检索结果-内蒙古大学图书馆

生命的化学 2024年第6期44卷 1098-1116页

作者：李松卢占英姜文丽徐尧杨延龙焦炳华卢小玲海军军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433 海军军医大学基础医学院实验教学中心上海200433 海军军医大学第一附属医院中医外科上海200433 海军军医大学中医系上海200433

癌症是目前中国和发达国家主要的死亡原因。随着癌症基因组测序技术的进步与成熟,对癌症相关基因有了更深入的了解,为寻找新的治疗靶点提供了新的可能性。通过生物信息学的研究,结果发现,转酮醇酶(transketolase,TKT)在泛癌的发生和进... 详细信息

癌症是目前中国和发达国家主要的死亡原因。随着癌症基因组测序技术的进步与成熟,对癌症相关基因有了更深入的了解,为寻找新的治疗靶点提供了新的可能性。通过生物信息学的研究,结果发现,转酮醇酶(transketolase,TKT)在泛癌的发生和进展中扮演着关键角色,涉及肿瘤分期和不良预后。大量的数据分析和文献研究揭示了TKT在肿瘤发生中的异常修饰现象,并发现TKT与多种顺铂耐药基因有关。我们对未来充满期待,相信会有更多的TKT抑制剂先导化合物出现,为癌症治疗带来新的希望。

关键词：转酮醇酶泛癌分析 DNA甲基化磷酸化耐药

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香草酸通过诱导自噬缓解HepG2细胞脂肪变性

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中国临床药理学杂志 2021年第19期37卷 2622-2626页

作者：陈倩伊力亚斯·艾萨雷秀英张瑜冯学召西仁阿依·西热甫米娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学药学院药理学教研室新疆医科大学基础医学院生物学教研室新疆医科大学基础医学院病理与病理生物学教研室新疆医科大学药学院生药学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院

目的研究自噬在香草酸（VA）缓解肝细胞脂肪变性中的作用。方法将HepG2细胞分为空白组（不含药物的完全培养基）、阳性对照组(50 nmol·L-1西罗莫司)和低、中、高剂量实验组(25,50,100μmol·L-1VA),作用时间12 h。用蛋白质印... 详细信息

目的研究自噬在香草酸（VA）缓解肝细胞脂肪变性中的作用。方法将HepG2细胞分为空白组（不含药物的完全培养基）、阳性对照组(50 nmol·L-1西罗莫司)和低、中、高剂量实验组(25,50,100μmol·L-1VA),作用时间12 h。用蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3B（LC3Ⅱ）和泛素结合蛋白P62（P62）表达水平的变化,探究VA诱导自噬的作用。用VA单独或联合100 nmol·L-1巴弗洛霉素A1（BafA1）处理Hep G2细胞12 h,实验分为空白组（不含药物的完全培养基）、对照A组(100 nmol·L-1BafA1)、对照B组(50μmol·L-1VA)和实验组(50μmol·L-1VA+100 nmol·L-1Baf A1)。用蛋白质印迹法检测LC3Ⅱ蛋白表达水平的变化,探究VA对自噬流的影响。用VA单独或联合3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预棕榈酸（PA）诱导的HepG2细胞脂肪变性模型,将细胞分为空白组（不含药物的完全培养基）、模型组(100μmol·L-1PA)、对照组(100μmol·L-1PA+50μmol·L-1VA)和实验组(100μmol·L-1PA+50μmol·L-1VA+5 mmol·L-13-MA),作用时间24 h。用比色法检测细胞内三酰甘油（TG）的含量,用蛋白质印迹法检测脂滴包被蛋白3（Perilipin3）表达水平的变化。结果在探究VA诱导自噬的研究中,空白组、阳性对照组和低、中、高剂量实验组的LC3Ⅱ蛋白相对表达量分别为0.53±0.08,0.93±0.31,0.89±0.22,0.96±0.24和0.92±0.14,P62蛋白相对表达量分别为1.47±0.16,0.96±0.17,1.07±0.06,0.76±0.07和0.63±0.12;空白组的上述指标与中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义（均P <0.05）。在探究VA对自噬流的影响中,空白组、对照A组、对照B组和实验组LC3Ⅱ蛋白相对表达量分别为0.40±0.12,0.87±0.14,0.67±0.07和1.13±0.11;实验组与对照A组、对照B组的上述指标和空白组比较,差异均有统计学意义（均P <0.05）。在脂肪变性模型中,空白组、模型组、对照组和实验组细胞中TG相对含量分别为0.70±0.16,1.34±0.11,1.07±0.03和1.33±0.14,Perilipin3蛋白相对表达量分别为0.61±0.14,1.24±0.19,0.72±0.03和1.03±0.21;模型组的上述指标与空白组和对照组比较,或实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义（均P <0.05）。结论香草酸通过诱导自噬,从而缓解PA诱导的HepG2细胞脂肪变性。

