检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报(医学版) 1982年第3期 171-177页

作者：赵前李茂深何开玲上海第一医学院基础医学部生物化学教研室研究生导师上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

观察抗癌药物对转录活性的影响具有重要的意义,所以建立了小鼠肝细胞核和小鼠HepA腹水型肝癌(简称HepA)细胞核的体外转录系统,并观察了一些抗癌药物包括中药制剂,对两种细胞核转录活性的影响。结果表明,细胞核体外转录系统是可靠的,可... 详细信息

观察抗癌药物对转录活性的影响具有重要的意义,所以建立了小鼠肝细胞核和小鼠HepA腹水型肝癌(简称HepA)细胞核的体外转录系统,并观察了一些抗癌药物包括中药制剂,对两种细胞核转录活性的影响。结果表明,细胞核体外转录系统是可靠的,可以作为观察药物对转录活性影响的有效工具。10-羟基喜树硷可能作用于DNA分子的某些特异部位而抑制转录活性;氯化花椒硷对核内依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅰ具有选择性抑制作用。

关键词：细胞核小鼠核(细胞学) 小家鼠转录活性花椒碱抗癌药物

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立体定向大鼠脑内SHG-44人脑胶质瘤模型的建立

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吉林大学学报（医学版） 2004年第2期30卷 224-226,F003页

作者：洪新雨罗毅男崔佳乐付双林王占峰别黎吉林大学第一医院神经外科吉林长春130021 吉林大学基础医学院药理学教研室吉林长春130021

目的 :探讨建立大鼠 SHG- 4 4脑胶质瘤模型的方法。方法 :选用雄性 Wistar大鼠 ,接种前连续 3d用地塞米松 1 mg/ 1 0 0 g体重灌胃 ;在立体定向条件下选取大鼠脑右侧尾状核区为靶点 ,接种 2× 1 0 5个处于对数生长期的 SHG- 4 4细胞 ... 详细信息

目的 :探讨建立大鼠 SHG- 4 4脑胶质瘤模型的方法。方法 :选用雄性 Wistar大鼠 ,接种前连续 3d用地塞米松 1 mg/ 1 0 0 g体重灌胃 ;在立体定向条件下选取大鼠脑右侧尾状核区为靶点 ,接种 2× 1 0 5个处于对数生长期的 SHG- 4 4细胞 ,接种后观察大鼠生长状态 ,分别于第 1、 2周进行核磁共振 (MRI)检查。在实验第 2周时解剖标本 ,行组织病理和 GFAP免疫组化检查。结果 :接种 1周后核磁共振检查 ,脑内形成实体瘤 ;HE染色组织病理证实是胶质瘤 ,GFAP免疫组化阳性 ;成瘤率约 6 0 %。结论 :用预先免疫抑制的方法。

关键词：神经胶质瘤疾病模型动物 SHG-44细胞株移植,异种立体定位技术

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胆道铸型扫描电镜观察

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上海医科大学学报 1995年第2期22卷 116-118页

作者：毛明珍汪良钟慈声上海医科大学基础医学院生物物理学教研室苏州医学院附属第一医院普外科

用扫描电镜铸型法观察大鼠肝内胆道系统以及与肝组织间的空间结构关系。结果：当用中等剂量的铸型剂（８０μｌ）从总胆管逆向注入时，可见小叶间及小叶内胆管及Ｍａｌｌ’ｓ间隙内有铸型剂充盈，胆小管中未见铸型剂；当用较大量（... 详细信息

用扫描电镜铸型法观察大鼠肝内胆道系统以及与肝组织间的空间结构关系。结果：当用中等剂量的铸型剂（８０μｌ）从总胆管逆向注入时，可见小叶间及小叶内胆管及Ｍａｌｌ’ｓ间隙内有铸型剂充盈，胆小管中未见铸型剂；当用较大量（２００μｌ）注入时，除上述部位充盈外，还可见肝狄氏间隙、肝血窦内有铸型剂。表明：铸型剂通过胆管上皮间隙，进入胆管周围淋巴而入Ｍａｌｌ’ｓ间隙；当铸型剂增多时，可经Ｍａｌｌ’ｓ间隙进入狄氏间隙和肝血窦。这可能是临床上造成胆道－静脉返流的一条途径。

