检索结果-内蒙古大学图书馆

中成药 2005年第6期27卷 685-687页

作者：贾丹辉李辰成胡香杰张贵卿郑州大学基础医学院药理教研室河南郑州450052 郑州大学第一附属医院内科

目的:观察舒络胶囊(水蛭、蜈蚣、川芎等)对血小板聚集和血栓形成的影响。方法:大鼠均分为大中小3剂量,灌胃给药;用二磷酸腺苷(ADP)、胶原(COL),花生四烯酸(AA)诱导大鼠血小板聚集;采用大鼠动静脉旁路和电刺激大鼠静总动脉两种血栓形成方... 详细信息

目的:观察舒络胶囊(水蛭、蜈蚣、川芎等)对血小板聚集和血栓形成的影响。方法:大鼠均分为大中小3剂量,灌胃给药;用二磷酸腺苷(ADP)、胶原(COL),花生四烯酸(AA)诱导大鼠血小板聚集;采用大鼠动静脉旁路和电刺激大鼠静总动脉两种血栓形成方法;以阿司匹林为阳性对照。结果:舒络胶囊大中剂量组均能明显抑制ADP、胶原、AA诱导大鼠的血小板最大聚集率,显著抑制两种方法引起的大鼠的血栓形成。结论:舒络胶囊具有抑制大鼠血栓形成和抗血小板聚集作用。

关键词：舒络胶囊血栓形成血小板聚集大鼠

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腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第6期26卷 622-625页

作者：钟建辉银巍藏林泉江伟健邱鹏新颜光美中山大学基础医学院药理教研室附属第一医院肾内科广东广州510080 中山大学

【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒p... 详细信息

【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带，Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。

关键词： DNA多聚酶β 腺病毒载体 PC12细胞

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“低钾”诱导神经元凋亡过程中ARNT2上调表达的分析

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中国病理生理杂志 2005年第3期21卷 479-483页

作者：孙林光银巍苏兴文程文芳江伟健邱鹏新颜光美中山大学基础医学院药理教研室中山大学第一附属医院肾内科实验室广东广州510089

目的 :观察“低钾”诱导大鼠神经元凋亡过程中ARNT2的表达变化 ,探讨ARNT2与神经元凋亡的关系。方法 :建立“低钾”诱导神经元凋亡模型 ,应用RT -PCR分析ARNT2在凋亡过程中mRNA的表达变化 ,Westernblotting分析蛋白质的表达变化 ,间接... 详细信息

目的 :观察“低钾”诱导大鼠神经元凋亡过程中ARNT2的表达变化 ,探讨ARNT2与神经元凋亡的关系。方法 :建立“低钾”诱导神经元凋亡模型 ,应用RT -PCR分析ARNT2在凋亡过程中mRNA的表达变化 ,Westernblotting分析蛋白质的表达变化 ,间接免疫荧光与激光共聚焦确定亚细胞定位。结果 :“低钾”诱导 30min后大鼠小脑颗粒神经元ARNT2mRNA表达水平即明显上调 ,1h后上调表达最明显 ,并持续至“低钾”诱导后 12h左右 ,ARNT2蛋白质水平的表达变化与mRNA水平的表达变化相似 ,免疫荧光结合激光共聚焦分析显示ARNT2蛋白定位于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内。结论 :ARNT2分布于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内 ,在“低钾”诱导的凋亡过程中ARNT2mRNA与蛋白均上调表达。

关键词：小脑颗粒神经元基因,ARNT2 细胞凋亡钾

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烟碱拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第2期26卷 160-163,167页

作者：黄晓卉朱小南许燕陈汝筑汪雪兰中山大学附属第一医院外科实验室广东广州510080 中山大学基础医学院药理教研室广东广州510080

【目的】研究烟碱对皮质神经元的保护作用。【方法】在培养至第6天的皮质神经元中以不同浓度(1 μmol/L,10μmol/L,100μmol/L)烟碱预孵2 h,再加入0.1μmol/L秋水仙碱作用24 h。通过相差显微镜形态学观察,Hoechst33258核荧光染色进行凋... 详细信息

【目的】研究烟碱对皮质神经元的保护作用。【方法】在培养至第6天的皮质神经元中以不同浓度(1 μmol/L,10μmol/L,100μmol/L)烟碱预孵2 h,再加入0.1μmol/L秋水仙碱作用24 h。通过相差显微镜形态学观察,Hoechst33258核荧光染色进行凋亡率计数和测定乳酸脱氢酶相对释放量(LDH)的实验,再测试10μmol/L 预孵不同时间(0.5,2,8)h的烟碱对秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用。【结果】秋水仙碱可诱导皮质神经元调亡,烟碱可拮抗秋水仙碱的此种作用。其中10μmol/L烟碱预孵2 h保护作用最强。【结论】烟碱可拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用。

