检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第3期34卷 318-322页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反... 详细信息

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反应 ,该重组蛋白在重要构象表位上与天然蛋白质一致。由该蛋白质诱生的抗体能有效地抑制恶性疟原虫的体外生长 ,这些结果为进一步开展MSP1 42重组蛋白疫苗有效性试验提供了基础

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 毕氏酵母体外抑制试验

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组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系

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生物化学与生物物理进展 2000年第6期27卷 609-612页

作者：陈坚张晓琴傅继梁上海第二军医大学军队卫生教研室上海200433 上海第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在... 详细信息

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶基因转录组蛋白脱乙酰化

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微生物基因组研究

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微生物学报 1997年第4期37卷 323-325页

作者：陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

人基因组计划(Human Genome Project HGP)是一项国际性的研究计划,其目标是要把人基因组大约10万个基因、30亿对核苷酸定位和序列分析,是一项可与“人类登月计划”相比拟的空前浩大的工程,它的实施对医学和人类认识自身有着划时代的意义... 详细信息

人基因组计划(Human Genome Project HGP)是一项国际性的研究计划,其目标是要把人基因组大约10万个基因、30亿对核苷酸定位和序列分析,是一项可与“人类登月计划”相比拟的空前浩大的工程,它的实施对医学和人类认识自身有着划时代的意义,它的完成对人类疾病的控制有极其重要的作用。要完成这样的项目,如果用传统的方法来进行,几乎是不可思议的,而各种自动化的大规模基因分析技术和计算机为基础的信息处理技术不断出现,大大加快了基因组分析的进程。对微生物基因组进行分析,在人基因组计划中仅是作为一种“模式生物”(model organism),用它们来试验方法。

关键词：微生物基因组研究

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重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子包涵体提取、复性和纯化的研究

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生物工程学报 1997年第2期13卷 142-148页

作者：周永春陆峰金永明贾林林爱友陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）以包涵体的形式存在于细胞中，通过破菌、洗涤获得包涵体，再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱层析得到了均一的产品，经高压液相和ＳＤＳ... 详细信息

由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）以包涵体的形式存在于细胞中，通过破菌、洗涤获得包涵体，再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱层析得到了均一的产品，经高压液相和ＳＤＳＰＡＧＥ电泳测定纯度均大于９８％，ｒｈＧＭＣＳＦ的比活为３２×１０７ＩＵ／ｍｇ，纯化获得的ｒｈＧＭＣＳＦ为一酸性蛋白，等电点约为５２，ＮＨ２末端前２０个氨基酸序列测定结果与文献报道一致。ｒｈＧＭＣＳＦ的ＮＨ２末端不均一，其中带Ｍｅｔ的分子约占５９５％，第一个氨基酸为Ａｌａ的分子约占２４６％，为Ｐｒｏ的分子约占１４６％。纯化过程中蛋白的纯化倍数为３９，生物活性总得率为６９１％，工艺重复性好。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子包涵体复性纯化

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中国海南省恶性疟原虫P190抗原变异的研究

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中国科学（B辑） 1993年第10期23卷 1070-1076页

作者：潘卫庆杨树桐邓海琳陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

本文应用双脱氧末端终止法测定了我国海南省恶性疟原虫FCC1/NH株P190抗原基因的部分DNA序列,共计2103个碱基对。与该基因现有资料比较,我们发现了该虫株P190基因的以下特征:(1)在核苷酸第2323至2340位间有18bp长的片段缺失,此缺失正位... 详细信息

本文应用双脱氧末端终止法测定了我国海南省恶性疟原虫FCC1/NH株P190抗原基因的部分DNA序列,共计2103个碱基对。与该基因现有资料比较,我们发现了该虫株P190基因的以下特征:(1)在核苷酸第2323至2340位间有18bp长的片段缺失,此缺失正位于该抗原一个重要T细胞表位和T-E-X三肽重复序列处。(2)该基因属MAD20变异型,但从3′端5013位起转变为K1型序列,表明在该处发生了基因内重组。(3)在N端三肽重复区为高度变异区,但该基因却与MAD20型序列呈现高度同源性。(4)除了缺失和5个碱基点突变外,其余序列符合双态性变异规则。本工作为P190疟疾疫苗的发展提供了可靠依据。

关键词：恶性疟原虫 P190抗原抗原变异

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恶性疟P190抗原基因的表达及免疫学研究

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生物工程学报 1994年第4期10卷 306-311页

作者：潘卫庆杨树桐邓海琳陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

克隆了我国海南省FCC1/HN株P190抗原三肽重复区基因,定名为P190TR。该基因片段经DNA序列分析鉴定后连接到改建的pGEX-2T表达载体BamHI和XbaI位点中,经鉴定的重组质粒转化感受态JM109(DE3)大肠杆菌进行表达。结果显示:该基因得到高效融... 详细信息

克隆了我国海南省FCC1/HN株P190抗原三肽重复区基因,定名为P190TR。该基因片段经DNA序列分析鉴定后连接到改建的pGEX-2T表达载体BamHI和XbaI位点中,经鉴定的重组质粒转化感受态JM109(DE3)大肠杆菌进行表达。结果显示:该基因得到高效融合表达,经一步亲和纯化后就取得高纯度的重组蛋白。用纯化的表达蛋白免疫动物亦产生P190TR特异性抗体。

关键词： P190抗原基因表达免疫学恶性疟

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恶性疟原虫FCC1/HN株MSA1抗原Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ保守区基因的亚克隆及序列分析

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第二军医大学学报 1993年第4期14卷 301-307页

