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第四届临床微生物学与感染病学国际论坛暨首届微生物耐药防控高峰论坛

作者：王粟肖淑珍顾飞飞刘庆中汤瑾郭晓奎倪语星韩立中上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科上海交通大学附属第一人民医院上海交通大学附属第六人民医院上海交通大学医学院病原微生物教研室

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1-磷酸鞘氨醇促进胰岛素分泌及可能机制研究

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中国药理学通报 2016年第11期32卷 1516-1520页

作者：赵艳丽丁亚琴王慧章毅杨静刘云峰山西医科大学第一临床医学院山西太原030001 山西医科大学第一医院内分泌科山西太原030001 山西医科大学药理学教研室山西太原030001

目的研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque 1077梯度离心获得胰岛,Dispase II消化得到胰岛细胞。不同... 详细信息

目的研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque 1077梯度离心获得胰岛,Dispase II消化得到胰岛细胞。不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预,观察低糖(2.8 mmol·L^(-1))和高糖(16.7 mmol·L^(-1))条件下胰岛素分泌的变化。膜片钳技术记录β细胞电压依赖性钾通道电流(Kv电流),观察S1P干预后Kv电流的变化。钙成像技术记录β细胞内Ca^(2+)浓度,观察不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预后细胞内的Ca2+浓度变化。结果与低糖组相比,高糖组明显刺激了胰岛素的分泌(P<0.01)。低糖条件下,S1P没有改变胰岛素分泌量(P>0.05)。高糖条件下,S1P浓度依赖性增加了胰岛素分泌量(P<0.01)。与对照组相比,S1P明显抑制了β细胞Kv电流(P<0.01)。高糖条件下,S1P浓度依赖性升高了胰岛细胞内Ca^(2+)浓度(P<0.01)。结论 S1P可能通过抑制β细胞Kv电流、升高细胞内Ca2+浓度,最终促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌。

关键词： 1-磷酸鞘氨醇 Ca^2+ 胰岛素分泌电压依赖性钾通道 SD大鼠 β细胞

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上海地区血流感染阴沟肠杆菌耐药性与分子特征研究

上海地区血流感染阴沟肠杆菌耐药性与分子特征研究

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第六届东方检验医学学术会议

作者：王粟肖淑珍顾飞飞刘庆中汤瑾郭晓奎倪语星韩立中上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科上海交通大学附属第一人民医院检验科上海交通大学附属第六人民医院检验科上海交通大学医学院微生物教研室

目的：探索上海地区血流感染阴沟肠杆菌的药物敏感性及分子流行病学特征,检测主要相关耐药基因,以期为临床治疗和预防控制提供更全面的针对性指导意见。方法：共收集上海市三家三甲医院2012年9月～2016年9月血培养首次分离的阴沟肠杆菌6... 详细信息

目的：探索上海地区血流感染阴沟肠杆菌的药物敏感性及分子流行病学特征,检测主要相关耐药基因,以期为临床治疗和预防控制提供更全面的针对性指导意见。方法：共收集上海市三家三甲医院2012年9月～2016年9月血培养首次分离的阴沟肠杆菌67株,纸片法进行临床常用抗菌药物的药敏试验,PCR扩增超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、碳青霉烯酶、质粒介导AmpC酶和介导多粘菌素耐药的MCR-1基因,采用eBURST软件对多位点序列分型(MLST)进行分析。

关键词：血流感染阴沟肠杆菌耐药性分子特征

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依托咪酯对HEK-293细胞中异源表达的hERG钾通道电流的抑制作用

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郑州大学学报（医学版） 2016年第2期51卷 204-208页

作者：韩圣娜刘备孔岚李靓冯馨张卫张莉蓉郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001 河南省肿瘤医院麻醉科郑州450008 郑州大学第一附属医院麻醉科郑州450052

目的:观察依托咪酯对HEK-293细胞中异源表达的hERG钾通道电流的抑制作用及其机制。方法:采用脂质体瞬时转染的方法将野生型hERG(WT-hERG)、突变型Y652A-hERG和F656C-hERG分别转染人胚胎肾细胞HEK-293,应用全细胞膜片钳技术记录依托咪酯... 详细信息