关键词：香草酸棕榈酸脂肪变性细胞自噬

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巨噬细胞对马尔尼菲篮状菌免疫作用机制研究进展

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中国真菌学杂志 2021年第1期16卷 60-64,68页

作者：夏露蓝秀万温波广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南宁530021 锦州医科大学附属第一医院锦州121000

马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei),旧称为马尔尼菲青霉菌(Penicillium marneffei),流行于东南亚和中国南部。法国Capponi等[1]在1956年从竹鼠体内分离的青霉菌属温控双相条件致病菌,室温25℃条件下表现为菌丝相,37℃环境下表现为... 详细信息

马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei),旧称为马尔尼菲青霉菌(Penicillium marneffei),流行于东南亚和中国南部。法国Capponi等[1]在1956年从竹鼠体内分离的青霉菌属温控双相条件致病菌,室温25℃条件下表现为菌丝相,37℃环境下表现为酵母相,酵母相菌体具有致病性。马尔尼菲篮状菌病主要集中于免疫力低下人群,尤其HIV患者,若得不到有效的治疗,病死率极高[2,3]。近年来,感染***发病率上升趋势明显[4],其传播途径最常见是经呼吸道吸入***孢子导致感染。

关键词：马尔尼菲篮状菌巨噬细胞免疫作用

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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刚地弓形虫致密颗粒蛋白3基因缺陷虫株的构建及毒力鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2025年

作者：王佩豪吴敏敏都建安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室感染性疾病研究中心安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学第一附属医院检验科

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CR... 详细信息

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CRISPR-associated protein9,CRISPR/Cas9]技术构建基因缺陷虫株。使用E-CRISPR软件设计向导RNA（guide RNA,gRNA）,利用Q5定点突变试剂盒突变pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒上的gRNA,构建pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒。构建一个含有GRA3基因上游序列、乙胺嘧啶抗性基因二氢叶酸还原酶胸苷酸合酶（dihydrofolate reductase-thymidylate synthase,DHFR-TS）和GRA3基因下游序列的GRA3基因供体质粒,并通过PCR扩增出GRA3基因供体DNA。将pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒和GRA3基因供体DNA电穿孔转染野生型刚地弓形虫ME49速殖子,电转后的虫株悬液接种于人包皮成纤维（human foreskin fibroblast,HFF）细胞中,并用乙胺嘧啶进行筛选,获得乙胺嘧啶抗性虫株后进行单克隆筛选,采用PCR和Western blotting鉴定弓形虫GRA3基因缺陷单克隆株ME49Δgra3,采用Western blotting检测弓形虫ME49Δgra3株中GRA3蛋白表达水平。将新鲜裂解的弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子各1 000个加入接种有HFF细胞的12孔板中,置于37℃含5%CO2的细胞培养箱中培养7d,以结晶紫染液染色法计数空斑数量。采用吉姆萨染色法对弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子感染的HFF细胞染色,计数细胞中含有1、2、4个和>4个弓形虫纳虫泡数量的细胞。比较弓形虫ME49株和ME49Δgra3株感染的C57BL/6小鼠35 d存活率。结果 PCR扩增发现,DHFR-TS基因上、下游同源臂条带在弓形虫ME49Δgra3株中均成功扩增,ME49株未扩增出相应条带;GRA3基因条带在弓形虫ME49株中成功扩增,ME49Δgra3株未扩增出GRA3基因条带但扩增出含DHFR-TS基因的条带。Western blotting检测发现,弓形虫ME49Δgra3株中未见GRA3蛋白表达。弓形虫ME49株平均形成（352.67±26.39）个空斑、ME49Δgra3株平均形成（235.00±26.29）个空斑,差异有统计学意义（t=5.472,P<0.01）。吉姆萨染色结果显示,弓形虫ME49株感染的HFF细胞中,纳虫泡内至少含有4个弓形虫速殖子的比例为（75.67±2.52）%,高于ME49Δgra3株感染组的（59.67±2.31）%（t=8.113,P<0.01）;纳虫泡内含有1个或2个弓形虫速殖子的比例为（24.33±2.52）%,低于ME49Δgra3株感染组的（40.33±2.31）%（t=-8.113,P<0.01）。感染弓形虫ME49株和ME49Δgra3株的小鼠分别自感染后第8、9天开始死亡,感染后第35 d存活率分别为10%（1/10）和70%（7/10）,差异具有统计学意义（χ2=6.762,P<0.01）。结论成功构建了刚地弓形虫ME49Δgra3株,GRA3蛋白可能增强弓形虫ME49株毒力。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白3 基因缺陷规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 毒力

