检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 140-142页

作者：娄永华焦炳华肖扬朱玉平王梁华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :在大肠杆菌中高效表达重组人可溶性 VEGI,纯化重组蛋白并分析其生物学活性。方法 :采用 PCR方法对编码人 VEGI全基因进行修饰 ,获得编码成熟蛋白第 2 9～ 174位氨基酸的 C端胞外区基因片段 ,将 PCR产物亚克隆到 p MD-18T中 ,经 DN... 详细信息

目的 :在大肠杆菌中高效表达重组人可溶性 VEGI,纯化重组蛋白并分析其生物学活性。方法 :采用 PCR方法对编码人 VEGI全基因进行修饰 ,获得编码成熟蛋白第 2 9～ 174位氨基酸的 C端胞外区基因片段 ,将 PCR产物亚克隆到 p MD-18T中 ,经 DNA测序证实后亚克隆入高表达载体 p L OU- 1,转化大肠杆菌 BL 2 1,获得高表达菌株。经 IPTG诱导获得高表达 ,纯化表达产物并检测其对内皮细胞 ECV30 4增殖的抑制活性。结果 :重组人可溶性 VEGI在大肠杆菌中获得高效表达 ,约占细菌总蛋白的 4 0 % ;纯化的重组蛋白经复性后具有直接抑制内皮细胞增殖的活性。结论 :重组人可溶性 VEGI在大肠杆菌中获得高效表达 ,且表达的重组蛋白具有抑制内皮细胞生长作用。

关键词：血管内皮聚合酶链反应血管生长抑制因子基因表达重组人可溶性VEGI 大肠杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a的克隆与表达

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 125-128页

作者：娄永华焦炳华周丙荣王梁华余伟民朱玉平第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p B... 详细信息

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p BL载体 ,转化大肠杆菌 DH5α,获得表达 rh- TNFα- D3a的工程菌。结果 :经巨引物二轮 PCR获得表达 TNFα突变蛋白的基因突变 ,经序列测定结果与设计一致 ,重组蛋白表达量占细菌总蛋白 18.0 % ,大部分为可溶性 ,占 rh- TNFα- D3a总量的 6 0 %以上。重组蛋白经纯化 ,纯度 >98%。 rh- TNFα- D3a对 L 92 9细胞表现出较高的细胞毒性 ,比活性大于 5× 10 8IU / mg。与野生型的 rh- TNFα相比 ,rh- TNFα- D3a的毒性降低为野生型的 1/ 10 ,同时其保留了 TNFα的抗肿瘤活性。结论 :rh- TNF-αD3a是一个毒性较低。

关键词：点突变聚合酶链反应重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a 克隆 rh-TNF α-D3a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a研究的综合报告

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 121-124页

作者：焦炳华娄永华王梁华朱玉平周丙荣第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发... 详细信息

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发生的程度 ; 期临床试验观察人体可耐受的安全剂量 ; - 期临床试验观察其对肿瘤患者的临床疗效。结果 :rh- TNFα-D3a体内抑瘤的 ED50 为其野生型的 2 / 3;L D50 为野生型的 11倍 ;恒河猴长期毒性的安全剂量为日本同类产品 PT0 5 0的 6 4倍 ; 期临床试验表明 ,≤ 2× 10 6 IU/ (m2· d)× 7d为人体可耐受的安全剂量 ,本品与野生型药物比较 ,其毒性反应的发生率及反应程度远远降低 ; - 期临床试验表明 ,胸腔内注射对恶性胸水 ,静脉途径对多种实体瘤包括恶性淋巴瘤、乳腺癌、恶性黑素瘤和肾癌等均有较好的疗效。结论 :研制新一代高效。

关键词：抗肿瘤药临床试验重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a rh-TNFα-D3a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人肝癌SMMC-7721细胞热休克反应条件的确立

引用

第二军医大学学报 2002年第8期23卷 920-921页

作者：徐晓辉王学敏谭金兴徐仁宝第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

热休克反应在生物界广泛存在，热休克时细胞变化的机制是当前研究的一个重要领域。本实验在热休克反应时糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）减少机制的研究中，确立了人肝癌SMMC-7721细胞的热休克反应条件。

关键词：肝癌 SMMC-7721细胞热休克反应细胞培养肝肿瘤糖皮质激素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

急性镉中毒大鼠睾丸氧化损伤机制的研究

引用

第二军医大学学报 2002年第1期23卷 64-66页

作者：周雍金慧英冯伟华胡惠民郑尊印木泉第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝... 详细信息