目的:观察依托咪酯对HEK-293细胞中异源表达的hERG钾通道电流的抑制作用及其机制。方法:采用脂质体瞬时转染的方法将野生型hERG(WT-hERG)、突变型Y652A-hERG和F656C-hERG分别转染人胚胎肾细胞HEK-293,应用全细胞膜片钳技术记录依托咪酯对转染后HEK-293细胞表达的hERG钾通道电流的抑制作用以及对激活曲线和失活曲线的影响。结果:依托咪酯可浓度依赖性地抑制WT-hERG转染的HEK-293细胞钾通道电流,其半数最大抑制浓度为(6.41±2.43)μmol/L,对激活曲线和失活曲线无明显影响。与WT-hERG转染的HEK-293细胞相比,依托咪酯对突变体Y652A-hERG及F656C-hERG转染的HEK-293细胞内钾通道电流的抑制作用减弱。结论:F656C可能是依托咪酯抑制hERG钾通道的重要靶点。

关键词：依托咪酯 hERG钾通道全细胞膜片钳 HEK-293细胞

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成人危重症患者利奈唑胺相关性血小板减少症的危险因素分析

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中国医院药学杂志 2016年第9期36卷 743-747页

作者：李佳范玉华廖丽雯曾嘉炜何秋毅闫佳佳陈杰陈孝中山大学附属第一医院药学部广东广州510080 中山大学药学院广东广州510006 中山大学中山医学院药理学教研室广东广州510080

目的：了解ICU危重症患者使用利奈唑胺治疗后并发血小板减少症的情况,并进行相关危险因素分析,为临床的合理安全用药提供依据。方法：采用回顾性研究方法,选取广州市某三甲医院ICU病房2013年1月-2014年12月使用利奈唑胺注射剂或片剂的... 详细信息

目的：了解ICU危重症患者使用利奈唑胺治疗后并发血小板减少症的情况,并进行相关危险因素分析,为临床的合理安全用药提供依据。方法：采用回顾性研究方法,选取广州市某三甲医院ICU病房2013年1月-2014年12月使用利奈唑胺注射剂或片剂的成人患者病例,调查利奈唑胺治疗中并发血小板减少症的情况,并用单因素和多因素逐步Logistic回归分析其相关危险因素。结果：通过统一的纳入和排除标准筛选符合要求的病例共57例,利奈唑胺治疗中并发血小板减少症的发生率为28.07%,并发血小板减少组与未并发组相比,血小板基线值较低[（174.06±53.21）×10^9/L：（228.93±81.86）×10^9/L,P=0.019],APACHEⅡ评分较高[（22.12±8.66）∶（16.20±4.77）,P=0.039],血清肌酐清除率（Ccr）较低[（中位数41.86,四分位数间距26.26）∶（中位数71.84,四分位数间距56.40）,P=0.003];多因素逐步Logistic回归显示利奈唑胺治疗中并发血小板减少症的危险因素包括血小板基线值（OR 5.02,95%CI 1.01-17.95,P=0.043）,CCr（OR 5.16,95%CI 1.21-22.03,P=0.027）和APACHEⅡ评分（OR 3.92,95%CI 1.08-14.14,P=0.037）。结论：危重症患者在使用利奈唑胺治疗的过程中应警惕血小板减少症的发生,尤其是血小板基线值〈200×10^9/L、肾功能不全（Ccr〈50mL·min^-1）和APACHEⅡ≥20分的患者。

关键词：利奈唑胺血小板减少症危险因素危重症

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河南汉族CYP2C19基因多态性对氯吡格雷药物代谢动力学的影响

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郑州大学学报（医学版） 2016年第1期51卷 95-99页

作者：申明惠王晓飞刘敏杨卫红黄晨征张胜军张莉蓉郑州大学附属中心医院科教科郑州450007 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心郑州450007 郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001 郑州大学第一附属医院临床药理研究中心郑州450052

目的:探讨CYP2C19基因多态性对氯吡格雷人体药物代谢动力学的影响。方法:43名健康受试者在单次服用75 mg氯吡格雷片后,定时采血,用液质联用技术(LC-MS/MS)分析受试者氯吡格雷血药浓度,采用PCR-限制性片段长度多态性分析法检测CYP2C19*2... 详细信息

目的:探讨CYP2C19基因多态性对氯吡格雷人体药物代谢动力学的影响。方法:43名健康受试者在单次服用75 mg氯吡格雷片后,定时采血,用液质联用技术(LC-MS/MS)分析受试者氯吡格雷血药浓度,采用PCR-限制性片段长度多态性分析法检测CYP2C19*2、*3基因突变。结果:CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2和CYP2C19*2/*2(*3)3种基因型分别为13、24和6例。药时曲线下面积(AUC)0-24和AUC0-∞在三种基因型间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:口服氯吡格雷后,CYP2C19不同基因型AUC不同。

