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细胞与分子免疫学杂志 2012年第8期28卷 818-821页

作者：张海飞郭敏芳孟健刘春云李艳花尉杰忠侯绍蔚丰玲肖保国马存根山西医科大学第一临床医学院神经内科山西太原030001 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009 复旦大学华山医院神经病学研究所上海200025

目的:利用体外培养的BV-2小胶质细胞,探讨法舒地尔(Fasudil)抑制LPS激活的炎性反应和小胶质细胞不同亚群的转换。方法:BV-2小胶质细胞进行常规培养和传代,实验分为PBS对照组、PBS联合Fasudil处理组、LPS刺激组、LPS联合Fasudil干预组。N... 详细信息

目的:利用体外培养的BV-2小胶质细胞,探讨法舒地尔(Fasudil)抑制LPS激活的炎性反应和小胶质细胞不同亚群的转换。方法:BV-2小胶质细胞进行常规培养和传代,实验分为PBS对照组、PBS联合Fasudil处理组、LPS刺激组、LPS联合Fasudil干预组。NO产生采用Griess法,TNF-α释放采用ELISA法,而M1和M2亚群分析采用流式细胞技术。结果:LPS处理导致典型的M1型小胶质细胞特征,而Fasudil处理可抑制LPS诱导的NO产生和炎性细胞因子TNF-α的释放,并且可以转化炎性M1型细胞至抗炎和修复的M2型细胞。结论:Fasudil显示了良好的抗炎效果,可能与M1小胶质细胞转化为抗炎和修复功能的M2型细胞有关。

关键词：盐酸法舒地尔小胶质细胞脂多糖抗炎作用

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法舒地尔通过诱导EAE小鼠Occludin表达抑制其炎性细胞浸润

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2012年第3期19卷 206-210页

作者：刘岳婷侯绍蔚刘春云郭敏芳李艳花张海飞尉杰忠肖保国马存根山西医科大学第一临床医学院神经内科 030001 山西大同大学脑科学研究所 037008 上海复旦大学华山医院神经病学研究所 200025

目的观察法舒地尔(Fasudil)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型的治疗效果并探讨其作用机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫建立国际标准的小鼠EAE模型。将免疫后的42只雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE组、Fasu... 详细信息

目的观察法舒地尔(Fasudil)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型的治疗效果并探讨其作用机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫建立国际标准的小鼠EAE模型。将免疫后的42只雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE组、Fasudil早期治疗组和Fasudil晚期治疗组。Fasudil早期治疗组即免疫后第3天按体质量40mg/(kg.d)腹腔注射Fasudil,1次/d,至免疫后30d;Fasudil晚期治疗组即免疫后首只小鼠出现症状即开始腹腔注射Fasudil,注射方法和剂量同Fasudil早期治疗组;与晚期治疗组给药同一时间,给予EAE组等量生理盐水作为对照。免疫后隔天观察各组小鼠临床评分和体质量变化。于免疫30d后处死动物,分离小鼠脊髓腰膨大和脑冠状位中部1/3处做冷冻切片,行HE染色和免疫荧光染色。同时提取小鼠脊髓蛋白检测Occludin蛋白的表达。结果 Fasudil可改善EAE的临床症状,抑制脑血管内皮细胞Rho激酶(ROCK)活性。与EAE组相比,Fasudil早期治疗组和晚期治疗组CD31阳性内皮细胞上p-MYPT1表达均减弱(P<0.01,P<0.05),起病时间均延长(P<0.01,P<0.05),脊髓Occludin蛋白表达均增加(P<0.05)。结论 Fasudil对EAE具有治疗的潜能,其机制可能为通过抑制血管内皮细胞ROCK活性,参与诱导内皮细胞紧密连接蛋白Occludin的表达,从而抑制炎性细胞的中枢浸润,最终阻止疾病的发生和发展。

关键词：法舒地尔多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎 Rho/Rock信号 Occludin

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谷氨酸对胚胎大鼠神经干细胞巢蛋白表达的影响

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中华脑科疾病与康复杂志（电子版） 2012年第1期2卷 60-64,69页

作者：蔡瑞艳张丽娜史瑞峰钟根深新乡医学院第一附属医院神经外科实验室河南省神经病学研究所河南省卫辉市453100

目的探讨谷氨酸对体外培养的大鼠神经干细胞巢蛋白(Nestin)的影响。方法取怀孕10 d的SD大鼠胚胎海马组织,分离神经干细胞进行体外培养,置于含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、B27的无血清培养基进行培养。传代至... 详细信息

