检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病毒学 2005年第6期20卷 632-636页

作者：王传彬田克恭王宏伟孙明遇秀玲金萍陈西钊全国畜牧兽医总站农业部兽医诊断中心北京100094

从鸡组织中获得了一株分离物,能凝集鸡红细胞,经负染后电镜观察可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约 90～100nm;经血凝抑制和神经氨酸酶抑制试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV),命名为A／Chicken／Hebei／1／20... 详细信息

从鸡组织中获得了一株分离物,能凝集鸡红细胞,经负染后电镜观察可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约 90～100nm;经血凝抑制和神经氨酸酶抑制试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV),命名为A／Chicken／Hebei／1／2002(H7N2)(简称CK／HB／1／02)。将该病毒接种SPF鸡,测得静脉接种致病指数(IVPI) 为0．00,剖检可见实验鸡多种组织器官有出血性变化,判为低致病力AIV;接种后7d从实验鸡泄殖腔棉拭中回收到病毒,并在血清中检测到H7亚型AIV抗体。经RT-PCR扩增了病毒HA1基因片段(约1．1kb),测定其核苷酸序列并与GenBank中的序列比较。结果表明,该病毒的HA1基因序列与AIV标准株A／***．／Eng-Q／79 (H7N1)的HA1基因同源性最高,为99．4％;与以色列和意大利H7N2 AIV的同源性较高,为96．8％～98．2％;与美国H7N2病毒的同源性很低,约为81．0％;其HA裂解位点的氨基酸序列为-KGR-GLF-,符合低致病力AIV的特征。

关键词：禽流感病毒 H7N2 亚型分离鉴定致病性

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抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 702-704页

作者：曾艳兵焦新安潘志明黄金林张评汻张苏华孙泉云刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 上海畜牧兽医总站兽医诊断中心上海201103

目的 :制备抗禽流感病毒 (AIV)H9亚型血凝素蛋白的单克隆抗体 (mAb)。方法 :以AIVH9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原 ,免疫 8wk龄BALB/c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹... 详细信息

目的 :制备抗禽流感病毒 (AIV)H9亚型血凝素蛋白的单克隆抗体 (mAb)。方法 :以AIVH9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原 ,免疫 8wk龄BALB/c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹水mAb的效价 ;采用ELISA、HI、免疫荧光染色 (IF)及Westernblot鉴定mAb的特异性。结果 :获得 3株可稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株 2A3、2H1和 1C8,其腹水mAb的ELISA效价依次为 1× 10 7、1× 10 5和 5× 10 6,血凝抑制效价为 1× 2 8～ 1× 2 13 ;3株mAb的Ig亚类均为IgG1。以mAb 2H1进行Westernblot的结果显示 ,该mAb能与AIV的Mr 为 75 0 0 0的蛋白条带起反应 ,表明其是针对AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb。与 32株AIVH9亚型国内分离株进行血凝抑制试验表明 ,mAb 2H1具有良好的广谱性。结论 :成功地制备了抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ,为AIV的抗原性分析、血清学诊断。

关键词：禽流感病毒 H9亚型血凝素单克隆抗体

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外国国家级兽医诊断中心的作用

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中国牧业通讯 1999年第9期 40-41页

作者：王宏伟王传彬全国畜牧兽医总站兽医诊断中心

本文作者通过对9个国家的政府性国家级兽医诊断中心(实验室)的作用进行了综述。希望国外这些成功的经验,能对当前我国无规定疫病区的建设起到参考作用。

关键词：兽医诊断中心国家级外国

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近两年上海规模化猪场的热点传染病

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上海畜牧兽医通讯 1998年第2期 14-15页

作者：孙泉云刘红李维功张曹民潘锦平汤赛冬上海市畜牧兽医站诊断中心 201103 上海市闵行区畜牧兽医站 201100

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猪葡萄球菌病的诊治

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中国兽医杂志 1998年第10期24卷 29-30页

作者：张银田段占启吕海涛侯英素逯纪成高婕全国畜牧兽医总站河北省保定市畜禽疫病诊断中心

保定市某２０００头规模养猪场，其中４４０头保育猪于１９９８年４月下旬８５％以上发病，经诊断为葡萄球菌病，通过采取有效措施，５天内病猪全部治愈。１发病情况该场陆续从产床转入同一保育猪舍的４４０头保育猪，在转群２周后，该... 详细信息

