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玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响

第二军医大学学报 2004年第8期25卷 920-921页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建姜华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷... 详细信息

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷.药理实验中证实苯丙素苷能抑制血小板聚集和大鼠中性白细胞花生四烯酸(AA)代谢物白三烯(LTB4)的生成[3].本研究在此基础上,进一步探讨苯丙素苷抗血小板聚集的作用机制.

关键词：玄参苯丙素苷 XS-8 血小板 cAMP 血浆 PGI2/TXA2

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海洋微生物抗肿瘤研究进展

海洋微生物抗肿瘤研究进展

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：杨好许强芝焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海... 详细信息

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海洋动植物资源有限，分离纯化复杂，难以工业化生产等弊端一直是阻碍海洋药物研究进一步开展的棘手问题，而海洋中种类最为多样的海洋微生物以其代谢产物多样和可培养逐渐吸引研究者的目光，尤其在抗肿瘤活性方面。有学者预言最有前途的抗肿瘤药物来自海洋，而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力。本文介绍了海洋微生物的多样性和异质性，简述了海洋细菌来源的抗肿瘤活性物质：别单孢菌属、土壤杆菌属、芽饱杆菌属、假单孢菌属等。并对海洋放线菌来源的抗肿瘤活性物质、海洋藻青菌来源的抗肿瘤活性物质进行了分析。研究发现与陆地微生物不同，海洋真菌而并非放线菌成为海洋微生物抗癌药物的主要来源。

关键词：海洋微生物海洋药物软体动物抗肿瘤活性海洋放线菌海洋真菌

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玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响

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中西医结合肝病杂志 2004年第3期14卷 160-161页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 上海药物研究所

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl ... 详细信息

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl 2蛋白表达 ,下调Fas/FasL的表达。结论 :玄参中苯丙素苷抗肝损伤细胞凋亡可能与其调控肝细胞凋亡相关基因有关。

关键词：玄参苯丙素苷大鼠肝损伤细胞凋亡药效学

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高血脂兔髂-股动脉成形术后平滑肌细胞中c-myc和cdc2基因的表达

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第二军医大学学报 2004年第4期25卷 401-403页

作者：关战军张传森金由辛第二军医大学长海医院心血管内科上海200433 基础医学部生物医学工程研究所中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室上海200231

目的 :探讨 c- myc和 cdc2基因在高血脂兔髂 -股动脉成形术后平滑肌细胞中的表达。方法 :2 4只新西兰白兔均饲以高脂饲料 ,于高脂饲喂 2周时用球囊导管扩张髂 -股动脉 ,造成动脉内膜损伤 ,6～ 8周行血管造影检查 ,对狭窄 >5 0 %的动... 详细信息

目的 :探讨 c- myc和 cdc2基因在高血脂兔髂 -股动脉成形术后平滑肌细胞中的表达。方法 :2 4只新西兰白兔均饲以高脂饲料 ,于高脂饲喂 2周时用球囊导管扩张髂 -股动脉 ,造成动脉内膜损伤 ,6～ 8周行血管造影检查 ,对狭窄 >5 0 %的动脉段行球囊扩张术 ,术后 2 4 h和 2周分别用 RT- PCR和免疫金银法检测 c- myc、cdc2 m RNA和相应蛋白质的表达。结果 :c- myc和 cdc2 m RNA在球囊扩张术后 2 4 h表达增加 ,其相应蛋白质在扩张术后 2周时表达增加 ,阳性颗粒主要位于新内膜层平滑肌细胞的胞核 ,少量位于胞质。结论 :动脉损伤后可致 c- myc、cdc2 m RNA和相应蛋白质表达增加 ,提示 c- myc和

关键词：高血脂髂-动脉成形术平滑肌细胞 c-myc cdc2 基因表达

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利用生物自显影筛选海洋微生物活性物质

利用生物自显影筛选海洋微生物活性物质

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：宋志刚许强芝焦炳华华东师范大学生命科学院第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

海洋生物活性物质，可以为新药研究提供先导化合物。海洋生物将是本世纪人们研究开发的重要药物资源。如何建立灵敏、方便、快捷的活性物质筛选模型将对实验的成败起着决定性的作用。生物自显影技术可在筛选化合物时起到重要的作用，Hom... 详细信息

海洋生物活性物质，可以为新药研究提供先导化合物。海洋生物将是本世纪人们研究开发的重要药物资源。如何建立灵敏、方便、快捷的活性物质筛选模型将对实验的成败起着决定性的作用。生物自显影技术可在筛选化合物时起到重要的作用，Homans A.L.等人已经利用它来筛选抗真菌的天然代谢产物。本文通过改进后将该方法应用于海洋微生物抗菌活性筛选和活性跟踪分离，取得良好效果。分析指出生物自显影技术是一种简便的生物自检技术，具有高度的灵敏性，容易保存记录，更重要的是它可以指导活性跟踪分离。在实际操作中我们发现玻璃板的TLC比铝质的TLC更加合适，它可以避免在裁剪铝板的时候破坏硅胶，并且由于玻璃板的质量较大，也可以增加我们喷洒抱子和菌液时候TLC的稳定性。

关键词：海洋微生物活性物质生物活性先导化合物筛选模型抗菌活性

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高密度发酵制备重组人OCIF活性域多肽融合蛋白

高密度发酵制备重组人OCIF活性域多肽融合蛋白

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：张兴群王梁华焦炳华缪辉南袁勤生华东理工大学生物反应器国家重点实验室上海 200237 第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海 200433 第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海 200433 华东理工大学生物反应器国家重点实验室上海 200237

