检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2019年第6期35卷 907-918页

作者：施昕妤郭刚强林康明李宝青薛向阳章慧娣温州医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室温州325035 温州医科大学附属第二医院检验科温州325000 温州医科大学附属第一医院肾内科温州325000

人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种β疱疹病毒。单核细胞是HCMV的主要体内靶标。当前大多数的研究集中于单个时间点来分析HCMV感染对单核细胞功能的影响,并未整体且动态地阐述HCMV感染对单核细胞功能的影响。本研究从GEO(... 详细信息

人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种β疱疹病毒。单核细胞是HCMV的主要体内靶标。当前大多数的研究集中于单个时间点来分析HCMV感染对单核细胞功能的影响,并未整体且动态地阐述HCMV感染对单核细胞功能的影响。本研究从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库筛选HCMV感染单核细胞4h、24h、48h后的基因芯片,通过生物信息学方法对HCMV感染单核细胞4h、24h、48h后的功能影响进行详细的阐述及比较分析,并用定量反转录聚合酶连锁反应(quantificational reverse transcription polymerase chain reaction,qRTPCR)验证HCMV感染人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)4h、24h和48h后白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-8、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-a、IL-10的表达。结果表明HCMV感染单核细胞4h后参与信号转导、炎症反应、免疫反应、防御病毒反应和趋化反应等17个通路,且可能与病理学过程/疾病、病毒疾病、RNA病毒感染和免疫系统疾病等相关。HCMV感染单核细胞24h后主要参与炎症反应、细胞趋化等信号通路,预测主要与系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)、结缔组织疾病和自身免疫性疾病等10种疾病相关。HCMV感染单核细胞48h后主要参与炎症反应、细胞趋化等信号通路,预测主要与结缔组织疾病、病理学过程和SLE等10个疾病相关。qRT-PCR结果显示HCMV感染THP-1细胞4h、24h和48h后IL-1β、IL-8、TNF-α、IL-10的表达增加。本研究表明HCMV感染主要引起炎症反应及趋化反应,并可能与自身免疫性疾病或SLE高度相关。

关键词：人巨细胞病毒(HCMV) 单核细胞炎症反应趋化反应

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金黄色葡萄球菌RNAⅢ敲除株对γ-溶血素表达调控的影响

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第三军医大学学报 2020年第1期42卷 45-49页

作者：谭利王轶男陈江姜北喻胜鹏黎庶胡晓梅陆军军医大学(第三军医大学):基础医学院微生物学教研室重庆400038. 陆军军医大学(第三军医大学):第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学):第一附属医院骨科全军矫形外科中心重庆400038

目的利用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌Newman RNAⅢ基因敲除株,探究RNAⅢ敲除对金葡菌γ-溶血素表达调控的影响。方法分别扩增RNAⅢ基因的上下游同源臂,根据同源重组原理,构建pBT2基因敲除载体,利用同源重组技术,构建RNAⅢ敲除株。... 详细信息

目的利用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌Newman RNAⅢ基因敲除株,探究RNAⅢ敲除对金葡菌γ-溶血素表达调控的影响。方法分别扩增RNAⅢ基因的上下游同源臂,根据同源重组原理,构建pBT2基因敲除载体,利用同源重组技术,构建RNAⅢ敲除株。并对野生株和敲除株γ-溶血素的转录水平和蛋白水平进行研究。结果实时荧光定量PCR结果显示RNAⅢ敲除株γ-溶血素A/B/C亚基的转录水平较野生株显著降低, Western blot检测结果也显示敲除株γ-溶血素蛋白表达水平较野生株明显减少。结论 RNAⅢ敲除可显著影响金葡菌γ-溶血素的表达。

关键词：金黄色葡萄球菌 RNAⅢ γ-溶血素基因敲除

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PSM-E抑制炎性细胞因子分泌及单核细胞趋化的功能研究

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热带医学杂志 2021年第4期21卷 402-407,F0002页