作者：杨树桐潘卫庆邓海琳陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所 200433

P190系恶性疟原虫裂殖子表面抗原1(MSA1),是很有希望的疟疾疫苗候选抗原。根据该基因现有序列,我们设计了3对引物,在5′端引物和3′端引物前分别设有BamHI和XbaI酶切位点序列,在每个酶切位点前设有保护性碱基GC,用固相亚磷酸酰胺法在ABI... 详细信息

P190系恶性疟原虫裂殖子表面抗原1(MSA1),是很有希望的疟疾疫苗候选抗原。根据该基因现有序列,我们设计了3对引物,在5′端引物和3′端引物前分别设有BamHI和XbaI酶切位点序列,在每个酶切位点前设有保护性碱基GC,用固相亚磷酸酰胺法在ABI391型DNA自动合成仪上自动合成引物,合成的引物氨解、冷冻干燥后经HPLC纯化。采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增了恶性疤原虫FCC1/HN株P190第3、4保守区和第2保守区部分序列的基因片段,分别定名为P190CR3、P190CR4和P190CR2-2,各片段均连接到pUC18载体上,用双脱氧末端终止法测定了克隆片段的DNA序列,结果表明这3个区域的DNA序列与MAD20(采自巴布亚-新几内亚)、Wellcome(采自西非)、K1(采自泰国)及CAMP(采自马尔加什)株恶性疟原虫P190相应区域比较也是高度保守的。在该基因第2保守区核苷酸第81位(相当于MAD20的732位)发生了碱基替换,由T替代了C,但未发生氨基酸的改变。

关键词：疟原虫保守序列疫苗

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丁酸钠对CHO-EPO工程细胞株rhEPO表达量的影响

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生物工程学报 1997年第3期13卷 269-272页

作者：刘小萍汪彦朱奎曹韫旭陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

以稳定整合有ｐＥＤＥＰＯ的ＣＨＯＥＰＯ工程细胞株为研究对象，在无血清条件下，系统观察了０５、１０、２５和５０ｍｍｏｌ／Ｌ４个浓度的丁酸钠作用于该细胞株的情况，结果表明：丁酸钠对ＣＨＯＥＰＯ工程细胞的生长... 详细信息

以稳定整合有ｐＥＤＥＰＯ的ＣＨＯＥＰＯ工程细胞株为研究对象，在无血清条件下，系统观察了０５、１０、２５和５０ｍｍｏｌ／Ｌ４个浓度的丁酸钠作用于该细胞株的情况，结果表明：丁酸钠对ＣＨＯＥＰＯ工程细胞的生长有明显的抑制作用；影响ＣＨＯＥＰＯ工程细胞ＥＰＯ表达，浓度１０ｍｍｏｌ／Ｌ可提高ＥＰＯ表达量２５倍左右，并可持续较长的一段时间；延缓ＣＨＯＥＰＯ工程细胞在无血清培养时的细胞脱落；

关键词：丁酸钠重组促红细胞生成素 CHO细胞

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重组人α8干扰素在大肠杆菌中的克隆与高表达

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 115-118页

作者：张平武王易伦陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

利用基因重组技术构建了人干扰素α８（ＩＦＮ－α８）高表达菌株Ｅ．ｃｏｌｉＸＬｌ－Ｂｌｕｅ／ｐＢｍ，经酶切鉴定、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ及生物活性测定等分析，表明能特异性地表达具有生... 详细信息

利用基因重组技术构建了人干扰素α８（ＩＦＮ－α８）高表达菌株Ｅ．ｃｏｌｉＸＬｌ－Ｂｌｕｅ／ｐＢｍ，经酶切鉴定、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ及生物活性测定等分析，表明能特异性地表达具有生物活性的ＩＦＮ－α８，表达量达到总菌体蛋白的２３％，经复性后比活为４．８×１０７ＩＵ／ｍｇ，具有良好的应用前景。

关键词：干扰素α8 基因重组克隆基因表达大肠杆菌

来源：评论

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重组人粒细胞集落刺激因子cDNA在哺乳动物细胞中高效表达的研究

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生物工程学报 1998年第1期14卷 70-74页

作者：陈坚曹韫旭陆德如第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

利用ＰＣＲ反应、ＤＮＡ测序、基因重组等技术，构建了两个表达人粒细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ的重组质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ和ｐＥＦ－ＧＣＳＦ，两质粒分别转染ＣＯＳ７细胞作瞬时表达，转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞作稳定表达。结果两质... 详细信息

利用ＰＣＲ反应、ＤＮＡ测序、基因重组等技术，构建了两个表达人粒细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ的重组质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ和ｐＥＦ－ＧＣＳＦ，两质粒分别转染ＣＯＳ７细胞作瞬时表达，转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞作稳定表达。结果两质粒在ＣＯＳ７细胞和ＣＨＯ细胞均获得了表达，ｐＥＤ－ＧＣＳＦ转染ＣＯＳ７细胞４８ｈ、７２ｈ的表达量分别为５２×１０４ｐｇ／ｍｌ和２３×１０５ｐｇ／ｍｌ，ｐＥＦ－ＧＣＳＦ转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ、７２ｈ的表达量分别为２８×１０５ｐｇ／ｍｌ和１４×１０５ｐｇ／ｍｌ。转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，随着加入的氨甲喋呤（ＭＴＸ）浓度升高，ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＋克隆数减少，但平均每个克隆的ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量升高，在０５μｍｏｌ／ＬＭＴＸ下最高表达ｒｈＧ－ＣＳＦ细胞株的量是４４６μｇ／ｍｌ／３ｄ。且表达的ｒｈＧ－ＣＳＦ注射小鼠腹腔可提高小鼠外周血白细胞的数量。

关键词：粒细胞集落刺激因子重组 cDNA 哺乳动物细胞

来源：评论

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