关键词：扫描电镜术胆道铸型胆道静脉返流

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小鼠肝脏免疫抑制因子的一些特性

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复旦学报(医学版) 1985年第2期 103-108页

作者：吴厚生汪迺经何球藻上海第一医学院基础医学部病理生理学上海第一医学院化学教研室

本文采用磷酸缓冲生理盐水(PDS)从门脉灌洗小鼠肝脏,经匀浆管研磨肝组织,制备肝浸液。肝浸液越早加入淋巴细胞培养中,其抑制活性越明显。肝浸液的此种免疫抑制活性在-20℃时可保持70d,在-70℃时,至少可保存190d。推测肝浸液中主要含有... 详细信息

本文采用磷酸缓冲生理盐水(PDS)从门脉灌洗小鼠肝脏,经匀浆管研磨肝组织,制备肝浸液。肝浸液越早加入淋巴细胞培养中,其抑制活性越明显。肝浸液的此种免疫抑制活性在-20℃时可保持70d,在-70℃时,至少可保存190d。推测肝浸液中主要含有一种不被透析、不耐热、被强酸(pH≤4.6)和强碱(pH>11)所破坏,能耐受低温、冻融和能被50～70％饱和硫酸铵盐析的蛋白质。部分纯化的肝脏免疫抑制蛋白,在高浓度时,能强烈抑制淋巴细胞对促有丝分裂原的增生反应,而低浓度时,能增强淋巴细胞增生反应,因而它具有双向作用,即免疫调节作用。此外,肝浸液中可能还含有能与~3H-胸苷(~3H-dT)竞争的核苷类。

关键词：肝肝脏免疫抑制因子淋巴细胞增生反应促有丝分裂原氚胸腺嘧啶核苷

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1-磷酸鞘氨醇后适应对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

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中国药理学通报 2016年第2期32卷 184-189页

作者：李蒙蒙王雨晴张丽志娄建石温克天津医科大学基础医学院药理学教研室天津300070 天津市第一中心医院妇产科天津300192

目的研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)后适应对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法建立HUVEC缺氧/复氧损伤模型,将HUVEC细胞分为5组,正常对照组、S1P低剂量组、S1P中剂量组、S1P高剂量组以及缺氧/复氧损伤(H... 详细信息

目的研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)后适应对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法建立HUVEC缺氧/复氧损伤模型,将HUVEC细胞分为5组,正常对照组、S1P低剂量组、S1P中剂量组、S1P高剂量组以及缺氧/复氧损伤(H/R)组。MTT法检测细胞存活率;流式细胞术分析测定细胞凋亡率;比色法测定细胞培养液中总超氧化物歧化酶(total superoxide disnmtase,TSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(copper/zinc superoxide dismutase,CuZn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn-SOD)活力以及一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;荧光显微镜下观察线粒体膜电位;Western blot测定HUVECs细胞Bcl-2/Bax、eNOS蛋白的表达水平。结果与H/R组相比,S1P低、中、高剂量组可明显增加HUVECs细胞缺氧/复氧损伤后细胞存活率;均明显升高T-SOD活力、CuZn-SOD活力、Mn-SOD活力,降低MDA含量,明显升高NO含量及增加eNOS蛋白表达,降低凋亡率,抑制线粒体膜电位下降。结论 S1P能够使H/R损伤的HUVECs细胞凋亡率降低,且呈一定的浓度依赖性。S1P对H/R损伤的HUVECs细胞凋亡的保护作用可能与降低细胞内MDA含量,提高细胞内SOD活力,提升线粒体膜电位,增强抗凋亡蛋白Bcl-2/Bax的表达有关。

关键词： S1P 缺氧/复氧 HUVECs细胞 Bcl-2/Bax eNOS 凋亡

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大鼠再生肝与BERH-2肝癌细胞核转录调控的比较研究

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复旦学报(医学版) 1983年第3期 218-224页

作者：孙小俭何开玲导师上海第一医学院基础医学部生物化学教研室研究生上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

我们以正常分裂增殖能力强并具有部分胚胎性质的再生肝细胞与BERH-2肝癌细胞进行基因表达转录水平调控的比较研究,结果显示,再生肝和肝癌细胞核转录活性,尤其RNA聚合酶A的转录活性明显高于正常。RNA聚合酶B在再生肝中转录活性升高,但在... 详细信息