目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝、睾丸两器官均发生严重的氧化损伤 ,细胞的抗氧化能力明显降低。但两者的变化规律不同 :肝脏在 6 h组 MT大量表达 (达正常值的 6 .7倍 )后 ,上述损伤逐渐减轻 ;而睾丸 MT表达的氧化损伤尽管在前 3h并不严重 ,但此后不断加剧。结论 :急性镉中毒时睾丸与肝氧化损伤规律明显不同 ,MT在睾丸中不能被诱导表达是睾丸对镉极其敏感的原因之一。

关键词：镉中毒氧化还原金属硫蛋白大鼠睾丸损伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡及其与FHIT基因突变关系的初步研究

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 136-139页

作者：王梁华朱玉平蔡清萍娄永华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长征医院普通外科

目的 :分析原核重组表达的人可溶性 TRAIL分子诱导多种肿瘤细胞的凋亡 ,并观察凋亡作用与 FHIT基因突变的关系。方法 :观察人可溶性 TRAIL对 2 8株不同来源的肿瘤细胞和正常细胞的直接细胞毒作用 ,RT- PCR法分析部分细胞的FHIT基因缺失... 详细信息

目的 :分析原核重组表达的人可溶性 TRAIL分子诱导多种肿瘤细胞的凋亡 ,并观察凋亡作用与 FHIT基因突变的关系。方法 :观察人可溶性 TRAIL对 2 8株不同来源的肿瘤细胞和正常细胞的直接细胞毒作用 ,RT- PCR法分析部分细胞的FHIT基因缺失突变情况。结果 :1～ 10 0 mg/ L的重组人可溶性 TRAIL蛋白即可诱导 19株细胞 (包括人肿瘤细胞株 )如 1990(胰腺导管癌 )、MCF- 7(乳腺癌 )、A 5 4 9(肺癌 )、U 2 5 1(星形胶质瘤 )、Hep G- 2 (肝细胞癌 )、M85 (胃癌 )、CNE- 2 (鼻咽癌 )、Hep- 2(喉癌 )、AT- 2 9(结肠癌 )、3AO (卵巢癌 )和 B16 - MB(黑色素瘤 ) ,髓性恶性细胞如 Jurkat、K5 6 2、U937、6 T- CEM,鼠源性 S180(肉瘤 )、Ehrlich(腹水瘤 )和 L ewis(肺癌 ) ,以及人内皮细胞株 ECV 30 4等发生凋亡 ;而其他 9株细胞 ,如 SK- N - SH(人神经母细胞瘤 )、8898(人胰腺导管癌 )、He L a(人宫颈癌 )、SMMU 772 1(人肝癌 )、HL 6 0 (人白血病 )、COS- 7(猴肾 )、人成纤维细胞、L 92 9(鼠成纤维细胞 )、Wish(人羊膜细胞 )等需大于 10 0 mg/ L的 TRAIL才能使其凋亡 ;观察到上述部分对 TRAIL敏感的人源细胞的 FHIT基因有缺失突变 ,而不敏感的人源细胞 FHIT基因完整。结论 :原核表达的人可溶性 TRAIL 具有明显诱导多种?

关键词： TRAIL 细胞凋亡 FHIT基因基因突变肿瘤细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人肝癌SM MC-7721细胞热休克反应时糖皮质激素受体mRNA减少机制初探

引用

中华内分泌代谢杂志 2002年第6期18卷 478-480页

作者：徐晓辉王学敏向正华郭兴中缪明永徐仁宝第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的　探讨人肝癌SMMC 772 1细胞热休克反应时糖皮质激素受体 (GR)mRNA减少的机制。方法　利用聚合酶链反应 (PCR)从大鼠GRcDNA质粒及人肝癌SMMC 772 1细胞基因组中扩增大鼠GR跨外显子 3 ,4,5片段 (与人GR跨外显子 3 ,4,5片段同源性在 ... 详细信息

