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复旦学报(医学版) 1982年第1期 39-43+81-82页

作者：何开玲沈慧芬陈伉丽上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

用细胞核免疫荧光、免疫过氧化物酶标、对流免疫电泳、免疫电泳、双向免疫扩散及火箭免疫电泳六种免疫鉴定法对肝癌染色质的免疫特性进行鉴定。经正常肝细胞核反复吸收过的抗肝癌染色质Ig能与肝癌染色质起阳性反应,而与正常肝染色质不... 详细信息

用细胞核免疫荧光、免疫过氧化物酶标、对流免疫电泳、免疫电泳、双向免疫扩散及火箭免疫电泳六种免疫鉴定法对肝癌染色质的免疫特性进行鉴定。经正常肝细胞核反复吸收过的抗肝癌染色质Ig能与肝癌染色质起阳性反应,而与正常肝染色质不起免疫反应。超离心分离的肝癌染色质非组蛋白仍能与抗肝癌染色质Ig作用,起阳性反应;而正常肝非组蛋白、组蛋白及肝癌组蛋白与抗肝癌染色质Ig作用,均起阴性反应。同时见到在抗肝癌染色质Ig与全染色质抽取液间出现二条沉淀线,而与肝癌染色质非组蛋白作用,只有一条沉淀线。实验结果证明,三甲基奶油黄(3′-MeDAB)诱发的大鼠肝癌细胞,具有免疫特异性的染色质,这种特异性是由其染色质非组蛋白引起的。

关键词：染色质抗肝癌超离心分离非组蛋白肝细胞核免疫鉴定

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小鼠肾脏芳香酰胺酶动力学研究

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复旦学报(医学版) 1983年第4期 277-282页

作者：查锡良陈惠黎顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

本文在纯化小鼠肾脏芳香酰胺酶(***,简称AAD)的基础上,进一步作了动力学方面的研究。此酶对热较为稳定;对尿素失活敏感。在Co存在下,此酶的Km和Vm均变大,但Lineweaver-Burk作图中其斜率不变,属反竞争性类型。苯丙氨酸(Phe)、甲硫氨酸(M... 详细信息

本文在纯化小鼠肾脏芳香酰胺酶(***,简称AAD)的基础上,进一步作了动力学方面的研究。此酶对热较为稳定;对尿素失活敏感。在Co存在下,此酶的Km和Vm均变大,但Lineweaver-Burk作图中其斜率不变,属反竞争性类型。苯丙氨酸(Phe)、甲硫氨酸(Met)和亮氨酸(Leu)是此酶的竞争性抑制剂,其Ki值分别为0.3×10M、0.5×10M和3.7×10M。此酶还对L-亮氨酰胺有轻微的水解作用,其Km值为2.4 x 10M。此外,抑制性氨基酸能拮抗Co对酶的激活作用,但二者似乎作用于酶的不同部位。

关键词：小鼠肾脏拮抗 AAD 抑制性氨基酸酶动力学生物力学

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小鼠肾脏芳香酰胺酶纯化和催化性质的研究

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上海第一医学院学报 1982年第5期 361-367页

作者：查锡良陈惠黎顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

用Triton X-100和胰蛋白酶处理并结合硫酸铵分段盐析和多种柱层析,从正常小鼠肾脏纯化了芳香酰胺酶（Arylamidase、简写AAD,E.C.3.4.11.2.）。纯化的AAD经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳（PAGE）鉴定为一条带。比活性为156μ/mg蛋白质。Sephade... 详细信息

用Triton X-100和胰蛋白酶处理并结合硫酸铵分段盐析和多种柱层析,从正常小鼠肾脏纯化了芳香酰胺酶（Arylamidase、简写AAD,E.C.3.4.11.2.）。纯化的AAD经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳（PAGE）鉴定为一条带。比活性为156μ/mg蛋白质。Sephadex G-200凝胶过滤测得分子量为213,000。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳（SDS-PAGE）测得纯化的AAD分子是由二个相同亚基组成的二聚体。含糖量为14.0％。以L-亮氨酰-β-萘胺为底物时的Km值为9.5×10-5M,最适pH为7.0。纯化AAD受Co++激活以及受几种氨基酸尤其是非极性大侧链氨基酸抑制。