保定市某２０００头规模养猪场，其中４４０头保育猪于１９９８年４月下旬８５％以上发病，经诊断为葡萄球菌病，通过采取有效措施，５天内病猪全部治愈。１发病情况该场陆续从产床转入同一保育猪舍的４４０头保育猪，在转群２周后，该场利用两天时间对小公猪进行了去势，...

关键词：猪病葡萄球菌病诊断治疗

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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的分离与分析

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中国兽医科技 2000年第4期30卷 7-10页

作者：叶春艳雷万里王传彬王宏伟陈西钊全国畜牧兽医总站兽医诊断中心北京100094 中国科学院微生物研究所北京100080

根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)的核酸序列 ,设计合成 1对引物 ,用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)从病猪肺中扩增出编码核衣壳蛋白 (NP)基因 ,克隆入T 载体后 ,利用双脱氧链末端终止法测定序列 ,所获得的序列经Ban... 详细信息

根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)的核酸序列 ,设计合成 1对引物 ,用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)从病猪肺中扩增出编码核衣壳蛋白 (NP)基因 ,克隆入T 载体后 ,利用双脱氧链末端终止法测定序列 ,所获得的序列经Bankit投放到GenBank ,并利用DNASIS、Dnastar等软件进行了分析。

关键词：核衣壳蛋白 PRRSV RT-PCR 基因克隆序列分析

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禽流感病毒血凝素基因在大肠杆菌中的表达

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中国预防兽医学报 2004年第3期26卷 173-176页

作者：宋晓晖王中立孙明田克恭陈西钊中国农业大学动物医学院北京100094 农业部全国畜牧兽医总站北京100026 农业部兽医诊断中心北京100094

采用RT＿PCR技术扩增禽流感病毒HA1基因,将HA1结构基因克隆于pGEX＿T载体上,测序结果表明插入的片段为HA1目的基因。切下目的基因HA1,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白原核表达载体PGEX＿4T＿2,获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分... 详细信息

采用RT＿PCR技术扩增禽流感病毒HA1基因,将HA1结构基因克隆于pGEX＿T载体上,测序结果表明插入的片段为HA1目的基因。切下目的基因HA1,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白原核表达载体PGEX＿4T＿2,获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定,表明HA1基因插入的位置、大小和读码框架均正确。证明成功构建了融合表达载体pGEX＿HA1。构建好的重组质粒,经1mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到了大量表达,经过4h表达量既达到高峰。融合蛋白GST＿HA1的分子量为62KD,以包涵体形式存在。Western＿Blot分析表明,融合蛋白能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。

关键词：禽流感病毒血凝素表达 pGEX-4T-2

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对兽医实验室生物安全建设的思考——法国、瑞典高等级生物安全实验室及设备生产企业考察情况报告

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中国牧业通讯 2004年第7期 38-40页

作者：陈国胜田克恭全国畜牧兽医总站动物防疫监督处 100026 农业部兽医诊断中心 100026

随着我国兽医事业的迅猛发展和生物技术的广泛应用 ,尤其是2003年春季突发的SARS疾病和2004年初全国暴发的高致病性禽流感疫情后 ,各地按农业部第302号公告《兽医实验室生物安全管理规范》规定 ,申请建立BSL -3实验室的报告数量急增 ,... 详细信息

