检索结果-内蒙古大学图书馆

Sal-miR-58通过HAX1介导胶质瘤细胞放射敏感性的作用及机制研究

中华放射肿瘤学杂志 2024年第8期33卷 746-752页

作者：王国辉葛鸿瑶杜振宇杨高山天津市第一中心医院放疗科天津300000 河北中医药大学基础医学院生物化学与生物学教研室石家庄050200

目的探讨丹参来源的Sal-miR-58对人胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响及其分子机制。方法分别采用体外合成的不同浓度的miR-Ctl和Sal-miR-58模拟物处理胶质瘤U251细胞,再给予X线照射。MTT检测Sal-miR-58对U251细胞活力的影响。Hoechst333... 详细信息

目的探讨丹参来源的Sal-miR-58对人胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响及其分子机制。方法分别采用体外合成的不同浓度的miR-Ctl和Sal-miR-58模拟物处理胶质瘤U251细胞,再给予X线照射。MTT检测Sal-miR-58对U251细胞活力的影响。Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染检测Sal-miR-58对照射后胶质瘤U251细胞凋亡的影响。2'',7''-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测Sal-miR-58联合照射对肿瘤细胞活性氧含量的影响。克隆形成实验检测Sal-miR-58联合照射对U251细胞放射敏感性的影响。蛋白质印迹法检测Sal-miR-58调控抗凋亡蛋白造血细胞特异性蛋白1-相关蛋白X-l(HAX1)及凋亡标志蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化的胱天蛋白酶(Cleaved-Caspase)9、Cleaved-Caspase 3的表达情况。多组间比较行单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验。结果Sal-miR-58能加重照射后U251细胞增殖的抑制(P<0.05)。Sal-miR-58促进U251细胞凋亡,并且增加照射后U251细胞活性氧的产生(P<0.05)。克隆形成实验显示,Sal-miR-58增加U251细胞放射敏感性,放射增敏比为1.43。蛋白质印迹法结果显示,Sal-miR-58抑制放射诱导的U251细胞HAX1表达,且Sal-miR-58能通过阻抑HAX1表达进而抑制Bcl-2表达,促进Caspase 9及Caspase 3的活化。结论Sal-miR-58具有增强U251细胞放射敏感性的作用,其可能机制是Sal-miR-58通过下调射线诱导的HAX1表达,促进肿瘤细胞的凋亡。

关键词：微RNAs,丹参来源 HAX1基因放射敏感性人胶质瘤

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CHMP2B高表达促进胰腺癌发生和发展的机制

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安徽医科大学学报 2024年第9期59卷 1551-1556页

作者：曹天宇金皓东黄灿安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032

目的解析带电多泡体蛋白2B(CHMP2B)在胰腺癌中高表达的临床意义,探究CHMP2B在胰腺癌中的促癌机制。方法通过GEPIA网站的转录组学分析胰腺癌中CHMP2B的表达情况,探究CHMP2B的表达与胰腺癌无疾病生存率和总生存率的关系。通过Western blo... 详细信息

目的解析带电多泡体蛋白2B(CHMP2B)在胰腺癌中高表达的临床意义,探究CHMP2B在胰腺癌中的促癌机制。方法通过GEPIA网站的转录组学分析胰腺癌中CHMP2B的表达情况,探究CHMP2B的表达与胰腺癌无疾病生存率和总生存率的关系。通过Western blot法检测HPNE细胞与BXPC-3、MIA PaCa-2、PANC-1三种胰腺癌细胞中CHMP2B的表达。胰腺癌在MIA PaCa-2细胞中使用Lipofectamine 2000转染CHMP2B因子的过表达质粒,通过Western blot验证在MIA PaCa-2中过表达CHMP2B质粒的过表达效果。通过克隆形成实验比较过表达CHMP2B因子对MIA PaCa-2细胞成瘤能力。CCK-8实验和Transwell实验验证过表达CHMP2B因子对MIA PaCa-2细胞增殖和迁移侵袭的影响。采用免疫荧光染色检测CHMP2B因子的细胞定位,Western blot法检测CHMP2B高表达对微管关联蛋白1轻链3B(MAP1LC3B)和重组核孔蛋白62(P62)表达的影响。结果CHMP2B因子在胰腺癌组织中表达升高(P<0.01)。CHMP2B因子的过表达降低胰腺癌患者的总生存率和无疾病生存率(P<0.01)。人胰腺癌细胞系中CHMP2B表达量明显高于正常人胰腺导管上皮细胞。CHMP2B的高表达促进胰腺癌MIA PaCa-2细胞成瘤,同时与对照组相比CHMP2B高表达导致胰腺癌增殖、迁移和侵袭能力升高。免疫荧光染色可见CHMP2B在细胞核和细胞质中均有分布,并与膜泡分泌相关。CHMP2B的高表达促进了MAP1LC3B的表达,但是抑制了P62的表达。结论临床胰腺癌组织样本中CHMP2B的高表达与体外胰腺癌细胞系中的高表达相一致。CHMP2B分布在细胞核和细胞质,并且参与膜泡运输和溶酶体自噬,在胰腺癌细胞系MIA PaCa-2中,CHMP2B与自噬标志物MAP1LC3B表达呈正相关,并且抑制P62的表达。可知CHMP2B对胰腺癌恶性程度的促进与细胞自噬相关。CHMP2B通过调节膜泡运输和细胞自噬满足胰腺癌细胞高的营养代谢需求,进而促进胰腺癌的恶性生物学行为。

