检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2006年第5期27卷 500-502页

作者：周运恒缪明永李洋时多黄鹤王学敏焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:研究大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化规律。方法:雄性SD大鼠70%肝切除(PH),制作肝再生模型,制备肝匀浆液,经离心后用酶标仪分别测定肝再生过程中不同时期(共8个时间点),肝细胞的凋亡酶活性。结果:Caspase-3... 详细信息

目的:研究大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化规律。方法:雄性SD大鼠70%肝切除(PH),制作肝再生模型,制备肝匀浆液,经离心后用酶标仪分别测定肝再生过程中不同时期(共8个时间点),肝细胞的凋亡酶活性。结果:Caspase-3活性,与对照组相比,在PH后3、6、72、120和168 h时显著性增高(P<0.001);而整个过程中Caspase-8的活性除了在PH后168 h时高于对照组外(P<0.05),其余时间点没有明显增高。结论:肝再生过程中肝细胞凋亡酶Caspase-3活性的升高可能主要是由内源性线粒体途径引起的。

关键词：肝再生肝细胞 caspase-3 caspase-8

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聚集蛋白基因转染促进移植肌肉功能恢复的实验研究

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中华整形外科杂志 2006年第5期22卷 378-382页

作者：张盈帆江华林子豪蔡在龙吴包金第二军医大学附属长征医院整形外科上海200003 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的研究转染神经源性聚集蛋白基因对游离移植肌肉功能恢复的影响。方法选大鼠股薄肌原位移植模型,按移植术后即刻肌肉内注射溶液的不同分为pCS2+-agrin基因转染实验组,pCS2+空质粒组以及生理盐水注射组,后两组作为手术对照组,基因电转... 详细信息

目的研究转染神经源性聚集蛋白基因对游离移植肌肉功能恢复的影响。方法选大鼠股薄肌原位移植模型,按移植术后即刻肌肉内注射溶液的不同分为pCS2+-agrin基因转染实验组,pCS2+空质粒组以及生理盐水注射组,后两组作为手术对照组,基因电转染术后不同时间检测各组肌肉收缩功能、神经源性agrin蛋白表达,以及终板区烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)数量的变化。结果术后早期agrin基因转染组肌肉功能恢复明显优于空质粒转染组以及生理盐水注射组(4、5、10周,P<0.05),但术后晚期15及20周时各组肌肉功能间差异无统计学意义。免疫组化显示agrin基因转染后,术后1周到5周,有大量棕黄色抗原抗体复合物沉积在终板及其邻近区域,但到第10周时表达明显减少,接近对照组水平。agrin基因转染组终板区的nAChR数量在各个时间点均高于实验对照组。结论移植肌肉终板区转染神经源性agrin基因,促进了移植肌肉早期功能的恢复。

关键词：聚集蛋白基因治疗肌肉移植肌肉功能

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人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38年轻和衰老细胞中线粒体量和mtDNA相对含量以及功能变化的比较

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第二军医大学学报 2006年第12期27卷 1290-1294页

作者：孙青菊龙建纲汪振诚缪明永王学敏第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38,比较年轻和衰老细胞中线粒体量和线粒体DNA(mtDNA)相对含量的变化,以及线粒体功能的改变,探讨线粒体与衰老的关系。方法培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38;四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;差速离心... 详细信息

目的培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38,比较年轻和衰老细胞中线粒体量和线粒体DNA(mtDNA)相对含量的变化,以及线粒体功能的改变,探讨线粒体与衰老的关系。方法培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38;四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;差速离心分离线粒体,BCA-100Pr定量试剂盒测定线粒体蛋白的含量;竞争PCR法分析mtDNA的相对含量;流式细胞仪测定线粒体膜电位的变化;分光光度法测定线粒体呼吸链氧化酶-NADH氧化酶活性。结果衰老细胞较年轻细胞形成单层时间明显延长,细胞圆缩蜕变,细胞活力明显低于年轻细胞;线粒体膜电位约下降为原来的50%;NADH氧化酶活性也降低,最大反应速度由66.73nmol/(mgprotein·min)降为36.01nmol/(mgprotein·min);衰老细胞线粒体蛋白含量(0.78±0.02mg/ml)高于年轻细胞(0.56±0.03mg/ml);以核18SrDNA为内参,衰老细胞mtDNA相对含量(1.557±0.072)明显高于年轻细胞(1.292±0.068)。结论衰老细胞中,线粒体量和mtDNA相对含量的增高可能是功能下降的一种代偿性反应,为探讨线粒体与衰老的关系提供一定参考。

关键词： WI-38细胞线粒体 DNA 线粒体衰老

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海洋生命活性物质和海洋药物的研究与开发

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 5-7页

作者：焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

海洋是生物资源的巨大宝库,地球上约80%的物种栖息在海洋中。由于特殊的生存环境,海洋生物可合成与陆地生物结构不同的、活性不一的代谢产物,为新药的研究与开发提供了大量的先导化合物。在过去的几十年间,全球范围内已从海洋动、植物... 详细信息