目的探讨谷氨酸对体外培养的大鼠神经干细胞巢蛋白(Nestin)的影响。方法取怀孕10 d的SD大鼠胚胎海马组织,分离神经干细胞进行体外培养,置于含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、B27的无血清培养基进行培养。传代至第2代,用免疫荧光细胞化学法检测神经干细胞特异性标志物Nestin的表达;培养液中添加5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)3 h后检测其在神经干细胞中的表达;含血清不含神经生长因子的培养液中培养7 d后经神经胶质酸性蛋白(GFAP)免疫荧光细胞化学法检测细胞分化情况。细胞传至第3代细胞后,经细胞计数后分为6组,A组为对照组,在B、C、D、E、F组培养液中分别加入浓度为200、400、600、800及1 000μmol/L的谷氨酸。观察各组神经干细胞的增殖情况,应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测各组中Nestin表达量的不同,应用统计学软件进行分析。结果 (1)细胞培养:胎鼠海马区分离培养的神经干细胞能很快增殖形成悬浮生长的圆形细胞球。经免疫荧光鉴定,细胞球Nestin抗体标记阳性。在培养液中加入BrdU后,BrdU能结合到细胞核中;诱导分化后,荧光鉴定GFAP标记阳性。(2)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR):Nestin mRNA在各组之间表达亦具有显著差异(P<0.05),其表达程度由高到低顺序与谷氨酸在各组中的浓度高低相一致:F组(2.21±0.42)、E组(1.99±0.37)、D组(1.58±0.26)、C组(1.36±0.41)、B组(1.05±0.34)、A对照组(0.83±0.21)。结论谷氨酸可以促进神经干细胞Nestin的表达,且在一定范围内表达量与谷氨酸浓度存在剂量依赖性。

关键词：谷氨酸神经干细胞胚胎大鼠巢蛋白

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小胶质细胞在不同炎性环境下亚型和功能的演变及其意义

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山西大同大学学报（自然科学版） 2012年第1期28卷 40-42页

作者：张海飞郭敏芳尉杰忠李艳花肖保国马存根山西医科大学第一临床医学院神经内科山西太原030001 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009 复旦大学华山医院神经病学研究所上海200025

近年来随着对多种神经系统炎性变性病如阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)和多发性硬化(MS)等发病机制的深入研究,显示脑内慢性免疫炎症反应可能是其重要病理特征之一,而小胶质细胞在其中所起的重要作用也日益受到人们的关注。小胶质... 详细信息

近年来随着对多种神经系统炎性变性病如阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)和多发性硬化(MS)等发病机制的深入研究,显示脑内慢性免疫炎症反应可能是其重要病理特征之一,而小胶质细胞在其中所起的重要作用也日益受到人们的关注。小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)的重要组成部分,同时又是脑内的主要免疫效应细胞。正常成年人脑中,小胶质细胞处于相对静息状态,而在免疫炎性反应过程中,小胶质细胞显示激活的细胞形态,在向病灶区移行的同时,可以产生神经毒性分子和神经营养因子,具有致炎和抗炎的作用。因此小胶质细胞的双重性对于理解疾病的发生发展,以及寻找疾病的治疗靶点具有极其重要的理论和实际意义。

关键词：小胶质细胞炎症反应细胞表型双重性

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力达霉素抑制人纤维肉瘤肺转移的裸鼠活体成像观察

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药学学报 2011年第1期46卷 45-49页

作者：张胜华钟根深何红伟程昕甄永苏中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050 新乡医学院第一附属医院神经病学研究所河南新乡453003 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

观察力达霉素(LDM)、LDM与甲氨蝶呤(MTX)联合用药对人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移的抑制作用。构建稳定表达荧光素酶的HT-1080细胞株并扩增培养,检测HT-1080LUC细胞的荧光素酶的表达。建立裸鼠人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移模型... 详细信息