关键词： CHMP2B 膜泡运输胰腺癌溶酶体自噬 P62 MAP1LC3B

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红细胞内ATP释放的机制、效应及其与疾病关系的研究进展

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中国病理生理杂志 2023年第11期39卷 2089-2094页

作者：梁浩王玉路王云霞刘治苏燕包头医学院第一附属医院创伤一科内蒙古包头014010 包头市中心医院内蒙古包头014040 包头医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室内蒙古包头014040

成熟红细胞(erythrocyte)由于无细胞核及含膜细胞器,主要通过糖酵解和磷酸戊糖途径进行能量代谢。糖酵解产生的三磷酸腺苷(adenosine triphos-phate,ATP)作为红细胞内主要能源物质,以往认为主要用于维持红细胞正常功能。早在1997年Mc-Cu... 详细信息

成熟红细胞(erythrocyte)由于无细胞核及含膜细胞器,主要通过糖酵解和磷酸戊糖途径进行能量代谢。糖酵解产生的三磷酸腺苷(adenosine triphos-phate,ATP)作为红细胞内主要能源物质,以往认为主要用于维持红细胞正常功能。早在1997年Mc-Cullough等就观察到缺氧或红细胞变形时,ATP可以被红细胞释放到细胞外。

关键词：红细胞 ATP释放疾病

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高糖抑制蛋白KIAA0753和CCSAP表达并通过钙信号阻断小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的成骨分化

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中国药理学通报 2025年第3期41卷 456-465页

作者：王吉春钱正霞李梦雪汪长东重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院麻醉科重庆400016

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blo... 详细信息

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blot检测KIAA0753和CCSAP蛋白表达情况;转染过表达质粒进入人胚肾细胞(HEK-293T),免疫共沉淀检测蛋白KIAA0753和CCSAP相互作用;利用成骨培养基分别在不同葡萄糖浓度和不同诱导时间处理MC3T3-E1细胞,试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,Western blot检测KIAA0753、CCSAP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)等蛋白的表达情况,然后再设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-CCSAP组MC3T3-E1细胞,依次检测KIAA0753、OCN、OPN蛋白的表达情况以及ALP活性;利用高通量基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中糖尿病鼠模型数据集筛选差异基因进行生物信息学分析;对MC3T3-E1细胞分别设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-KIAA0753组,Western blot检测钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡbeta,CAMK2B)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)蛋白的表达。结果与5.5 mmol·L^(-1)组相比,25 mmol·L^(-1)抑制成骨细胞中KIAA0753和CCSAP蛋白表达,且蛋白KIAA0753和CCSAP存在相互作用。同时25 mmol·L^(-1)也抑制成骨细胞ALP、OPN、OCN蛋白表达,在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达CCSAP上调KIAA0753、OCN、OPN、ALP的表达。糖尿病鼠模型的差异基因主要富集在“信号受体、信号调控”等方面。25 mmol·L^(-1)葡萄糖抑制成骨细胞中CAMK2B、PLN蛋白的表达,且在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达KIAA0753上调CAMK2B、PLN蛋白的表达。结论高糖抑制KIAA0753和CCSAP蛋白表达,抑制小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化和钙信号传导,过表达CCSAP挽救高糖对成骨分化的抑制作用以及过表达KIAA0753逆转高糖对钙信号通路的抑制作用。

