检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1997年第4期18卷 301-305页

作者：曹广文杜平崔龙高军潘欣戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正... 详细信息

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正常胎盘组织及建株癌基因组中扩增ＣＥＡ基因启动子核心序列，ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法确定扩增序列可靠性。用ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列分析方法确定扩增序列突变情况。用Ｂａｎｄ－Ｓｈｉｆｔ分析法检验扩增序列的启动子功能。结果：不同组织细胞基因组中的ＣＥＡ基因转录起始位点上游－１３０ｂｐ～＋６９ｂｐ的ＣＥＡ基因启动子核心序列区段未发现明显序列差异。大肠癌组织中ＣＥＡ基因的转录与大肠癌基因组中ＣＥＡ基因启动子核心序列无明显的对应关系。从大肠癌组织和正常组织ＤＮＡ中扩增出来的ＣＥＡ启动子序列与ＣＥＡ阳性的ＬｏＶｏ大肠癌细胞核蛋白提取物的结合能力一致，但不能与ＣＥＡ阴性的ＲＣ９４０６人肾癌细胞结合。结论：ＣＥＡ基因在大肠癌细胞中的特异转录不是由于ＣＥＡ基因启动子序列的突变。来源于正常细胞或者大肠癌细胞基因组的ＣＥＡ基因启动子均适合大肠癌组织特异性基因治疗。

关键词：大肠肿瘤癌胚抗原基因启动子基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

携带HuIL-3基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

引用

第二军医大学学报 1997年第1期18卷 9-12页

作者：高军曹广文戚中田杜平仇晓芳杨文国崔龙孙如美第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院普通外科

目的:构建携带人白细胞介素3（HuIL－3）cDNA的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：将HuIL－3cDNA克隆到逆转录病毒载体pMNSM的PL位点，构建SV40早期启动子驱动的载体pMNS－IL－3；从质粒pGEM．7Zf－AFPe中游离人甲胎蛋白（AFP）... 详细信息

目的:构建携带人白细胞介素3（HuIL－3）cDNA的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：将HuIL－3cDNA克隆到逆转录病毒载体pMNSM的PL位点，构建SV40早期启动子驱动的载体pMNS－IL－3；从质粒pGEM．7Zf－AFPe中游离人甲胎蛋白（AFP）增强子核心序列，先克隆到pMNSM的PL位点上，再将HuIL－3cDNA片段克隆到PL位点上，构建出SV40早期启动子和AFP增强子驱动的人肝癌特异性表达载体PMNSA－IL－3。结论：该载体为肝癌特异性转基因治疗提供了一条途径。

关键词：肝肿瘤逆转录病毒载体 HuIL-3 基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

遗传性视网膜色素变性3型基因位点单拷贝探针库的构建

引用

第二军医大学学报 1997年第3期18卷 225-227页

作者：周炜缪为民朱冠山姚玉河焦炳华柴建华第二军医大学基础医学部微生物学教研室复旦大学遗传学研究所

目的：构建遗传性视网膜色素变性３型（ＲＰ３）基因位点的单拷贝探针库。方法：对包含ＲＰ３位点的酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＨＯ５１２进行亚克隆，用人总ＤＮＡ杂交法去除重复顺序克隆。结果：构成ＲＰ３位点特异的单拷贝探针库。结... 详细信息

目的：构建遗传性视网膜色素变性３型（ＲＰ３）基因位点的单拷贝探针库。方法：对包含ＲＰ３位点的酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＨＯ５１２进行亚克隆，用人总ＤＮＡ杂交法去除重复顺序克隆。结果：构成ＲＰ３位点特异的单拷贝探针库。结论：该库对于构建ＲＰ３位点精细的Ｃｏｓｍｉｄ克隆重叠群及最终识别ＲＰ３基因提供了一种有效的工具。

关键词：视网膜色素变性基因位点单拷贝探针库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

几种从凝胶中回收YAC DNA的方法及其效果的比较

引用

第二军医大学学报 1997年第5期18卷 483-484页

作者：朱冠山缪为民周炜姚玉河焦炳华柴建华第二军医大学长海医院感染科第二军医大学基础医学部微生物学教研室复旦大学遗传所人类基因组实验室

几种从凝胶中回收ＹＡＣＤＮＡ的方法及其效果的比较＊朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自１９８７年首次构建了人类基因组酵母人工染色体（ＹＡＣ）分子克隆库［１］，目前ＹＡＣ的克隆容量已达８００～１０００ｋｂ，由... 详细信息

几种从凝胶中回收ＹＡＣＤＮＡ的方法及其效果的比较＊朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自１９８７年首次构建了人类基因组酵母人工染色体（ＹＡＣ）分子克隆库［１］，目前ＹＡＣ的克隆容量已达８００～１０００ｋｂ，由此而成为基因组作图和测序的一个最重...