关键词： CYP2C19 基因多态性氯吡格雷药物代谢动力学河南省汉族

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亚抑制浓度庆大霉素诱导大肠埃希菌发生适应性耐药的研究

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中国抗生素杂志 2016年第3期41卷 232-236页

作者：庄逸菁姚芬黄源春宋卉蔡聪艺谢丽华陈伟东彭青汕头大学医学院药理学教研室汕头515041 汕头大学第一附属医院汕头515041 广东省食品药品职业学院广州510000 汕头大学第二附属医院汕头515041

目的观察大肠埃希菌经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,其在体外是否发生适应性耐药,并对可能涉及的相关膜蛋白及小分子RNA的表达水平变化进行了研究。方法大肠埃希菌ATCC25922经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,测定其在含不同浓度的庆大霉素... 详细信息

目的观察大肠埃希菌经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,其在体外是否发生适应性耐药,并对可能涉及的相关膜蛋白及小分子RNA的表达水平变化进行了研究。方法大肠埃希菌ATCC25922经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,测定其在含不同浓度的庆大霉素的肉汤中的生长曲线,观察其是否发生适应性耐药,并采用平板菌落计数法观察适应性耐药的发生情况,Realtime PCR比较大肠埃希菌诱导前后相关基因omp C、omp F、omp A、omp X、sox S及小RNA mic F的表达水平。结果大肠埃希菌ATCC 25922在第一次接触0.5×MIC的庆大霉素后,再接触0.5×MIC及1×MIC庆大霉素的MH肉汤中,均出现适应性耐药。而在含0.5×MIC的琼脂平板上,庆大霉素对受试菌的抑制率明显较对照菌高,显示大肠埃希菌在琼脂平板上生长也可发生适应性耐药。Real-time PCR结果显示:相对于对照组,受试组的膜蛋白基因omp F表达水平下调,而omp A、omp X及氧化应激反应相关基因sox S的表达水平则明显上调,omp C和mic F的表达没有明显变化。结论本论文证实了大肠埃希菌在亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,可发生适应性耐药现象。发生适应性耐药的机制可能与膜蛋白omp F表达下降,omp X及omp A上调有关。

关键词：大肠埃希菌适应性耐药庆大霉素

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基因多态性对阿托伐他汀治疗慢性肾脏病致心肌酶改变的影响

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汕头大学医学院学报 2016年第3期29卷 135-137,147页

作者：刘瑞雪林泓杜擎黄丹梅郑付春石刚刚汕头大学医学院药理学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院药剂科广东汕头515041

目的:研究中国潮汕地区汉族人群阿托伐他汀转运代谢基因(SLCO1B1、CYP3A4、CYP3A5、ABCB1、ABCG2)遗传多态性与阿托伐他汀影响慢性肾脏病(CKD)患者心肌酶水平的关联。方法:CKD患者(69例)服用阿托伐他汀(20 mg/d)6周。Taqman基因型鉴定... 详细信息

目的:研究中国潮汕地区汉族人群阿托伐他汀转运代谢基因(SLCO1B1、CYP3A4、CYP3A5、ABCB1、ABCG2)遗传多态性与阿托伐他汀影响慢性肾脏病(CKD)患者心肌酶水平的关联。方法:CKD患者(69例)服用阿托伐他汀(20 mg/d)6周。Taqman基因型鉴定技术分别对位于SLCO1B1的rs2306283、4149056位点,CYP3A4的rs2242480、4646437位点,CYP3A5的rs776746位点,ABCB1的rs1128503、2032582、1045642位点和ABCG2的rs2231142位点单核苷酸多态性进行基因型鉴定。多元线性回归法评价其与心肌酶水平的关联。结果:SLCO1B1 rs2306283 GG基因型携带者乳酸脱氢酶(LDH)水平上升6.6%,GA型携带者下降7.5%(P<0.05);ABCB1 rs1128503 TT型携带者LDH水平上升8.3%,TC型携带者下降5.4%(P<0.05);ABCB1rs1045642 CC型携带者肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)水平上升5.8%,TT型携带者上升51.1%(P<0.05);ABCB1 rs2032582CC型携带者CK-MB水平上升6.0%,AA+TT型携带者上升43.6%(P<0.05)。结论:SLCO1B1 rs2306283和ABCB1 rs1128503与服用阿托伐他汀6周后LDH水平的变化显著相关;ABCB1 rs1045642和ABCB1 rs2032582与CK-MB水平变化显著相关。