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基于TCGA数据分析KIF4A基因在恶性胸膜间皮瘤中的表达及预后意义

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右江民族医学院学报 2023年第6期45卷 868-873,885页

作者：李锦松李彬李汉伟刘如爱普元倩自加吉余敏熊伟大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南大理671000 云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 云南省高校临床生物化学检验重点实验室云南大理671000 云南省大理白族自治州第一人民医院云南大理671000 云南大学生命科学学院生物化学与分子生物学实验室云南昆明650091

目的探讨驱动蛋白超家族4A(KIF4A)基因在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达及其临床意义。方法应用TCGA数据库下载MPM数据集分析KIF4A与MPM的临床病理相关性;运用GEIPA数据库分析KIF4A的表达量与MPM预后的相关性;利用TIMER 2.0数据库分析KIF4... 详细信息

目的探讨驱动蛋白超家族4A(KIF4A)基因在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达及其临床意义。方法应用TCGA数据库下载MPM数据集分析KIF4A与MPM的临床病理相关性;运用GEIPA数据库分析KIF4A的表达量与MPM预后的相关性;利用TIMER 2.0数据库分析KIF4A免疫细胞浸润相关性和MPM免疫细胞存活曲线;使用R语言进行KIF4A基因富集分析。结果KIF4A与MPM组织分型有关(P<0.05);KIF4A高表达与MPM患者预后不良有关(P<0.001),且上皮型MPM患者的预后优于肉瘤型MPM患者(P<0.05);KIF4A基因表达与B淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、髓样树突状细胞浸润成正相关,并在DNA的复制、蛋白酶体、剪接体、mRNA监测等通路发挥作用。结论KIF4A在MPM组织中高表达,是判断MPM预后的良好指标之一。

关键词：恶性间皮瘤驱动蛋白超家族4A TCGA数据库预后生物信息学

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薯蓣皂苷元对鱼藤酮损伤PC-12细胞的保护作用研究

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食品安全质量检测学报 2021年第5期12卷 1954-1959页

作者：张瑜伊力亚斯·艾萨雷秀英陈倩西仁阿依·西热甫米娜袁芳新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的研究薯蓣皂苷元对PC-12细胞生长的影响及其自噬诱导作用。方法用薯蓣皂苷元(diosgenin,DG)干预PC-12细胞,四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和平板克隆形成实验检测DG对PC-12细胞的保护作用。DG处理PC-12细胞, We... 详细信息

目的研究薯蓣皂苷元对PC-12细胞生长的影响及其自噬诱导作用。方法用薯蓣皂苷元(diosgenin,DG)干预PC-12细胞,四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和平板克隆形成实验检测DG对PC-12细胞的保护作用。DG处理PC-12细胞, Western Blot方法检测P62、LC3-Ⅱ蛋白的相对表达量。DG处理经过鱼藤酮诱导损伤的PC-12细胞,激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧的变化, Mito Tracker Red方法观察线粒体变化。结果 MTT法和平板克隆形成实验结果表明,薯蓣皂苷元在15μg/mL时对PC-12细胞有保护作用。DG干预PC-12细胞12 h后, P62蛋白表达减少(P<0.05), LC3-Ⅱ蛋白水平升高(P<0.05)。DG干预鱼藤酮损伤的PC-12细胞24 h后,细胞内活性氧降低(P<0.001),线粒体损伤减弱。结论薯蓣皂苷元可以通过诱导细胞自噬对鱼藤酮诱导的PC-12细胞损伤发挥保护作用。