关键词：糖尿病 KIAA0753 CCSAP 蛋白相互作用成骨分化钙信号

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恶性胸膜间皮瘤免疫组织化学诊断标志物的研究进展

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中华劳动卫生职业病杂志 2023年第11期41卷 869-875页

作者：普元倩张也频熊伟大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，大理　671000 楚雄彝族自治州第一人民医院病理科，楚雄　651000

恶性胸膜间皮瘤（malignant pleural mesothelioma，MPM）是来源于胸膜的恶性肿瘤，起病隐匿，局部侵袭性强，生存期短，预后较差，临床诊断对其治疗及预后具有重要意义。目前，确诊MPM的金标准为组织病理学检查结果。免疫组织化学（imm... 详细信息

恶性胸膜间皮瘤（malignant pleural mesothelioma，MPM）是来源于胸膜的恶性肿瘤，起病隐匿，局部侵袭性强，生存期短，预后较差，临床诊断对其治疗及预后具有重要意义。目前，确诊MPM的金标准为组织病理学检查结果。免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）是病理诊断较为有效的辅助手段，初步检查可使用2个阳性标志物和2个阴性标志物区分胸膜转移性肿瘤，并根据鉴别诊断选择补充抗体。IHC标志物的联合使用在MPM与其他肿瘤之间的鉴别诊断中起着至关重要的作用。本文主要介绍MPM中常用的IHC标志物以及新型IHC标志物在筛查和鉴别诊断中的研究进展，旨在为MPM临床诊断和治疗提供参考依据。

关键词：间皮瘤恶性胸膜间皮瘤免疫组织化学诊断标志物

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酪氨酸激酶抑制剂BGJ398对人肝癌Huh-7细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其作用机制

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中国生物制品学杂志 2023年第8期36卷 947-954页

作者：刘畅余安琪池奋清弓韬梁文婷于保锋长治医学院基础部生物化学与分子生物学教研室山西长治046000 长治医学院第一临床学院山西长治046000 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 山西大学环境科学研究所山西太原030001

目的评价酪氨酸激酶抑制剂BGJ398对人肝癌Huh-7细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测10种酪氨酸激酶抑制剂对Huh-7细胞存活的影响,并分别采用单靶点动力学公式和双相动力学公式分析Huh-7细胞对BGJ398的敏感性... 详细信息

目的评价酪氨酸激酶抑制剂BGJ398对人肝癌Huh-7细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测10种酪氨酸激酶抑制剂对Huh-7细胞存活的影响,并分别采用单靶点动力学公式和双相动力学公式分析Huh-7细胞对BGJ398的敏感性。将10、30和90 nmol/L BGJ398分别加入Huh-7细胞,同时设对照组(不加药物),37℃培养24 h,流式细胞术检测BGJ398对Huh-7细胞凋亡和周期的影响;划痕试验检测BGJ398对Huh-7细胞迁移能力的影响;Western blot法检测BGJ398对Huh-7细胞多条通路相关蛋白表达水平的影响。结果 10种酪氨酸激酶抑制剂均可抑制Huh-7细胞增殖,其中Huh-7细胞对BGJ398最敏感,IC50为(0.020±0.013)μmol/L;Huh-7细胞对BGJ398的反应由两相组成,其中F1相占92.8%(Kd1为36 nmol/L),F2相占7.2%(Kd2>1 000μmol/L)。与对照组比较,30和90 nmol/L BGJ398组Huh-7细胞凋亡率及处于G1期的细胞百分比均显著上升(t=-6.407~-4.459,P均<0.05),10、30和90 nmol/L BGJ398组处于S期的细胞百分比明显减少(t分别为2.982、7.859和12.425,P均<0.05);划痕24及48 h后,30、90 nmol/L BGJ398组划痕面积均明显减小(t=5.376~18.197,P均<0.05);30、90 nmol/L BGJ398组磷酸化成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)及磷酸化胞外信号调节激酶1/2(Erk1/2)蛋白的表达水平均明显下降(t=4.015~6.729,P均<0.01)。结论 BGJ398能够抑制人肝癌Huh-7细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,可能是通过抑制FGFR磷酸化及MAPK信号通路实现的,BGJ398有望成为治疗肝癌的潜在药物。

