检索结果-内蒙古大学图书馆

郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 304-306页

作者：董敬民张金嵩胡军韩志强郑州大学第一附属医院眼科郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州大学第一附属医院内科学教研室

目的:观察水通道蛋白-4(AQP4)在大鼠眼虹膜睫状体及视网膜组织中的分布。方法:取6只正常Wist-ar大鼠眼组织切片,行免疫组织化学染色,光镜下观察AQP4的分布。结果:睫状体上皮细胞AQP4呈阳性表达,睫状体及虹膜内血管内皮细胞均有AQP4阳性... 详细信息

目的:观察水通道蛋白-4(AQP4)在大鼠眼虹膜睫状体及视网膜组织中的分布。方法:取6只正常Wist-ar大鼠眼组织切片,行免疫组织化学染色,光镜下观察AQP4的分布。结果:睫状体上皮细胞AQP4呈阳性表达,睫状体及虹膜内血管内皮细胞均有AQP4阳性表达,视网膜内核层及神经节细胞层也可见AQP4阳性表达。结论:AQP4在大鼠睫状体上皮细胞及视网膜内核层、神经节细胞层分布,可能参与房水调节及神经节水代谢功能调节。

关键词：大鼠水通道蛋白-4 虹膜睫状体视网膜

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EGFR基因单核苷酸多态性与结直肠癌的相关性

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山东医药 2009年第51期49卷 4-6页

作者：李峰严家芹陈壬寅赵国强李晟磊曹娟娟郑州大学第一附属医院河南省肿瘤病理重点实验室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因第13外显子G64A单核苷酸多态性与结直肠癌的相关性。方法应用PCR-RFLP法结合DNA测序法对49例结直肠癌患者外周血DNA中EGFR基因的第13外显子G64A单核苷酸多态性位点的等位基因进行检测。分析G/G、G/A... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因第13外显子G64A单核苷酸多态性与结直肠癌的相关性。方法应用PCR-RFLP法结合DNA测序法对49例结直肠癌患者外周血DNA中EGFR基因的第13外显子G64A单核苷酸多态性位点的等位基因进行检测。分析G/G、G/A、A/A基因型的分布及与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果EGFR基因第13外显子G64A多态性位点G/G、G/A、A/A基因型频率分别为26.5%、59.2%、14.3%,与患者的性别、年龄、肿瘤生长部位、体积、浸润深度、大体形态、组织学类型、分化程度、血道转移无相关性(P>0.05),与淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),携带G/A、G/G基因型和G等位基因的结直肠癌患者淋巴结转移风险增加(基因型G/G、G/A与A/A比较的OR分别为7.0、1.3,等位基因G与A比较的OR为2.7)、TNM分期递增(基因型A/A、G/A、G/G的平均秩次分别为18.43、23.14、32.69,等位基因A与G的平均秩次分别为42.71、54.81)。结论检测EGFR基因第13外显子G64A单核苷酸多态性有助于评估结直肠癌患者淋巴结转移情况和预后。

关键词：结直肠癌表皮生长因子受体基因单核苷酸多态性

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靶向PPARγ基因RNA干扰对乙醇诱导家兔骨髓基质细胞成脂分化的影响

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郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 266-269页

作者：王少华王义生李月白赵国强郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

目的:观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因RNA干扰阻断乙醇诱导骨髓基质细胞的成脂分化效应。方法:选用家兔第2代骨髓基质细胞,随机分为7组。对照组(N):无特殊处理;模型组(M):给予0.09mol/L乙醇;感染空载体组(C0):给予... 详细信息