关键词：染色体 YAC 凝胶 PFGE 回收 DNA 分离

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国姥鲨软骨新生血管抑制因子的生物学活性研究

引用

药物生物技术 1997年第3期4卷 138-143页

作者：王路焦炳华缪辉南第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

实验对分离纯化了的姥鲨软骨新生血管抑制因子 (Shark cartilage derived inhibitor,SCDI)进行了生物学活性研究 ,结果表明它对型胶原酶、内皮细胞 DNA合成、角膜新生血管和荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用。12 μg SCDI可竞... 详细信息

实验对分离纯化了的姥鲨软骨新生血管抑制因子 (Shark cartilage derived inhibitor,SCDI)进行了生物学活性研究 ,结果表明它对型胶原酶、内皮细胞 DNA合成、角膜新生血管和荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用。12 μg SCDI可竞争抑制一个单位的胶原酶活性 ;其对小鼠心肌和肺毛细血管内皮细胞 DNA合成的 IC50 分别为 3.38μg和 11.74 μg;高剂量组 (40 μg)和低剂量组 (10μg) SCDI对家兔眼角膜新生血管的抑制率分别为 70 .2 4 %和 38.38% ;SCDI在 2 0 mg/kg的剂量下对 B16黑色素瘤和 L ewis肺癌的抑瘤率分别为 4 5.4 5%和 37.84 % .

关键词：鲨鱼软骨新生血管抑制因子生物学活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国姥鲨软骨新生血管抑制因子的分离纯化及理化性质检测

引用

药物生物技术 1997年第1期4卷 17-21页

作者：王路焦炳华缪辉南第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :... 详细信息

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :SCDI的分子量为 16 10 0 D,等电点为 8.15;氨基酸组成分析表明 SCDI含有 2 0种氨基酸 ,其中以 L eu、Ile和

关键词：鲨鱼软骨新生血管抑制因子分离纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胞嘧啶脱氨酶基因体外特异性前药转换抗大肠癌作用研究

引用

外科 1997年第2期2卷 84-87页

作者：崔龙屠岳曹广文杜平戚中田高军吴宗娣仇小芳王元和第二军医大学附属长海医院外科 200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学附属长征医院普通外科 200003

为使胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在大肠癌细胞中特异表达。方法:构建了以CEA基因顺式转录调控序列驱动CD基因的组织特异型重组逆转录病毒载体G1CEACDNa,以脂质体法将重组载体及转录受LTR驱动的CD基因逆转录病毒载体pCD2分别转导入高分泌CEA的... 详细信息

为使胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在大肠癌细胞中特异表达。方法:构建了以CEA基因顺式转录调控序列驱动CD基因的组织特异型重组逆转录病毒载体G1CEACDNa,以脂质体法将重组载体及转录受LTR驱动的CD基因逆转录病毒载体pCD2分别转导入高分泌CEA的大肠癌细胞LoVo中,经G418完全选择后进行前药5-FC敏感试验。结果:转导普通型及组织特异型CD基因的LoVo细胞较亲代细胞对5-FC的前药转换抑瘤效应明显(均为P<0.01);而转导组织特异性CD基因的LoVo细胞较转导普通型CD基因的LoVo细胞对5-FC的敏感性显著增高(P<0.01),其IC_(50)分别为0.1mmol/L和0.5mmol/L。结论:表明CEA TRS可驱动自杀基因在高分泌CEA大肠癌细胞中特异性表达,在一定程度上达到了靶向杀伤肿瘤细胞的目的。

关键词：大肠癌胞嘧啶脱氨酶癌胚抗原基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a的制备及纯化

引用

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 324-327页

作者：王梁华焦炳华第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：制备符合临床应用标准的高纯度重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）。方法：高效表达ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ的Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌经过超声破碎、硫酸铵分段盐析、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００层析，得到电泳... 详细信息

目的：制备符合临床应用标准的高纯度重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）。方法：高效表达ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ的Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌经过超声破碎、硫酸铵分段盐析、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００层析，得到电泳纯ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ，其比活性为１．８８×１０８ＩＵ／ｍｇ。进一步超滤浓缩，ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０纯化，比活性达２×１０８ＩＵ／ｍｇ。结果：纯度＞９８．２％，回收率约为６５％，内毒素＜２Ｅｕ·（１０６ＩＵ）－１·ｍｌ－１。结论：建立了适宜的ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ纯化方法，连续三批原料和制剂通过国家卫生部药品生物制品检定所检定，符合ＷＨＯ有关基因工程产品临床用药标准，为过渡到临床验证打下了基础。

关键词：肿瘤坏死因子衍生物纯化制备 rh-TNFαD3a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RT－PCR检测HCV　RNA假阳性结果分析

引用

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 391-392页

作者：宋燕斌崔晓红潘卫王锦红戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测... 详细信息

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...

关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应假阳性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

携带HSV－tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

引用

第二军医大学学报 1996年第2期17卷 101-104页

作者：高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（... 详细信息

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶ－ｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ＰＭＮｐ－ｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７Ｚ－ＡＦＰｅ质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮｐ－ｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰ－ｔｋ逆转录病毒载体。结论：该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。

关键词：肝肿瘤基因治疗逆转录病毒载体 HSV-tk

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：