随着我国兽医事业的迅猛发展和生物技术的广泛应用 ,尤其是2003年春季突发的SARS疾病和2004年初全国暴发的高致病性禽流感疫情后 ,各地按农业部第302号公告《兽医实验室生物安全管理规范》规定 ,申请建立BSL -3实验室的报告数量急增 ,而生物安全实验室的建设和维持运转需要庞大的经费支持 ,如何集中有限资金 ,加强生物安全实验室建设 ,提升突发动物疫病和重大动物卫生事件应急反应能力 ,成为我们当前工作的重大课题。为此 ,2003年9月7～19日 ,由农业部等单位组成的实验室专家考察团 ,前往法国、瑞典考察高等级生物安全实验室及有关设施设备生产企业 ,考察发现 ,国外在生物安全实验室建设及其管理方面的许多成功经验 ,对我国兽医实验室的建设具有十分重要的借鉴意义。现将此次考察情况刊发 ,希望各地能结合实际应用于实践。

关键词：兽医实验室生物安全法国瑞典监督管理法制建设因地制宜实验室设备生产生产企业

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猪伪狂犬病病毒XIN-W株gD和gE基因的克隆及序列分析

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动物医学进展 2005年第1期26卷 66-70,88页

作者：陈磊赵铁柱张鲁安李岩新疆兵团畜牧兽医工作总站动物疫病控制与诊断中心新疆乌鲁木齐830063 农业部兽医诊断中心北京100094

根据已发表的PRVgD、gE基因序列 ,设计合成了两对引物 ,对猪伪狂犬病病毒XIN W株相关的毒力基因gD、gE序列进行测定和分析。经PCR扩增分别得到了全长为 12 0 9bp,1 743bp的gD、gE全基因序列 ,将它们克隆到pGEM T Easy载体中 ,并转化JM1 ... 详细信息

根据已发表的PRVgD、gE基因序列 ,设计合成了两对引物 ,对猪伪狂犬病病毒XIN W株相关的毒力基因gD、gE序列进行测定和分析。经PCR扩增分别得到了全长为 12 0 9bp,1 743bp的gD、gE全基因序列 ,将它们克隆到pGEM T Easy载体中 ,并转化JM1 0 9,挑取阳性菌落的质粒进行PCR、酶切、测序鉴定 ,与其他参考毒株的gD、gE基因进行比较。结果表明 ,XIN W株与其它毒株相比 ,gD、gE基因核苷酸序列的同源性分别为 97.9%～99.3 % ,98.0 %～ 98.7% ;氨基酸序列的同源性分别为 97.0 %～ 99.3 % ,97.1 %～ 98.1 %。不同的PRV毒株间gD、gE基因在核苷酸水平和氨基酸水平高度保守。遗传进化树显示 ,XIN W株和国内其它毒株起源相同。

关键词：伪狂犬病病毒 gD基因 gE基因序列分析

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江苏常州地区禽白血病血清学调查研究

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中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 185-189页

作者：王建孙彤孙竹筠苏苌陈鸿军陈丹清江苏省常州市武进区畜牧兽医中心常州213161 中国农业科学院上海兽医研究所动物疫病诊断中心上海200241

为了解江苏常州地区肉鸡禽白血病病毒(ALV)感染情况,本研究采集了该地区2019年7-12月、2020年1-4月肉鸡血清样本1257份,通过ELISA试剂盒检测ALV-A/B、ALV-J、抗原p27阳性率。结果显示:在接受调查的两个地区均存在ALV感染及混合感染,且AL... 详细信息

为了解江苏常州地区肉鸡禽白血病病毒(ALV)感染情况,本研究采集了该地区2019年7-12月、2020年1-4月肉鸡血清样本1257份,通过ELISA试剂盒检测ALV-A/B、ALV-J、抗原p27阳性率。结果显示:在接受调查的两个地区均存在ALV感染及混合感染,且ALV-A/B感染率(13.13%)均高于ALV-J(5.01%);不同月份阳性率存在一定差异,ALV-A/B、ALV-J均为春夏季阳性率较高,秋冬季逐渐下降趋势;抗体阳性样本中有54.39%的p27抗原阳性率。本次调查为江苏常州地区商品肉鸡ALV净化及防控提供一定的参考依据。

关键词： ALV-J ALV-A/B p27抗原 ELISA

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