目的:观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因RNA干扰阻断乙醇诱导骨髓基质细胞的成脂分化效应。方法:选用家兔第2代骨髓基质细胞,随机分为7组。对照组(N):无特殊处理;模型组(M):给予0.09mol/L乙醇;感染空载体组(C0):给予空载体腺病毒1×105U和乙醇;感染无关siRNA组(C1):给予无关序列siRNA腺病毒1×105U和乙醇;干扰1、2、3组(S1、S2、S3):分别给予靶向PPARγ siRNA1、2、3腺病毒1×105U和乙醇。7d后采用RT-PCR技术检测MSCs内PPARγ mRNA表达,14d后测定MSCs内甘油三酯含量,21d后MSCs苏丹Ⅲ染色,计数脂肪细胞。结果:M组、C0组、C1组PPARγ mRNA呈高表达,脂肪细胞数增多,细胞甘油三酯含量升高,与N组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);S1组、S2组、S3组PPARγ mRNA呈低表达,脂肪细胞数少,细胞内甘油三酯含量稍高,与M组、C0组、C1组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),与N组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因RNA干扰能够有效地阻断乙醇诱导的骨髓基质细胞中PPARγ mRNA高表达和成脂分化。

关键词： RNA干扰乙醇骨髓基质细胞过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 成脂分化兔

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豫医无毛小鼠无毛基因突变部位的定位和分析

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郑州大学学报（医学版） 2009年第6期44卷 1144-1146页

作者：臧文巧杨璇王涛轩小燕李敏杜英郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 河南中医学院第一附属医院血液肿瘤科郑州450000

目的:研究豫医无毛小鼠(YYHL)突变的分子机制。方法:对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对扩增片段克隆后测序,并与Musmuscnlus进行同源性分析。结果:共测出YYHL DNA序列1824bp和昆明小鼠DNA序列1816bp,其不同之处有27处... 详细信息

目的:研究豫医无毛小鼠(YYHL)突变的分子机制。方法:对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对扩增片段克隆后测序,并与Musmuscnlus进行同源性分析。结果:共测出YYHL DNA序列1824bp和昆明小鼠DNA序列1816bp,其不同之处有27处,变异方式包括插入、缺失和点突变。其中在12外显子中有一无义突变(G→A),导致该部位由编码色氨酸的UGG转变为终止密码子UGA。结论:YYHL无毛性状的产生可能与基因组的变异有关。

关键词：豫医无毛小鼠基因突变

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靶向PPARγ基因siRNA腺病毒对乙醇抑制家兔骨髓基质细胞成骨分化的影响

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郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 269-272页

作者：刘鸣王少华李月白赵国强王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

目的:观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因siRNA腺病毒阻断乙醇作用、保持骨髓基质细胞(MSCs)成骨分化的作用。方法:选用家兔第2代MSCs,随机分为7组。对照组(N):无特殊处理;模型组(M):给予0.09mol/L乙醇;感染空载体组(C... 详细信息

目的:观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因siRNA腺病毒阻断乙醇作用、保持骨髓基质细胞(MSCs)成骨分化的作用。方法:选用家兔第2代MSCs,随机分为7组。对照组(N):无特殊处理;模型组(M):给予0.09mol/L乙醇;感染空载体组(C0):给予空载体腺病毒1×105U和乙醇;感染无关siRNA组(C1):给予无关序列siRNA腺病毒1×105U和乙醇;干扰1、2、3组(S1、S2、S3):分别给予靶向PPARγ siRNA1、2、3腺病毒1×105U和乙醇。7d后采用RT-PCR技术检测MSCs内PPARγ mRNA和骨钙素(Osteocalcin)mRNA表达,14d测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:M组、C0组、C1组PPARγ mRNA呈高表达,Osteocalcin mRNA呈低表达,ALP活性下降,与N组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。S1组、S2组、S3组PPARγ mRNA呈低表达,Osteo-calcin mRNA呈高表达,ALP活性升高,与M组、C0组、C1组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因siRNA腺病毒能够阻断乙醇作用,下调细胞内PPARγ基因表达和上调Osteocalcin基因表达,保持MSCs成骨分化。

关键词： siRNA腺病毒乙醇骨髓基质细胞过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 骨钙素成骨分化兔

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沉默STAT3基因对人食管癌EC1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