观察力达霉素(LDM)、LDM与甲氨蝶呤(MTX)联合用药对人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移的抑制作用。构建稳定表达荧光素酶的HT-1080细胞株并扩增培养,检测HT-1080LUC细胞的荧光素酶的表达。建立裸鼠人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移模型,并采用活体动物成像系统监测肿瘤的生长情况,观察LDM和MTX的体内抗肺转移瘤活性。结果表明,HT-1080LUC细胞荧光光子量与细胞数呈线性相关,最小可检测的细胞数量为100个/孔。活体成像结果显示,治疗组裸鼠的肺部荧光强度较对照组明显减弱。单独给予LDM 0.025 ***-1、LDM 0.05 ***-1或MTX 0.5 ***-1的肺转移抑制率分别为53.9%、75.9%和70.2%;LDM 0.025 ***-1与MTX 0.5 ***-1联合应用的肺转移抑制率为88.7%,两药相互作用指数CDI=0.82。研究表明,LDM对人纤维肉瘤肺转移有明显抑制作用,与MTX联合用药对肺转移瘤的疗效明显优于单独给药。

关键词：力达霉素甲氨蝶呤人纤维肉瘤HT-1080LUC细胞实验性肺转移肿瘤联合化疗

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他汀类药物对EAE小鼠RhoA表达的影响

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2010年第2期17卷 104-106页

作者：王捷尉杰忠郭敏芳纪宁孙永胜梁丽云马存根山西医科大学第一附属医院神经科 030001 山西大同大学脑科学研究所医学院神经病学教研室037008

目的探讨他汀类药物能否抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型RhoA蛋白表达及其对小鼠发病情况的影响。方法随机将雌性C57BL/6小鼠分为EAE组、他汀治疗组和佐剂组3组。EAE组和他汀治疗组用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽(MOG_(35-55)... 详细信息

目的探讨他汀类药物能否抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型RhoA蛋白表达及其对小鼠发病情况的影响。方法随机将雌性C57BL/6小鼠分为EAE组、他汀治疗组和佐剂组3组。EAE组和他汀治疗组用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽(MOG_(35-55))免疫小鼠建立EAE模型,佐剂组以生理盐水替代MOG_(35-55)同样方法注射;他汀治疗组自免疫后第3天始按体质量10 nag/(kg·d)予阿托伐他汀灌胃。观察3组小鼠发病情况及病理变化并测定脑组织中RhoA蛋白表达。结果与佐剂组相比,EAE组小鼠脑组织中RhoA蛋白表达明显增多(P<0.01)。他汀治疗组脑组织RhoA蛋白表达及临床神经功能评分均较EAE组下降(P<0.01)。结论 EAE小鼠RhoA蛋白表达上调。他汀类药物可能通过抑制RhoA蛋白表达治疗EAE。

关键词：阿托伐他汀脑脊髓炎,实验性自身免疫性多发性硬化 RhoA GTP结合蛋白质类

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没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾间质纤维化的影响及机制探讨

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川北医学院学报 2009年第6期24卷 523-525页

作者：冯江超邵志成龚雨顺陈力学刘世平张捷邵阳川北医学院附属医院肾内科四川南充637000 湖南农业大学茶学教育部重点实验室湖南长沙410128 重庆医科大学附属第一医院神经病学研究所重庆400016

目的探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法将30只健康、雄性SD大鼠随机分为UUO组、假手术组(SOR)和EGCG组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,EGCG组分别灌胃EGCG20mg/(kg.d),连续3... 详细信息

目的探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法将30只健康、雄性SD大鼠随机分为UUO组、假手术组(SOR)和EGCG组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,EGCG组分别灌胃EGCG20mg/(kg.d),连续3天。术后第8天分别处死各组大鼠,用免疫组织化学方法测定转化生长因子β(TGF-β)的表达情况。行HE和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果EGCG组TGF-β的表达量(1.94±0.31)与模型组(3.11±0.39)比较明显降低(p<0.01)。EGCG能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论没食子儿茶素没食子酸酯对单侧输尿管梗阻所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β的表达有关。

关键词：没食子儿茶素没食子酸酯肾间质纤维化转化生长因子β

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核酸疫苗免疫对帕金森病小鼠的治疗作用

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中国老年学杂志 2008年第19期28卷 1878-1880页

作者：王少君王加才欧阳松应彭国光罗琴涂文斌江思德徐芙蓉中铁二十局中心医院(延安大学医学院第三附属医院)神经内科重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016 中国科学院生物物理研究所

目的探讨α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)核酸疫苗免疫对MPTP慢性帕金森病(PD)小鼠的治疗效果。方法将该实验室成功构建的α-syn核酸疫苗-pVAX1-hα-Syn84-140用Qiagen试剂盒大量制备α-syn质粒;24只MPTP慢性PD小鼠随机分为3组:疫... 详细信息