海洋是生物资源的巨大宝库,地球上约80%的物种栖息在海洋中。由于特殊的生存环境,海洋生物可合成与陆地生物结构不同的、活性不一的代谢产物,为新药的研究与开发提供了大量的先导化合物。在过去的几十年间,全球范围内已从海洋动、植物及微生物中分离得到15 000多个化合物,其中头孢霉素、芋螺毒素、阿糖胞苷和阿糖腺苷等4个药物均是以海洋来源先导化合物为基础开发成功的。

关键词：海洋生物学海洋药化合物活性物质

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人肝癌SMMC-7721细胞株部分线粒体基因表达的研究

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 46-50页

作者：王洁王学敏龙建纲于军汪振诚焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察人肝癌SMMC-7721细胞株部分线粒体DNA(mtDNA)基因表达的情况。方法:根据人线粒体DNA(mtDNA)基因序列,利用primer premier 5.0生物软件设计了4对PCR引物,分别是扩增D-loop区、ND6、ATPase8-ATPase6、16sRNA基因,采用RT-PCR方法对SMMC-7721细胞线粒体DNA上D-loop区及其他3个基因的表达进行了检测,并与其在正常人肝细胞株(L02)线粒体中的表达作了比较。结果:我们发现,与正常人肝细胞株(L02)相比,在SMMC-7721细胞中,D-loop区、ND6、ATPase8-ATPase6基因表达总体是增高的,16sRNA基因表达基本不变,同时在同一基因两条链(重链和轻链)之间的表达也存在差异。结论:我们认为,由于线粒体DNA编码的多肽均是氧化磷酸化酶复合物的亚单位,这些基因表达的异常可能造成细胞对氧利用障碍,细胞能量产生减少,成为造成SMMC-7721细胞主要以糖酵解的方式提供能量的重要原因之一。

关键词： DNA 线粒体基因表达肝肿瘤细胞株

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贻贝多糖MPs的制备、组分鉴定和免疫学活性研究

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 12-16页

作者：王俊徐红丽张建鹏刘军华冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:分离纯化厚壳贻贝(Mytilus coruscus)多糖MPs,并测定其纯度和单糖组分。方法:用组织匀浆后热水抽提,Sevage法除蛋白,乙醇沉淀,再经DEAE-cellulose 52、Sephacryl S-200柱层析和高效液相色谱(HPLC),分离纯化得到贻贝多糖MPs。分离... 详细信息

目的:分离纯化厚壳贻贝(Mytilus coruscus)多糖MPs,并测定其纯度和单糖组分。方法:用组织匀浆后热水抽提,Sevage法除蛋白,乙醇沉淀,再经DEAE-cellulose 52、Sephacryl S-200柱层析和高效液相色谱(HPLC),分离纯化得到贻贝多糖MPs。分离到多糖粗品行全波段的最大吸收波长光谱扫描、硫酸-苯酚比色法测定糖含量;经紫外光谱扫描分析、红外光谱扫描分析、染料结合比色法、HPLC鉴定其纯度,再经气相色谱(GC)进行单糖组分分析。纯化得到纯品进行免疫学活性测定。结果:经分离纯化获得贻贝多糖纯品多个组分MPs-A1/A2/B1/B2/B3/C1/C2/C3,其中MPs-B1纯度较高,相对分子质量为3 510 000,主要含有葡萄糖、半乳糖2种单糖组分,二者比例接近1∶1,1HNMR表明为α-吡喃己糖。MPs-B1增强小鼠NK细胞活性、抗体形成细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性。结论:经工艺改进后获得的MPs-B1与同类和前期研究所报道的贻贝多糖在理化性质、含糖量、单糖组分上均有显著区别。MPs-B1具有正向免疫调节作用。

关键词：厚壳贻贝多糖类分离提纯免疫活性

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东海微生物中6种环二肽类天然活性物质的分离和鉴定

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 22-24页

作者：艾峰许强芝杨妤刘小宇施晓琼宋志刚焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:从海洋微生物中寻找天然活性物质。方法:利用稻瘟霉作为菌株筛选模型,对筛选出来的活性菌株F8712发酵液的醋酸乙酯提取物进行化合物分离;通过1HNMR1、3CNMR和ESI-MS对化合物进行结构鉴定。结果和讨论:鉴定了6个环二肽类化合物,它... 详细信息