目的　探讨人肝癌SMMC 772 1细胞热休克反应时糖皮质激素受体 (GR)mRNA减少的机制。方法　利用聚合酶链反应 (PCR)从大鼠GRcDNA质粒及人肝癌SMMC 772 1细胞基因组中扩增大鼠GR跨外显子 3 ,4,5片段 (与人GR跨外显子 3 ,4,5片段同源性在 89%以上 )及人GR内含子E的DNA片段 ,构建转录质粒 ,并在体外进行转录 ,用地高辛标记反义RNA探针 ,进行细胞原位杂交 ,碱性磷酸酶底物NBT BCIP显色 ,计算机图像分析系统进行扫描半定量分析。结果　人肝癌SMMC 772 1细胞 44℃培养 1h后 ,用跨外显子和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比未经热休克反应组低 ;加放线菌素D后热休克反应组 ,用跨外显子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组低 ,而用内含子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组高 ;加放线菌酮后热休克反应组 ,用跨外显子探针和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比热休克反应组高。结论　热休克反应时GRmRNA转录过程受抑 ,GRmRNA前体成熟过程存在剪接障碍。

关键词：肝癌 SMMC-7721细胞热休克反应糖皮质激素受体 mRNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

神经生长因子对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内ATP酶的影响

引用

第二军医大学学报 2002年第8期23卷 859-859,867页

作者：黄才国魏善建姜华贾瑞波焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国药科大学

缺血缺氧性脑损伤(HIE)在临床上致死率和致残率都很高,是严重威胁新生儿健康的疾病之一,而且病因相当复杂,其中脑内细胞膜酶活性的变化也是造成细胞膜损害的原因之一.神经生长因子(NGF)对损伤神经细胞具有修复作用,对缺血缺氧性脑损伤... 详细信息

缺血缺氧性脑损伤(HIE)在临床上致死率和致残率都很高,是严重威胁新生儿健康的疾病之一,而且病因相当复杂,其中脑内细胞膜酶活性的变化也是造成细胞膜损害的原因之一.神经生长因子(NGF)对损伤神经细胞具有修复作用,对缺血缺氧性脑损伤有一定的治疗作用[1].本文研究NGF对HIE模型大鼠细胞Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响.

关键词：神经生长因子缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内 ATP酶实验研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吸入麻醉药对离体鼠肝线粒体跨膜电位的影响

引用

第二军医大学学报 2002年第6期23卷 611-613页

作者：俞卫锋杨立群纪筠陶勇缪明永第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :通过观察吸入麻醉药对离体鼠肝线粒体跨膜电位的影响 ,研究吸入麻醉药肝毒性与线粒体能量代谢的关系。方法 :应用碱性藏红为探针 ,在 3ml的反应体系中分别加入 5、10、2 0、5 0μl/ ml氟烷、恩氟烷、异氟烷及七氟烷 ,用 UV - 30 ... 详细信息

目的 :通过观察吸入麻醉药对离体鼠肝线粒体跨膜电位的影响 ,研究吸入麻醉药肝毒性与线粒体能量代谢的关系。方法 :应用碱性藏红为探针 ,在 3ml的反应体系中分别加入 5、10、2 0、5 0μl/ ml氟烷、恩氟烷、异氟烷及七氟烷 ,用 UV - 30 0 0分光光度计进行双波长 (5 11～ 5 33nm )扫描 ,观察上述 4种药物对 ATP或琥珀酸能化及非能化鼠肝线粒体跨膜电位 (Δψ)的影响。结果 :氟烷与经典的解耦联剂氰化 -对 -三氟甲氧基苯腙相似 ,能明显降低能化及非能化线粒体的跨膜电位 ,而其余 3种药物仅在大剂量时才降低线粒体的跨膜电位。结论 :氟烷具有解耦联作用。氟烷与其他吸入麻醉药在能量代谢上的这种差异是否为它们肝毒性差异的原因值得引起重视。

关键词：麻醉药线粒体跨膜电位影响肝毒性离体肝吸入麻醉

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人多种组织中线粒体DNA存在13.1kb片段缺失突变

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 221-223页

作者：张燕王学敏蒋蕾沈茜第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :在人外周血细胞中筛选到新的线粒体 DNA大片段缺失突变后 ,进一步探讨该缺失在稳定组织内的分布。方法 :以人外周血细胞及人体多种组织 DNA为模板 ,进行 PCR扩增 ,筛选该突变。结果 :在人外周血细胞及多种稳定组织中发现 13.1kb... 详细信息

目的 :在人外周血细胞中筛选到新的线粒体 DNA大片段缺失突变后 ,进一步探讨该缺失在稳定组织内的分布。方法 :以人外周血细胞及人体多种组织 DNA为模板 ,进行 PCR扩增 ,筛选该突变。结果 :在人外周血细胞及多种稳定组织中发现 13.1kb缺失突变的存在。结论 :这种广泛分布于健康人多种组织中的线粒体

关键词： DNA 线粒体基因缺失基因突变人多种组织

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：