作者：牛若溪袁磊谭姹辉陈德林鲁文汇孙正杰秦性良朱勋徐霖曹开源中山大学临床检验标准化研究中心广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 中山大学-香港大学(粤港)传染病监测联合实验室广东广州510080 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 南昌大学第一附属医院检验科江西南昌330006 中山大学第一附属医院泌尿外科广东广州510080

目的探索在前列腺癌中前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型剪切变异体PSM-E对炎性细胞因子的分泌,及其对单核细胞趋化的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测110例原发性前列腺癌组织中PSM-E与肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表面特异性蛋白CD206... 详细信息

目的探索在前列腺癌中前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型剪切变异体PSM-E对炎性细胞因子的分泌,及其对单核细胞趋化的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测110例原发性前列腺癌组织中PSM-E与肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表面特异性蛋白CD206的表达。用siRNA转染LNCaP细胞干扰PSM-E的表达作为实验组,对LNCaP细胞转染对任何基因无干扰作用的siRNA作为对照组。利用佛波酯和白细胞介素-4(IL-4)刺激单核细胞THP-1诱导其分化为M2型TAMs。将M2型TAMs分别与实验组和对照组LNCaP细胞共培养72 h后,收集培养基上清,采用炎症因子芯片检测共培养系统中细胞因子的变化。将单核细胞系THP-1分别与实验组和对照组LNCaP细胞共培养72 h后,结晶紫染色观察单核细胞趋化情况。结果110例原发性前列腺癌组织中,PSM-E呈高表达的阳性率为54.5%(60/110),CD206呈高表达的阳性率为58.1%(64/110)。Spearman相关性分析结果显示,以免疫组化评分为指标,PSM-E与CD206表达呈负相关(r=-0.5,P<0.01)。成功构建PSM-E敲低的前列腺癌LNCaP细胞模型和M2型TAMs细胞模型(THP-1来源)。与阴性对照组相比,PSM-E敲低细胞组的PSM-E的mRNA水平表达量显著降低(P<0.05);与M0型巨噬细胞相比,M2型TAMs细胞标志物基因CCL17、CCL18、CCL22的表达显著增高(P<0.05)。与对照组相比,将敲低PSM-E的前列腺癌LNCaP细胞与TAMs共培养后,细胞培养上清中的干扰素γ诱导的T细胞α型趋化因子(ITAC)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、Fractalkine、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、MIP-1β、MIP-3α、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-7、IL-8、IL-10、IL-13、IL-21、IL-23炎性细胞因子均呈较强升高,提示PSM-E可抑制肿瘤微环境中炎症细胞因子的分泌。与对照组相比,将THP-1细胞与敲低PSM-E的前列腺癌LNCaP细胞共培养后,趋化的穿过培养小室的细胞数量显著增加。结论PSM-E具有抑制肿瘤微环境中炎性细胞因子的产生,进而抑制单核细胞趋化的新功能,提示PSM-E可成为肿瘤相关巨噬细胞靶向性治疗的一个新分子靶点。

关键词： PSM-E 肿瘤相关巨噬细胞细胞因子前列腺癌

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结直肠癌组织浸润免疫细胞组成及特征

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温州医科大学学报 2020年第6期50卷 454-460页

作者：吴林峰孙永吉叶乐乐沈贤薛向阳沈淑蓉温州市中西医结合医院肿瘤科浙江温州325000 温州医科大学第一临床医学院浙江温州325035 温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035 温州医科大学附属第二医院胃肠外科浙江温州325027

目的:研究结直肠癌(CRC)患者和健康人大肠组织中免疫细胞的浸润情况,为后续开展肿瘤微环境的研究提供前期的分析结果和数据。方法:通过GEO数据库对51例正常人结直肠组织和333例CRC患者肿瘤组织的基因表达谱数据进行计算分析,通过CIBERS... 详细信息