目的:从海洋微生物中寻找天然活性物质。方法:利用稻瘟霉作为菌株筛选模型,对筛选出来的活性菌株F8712发酵液的醋酸乙酯提取物进行化合物分离;通过1HNMR1、3CNMR和ESI-MS对化合物进行结构鉴定。结果和讨论:鉴定了6个环二肽类化合物,它们分别为环[Ala-Leu](Ⅰ),环[Ala-Ile](Ⅱ),环[Val-Pro](Ⅲ),环[Leu-Pro](Ⅳ),环[Ile-Pro](Ⅴ)和环[Leu-Val](Ⅵ)。这些环二肽都没有抗稻瘟霉活性,化合物Ⅴ对鳗弧菌(Vibrio anguillarm)具有较强的抑制能力,其MIC为0.07μg/ml。

关键词：环二肽海洋生物学稻瘟霉鳗弧苗分离鉴定东海

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Citrostatin的构建与活性分析

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第二军医大学学报 2006年第11期27卷 1249-1253页

作者：马丽杨生生杨志峰陈欢蔡在龙第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:本研究拟通过人工化学合成技术将2个不同机制发挥抗癌作用的小肽结合起来,产生一个融合肽Citrostatin,并研究其生物学活性,以期获得具有双重抗肿瘤功能的抗肿瘤肽。方法:化学合成Citrostatin并经HPLC分离纯化,通过内皮细胞杀伤实... 详细信息

目的:本研究拟通过人工化学合成技术将2个不同机制发挥抗癌作用的小肽结合起来,产生一个融合肽Citrostatin,并研究其生物学活性,以期获得具有双重抗肿瘤功能的抗肿瘤肽。方法:化学合成Citrostatin并经HPLC分离纯化,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性分析、体外管状结构生成抑制实验,以及鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验分析Citrostatin的生物学活性。结果:Citrostatin可明显抑制内皮细胞ECV304的增殖(ED50为6.2μg/ml),有效杀伤肿瘤细胞1990及NCI-H640细胞(ED50分别为50μg/ml、16μg/ml),并明显抑制体外管状结构生成及鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成。结论:本研究成功构建并合成了抗肿瘤融合48肽Citrostatin,研究表明该融合肽同时具有抑制肿瘤组织新生血管形成和直接杀伤肿瘤的双重活性。

关键词： Citrostatin 融合肽抗肿瘤药血管生成抑制

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海螵蛸多糖CPS-1对小鼠实验性溃疡性结肠炎作用的初步观察

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 28-30页

作者：魏江洲张建鹏刘军华徐红丽冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探讨海螵蛸多糖相对均一组分———CPS-1对小鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用。方法:采用DSS诱导法建立小鼠UC模型,以SMZ-TMP为对照,通过临床症状、体质量改变、局部肠黏膜(溃疡发生)改变情况等指标对高、低剂量CPS-1对UC小鼠... 详细信息

目的:探讨海螵蛸多糖相对均一组分———CPS-1对小鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用。方法:采用DSS诱导法建立小鼠UC模型,以SMZ-TMP为对照,通过临床症状、体质量改变、局部肠黏膜(溃疡发生)改变情况等指标对高、低剂量CPS-1对UC小鼠的保护作用进行初步观察。并采用ELISA方法测定了小鼠血清中某些内皮增殖及炎症相关的细胞因子的含量变化。结果:海螵蛸多糖治疗组小鼠模型建立后的体质量没有明显降低,小鼠的一般生长情况都良好,血清中EGF和PDGF的含量较模型建立前明显增加,而TNF-α的含量与阳性对照组相比则明显降低(P<0.05)。结论:海螵蛸多糖CPS-1能够明显的提高UC小鼠血液中EGF和PDGF的含量,加速溃疡组织的愈合;同时降低TNF-α的表达,从而缓解炎症。因此,海螵蛸多糖CPS-1能够加速溃疡组织的愈合和修复过程。

关键词：海螺蛸多糖类结肠炎溃疡性小鼠

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东海药用微生物资源的初步调查研究

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第二军医大学学报 2006年第5期27卷 535-537页

作者：杨妤许强芝艾峰刘小宇施晓琼焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:对中国东海药用微生物资源进行初步调查研究。方法:从中国东海采集海水和底泥样品,选用不同的分离培养基,采用无限稀释及平板划线的方法分离出单菌落,利用纸片法和稻瘟霉模型对菌株发酵液进行活性筛选。结果:从样品中分离得到1 04... 详细信息

目的:对中国东海药用微生物资源进行初步调查研究。方法:从中国东海采集海水和底泥样品,选用不同的分离培养基,采用无限稀释及平板划线的方法分离出单菌落,利用纸片法和稻瘟霉模型对菌株发酵液进行活性筛选。结果:从样品中分离得到1 041株单菌落,包括506株放线菌,421株细菌和114株真菌,其中具有抗菌活性菌株303株,活性菌株分离率为29.1%。抗稻瘟霉分生孢子活性菌株219株,活性菌株分离率为21.0%。结论:分离得到的抗菌活性菌株,抗稻瘟霉分生孢子活性菌株的比例均达到20.0%以上,说明东海具有丰富的药用微生物资源。

关键词：海洋药东海活性筛选

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