我们以正常分裂增殖能力强并具有部分胚胎性质的再生肝细胞与BERH-2肝癌细胞进行基因表达转录水平调控的比较研究,结果显示,再生肝和肝癌细胞核转录活性,尤其RNA聚合酶A的转录活性明显高于正常。RNA聚合酶B在再生肝中转录活性升高,但在肝癌却无明显变化,随着保温时间延长,反而略有下降。利用DNA酶I为探针,对再生肝和肝癌细胞核进行DNA消化动力学研究表明,再生肝染色质DNA酶I消化百分率与正常相同,说明转录活性部位的数量不变;而肝癌细胞核经短暂消化,其染色质对DNA酶I的敏感性增加,说明转录活性部位数量增加。利用DNA饱和分析法,在完整细胞核中测定了RNA聚合酶相对含量和相对比活性,显示再生肝RNA聚合酶含量增加,但比活性无明显变化;而肝癌细胞RNA聚合酶含量和比活性都高于正常。

关键词：肝癌细胞转录活性再生肝 BERH-2 细胞核核(细胞学) 大鼠转录调控

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骆驼蓬总碱通过诱导细胞自噬促进Tau蛋白和α-突触核蛋白的降解

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中华神经医学杂志 2021年第11期20卷 1081-1091页

作者：雷秀英伊力亚斯·艾萨张瑜陈倩冯学召西仁阿依·西热甫米娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院药理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院生药学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL ... 详细信息

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH作用24 h,观察细胞形态及数目的变化,采用MTT法检测细胞存活率;(2)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬激活剂雷帕霉素及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH作用4 h,采用免疫荧光染色检测细胞自噬体数;(3)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组、10μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L雷帕霉素、10μg/mL TAH作用4 h,Western blotting检测细胞p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ蛋白的表达;(4)将PC12细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬抑制剂氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用4 h,Western blotting检测细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达;(5)将PC12细胞分为TAH组和空白对照组,分别加入10μg/mL TAH和等量溶剂处理4 h后,Western blotting检测细胞磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)的表达;(6)将过表达Tau-绿色荧光蛋白(GFP)的Tet on HEK293细胞分为空白对照组、TAH组、强力霉素组、强力霉素+TAH组、强力霉素+TAH+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、强力霉素+TAH+氯喹组,后4组细胞加入200 ng/mL强力霉素处理24 h后,空白对照组加入等量溶剂,TAH组加入10μg/mL TAH,后3组细胞分别加入10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+5 mmol/L 3-MA、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹,作用24 h后在激光共聚焦显微镜下观察细胞绿色荧光强度的变化,Western blotting检测细胞Tau-GFP和LC3-Ⅱ蛋白的表达;(7)将稳定表达α-Syn的HEK293细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用24 h,Western blotting检测细胞α-Syn和LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果:(1)与空白对照组比较,20、50μg/mL TAH组细胞存活率降低,且50μg/mL TAH组细胞存活率低于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)与空白对照组比较,雷帕霉素组、10、20μg/mL TAH组细胞自噬体数增多,且10μg/mL TAH组细胞自噬体数多于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05),因此,选择10μg/mL TAH用于后续实验;(3)与空白对照组比较,雷帕霉素组、TAH组细胞p62蛋白的表达均降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)与空白对照组比较,氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,且TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,差异均有统计学意义(P<0.05);(5)与空白对照组比较,TAH组细胞p-mTOR、p-p70S6K的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);(6)强力霉素组细胞Tau-GFP蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素组降低,强力霉素+TAH+3-MA组、强力霉素+TAH+氯喹组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素组增加,强力霉素+TAH+3-MA组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组降低,强力霉素+TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05);(7)与空白对照组比较,TAH组HEK293细胞α-Syn蛋白的表达降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,TAH+氯喹组细胞α-Syn蛋白的表达高于TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TAH可能通过抑制mTOR/p70S6K信号通路激活神经细胞

关键词：骆驼蓬总碱细胞自噬 Tau蛋白 α-突触核蛋白

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H615肝癌和Hep A腹水肝癌的酶学比较 Ⅱ.酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶的活力及诱导的变化

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上海第一医学院学报 1983年第4期 283-288页

作者：盛宗梅陈惠黎上海第一医学院基础医学部生物化学教研室上海第一医学院基础医学部生物化学教研室研究生导师

正常615小棕鼠(615鼠)和小白鼠肝中的酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶(TAT)的活力可受氢化可的松、地塞米松、cAMP加茶碱、胰岛素和L-色氨酸的诱导,但两种鼠肝TAT的反应性有所差别。H615肝癌(H615)中的TAT活力仅为615鼠肝的1/2,虽能受上述五... 详细信息