关键词：烟碱皮质神经元秋水仙碱凋亡乳酸脱氢酶

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克隆人神经母细胞瘤细胞株鲀毒素抵抗型钠通道的序列分析

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中国药理学与毒理学杂志 2005年第3期19卷 186-193页

作者：欧绍武龟山亚砂子郝丽英龟山正树李金鸣中国医科大学附属第一医院神经外科辽宁沈阳110001 鹿儿岛大学医学部第二生理教研室中国医科大学基础医学院药理学教研室辽宁沈阳110001

目的　为了弄清人神经母细胞瘤(NB 1)细胞上的毒素抵抗型(TTX R)电压依赖性钠通道的编码基因及分子特性。方法　使用逆转录聚合酶链反应方法,对NB 1细胞TTX R钠通道α亚单位进行克隆。结果　该克隆命名为hNbR1,其开放阅读框架(ORF)为2... 详细信息

目的　为了弄清人神经母细胞瘤(NB 1)细胞上的毒素抵抗型(TTX R)电压依赖性钠通道的编码基因及分子特性。方法　使用逆转录聚合酶链反应方法,对NB 1细胞TTX R钠通道α亚单位进行克隆。结果　该克隆命名为hNbR1,其开放阅读框架(ORF)为2 0 16个氨基酸残基。序列分析显示,hNbR1与心肌Nav1.5 /SCN5A氨基酸相似性达99.1% ,并具有电压依赖性钠通道的结构特点。4个相似的跨膜结构域(DⅠ～DⅣ) ,其中包括6个推定的α螺旋跨膜片段(S1～S6 ) ,每个结构域的电压感受器跨膜片段(S4 )均有正电荷残基;在DⅠ的P 环存在的半胱氨酸残基(C373)提示该通道为TTX R钠通道。DⅠS3～S4一个位于第3号染色体的新的外显子(第6A外显子)编码了该通道α亚单位。另外,一个删除了DⅡ～DⅢ第18外显子的选择性剪切体(hNbR1 2 )被发现。结论Nav1.5 /SCN5A比以往所知具有更加广泛的分布,而且发现一个新的外显子在神经肿瘤组织中编码了这个TTX R钠通道的α亚单位。

关键词：神经母细胞瘤细胞,培养的钠通道基因克隆,分子

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克隆的人神经母细胞瘤细胞株鲀毒素抵抗型钠通道的功能分析

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中国药理学与毒理学杂志 2005年第4期19卷 284-288页

目的作者已经克隆了人神经母细胞瘤(NB-1)细胞株毒素抵抗型(TTX-R)钠通道α亚单位及其选择性剪切体,分别命名为hNbR1和hNbR1-2,本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性。方法使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人... 详细信息

目的作者已经克隆了人神经母细胞瘤(NB-1)细胞株毒素抵抗型(TTX-R)钠通道α亚单位及其选择性剪切体,分别命名为hNbR1和hNbR1-2,本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性。方法使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人胚肾细胞(HEK-293)上记录这两个钠通道的钠电流。结果这两个变构体在稳态激活和失活方面略微不同,hNbR1和hNbR1-2的半数激活电压分别为-(37.8±1.3)和-(43.5±1.7)mV,半数失活电压分别为-(74.4±1.1)和-(81.5±1.1)mV,hNbR1-2的稳态激活和稳态失活曲线较hNbR1分别负向移位5.7mV和7.1mV。TTX阻断hNbR1和hNbR1-2的IC50分别为(7.9±2.3)和(8.3±2.5)μmol·L-1,二者对TTX的敏感性无显著性差异。结论两个钠通道变构体hNbR1和hNbR1-2均可在HEK-293细胞上表达并产生钠电流,二者在稳态激活和失活方面略微不同,对TTX的敏感性无显著性差异。

关键词：神经母细胞瘤钠通道膜片钳技术,全细胞

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钙与维生素D_3抑制人宫颈癌细胞和组织增殖作用的相关性研究

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中国医科大学学报 2005年第5期34卷 403-405页

作者：于君丽刁尧郭科军于成国关福兰金万宝魏敏杰中国医科大学基础医学院药理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院同位素研究室中国医科大学附属第一医院妇产科

目的:检测不同浓度与作用时间的钙离子(Ca2+)对HeLa细胞增殖与宫颈癌组织3H-TdR掺入的影响,同时检测维生素D3(VD3)的协同作用与维拉帕米(VP)的拮抗作用,探讨Ca2+抑制宫颈癌细胞与组织增殖的可能作用机制。方法:应用MTT法检测HeLa细胞在... 详细信息