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肿瘤防治研究 2009年第6期36卷 456-458页

作者：轩小燕李珊珊郑献召李娜王丰郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室 450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细... 详细信息

目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、免疫组化方法检测STAT3mRNA和蛋白变化。结果裸鼠体内实验显示,实验组肿瘤增长受到明显抑制;HE染色显示对照组肿瘤体积大、异形明显;RT-PCR、免疫组化结果表明实验组STAT3mRNA和蛋白表达下调。结论shRNA沉默STAT3基因能抑制人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调STAT3mRNA和蛋白的表达,为食管癌的基因治疗提供了新的靶点,开辟了新的思路。

关键词：食管癌细胞EC1 基因沉默裸鼠 STAT3

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鼠β-防御素2抗宫颈癌的实验研究

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第12期25卷 1186-1188页

作者：魏晓丽丁剑冰蒋忠华温浩李明远新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830054 四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的:建立BALB/c小鼠U14宫颈癌移植瘤模型,观察肿瘤生长情况,探讨mBD2对小鼠机体免疫功能的影响。方法:采用无内毒素质粒大抽试剂盒抽提pcDNA3.1(+)/mBD2、pcDNA3.1(+)/rmBD2和pcDNA3.1(+)质粒DNA。将荷瘤小鼠随机分为5组,分别采用pcDNA... 详细信息

目的:建立BALB/c小鼠U14宫颈癌移植瘤模型,观察肿瘤生长情况,探讨mBD2对小鼠机体免疫功能的影响。方法:采用无内毒素质粒大抽试剂盒抽提pcDNA3.1(+)/mBD2、pcDNA3.1(+)/rmBD2和pcDNA3.1(+)质粒DNA。将荷瘤小鼠随机分为5组,分别采用pcDNA3.1(+)/mBD2、pcDNA3.1(+)/rmBD2质粒治疗,同时设立pcDNA3.1(+)、顺铂和PBS组对照;观察肿瘤生长状况、荷瘤小鼠存活时间,绘制小鼠生存曲线。结果:成功建立了BALB/c小鼠U14移植瘤模型。采用pcDNA3.1(+)/mBD2、pcDNA3.1(+)/rmBD2、pcDNA3.1(+)治疗造模成功的荷瘤小鼠,结果显示:pcDNA组及PBS组肿瘤生长迅速,出现大范围出血、坏死,并于治疗后7d全部死亡;mBD2组与rmBD2组小鼠肿瘤生长相对缓慢,出现局部出血坏死等现象,至治疗2周,出现死亡,至治疗结束时,每组仍有3只小鼠存活,而Pt组小鼠肿瘤生长慢,小鼠生长较为活跃,至治疗21d,开始出现死亡,pcDNA和PBS组与mBD2组和rmBD2组及Pt组与mBD2组和rmBD2组生存时间比较,结果有统计学意义(P<0.05),mBD2组和rmBD2生存时间比较,也具有统计学意义(P<0.05)。结论:mBD2能够抑制移植瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存时间。在抑瘤效果上,mBD2优于外加信号肽重组mBD2作用。

关键词： U14 mBD2 宫颈肿瘤生存曲线

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RNA干扰Stat3基因对EC-1细胞侵袭转移和增殖能力的影响

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第四军医大学学报 2009年第7期30卷 606-609页

作者：轩小燕李珊珊郑献召李娜王丰高远张红燕闫爱华河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学第一附属医院病理科郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450052

目的:构建针对信号转导子和转录激活子3(Stat3)基因的siRNA表达载体,研究Stat3基因沉默对人食管鳞癌EC-1细胞侵袭转移及增殖的影响.方法:构建pSUPER-EG-FP-Stat3siRNA表达载体,转染EC-1细胞,RT-PCR,Western Blot检测Stat3的表达;Boyden-chamber体外侵袭实验检测siRNA对细胞侵袭转移能力的影响,MTT法检测siRNA对细胞增殖能力的作用.结果:酶切和测序证实pSUPER-EGFP-Stat3siRNA表达载体构建成功;RT-PCR,Western Blot结果表明,siRNA能有效地降解EC-1细胞中Stat3基因的mRNA,下调Stat3蛋白的表达;转染siRNA后,与对照组相比,EC-1细胞侵袭转移和增殖能力明显下降.结论:成功构建针对Stat3基因的siRNA表达载体,可有效沉默Stat3基因在食管鳞癌EC-1细胞中的表达,抑制EC-1细胞的侵袭转移及增殖能力,可为食管癌的基因治疗提供理论依据.