关键词：小鼠肾脏 AAD 洗脱体积酶纯化催化性质

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运铁蛋白及其抗血清的制备和癌细胞株运铁蛋白受体的检测

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上海第一医学院学报 1984年第3期 165-168页

作者：周惠人马瑾瑜顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室上海第一医学院基础医学部病理学教研室上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

本文介绍用利凡诺（Rivanol）沉淀、硫酸铵盐析及DEAE-SephadexA50层析法提纯人血清运铁蛋白(T?),并用它免疫家兔,制备兔抗人运铁蛋白单价特异抗血清。采用间接免疫酶标法检测人体培养细胞株运铁蛋白受体。证明人宫颈癌培养细胞（Hela... 详细信息

本文介绍用利凡诺（Rivanol）沉淀、硫酸铵盐析及DEAE-SephadexA50层析法提纯人血清运铁蛋白(T?),并用它免疫家兔,制备兔抗人运铁蛋白单价特异抗血清。采用间接免疫酶标法检测人体培养细胞株运铁蛋白受体。证明人宫颈癌培养细胞（Hela细胞）及五株人肝癌培养细胞（BEL-7402、BEL-7405、SMMC-7721、QGY-7703及Mahlavn）的细胞膜上均具有丰富的运铁蛋白受体。

关键词：运铁蛋白受体人肝癌免疫酶标法人宫颈癌细胞生长癌细胞株血清运铁蛋白层析法利凡诺硫酸铵盐析

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肝癌相关神经节苷脂的分离纯化及其结构分析

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上海第一医学院学报 1985年第6期 467-470页

作者：夏霞娟崔肇春顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室大连医学院生物化学教研室上海第一医学院基础医学部生物化学教研室交换师资

从BERH-2大鼠肝癌组织中分离纯化与肝癌相关的神经节苷脂(Gg-A、Gg-B),用酸解、酶解,气相色谱、气相-质谱联用测定其糖残基顺序、异头结构、糖基的连接位点、脂肪酸成分、唾液酸组成等。Gg-A、Gg-B除长链脂肪酸百分含量不同外,其结构均... 详细信息

从BERH-2大鼠肝癌组织中分离纯化与肝癌相关的神经节苷脂(Gg-A、Gg-B),用酸解、酶解,气相色谱、气相-质谱联用测定其糖残基顺序、异头结构、糖基的连接位点、脂肪酸成分、唾液酸组成等。Gg-A、Gg-B除长链脂肪酸百分含量不同外,其结构均为NeuAc-NeuAc-3Galβ1-4Glcβ1-Ceramide。

关键词：神经节苷脂肝癌薄板层析气相-质谱联用

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用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色改良法检测膜蛋白

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上海第一医学院学报 1982年第6期 433-436页

作者：欧阳启楣朱正美顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)一般采用考马斯亮蓝染色,这种染色步骤简单但敏感度低,样品中一些微量的蛋白质组分往往不能显示。为了提高检测蛋白质的能力,也有用放射性同位素标记蛋白质,再结合放射自显影;此法检测的灵敏度高但手续繁杂、... 详细信息

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)一般采用考马斯亮蓝染色,这种染色步骤简单但敏感度低,样品中一些微量的蛋白质组分往往不能显示。为了提高检测蛋白质的能力,也有用放射性同位素标记蛋白质,再结合放射自显影;此法检测的灵敏度高但手续繁杂、过程很长。1979年Switzer介绍一种银染色法,其灵敏度虽可与放射自显影媲美;但操作繁杂、较难掌握且硝酸银用量大。为此我们对PAGE银染色法作了改进,使其操作简化、重复性好,并节省80％以上的硝酸银用量;对检测细胞膜蛋白的灵敏度,远高于考马斯亮蓝染色法。

关键词：膜蛋白聚丙烯酰胺凝胶结构蛋白考马斯亮蓝染色法改良法

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测定RNA聚合酶相对含量的DNA饱和分析法

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上海第一医学院学报 1983年第3期 213-217页

作者：孙小俭何开玲上海第一医学院基础医学部生物化学教研室上海第一医学院基础医学部生物化学教研室研究生导师

DNA饱和分析法,是一种简便的测定RNA聚合酶相对含量和相对比活性的方法。用超声处理的小牛胸腺DNA为外源性模板,测定细胞核的转录活性,作出DNA饱和曲线,测出全核内的RNA聚合酶的相对含量和相对比活性。在全核内测定,较接近生理条件,结... 详细信息