目的:研究结直肠癌(CRC)患者和健康人大肠组织中免疫细胞的浸润情况,为后续开展肿瘤微环境的研究提供前期的分析结果和数据。方法:通过GEO数据库对51例正常人结直肠组织和333例CRC患者肿瘤组织的基因表达谱数据进行计算分析,通过CIBERSORT方法将基因表达谱数据转化为组织中22种免疫细胞的浸润比例,对比这些免疫细胞在两者中的分布情况。结果:肠道浸润的免疫细胞组成在CRC患者与健康人之间有较大差异。T细胞和B细胞在肿瘤组织中的浸润数量少于健康人,而巨噬细胞、中性粒细胞、肥大细胞和树突状细胞在肿瘤组织中的浸润数量大于健康人。结论:CRC患者和健康人的结直肠组织中免疫细胞浸润存在较大的差异,这些具有差异的免疫细胞在癌症进展中可能发挥重要作用。

关键词：结直肠癌 CIBERSORT 肿瘤微环境免疫细胞

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鉴别鲍曼不动杆菌定植与感染的临床指标研究

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安徽医科大学学报 2018年第6期53卷 967-970页

作者：宋骏黄升海钟民安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 皖南医学院第一附属医院芜湖241001

目的探讨T淋巴细胞亚群与细胞因子在鉴别鲍曼不动杆菌定植与感染中的临床意义。方法选取109例痰培养分离出鲍曼不动杆菌的住院患者,根据中华医学会呼吸分会医院获得性肺炎的诊断标准分为鲍曼不动杆菌定植组53例和感染组56例。另选择50... 详细信息

目的探讨T淋巴细胞亚群与细胞因子在鉴别鲍曼不动杆菌定植与感染中的临床意义。方法选取109例痰培养分离出鲍曼不动杆菌的住院患者,根据中华医学会呼吸分会医院获得性肺炎的诊断标准分为鲍曼不动杆菌定植组53例和感染组56例。另选择50例健康人群作为对照组,检测各组外周血T淋巴细胞亚群与细胞因子,并比较各组间的差异。应用Spearman相关分析,探讨影响T淋巴细胞亚群、细胞因子的相关影响因素;应用Logistic回归分析,了解T淋巴细胞亚群、细胞因子是否为鲍曼不动杆菌感染的独立影响因素。结果在鲍曼不动杆菌定植组与感染组之间,T淋巴细胞亚群、TNF-α、IFN-γ、IL-17存在显著性的差异。鲍曼不动杆菌感染与TNF-α(r_s=0.241,P=0.012)、IFN-γ(r_s=0.235,P=0.014)、IL-2(r_s=0.249,P=0.009)、IL-4(r_s=0.268,P=0.005)和IL-17(r_s=0.538,P<0.001)存在正相关,与CD3^+(r_s=-0.193,P=0.045)和CD4^+/CD8^+(r_s=-0.302,P=0.001)存在负相关。多因素Logistic回归分析显示IFN-γ(OR=1.420)和IL-17(OR=1.511)是鲍曼不动杆菌感染的危险因素。结论血清IFN-γ、IL-17可作为鉴别鲍曼不动杆菌感染与定植的指标,并可为抗菌药物的合理使用以及医院感染的预防、控制提供依据。

关键词：鲍曼不动杆菌 T淋巴细胞亚群细胞因子定植感染

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过表达IL-18抑制人结直肠癌细胞HCT-116的增殖

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第2期25卷 142-147页

作者：陈亚楠杨如许芝山吴敏娜路平钟根深新乡医学院第一附属医院生命科学技术研究中心河南卫辉453100 新乡医学院基础医学院微生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院肿瘤内二科河南卫辉453100

目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测H... 详细信息

目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测HCT-116/IL-18细胞与野生型HCT-116细胞的增殖,Western blotting检测两组细胞内IL-18、Cyclin D1、增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA损伤修复酶(PARP)蛋白的表达。将HCT-116、HCT-116/IL-18细胞分别接种于裸鼠左右两侧腋下,观察成瘤性及移植瘤的生长情况,免疫组化法检测移植瘤组织中IL-18及PCNA的表达。结果:IL-18基因在HCT-116细胞内过表达,可延缓HCT-116的增殖(P<0.05或P<0.01);与HCT-116细胞相比,HCT-116/IL-18细胞内PARP表达明显增强,PCNA、Cyclin D1表达减弱(P<0.01)。HCT-116/IL-18细胞系在裸鼠体内成瘤率明显降低,成瘤率为43%,与对照组比较其移植瘤成瘤时间晚、生长慢、肿块小,且HCT-116/IL-18异种移植瘤PCNA蛋白表达下调(P<0.01)。结论:过表达IL-18基因对HCT-116细胞生长增殖具有抑制作用,其机制可能与IL-18调控细胞周期和促进DNA损伤有关。