关键词： Stat3基因 RNA干扰 EC-1细胞肿瘤转移癌,鳞状细胞食管肿瘤

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反义NF-κB p65寡核苷酸对食管鳞癌细胞EC9706增殖及凋亡的影响

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郑州大学学报（医学版） 2009年第3期44卷 472-475页

作者：轩小燕王新华李珊珊张红燕王小军李娜王丰阎爱华郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001

目的:探讨反义NF-κBp65寡核苷酸对食管鳞癌细胞EC9706增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:利用转染试剂KeyGenI介导将反义NF-κBp65寡核苷酸片段体外转染入人食管鳞癌EC9706细胞株。转染72h后,应用RT-PCR、流式细胞术检测EC9706细胞中NF... 详细信息

目的:探讨反义NF-κBp65寡核苷酸对食管鳞癌细胞EC9706增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:利用转染试剂KeyGenI介导将反义NF-κBp65寡核苷酸片段体外转染入人食管鳞癌EC9706细胞株。转染72h后,应用RT-PCR、流式细胞术检测EC9706细胞中NF-κBp65mRNA和蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞增殖周期。以单纯转染试剂为阴性对照,未转染的EC9706细胞为空白对照。结果:转染72h后,反义组EC9706细胞中NF-κBp65mRNA的表达及蛋白标记率与阴性对照和空白对照组比较,下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05);反义组EC9706细胞的增殖能力与阴性对照和空白对照组相比明显受抑,抑制率为15.0%;反义组EC9706凋亡细胞数较阴性对照、空白对照组升高,差异具有统计学意义(P<0.05);反义组G1期的EC9706细胞数较阴性对照、空白对照组升高,而S期细胞数较阴性对照、空白对照组降低,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论:特异性阻断NF-κBp65的转录,可以抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,参与细胞周期调控。NF-κBp65有望成为肿瘤基因治疗的靶点。

关键词： NF-κB p65基因反义寡核苷酸技术 MTT 流式细胞术

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蛋白质芯片技术对脐血浆生物活性成分的分析

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临床检验杂志 2009年第6期27卷 411-413页

作者：唐悦张静杜英杨波吴世凯李国喜胡祥郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学第一附属医院神经外科郑州450052 深圳市北科细胞工程研究所深圳518000

目的通过高通量筛选、检测脐血中细胞因子的种类和含量,全面了解脐血浆生物活性成分及表达水平。方法取10位健康足月分娩产妇脐静脉血2 ml和健康成年女性志愿者捐献的外周静脉血2 ml,应用抗体芯片RayBio(?) Biotin Label-basedHuman Ant... 详细信息

目的通过高通量筛选、检测脐血中细胞因子的种类和含量,全面了解脐血浆生物活性成分及表达水平。方法取10位健康足月分娩产妇脐静脉血2 ml和健康成年女性志愿者捐献的外周静脉血2 ml,应用抗体芯片RayBio(?) Biotin Label-basedHuman Antibody ArrayⅠ一次性检测507种细胞因子表达水平,两样本中细胞因子比值大于或小于两倍以上者为有显著差异。结果在蛋白质芯片检测所包括的507种细胞因子中,脐血浆中有94种成分显著高于对照组,28种成分显著低于对照组。结论抗体芯片技术能高通量、平行性检测脐血浆生物活性成分及表达水平,为深入研究脐血细胞因子积累了数据。

关键词：脐血细胞因子抗体芯片

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