关键词：酪氨酸激酶抑制剂BGJ398 细胞增殖细胞凋亡细胞周期细胞迁移信号通路

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KAP1基因在恶性胸膜间皮瘤的表达及预后意义

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中华劳动卫生职业病杂志 2024年第4期42卷 258-267页

作者：梅雯王心萌刘如爱熊伟张也频楚雄彝族自治州第一人民医院病理科楚雄675000 大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大理671000 云南省生物医药研发重点实验室大理671000

目的分析KRAB相关蛋白1(KAP1)在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达,研究其表达水平与MPM患者的临床特征及预后的关系。方法于2022年4月,通过TCGA数据库中下载的MPM患者KAP1 mRNA二代测序数据及临床病理资料,分析KAP1 mRNA表达量与临床参数相... 详细信息

目的分析KRAB相关蛋白1(KAP1)在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达,研究其表达水平与MPM患者的临床特征及预后的关系。方法于2022年4月,通过TCGA数据库中下载的MPM患者KAP1 mRNA二代测序数据及临床病理资料,分析KAP1 mRNA表达量与临床参数相关性;基于楚雄数据集队列临床样本分析KAP1蛋白表达量与临床病理参数的相关性及其预后价值。用qRT-PCR和Western blotting法分析人正常胸膜间皮细胞系Met-5A和MPM细胞系NCI-H28(上皮型)、NCI-H2052(肉瘤型)、NCI-H2452(双相混合型)和MTSO-211H中KAP1 mRNA和蛋白质的表达水平;用免疫组化和Western blotting法检测KAP1蛋白在MPM组织及正常胸膜组织中的表达。构建Kaplan-Meier模型探讨KAP1表达量对MPM患者预后的影响,Cox多因素回归分析MPM患者的预后影响因素。结果NCI-H28、NCI-H2052、NCI-H2452和MTSO-211H细胞中KAP1基因表达水平均明显高于Met-5A细胞(P<0.05)。与正常胸膜组织比较,MPM组织中KAP1明显高表达(P<0.05),KAP1蛋白表达水平与TP53蛋白表达水平、血清CEA水平相关(P<0.05)。KAP1 mRNA表达水平与总体生存率明显相关,KAP1 mRNA高表达的间皮瘤患者总生存时间均明显缩短(HR=3.7,Logrank P<0.001)。肿瘤类型、年龄与KAP1 mRNA表达水平MPM患者生存预后有关(P<0.05)。多因素分析发现,肿瘤类型和KAP1 mRNA表达水平是影响MPM患者预后的独立因素(P<0.05)。结论KAP1在MPM组织中呈高表达,其表达水平与病理类型可能与患者预后相关。

关键词：间皮瘤基因表达 KAP1基因 TCGA数据库楚雄队列

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PATL1对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响及其作用机制

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安徽医科大学学报 2024年第1期59卷 133-139页

作者：徐泽宇莱智勇任益凡武锋彭雨婷徐钧山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 山西医科大学第一医院肝胆胰外科太原030001

目的探讨PAT家族蛋白1(PATL1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其潜在的作用机制。方法通过TCGA数据库分析PATL1在泛癌、胃癌组织与正常组织中的表达水平;采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验评估40例人胃癌组织及配对癌旁组织中PA... 详细信息

目的探讨PAT家族蛋白1(PATL1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其潜在的作用机制。方法通过TCGA数据库分析PATL1在泛癌、胃癌组织与正常组织中的表达水平;采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验评估40例人胃癌组织及配对癌旁组织中PATL1的表达水平;通过Kaplan-Meier Plotter数据库分析PATL1对胃癌患者预后情况;在胃癌细胞株AGS中转染PATL1干扰载体,RT-qPCR实验评估干扰效果,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell实验及划痕愈合实验检测PATL1对AGS增殖和迁移的影响;采用Western blot实验检测干扰PATL1后对胃癌细胞中细胞-髓细胞瘤病病毒致癌基因(c-Myc),自噬相关蛋白7(ATG7)蛋白表达的影响。结果RT-qPCR实验显示,PATL1在人胃癌组织中表达高于正常胃组织(P<0.001),并且PATL1与肠型胃癌患者预后有相关性(P<0.0001)。敲低PATL1后,增殖、迁移的胃癌细胞数目减少(P<0.05)。Western blot实验检测结果显示敲低PATL1后c-Myc、ATG7蛋白表达水平也随之下降(P<0.05)。结论PATL1可能通过与c-Myc、ATG7相互串扰抑制了胃癌细胞的增殖和迁移。