目的探讨α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)核酸疫苗免疫对MPTP慢性帕金森病(PD)小鼠的治疗效果。方法将该实验室成功构建的α-syn核酸疫苗-pVAX1-hα-Syn84-140用Qiagen试剂盒大量制备α-syn质粒;24只MPTP慢性PD小鼠随机分为3组:疫苗组、空质粒对照组和PBS对照组,各组小鼠分别肌注pVAX1-hα-Syn84-140重组质粒,pVAX1空质粒和PBS各100μl,共免疫3次,每次间隔3w,末次免疫后2w,观察小鼠行为学变化及中脑黑质α-syn表达和多巴胺能神经元数目变化。结果pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗免疫组小鼠的类PD样症状与空质粒和PBS对照组相比显著减轻(P<0.01);小鼠中脑黑质α-syn表达较对照组减少约30%(P<0.01),且多巴胺能神经元数目较空质粒和PBS对照组增多了31%～39%(P<0.01)。结论pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗具有较强的免疫原性,能对帕金森病小鼠产生较好的免疫治疗作用。

关键词：帕金森病 α-突触核蛋白核酸疫苗

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帕金森病治疗的循证医学证据

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中国现代神经疾病杂志 2007年第1期7卷 39-43页

作者：杨卉陈生弟浙江省杭州市第一人民医院神经科 310006 上海交通大学医学院附属瑞金医院神经科、上海交通大学医学院神经病学研究所

帕金森病（Parkinson disease，PD）是一种病因未明的中老年人常见的神经系统变性疾病，主要临床表现为静止性震颤、肌强直、动作迟缓和姿势异常，以黑质多巴胺能神经元进行性缺失和纹状体多巴胺递质进行性减少为其典型的病理生化特征... 详细信息

帕金森病（Parkinson disease，PD）是一种病因未明的中老年人常见的神经系统变性疾病，主要临床表现为静止性震颤、肌强直、动作迟缓和姿势异常，以黑质多巴胺能神经元进行性缺失和纹状体多巴胺递质进行性减少为其典型的病理生化特征。虽然至今仍缺乏病因治疗手段，但已有多种抗帕金森病药物及手术治疗被证实能有效改善帕金森病患者的症状。在临床实践中，帕金森病患者的疗效和预后受多种因素的影响，如个体差异性、病情进展速度及长期治疗难以避免的药物不良反应，尤其运动并发症等。

关键词：抗帕金森病药物病因治疗循证医学证据 Parkinson 黑质多巴胺能神经元神经系统变性疾病药物不良反应静止性震颤

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中风后遗失语的规范化治疗

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中国现代医学杂志 2006年第19期16卷 2949-2953页

作者：邬剑军蒋雨平蔡振林倪冬艳姚建新林春颖熊友生周小平邱晓平复旦大学附属华山医院神经内科(复旦大学神经病学研究所) 上海200040 上海市闵行区中心医院上海201100 复旦大学附属上海市第五人民医院上海200240 常熟市中医医院江苏常熟215500 上海市南汇区中心医院上海201300 江西医学院附属第二医院江西南昌330006 镇江市第一人民医院江苏镇江212002 浦东新区人民医院上海201200

目的探讨不同语言背景对于中风后失语康复训练的影响,并制定有效的失语康复原则。方法将112例中风后失语患者分为2组,其中沪语组68例和普通话组44例,分别进行语言功能评定和康复。结果语言康复能明显改善中风后失语症状(P<0.001)。... 详细信息

目的探讨不同语言背景对于中风后失语康复训练的影响,并制定有效的失语康复原则。方法将112例中风后失语患者分为2组,其中沪语组68例和普通话组44例,分别进行语言功能评定和康复。结果语言康复能明显改善中风后失语症状(P<0.001)。沪语组在口语表达方面改善更显著(P=0.03);普通话组在书写方面效果更佳(P=0.03);听理解和阅读能力方面,沪语组或普通话组的康复效果差异不明显(P值分别为0.88和0.20)。各种可能影响失语恢复的因素中,失语的严重程度和开始康复距离中风发生的时间极大影响恢复效果;受教育程度显著影响沪语组和普通话组的阅读及书写的康复(P值均<0.001);失语类型对听理解和阅读康复的影响显著(P值为0.02);年龄和初始中风严重程度(以日常生活能力评价)对不同语言背景失语康复的影响不明显。结论对中风后失语患者语言康复训练能极大地改善症状,使用患者日常用语结合恰当的康复训练手段效果会更理想。

关键词：失语中风康复

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