关键词：结直肠癌白介素-18 细胞增殖移植瘤

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原核表达家蝇抗菌肽Phormicin A,B蛋白对大肠杆菌标准株的影响

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生物加工过程 2019年第6期17卷 623-629页

作者：王兵杜兵王代琴覃海韦鹏威姚杨万珊王涛吴建伟贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵州贵阳550025 贵州医科大学第一附属医院微生物免疫科贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院病原生物学教研室贵州贵阳550025

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 ... 详细信息

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 mmol/L,并绘制了二者作用于大肠杆菌标准株的时间生长曲线。结果显示:家蝇Phormicin A、B原核表达蛋白对于大肠杆菌标准株的生长具有一定的抑制作用,此研究为应用于抗临床大肠杆菌感染药物的研发提供了一定的参考。

关键词： Phormicin 家蝇抗菌肽

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巨噬细胞与血小板体外抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的增殖

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第9期34卷 782-786页

作者：顾顺利刘二雄徐金梅胡兴斌尹文空军军医大学第一附属医院输血科陕西西安710032 空军军医大学基础医学院微生物学教研室陕西西安710032

目的体外研究巨噬细胞与去白细胞单采血小板抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)增殖的效率,并初步探讨其作用机制。方法将4×108个/mL MRSA接种至LB培养体系,分为血小板组(每升加入2×10^(11)个去白细胞的单采血小板)、巨噬细... 详细信息

目的体外研究巨噬细胞与去白细胞单采血小板抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)增殖的效率,并初步探讨其作用机制。方法将4×108个/mL MRSA接种至LB培养体系,分为血小板组(每升加入2×10^(11)个去白细胞的单采血小板)、巨噬细胞组(每升加入1×10~9个体外诱导培养的巨噬细胞)、对照组(去白细胞单采血小板和巨噬细胞均不加)。培养不同时间后,检测两组菌液的吸光度值以反映细菌的增殖情况,并在培养2 h时采集菌液,倍比稀释后涂板计数细菌数量;流式细胞术检测血小板对MRSA的捕获,ELISA检测对照组和血小板组中的血小板因子4(PF4)的含量。结果与对照组相比,巨噬细胞组和血小板组均可抑制MRSA增殖,且血小板组的作用更加显著。结论血小板可以在体外抑制MRSA增殖,其抑制效果优于巨噬细胞。

关键词：巨噬细胞去白细胞单采血小板耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

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PD-1抗体增强奥沙利铂体内外抗结肠癌的效果

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第10期25卷 999-1005页

作者：钟根深孙智洋陈亚楠许芝山杨如吴敏娜石焕路平新乡医学院第一附属医院肿瘤内二科河南新乡453003 新乡医学院河南省分子诊断和检验医学协同创新中心医学检验学院河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院生命科学技术研究中心河南新乡453003 新乡医学院基础医学院微生物学教研室河南新乡453003 山东大学附属肿瘤医院肿瘤科山东济南250117

目的:探讨奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)联合PD-1抗体对结肠癌的抗肿瘤作用。方法:选用结肠癌细胞系HCT-116和HT-29,用流式细胞术检测细胞中PD-L1的表达。采用T细胞共培养的方法检测OXA预处理HCT-116细胞联合PD-1抗体作用后细胞因子分泌及... 详细信息