关键词：慢性肾脏病单核苷酸多态性阿托伐他汀乳酸脱氢酶肌酸激酶同工酶

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时空调控miR-195敲减转基因载体的构建及验证

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国际遗传学杂志 2016年第3期39卷 123-132页

作者：班涛张玉瑶吴兆菊赵欣朱久新哈尔滨医科大学药学院药理教研室黑龙江中医药大学基础医学院解剖与组胚教研室哈尔滨市第一医院药剂科

目的构建时空调控miR-195敲减转基因载体并验证其活性。方法通过分子克隆技术构建含有神经特异性启动子、四环素诱导表达系统、miR-195海绵、绿色荧光蛋白及绝缘子等调控元件的转基因载体并测序鉴定,利用细胞转染技术将该载体瞬时转染入... 详细信息

目的构建时空调控miR-195敲减转基因载体并验证其活性。方法通过分子克隆技术构建含有神经特异性启动子、四环素诱导表达系统、miR-195海绵、绿色荧光蛋白及绝缘子等调控元件的转基因载体并测序鉴定,利用细胞转染技术将该载体瞬时转染入SHSY5Y细胞,经荧光显微镜观察其荧光表达,利用实时定量PCR技术及蛋白免疫印迹检测miR-195含量及GFP蛋白表达。结果通过将Tet-on四环素诱导系统中反义转录激活子rtTA克隆到NSE启动子下游,以及TRE-Tight的多克隆位点内引入miR-195海绵携带IRES介导的EGFP,获得双质粒Tet-on表达载体。以pcDNA3.1+质粒为骨架,3个不同区域的双拷贝cHs4绝缘子核心片段为间隔,将其调控元件(NSE-rtTA)和反应元件(TRE-miR-195 spongeIRES-EGFP)串联成单一转基因载体。该载体经测序验证序列正确,瞬时转染入SH-SY5Y细胞,经强力霉素诱导36 h后细胞内可见明显绿色荧光蛋白表达,且miR-195表达水平明显降低。结论成功构建神经系统特异性miR-195敲减转基因载体,并具有时空调控的特点,为进一步建立转基因动物模型奠定基础。

关键词： miR-195 转基因载体 Tet-on四环素诱导表达系统

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血浆源性人凝血因子Ⅷ治疗血友病A有效性和安全性多中心Ⅲ期临床研究

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中华内科杂志 2016年第8期55卷 624-627页

作者：张建华董春霞张爱荣杨林花洪梅胡豫张梅潘峻罗建民贺佳山西医科大学第二医院太原030001 华中科技大学同济医学院附属协和医院西安交通大学医学院第一附属医院河北医科大学第二医院上海第二军医大学统计教研室

目的评价一种国产血浆源性人凝血因子Ⅷ（FⅧ）治疗血友病A的有效性和安全性.方法符合入组标准的患者知情同意后进入试验,根据患者体重、病情严重程度等因素计算FⅧ输注剂量,计算给药后10、60 min的FⅧ活性输注效率值,据临床症状改善... 详细信息

目的评价一种国产血浆源性人凝血因子Ⅷ（FⅧ）治疗血友病A的有效性和安全性.方法符合入组标准的患者知情同意后进入试验,根据患者体重、病情严重程度等因素计算FⅧ输注剂量,计算给药后10、60 min的FⅧ活性输注效率值,据临床症状改善情况进行有效性评级,记录不良事件,治疗后3及6个月检测病原微生物指标及FⅧ抗体.结果共入组65例患者,其中可行安全性评价65例,可行有效性评价60例,完成临床试验全程观察57例.受试者以中、重度血友病为主（52例）,主要临床表现为关节出血（44例）.治疗急性出血事件的总体有效性均被评为“显效”42例（70.00％）或“好转”18例（30.00％）,“无效”为0例.首次给药后10、60 min FⅧ活性及FⅧ活性输注效率均值明显升高[10 min：（123.66 ± 47.54）％;60 min：（108.05 ± 43.24）％].无过敏反应、严重不良事件发生,不良反应发生率为1.54％（1例）.治疗后3、6个月检查甲型肝炎病毒IgM抗体、HBsAg、HCV抗体、抗-HIV、梅毒螺旋体抗体、FⅧ抗体,未发现阴性转阳性病例.结论该国产血浆源性FⅧ治疗血友病A具有良好的有效性及安全性,可以作为血友病A患者急性出血事件的治疗选择。

关键词：血友病A 血浆源性人凝血因子Ⅷ

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