检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2009年第2期29卷 188-192页

作者：蔡文杰王铭洁张宇玲琚立华朱依纯上海理工大学医疗器械与食品学院基础医学教研室上海200093 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系上海200032

目的构建显性负突变存活素质粒。方法从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,... 详细信息

目的构建显性负突变存活素质粒。方法从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,经测序鉴定后转染细胞,观察对细胞凋亡的影响。结果用巢式PCR扩增出含存活素基因的496 bp产物,和引入酶切位点后的452 bp产物。通过重叠PCR 3次PCR反应,得到452 bp大小的定点突变产物。重组载体经测序鉴定表明插入片段无误,转染细胞后能发出明亮的绿色荧光,Hochest染色显示细胞凋亡比空质粒对照组显著。结论成功构建了显性负突变存活素质粒。

关键词：显性负突变存活素重叠PCR

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胱硫醚-γ-裂解酶在三种微血管内皮细胞上的表达

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中国微循环 2009年第4期13卷 227-230,F0002页

作者：蔡文杰王铭洁张宇玲金惠铭朱依纯上海理工大学医疗器械与食品学院基础医学教研室上海200093 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系

目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢(H2S)的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC),设计相应引物后用RT-PCR的方法检测胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因转... 详细信息

目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢(H2S)的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC),设计相应引物后用RT-PCR的方法检测胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因转录情况,进一步用兔抗大鼠CSE和CBS多克隆抗体对CMEC进行蛋白水平的免疫荧光染色。此外对另两种微血管内皮细胞株RF/6A和bEnd.3也检测了H2S生成酶的表达。结果三种微血管内皮细胞都扩增出CSE基因的特异条带,而CBS基因都未扩增出相应产物。CMEC的免疫荧光染色显示CSE抗体染色为阳性,CBS抗体染色为阴性。结论首次发现了微血管内皮细胞上存在CSE的表达,提示内皮细胞可以通过生成硫化氢调节心血管活动。

关键词：硫化氢胱硫醚-γ-裂解酶微血管内皮细胞

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锌指蛋白KOX12的克隆及表达

引用

放射免疫学杂志 2009年第5期22卷 524-526页

作者：陈颖鸟越俊彦廣橋良彦沈敏刘宝林上海理工大学医疗器械与食品学院 200093 上海杨浦区安图医院医学实验科 200093 日本札幌医科大学病理教研室

目的:在大肠杆菌中表达KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定基础。方法:根据GenBank中KOX12的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR的方法从肺癌细胞株中扩增得到KOX12片段,将它克隆到PcDNA3.1F2/FOXM1质粒,然后经BamHI和XhoI双酶切,得到修... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定基础。方法:根据GenBank中KOX12的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR的方法从肺癌细胞株中扩增得到KOX12片段,将它克隆到PcDNA3.1F2/FOXM1质粒,然后经BamHI和XhoI双酶切,得到修饰过的KOX12基因片段,构建原核表达质粒PQE30/KOX12,以大肠杆菌M15为宿主菌表达目的蛋白,并采用Ni-NTA agarose亲和层析对目的蛋白进行了纯化。结果:构建了PQE30/KOX12原核表达体系,并检测到KOX12蛋白的有效表达。结论:成功地构建了原核表达质粒PQE30/KOX12并表达了KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定了基础。

关键词：锌指蛋白 KOX12 表达纯化

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免疫抑制剂在器官移植中的应用与安全性评价

引用

中国组织工程研究与临床康复 2008年第31期12卷 6101-6104页

作者：王艳琚立华陈昌乐上海理工大学医疗器械与食品学院医学基础教研室上海市200093 上海市气功研究所上海市200030

器官移植已达到相当成功的水平,这与免疫抑制剂在临床应用是分不开的。免疫抑制剂在器官移植中用于防治排斥反应,即干扰受体对外来抗原的识别和对非自身细胞的清除,但由于免疫抑制剂的作用是非特异的,选择性差,有明显的毒副作用故对正... 详细信息

器官移植已达到相当成功的水平,这与免疫抑制剂在临床应用是分不开的。免疫抑制剂在器官移植中用于防治排斥反应,即干扰受体对外来抗原的识别和对非自身细胞的清除,但由于免疫抑制剂的作用是非特异的,选择性差,有明显的毒副作用故对正常和异常的免疫反应均有抑制作用。免疫抑制剂在临床应用后引起的肝、肾毒性已经影响到了肾移植术后患者的生存质量和移植肾的长期存活率。为了进一步提高临床效果,促使人们研发新型免疫抑制剂,研究不同免疫抑制剂等组合的免疫效果。本文分析免疫抑制剂在器官移植中的应用效果及在器官移植急性排斥反应中的作用。探讨免疫抑制剂在器官移植中应用的安全性。

关键词：免疫抑制剂器官移植肾移植肝移植安全性

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