关键词：薯蓣皂苷元细胞自噬帕金森病鱼藤酮

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宏基因组二代测序诊断惠普尔养障体重症肺炎一例报道并文献复习

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实用心脑肺血管病杂志 2024年第1期32卷 134-137页

作者：陈平吴文兵任思冲米佳丽四川省遂宁市中心医院药学部 629000 西南医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室四川省泸州市646000 成都医学院第一附属医院肾内科四川省成都市610500

惠普尔养障体(TW)重症肺炎是由TW感染引起的罕见病,传统检测方法不易获得其病原学证据,误诊率极高,故其早期诊断与治疗仍面临巨大挑战。宏基因二代测序(mNGS)可检测到传统检测手段无法检测到的罕见病原体,使得TW检出率不断提高。本文报... 详细信息

惠普尔养障体(TW)重症肺炎是由TW感染引起的罕见病,传统检测方法不易获得其病原学证据,误诊率极高,故其早期诊断与治疗仍面临巨大挑战。宏基因二代测序(mNGS)可检测到传统检测手段无法检测到的罕见病原体,使得TW检出率不断提高。本文报道1例支气管肺泡灌洗液mNGS诊断为TW感染的重症肺炎患者,给予头孢曲松联合复方磺胺甲噁唑治疗,患者病情好转。

关键词：肺炎惠普尔养障体宏基因组二代测序病例报告

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构树叶黄酮类物质提取工艺的优化及其对小鼠表皮干细胞的抗氧化作用

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中国生物制品学杂志 2024年第3期37卷 343-349,355页

作者：岑丽航孙鸽云王珍珍肖瑞琳王丽丽常冰梅山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 太原市铁路局疾病预防控制中心山西太原030001 山西医科大学第一医院山西太原030001

目的优化构树叶黄酮类物质的提取工艺,并探讨黄酮类物质对小鼠表皮干细胞的抗氧化作用。方法采用单因素试验优化构树叶黄酮类物质提取工艺中的液料比(15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1)、NaOH浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)、pH(... 详细信息

目的优化构树叶黄酮类物质的提取工艺,并探讨黄酮类物质对小鼠表皮干细胞的抗氧化作用。方法采用单因素试验优化构树叶黄酮类物质提取工艺中的液料比(15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1)、NaOH浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)、pH(2.5、3.0、3.5、4.0、4.5)、浸提温度(60、65、70、75、80℃)。在单因素试验结果的基础上,以黄酮类物质质量分数为评价指标,采用正交试验设计确定最佳提取工艺。免疫磁珠法分选CD49f+/CD71-小鼠表皮干细胞,并检测黄酮类物质对其细胞相对活力及细胞中还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。结果黄酮类物质提取工艺的最佳条件为:液料比30∶1、NaOH浓度0.6%、pH4.5、浸提温度75℃。最佳条件下提取黄酮类物质平均质量分数为1.47%。与阴性对照组比较,当黄酮类物质终浓度为25及50μg/mL时,细胞相对活力明显增加(F分别为1.427和13.747,P均<0.01);当黄酮类物质终浓度为12.5、25、50μg/mL时,GSH含量明显上升(F分别为0.044、0.291和2.577,P均<0.05),MDA含量明显下降(F分别为3.568、4.909和1.400,P均<0.05)。结论优化后的构树叶黄酮类物质提取工艺稳定可靠,有利于构树叶加工后剩余原液的再利用,提取的黄酮类物质可促进小鼠表皮干细胞增殖,具有抗氧化性。

关键词：构树叶黄酮表皮干细胞抗氧化

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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值

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新疆医科大学学报 2025年第4期48卷 421-425,431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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