DNA饱和分析法,是一种简便的测定RNA聚合酶相对含量和相对比活性的方法。用超声处理的小牛胸腺DNA为外源性模板,测定细胞核的转录活性,作出DNA饱和曲线,测出全核内的RNA聚合酶的相对含量和相对比活性。在全核内测定,较接近生理条件,结果具有较大的真实性。

关键词：聚合酶比活性外源性多聚酶转肽酶 DNA 相对含量 RNA

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小鼠肝脏芳香酰胺酶分子中唾液酸对酶稳定性及催化性质的影响

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上海第一医学院学报 1984年第6期 465-468页

作者：查锡良陈惠黎上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

作者观察了小鼠肝脏芳香酰胺酶分子中唾液酸残基对酶稳定性及催化性质的影响,发现酶的唾液酸残基去除后,对尿素失活率不变,对热稳定性可见降低;但是Co2+激活程度、氨基酸（Phe、Met、Leu）抑制程度与抑制常数以及对底物L-亮氨酰β-萘胺... 详细信息

作者观察了小鼠肝脏芳香酰胺酶分子中唾液酸残基对酶稳定性及催化性质的影响,发现酶的唾液酸残基去除后,对尿素失活率不变,对热稳定性可见降低;但是Co2+激活程度、氨基酸（Phe、Met、Leu）抑制程度与抑制常数以及对底物L-亮氨酰β-萘胺的Km值等都保持不变,说明糖链末端唾液酸尽管携带负电荷但并不妨碍底物、Go2+和氨基酸等与酶分子相应部位的结合,因此可推测唾液酸至少不影响活性部位局部的立体结构。

关键词：小鼠肝脏唾液酸 N-乙酰神经氨酸酶稳定性酶分子芳香酰胺催化性质

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肝癌组织与正常肝组织的神经节苷脂图谱

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复旦学报(医学版) 1985年第2期 149-151页

作者：郭能华袁继鼎顾天爵上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

比较分析了四种不同来源肝癌样品中神经节苷脂的高效硅胶薄板层析(HPTLC)图谱。结果表明,这四种不同来源的肝癌样品与正常肝的图谱比较,示有明显的变化,特别是在含双唾液酸的GD区域,所有肝癌样品都有一条含量较正常显著升高的带,而作为... 详细信息

比较分析了四种不同来源肝癌样品中神经节苷脂的高效硅胶薄板层析(HPTLC)图谱。结果表明,这四种不同来源的肝癌样品与正常肝的图谱比较,示有明显的变化,特别是在含双唾液酸的GD区域,所有肝癌样品都有一条含量较正常显著升高的带,而作为正常肝中神经节苷脂主要组分的GM在肝癌组织中则明显减少。

关键词：神经节苷脂肝癌薄板层析

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丙酮酸激酶同工酶与Crabtree效应的关系

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上海第一医学院学报 1981年第6期 428-451页

作者：邵明川陈惠黎上海第一医学院基础医学部生物化学教研室

Crabtree效应是恶性肿瘤糖代谢调节的重要特征,指有氧酵解对氧化的抑制作用。自该效应发现五十余年来,对其机理的研究一直不断,但至今尚未完全阐明。我们以小鼠HepA腹水肝癌(简称HepA)为材料,比较系统地研究了丙酮酸激酶(PyK)同工酶与... 详细信息

Crabtree效应是恶性肿瘤糖代谢调节的重要特征,指有氧酵解对氧化的抑制作用。自该效应发现五十余年来,对其机理的研究一直不断,但至今尚未完全阐明。我们以小鼠HepA腹水肝癌(简称HepA)为材料,比较系统地研究了丙酮酸激酶(PyK)同工酶与该效应之间的关系。

关键词：正常小鼠 PEP 丙酮酸激酶 Crabtree 酵解小鼠肝匀浆线粒体粒线体同工酶谱 ADP

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