关键词：胃癌增殖迁移 PATL1 自噬相关蛋白

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“教科思三位一体”全方位模式提升医学生科研综合能力的探索与实践

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中国生物化学与分子生物学报 2025年

作者：杨晓红黄春洪罗达亚朱伟锋应牡英姜祎郭璟翀廖浩棠汤晓丽南昌大学江西医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室南昌大学眼视光学院眼视光医学系南昌大学第一临床医学院临床医学系南昌大学第二临床医学院临床医学系

科教融合是推动社会进步和科技发展的重要策略，是实现创新人才培养的现代化高等教育形式。开展医学本科生科研训练是培养高校医学本科生创新能力和综合素质的重要途径之一。本团队将分子生物学实验教学与开展医学本科生科研训练有机融... 详细信息

科教融合是推动社会进步和科技发展的重要策略，是实现创新人才培养的现代化高等教育形式。开展医学本科生科研训练是培养高校医学本科生创新能力和综合素质的重要途径之一。本团队将分子生物学实验教学与开展医学本科生科研训练有机融合，以课程思政作为价值引领，提出了“教科思三位一体”的教学模式，旨在全方位培养学生科研综合能力。本次教学活动以基因多态性实验为例，全年级选拔出具有科研潜力的学生，分成4个项目组，分别由4名老师指导，从科研选题、项目书撰写、实验设计、科研伦理申请及项目总结等全过程进行科研训练。在整个教学过程中，本团队一直秉承着以学生为中心的教育理念，激发学生的内在动机，学生是项目的设计者和执行者，教师只是学习的引导者和促进者。经过本次训练，学生不但熟悉了科学研究项目书的撰写和实施的全过程，而且在文献阅读、实验设计、实验技能及解决问题的能力等方面都得到了一定程度的提升，尤为重要的是，本次教学活动也培养了学生的科研伦理意识和学术道德规范。

关键词：课程思政科教融合科研训练科研综合能力科研伦理

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68例恶性胸膜间皮瘤组织临床病理特征分析

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中华劳动卫生职业病杂志 2023年第8期41卷 588-593页

作者：梅雯杨晟杰张也频符群山熊伟赵一楚雄彝族自治州第一人民医院病理科楚雄675000 大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南省高校临床生物化学检验重点实验室云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

目的分析弥漫性恶性胸膜间皮瘤(MPM)的临床病理特征,探讨诊断思路,以期提高早期诊断率。方法于2019年1月至2022年1月回顾性研究楚雄彝族自治州人民医院68例MPM患者的临床资料,通过分析其临床特征、辅助检查及免疫组织化学资料,总结其发... 详细信息

目的分析弥漫性恶性胸膜间皮瘤(MPM)的临床病理特征,探讨诊断思路,以期提高早期诊断率。方法于2019年1月至2022年1月回顾性研究楚雄彝族自治州人民医院68例MPM患者的临床资料,通过分析其临床特征、辅助检查及免疫组织化学资料,总结其发病特征、组织病理学形态及钙结合蛋白(CR)、肾小球足突细胞膜蛋白(D2-40)、肾母细胞瘤基因-1(WT-1)等表达情况。结果68例患者中,男性40例(58.82%)、女性28例(41.18%),中位年龄为58.0岁。病理类型以上皮型为主59例(86.76%);发生部位以后右侧胸腔为主39例(57.35%)。最常见的首发临床表现为胸腔积液(95.59%)、胸痛(36.75%)、胸闷气促(30.88%),50例患者进行影像学检查主要表现为胸腔积液49例(98.00%),胸膜增厚46例(92.00%)。MPM瘤细胞常表达CR、肾母细胞癌基因-1(WT-1)和D2-40等,与肺腺癌鉴别的主要标志物甲状腺转录因子1(TTF-1)、天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、癌胚抗原(CEA)阴性。患者血清细胞角蛋白21-1(CYFRA21-1)和CEA对良、恶性胸腔积液具有较高的鉴别诊断价值。结论弥漫型MPM组织学和细胞学形态多样,需要与多种疾病鉴别,通过免疫组化正确诊断弥漫型MPM需一组间皮细胞相关抗体联合应用。

关键词：恶性胸膜间皮瘤临床特征诊断免疫组织化学

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