牙区发育不全的牙胚(rudimentary bud 2,R2)与磨牙区第一磨牙(the first molar,M1)牙胚的形态差异。方法:选取胚胎12.5 d(E12.5)及胚胎13.5 d(E13.5)小鼠胚胎头部标本,经冠状面连续石... 详细信息

目的:三维重建小鼠牙发育早期牙胚的形态结构,对比无牙区发育不全的牙胚(rudimentary bud 2,R2)与磨牙区第一磨牙(the first molar,M1)牙胚的形态差异。方法:选取胚胎12.5 d(E12.5)及胚胎13.5 d(E13.5)小鼠胚胎头部标本,经冠状面连续石蜡切片、苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后,获取组织学图像数据。图像经Photoshop CC 2018软件处理并配准,用Fiji软件再配准与赋予虚拟CT值后,导入Mimics Research 19.0软件进行三维重建和分析。结果:在重建的三维图像中观察到无牙区R2上皮可向间充质内陷形成蕾状,但其下方无明显的间充质细胞团形成。赋予无牙区R2和磨牙区M1虚拟CT值后,对重建图像进行半定量测量,发现凝聚在无牙区R2蕾状上皮周围的间充质细胞密度较低,凝聚面积较小。此现象可能与无牙区细胞增殖不如磨牙区活跃有关。结论:基于组织学切片的三维重建结果提示,发育早期小鼠无牙区丧失了形成间充质细胞团的能力。

关键词：三维重建牙发育牙胚无牙区间充质

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