目的:探讨奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)联合PD-1抗体对结肠癌的抗肿瘤作用。方法:选用结肠癌细胞系HCT-116和HT-29,用流式细胞术检测细胞中PD-L1的表达。采用T细胞共培养的方法检测OXA预处理HCT-116细胞联合PD-1抗体作用后细胞因子分泌及CD4/CD8亚型变化。建立BALB/c小鼠的结肠癌细胞CT26移植瘤模型,用OXA联合PD-1抗体治疗,评估其抗肿瘤活性;同时采用CD8抗体清除小鼠CD8^+T细胞,评估CD8^+T细胞在OXA抗肿瘤中的作用。结果:OXA能够显著上调结肠癌细胞表面PD-L1的表达。OXA预处理后的结肠癌HCT-116细胞和T细胞共培养后,与单纯培养的T细胞相比,能降低其培养上清中IL-2、IFN-γ和TNF的水平(均P<0.05)及体系中CD4^+记忆性T细胞和CD8^+T_(EMRA)比率(P<0.05)、增加CD4^+(P>0.05)和CD8^+(P<0.05)初始T细胞比率;联合PD-1抗体后,与OXA预处理的HCT-116和T细胞共培养组相比,T细胞培养上清中IFN-γ和IL-10含量(P<0.05)以及CD8^+T_(CM)和T_(EMRA)比率增加(P>0.05)。体内抑瘤实验表明,OXA联合PD-1抗体可以增强其抗肿瘤活性,抑瘤率显著高于单用OXA组和αPD-1组(58.2%vs 25.6%、29.1%,均P<0.05);清除CD8^+T细胞后,OXA的抗肿瘤活性由68.4%下降到46.2%(P<0.05)。结论:OXA联合PD-1抗体具有联合增效的作用,同时CD8^+T细胞在OXA的抗肿瘤活性中具有重要作用。

关键词：奥沙利铂 PD-1抗体结肠癌 CD8^+T细胞

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海参提取物TBL-12抑制激素非依赖性前列腺癌细胞的增殖和转移

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热带医学杂志 2019年第3期19卷 261-265,256页

作者：袁磊周凯苏畅黄旭斌何恺舒张甜徐霖曹开源中山大学临床检验标准化研究中心广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 中山大学香港大学粤港联合实验室广东广州510080 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学附属第一医院血液科广东广州510080 中山大学附属第一医院内科ICU 广东广州510080

目的探讨TBL-12在体外对激素非依赖性前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及其可能的机制。方法采用不同浓度(30、60、90μg/mL)的TBL-12处理PC-3和DU145前列腺癌细胞,分别用Cell Counting Kit-8法(CCK-8法)、划痕实验、Transwell... 详细信息

目的探讨TBL-12在体外对激素非依赖性前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及其可能的机制。方法采用不同浓度(30、60、90μg/mL)的TBL-12处理PC-3和DU145前列腺癌细胞,分别用Cell Counting Kit-8法(CCK-8法)、划痕实验、Transwell侵袭实验检测TBL-12对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响,通过明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的酶活性。结果与对照组相比,TBL-12能显著抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,并呈剂量依赖性(P<0.05)。30μg/mL TBL-12能显著抑制前列腺癌细胞增殖和集落形成以及肿瘤转移(P<0.05)。90μg/mL的TBL-12处理后,PC-3细胞的集落形成率降至(8±3)%,迁移率由(53±11)%降为(12±4)%,侵袭细胞数由每个视野(1 085±101)个细胞减少到(29±18)个;而DU145细胞的集落形成率降至(5±2)%,细胞迁移率由(54±6)%降为(9±1)%,侵袭细胞数由每个视野(516±38)个减少到(10±9)个。明胶酶谱检测发现TBL-12可降低MMP-2、MMP-9的酶活性(P<0.05),90μg/mL的TBL-12处理后,PC-3细胞中MMP-9的酶活性降至(36±5)%,MMP-2降为(43±8)%;DU145细胞中MMP-9的酶活性降至(30±10)%,MMP-2降为(40±6)%。结论 TBL-12能显著抑制激素非依赖性前列腺癌细胞在体外的增殖、迁移和侵袭能力,具有潜在的治疗前列腺癌的临床应用价值。

关键词：海参提取物前列腺癌细胞增殖肿瘤迁移肿瘤侵袭

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