目的:检测不同浓度与作用时间的钙离子(Ca2+)对HeLa细胞增殖与宫颈癌组织3H-TdR掺入的影响,同时检测维生素D3(VD3)的协同作用与维拉帕米(VP)的拮抗作用,探讨Ca2+抑制宫颈癌细胞与组织增殖的可能作用机制。方法:应用MTT法检测HeLa细胞在各作用因素存在时的增殖水平;应用同位素放射自显影检测新鲜人宫颈癌组织在各刺激因素存在时的3H-TdR掺入水平。结果:Ca2+具有抑制HeLa细胞增殖和宫颈癌组织3H-TdR掺入作用,VD3可明显协同增强Ca2+的抑制作用,VP可明显拮抗Ca2+的作用、部分拮抗VD3的协同作用。结论:Ca2+具有剂量与时间依赖性抑制宫颈癌细胞与组织增殖的作用,其作用机制与促进细胞外钙内流相关;VD3的协同抑制作用不仅与促进细胞外钙内流相关,还存在其它机制有待探讨。

关键词：钙离子维生素D3 宫颈癌细胞增殖

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长期摄铝对大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

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毒理学杂志 2005年第3期19卷 211-212页

作者：曹云鹏滕赞李智丛华中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院药理教研室

钙存在于有生命的细胞中，它对影响细胞代谢，从而调节细胞的生长、发育、衰老及死亡都具有重要意义。大量资料表明，铝具神经毒性且是阿尔茨海默病（AD）的重要危险因素，但两者之间的关系仍未阐明。本实验观察长期摄铝对大鼠脑细胞内... 详细信息

钙存在于有生命的细胞中，它对影响细胞代谢，从而调节细胞的生长、发育、衰老及死亡都具有重要意义。大量资料表明，铝具神经毒性且是阿尔茨海默病（AD）的重要危险因素，但两者之间的关系仍未阐明。本实验观察长期摄铝对大鼠脑细胞内游离钙浓度[Ca^2＋]．变化，进一步探讨铝的神经毒性机制.

关键词：铝细胞内钙脑大鼠

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m_5 AChR-G_(11)融合蛋白筛选m_5受体配体的研究

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中国医科大学学报 2005年第5期34卷 396-398页

作者：王海波秦兴军郭政东杨君兰中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院口腔颌面外科中国医科大学基础医学院药理学教研室辽宁省疾病预防控制中心

目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法:采用杆状病毒Sf 9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验... 详细信息

目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法:采用杆状病毒Sf 9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验,检测m5AChR-G11融合蛋白的功能。结果:m5AChR-G11融合蛋白的表达水平为(60.39±1.95)***-1蛋白。不同配体存在时使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化,ace-tylcholine,M cN-A-343,AF-102B,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和atrop ine存在时以及无配体时,GDP的IC50值分别是134.90,46.77,38.02,10.00,13.80,18.62,5.89,23.40μmol/L。结论:杆状病毒Sf 9细胞表达系统表达的m5AChR-G11融合蛋白具备m受体配体结合特性和两组分间的偶联功能。乙酰胆碱是m5受体的完全激动剂,M cN-A-343和AF-102B是部分激动剂,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和阿托品是拮抗剂。

关键词：融合蛋白毒蕈碱乙酰胆碱受体 G蛋白偶联受体兴奋剂拮抗剂

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人参皂甙Rh2对脑胶质细胞瘤侵袭性的影响

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中国实验诊断学 2005年第1期9卷 36-38页

作者：姚兴军洪新雨刘兴吉崔佳乐吉林大学第一医院神经外科吉林长春130021 吉林大学基础医学院药理教研室

目的　探讨人参皂甙Rh2对C6胶质细胞瘤体内侵袭的影响。方法　将携带增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pegfp N3质粒体外转染C6胶质瘤细胞 ,将C6阳性克隆以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠胶质瘤移植模型。一周后经MRI检测接种... 详细信息

目的　探讨人参皂甙Rh2对C6胶质细胞瘤体内侵袭的影响。方法　将携带增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pegfp N3质粒体外转染C6胶质瘤细胞 ,将C6阳性克隆以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠胶质瘤移植模型。一周后经MRI检测接种成功的大鼠 ,随机分成两组 ,采用阴性对照及腹腔给药的方法 ,用病理检查、荧光显微镜及MRI观察Rh2对胶质瘤侵袭的影响。结果　稳定转染EGFP基因的C6瘤细胞于体内、外均可发出绿色荧光 ,在荧光显微镜下易于区分肿瘤与非肿瘤区。 16 μl/mlRh2可明显抑制肿瘤体内侵袭。结论　Rh2降低了C6瘤细胞的体内侵袭性 ,抑制肿瘤生长。

关键词：神经胶质细胞瘤人参皂甙Rh2

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