破骨细胞形成抑制因子(OCIF或称OPG)可通过抑制破骨细胞形成、抑制成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡实现对骨密度的调节，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员。骨质疏松症、Paget’s病、癌症骨转移等导致的骨破坏都与破骨细胞分化增殖异常活... 详细信息

破骨细胞形成抑制因子(OCIF或称OPG)可通过抑制破骨细胞形成、抑制成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡实现对骨密度的调节，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员。骨质疏松症、Paget’s病、癌症骨转移等导致的骨破坏都与破骨细胞分化增殖异常活跃和骨吸收过量密切相关，因此，OCIF研究将为这些骨骼类疾病的预防和治疗提供帮助。本研究在获得OCIF活性结构域(OCIFAD)克隆与表达基础上，进一步考察了实现发酵罐高密度发酵表达可溶性OCIFAD融合蛋白的各种参数，实现了高表达。

关键词：高密度发酵多肽融合蛋白肿瘤坏死因子超家族成员破骨细胞

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鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗急性肝损伤作用

鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗急性肝损伤作用

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：范秋领金艳黄才国魏善建焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海 200237 中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

鲨鱼是海洋生物资源中重要的物种，鲨鱼软骨中抗肿瘤活性物质在美国己进入临床试验，鲨鱼免疫球蛋白基因及其产物的结构与人类存在一定的同源性，表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况。我们用LaBrecque等的提取方... 详细信息

鲨鱼是海洋生物资源中重要的物种，鲨鱼软骨中抗肿瘤活性物质在美国己进入临床试验，鲨鱼免疫球蛋白基因及其产物的结构与人类存在一定的同源性，表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况。我们用LaBrecque等的提取方法从幼鲨肝脏中提取了一种活性蛋白，通过研究证明其能够促进肝癌细胞HepG 2的增值，促进其DNA的合成，我们认为这是存在于幼鲨肝脏中的肝刺激物(sHSS)。为了进一步证实其功能，本文探讨了其对小鼠急性肝损伤的保护作用。

关键词：鲨鱼肝刺激物肝细胞细胞增殖抗急性肝损伤海洋生物

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浙江舟山群岛12种海洋动物中生命活性物质的初步筛选

浙江舟山群岛12种海洋动物中生命活性物质的初步筛选

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：范秋领黄才国缪辉南焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海 200237 中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

海洋是一个低温、高盐、高压、缺氧、缺少光照的特殊环境，在这样的环境中生存的生物能代谢产生与陆地生物不同的新颖的生命活性物质，它们具有抗肿瘤、抗菌、抗真菌、抗病毒、抗心脑血管疾病、抗艾滋病等作用，借助于各种药物筛选、分... 详细信息

海洋是一个低温、高盐、高压、缺氧、缺少光照的特殊环境，在这样的环境中生存的生物能代谢产生与陆地生物不同的新颖的生命活性物质，它们具有抗肿瘤、抗菌、抗真菌、抗病毒、抗心脑血管疾病、抗艾滋病等作用，借助于各种药物筛选、分离手段，目前已从海洋生物中发现具有重要生理及药理活性的化合物上千种，这些化合物包括甾醇、萜类、皂甙、聚醚、大环内酯、脂肪酸、多糖、生物碱、环肽、蛋白质等类型，其中Bryostatin 1、Dolastatin 10等已进入临床试验。我国浙江舟山群岛有丰富的海洋资源，本文从舟山采集到12种海洋动物，利用多种活性筛选模型对其粗提物进行活性筛选，从中筛选出几种具有不同生物活性的物种，为进一步分离提取奠定了基础。

关键词：海洋动物活性物质生命活性药理活性海洋资源

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镉暴露大鼠睾丸支持细胞金属硫蛋白表达的时相研究

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 965-968页

作者：任绪义周雍张建鹏仲燕冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸... 详细信息

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成。

关键词：金属硫蛋白镉睾丸支持细胞睾丸组织镉损伤

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细菌双杂交系统在细胞外蛋白质相互作用中的应用

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第二军医大学学报 2003年第10期24卷 1095-1098页

作者：张弛王梁华罗以勤张兴群高云史薇包晨颖球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性。方法:应用Stratagene BacterioMatch two hy-brid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合... 详细信息

目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性。方法:应用Stratagene BacterioMatch two hy-brid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合表达质粒。重组质粒分别相应共转化报告菌株XL1-Blue MRF,报道基因产物以抗羧苄青霉素和β-半乳糖苷酶活性作为转录激活的指标。结果:pTRG-TRAIL与pBT-DR4,pTRG-TRAIL与pBT-DR5及对照组分别共转化后在高浓度羧苄青霉素(500μg/ml以上)筛选下宿主菌呈转录激活状态,pTRG-TRAIL与pBT-OPG组共转化后在低浓度羧苄青霉素(250μg/ml以下)筛选下宿主菌呈转录激活状态,用X-Gal-PETG平皿可以进一步验证阳性克隆。对照组pTRG-TRAIL与pBT-LGF2,pBT-DR4、pBT-DR5或pBT-OPG与pTRG-Gal114组共转化后呈阴性。结论:所用的双杂交序列皆为编码这些蛋白质的细胞外区域,而这些蛋白质本身的相互作用已有其他报道验证,所以细菌双杂交系统可以用于细胞外蛋白质的相互作用研究。

关键词：细菌双杂交系统细胞外蛋白质相互作用临床应用可行性 TNF相关凋亡诱导配体质粒构建

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