正常615小棕鼠(615鼠)和小白鼠肝中的酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶(TAT)的活力可受氢化可的松、地塞米松、cAMP加茶碱、胰岛素和L-色氨酸的诱导,但两种鼠肝TAT的反应性有所差别。H615肝癌(H615)中的TAT活力仅为615鼠肝的1/2,虽能受上述五种诱导剂诱导,但比615鼠肝诱导后的水平低得多。其中cAMP加茶碱和胰岛素对H615中TAT诱导能力的降低较其他三种诱导剂更为明显,提示除DNA的转录、转录后或翻译等环节有异常外,尚有这两种化合物特殊诱导环节的缺损。Hep A小鼠腹水肝癌(Hep A)中的TAT活力极低,不受上述任何诱导剂的诱导;H 615和Hep A宿主肝中TAT的活力,后者低于前者,两者均低于正常肝,而分别高于H 615及Hep A,两者也可被五种诱导剂诱导,但诱导后的水平也低于正常肝而高于肝癌;由此推测,肝癌可能分泌一种化学物质对TAT的活力有抑制作用。

关键词：肝癌肝脏肿瘤诱导剂 H615 氢化可的松鼠肝小白鼠 TAT Hep A 腹水水肿酶学

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儿茶素对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV200凋亡的影响

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中国药理学通报 2004年第2期20卷 188-191页

作者：张肃梁钢黄志明黄仁彬唐安洲许佐良广西医科大学药理学教研室南宁530021 广西医科大学第一临床医学院南宁530021 北京大学医学部临床肿瘤学院基础免疫室北京100036

目的　研究两种儿茶素ECG、EGCG对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的促凋亡作用。方法　MTT法检测药物对细胞的毒性作用 ,用形态学观察法、TUNUL法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪PI染色法观察细胞凋亡。结果　 30mg·L-1ECG或 8mg... 详细信息

目的　研究两种儿茶素ECG、EGCG对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的促凋亡作用。方法　MTT法检测药物对细胞的毒性作用 ,用形态学观察法、TUNUL法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪PI染色法观察细胞凋亡。结果　 30mg·L-1ECG或 8mg·L-1EGCG联合 0 0 2 4mg·L-1长春新碱 (VCR)可用形态学观察、免疫组化法、琼脂糖凝胶电泳法见到细胞凋亡改变 ,而对照组无此类改变或改变不明显。结论　两种儿茶素在低细胞毒剂量时可促进长春新碱对耐药口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的细胞凋亡作用。

关键词：儿茶素多药耐药口腔癌凋亡

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人肝脏组织CYP3A4酶活性的高效液相色谱法测定

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郑州大学学报（医学版） 2013年第4期48卷 544-547页

作者：张海朋赵杰张莉蓉王晓飞薛文华郑州大学第一附属医院药学部郑州450052 郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001

目的:建立测定人体肝脏组织中CYP3A4酶活性的HPLC方法。方法:取21例肝癌、16例肝血管瘤、13例胆组织病变患者的肝组织,制作肝微粒体,体外孵育后以咪达唑仑(MDZ)为探针药物,用高效液相色谱法测定CYP3A4的Km值。HPLC色谱条件:色谱柱为Ange... 详细信息

目的:建立测定人体肝脏组织中CYP3A4酶活性的HPLC方法。方法:取21例肝癌、16例肝血管瘤、13例胆组织病变患者的肝组织,制作肝微粒体,体外孵育后以咪达唑仑(MDZ)为探针药物,用高效液相色谱法测定CYP3A4的Km值。HPLC色谱条件:色谱柱为AngelC-18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇:乙腈:水(体积比53:13:34),流速1mL/min,检测波长220nm,柱温25℃,进样量40μL。结果:1'-OHMDZ与MDZ的出峰时间分别为10.05与15.02min,分离充分(R>1.5),1'-OHMDZ质量浓度的范围为200～6000μg/L,高、中、低浓度回收率均>90%,日内、日间精密度RSD均<5%,稳定性RSD均<5%。50例患者Km值1.75～30.17μmol/L;不同性别、年龄及肝胆病变患者的Km值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该法稳定、快速、重复性好,可用于人体肝组织中CYP3A4酶活性的测定;性别、年龄及肝胆病变情况对CYP3A4酶活性无影响。

关键词：高效液相色谱肝脏 CYP3A4

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