检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药科大学学报 2009年第6期40卷 553-558页

作者：苏宝亮刘长城李帅杨科何志颖胡以平王欣中国药科大学分析测试中心南京210009 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子细胞生物学重点实验室上海200031 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:观察外源成体肝细胞在Fah-/-小鼠肝脏中增殖的微观特性并对该小鼠模型肝脏损伤后的病理学变化进行研究。方法:野生型小鼠成体肝细胞经脾脏移植到Fah-/-小鼠后,观察移植Fah-/-小鼠的体重变化,生存状态及肝组织的Fah免疫组化和电镜... 详细信息

目的:观察外源成体肝细胞在Fah-/-小鼠肝脏中增殖的微观特性并对该小鼠模型肝脏损伤后的病理学变化进行研究。方法:野生型小鼠成体肝细胞经脾脏移植到Fah-/-小鼠后,观察移植Fah-/-小鼠的体重变化,生存状态及肝组织的Fah免疫组化和电镜观察以评价再殖效率和病理学变化。结果:Fah-/-小鼠的肝HE染色显示为亚急性损伤的病理特点。电镜观察显示,初期肝细胞坏死,凋亡现象随时间增多,随后有凋亡和坏死并存。而Fah-/-小鼠在NTBC[2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-环己烷-1,3-二酮]药物的治疗后,无明显病理学变化。肝细胞移植后的Fah-/-小鼠均健康存活,体重稳步上升。8周时可以达到90%以上再殖。肝脏生化指标恢复正常。结论:Fah-/-小鼠的肝脏损伤可以使移植的肝细胞90%以上的再殖,维持肝脏正常的组织结构,并发挥正常的肝细胞功能。Fah-/-小鼠作为肝脏再殖模型可用于干细胞肝向分化研究。

关键词： Fah基因剔除小鼠肝细胞移植再殖

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戒断对吗啡依赖小鼠自发活动及场景性恐惧条件化表达的影响

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第二军医大学学报 2007年第4期28卷 385-388页

作者：宋赠宋娟欧阳新平高军付爱文田绍文南华大学医学院生理学教研室衡阳421001 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 山东省阳信县计划生育服务站阳信251800

目的:研究不同戒断期对吗啡依赖小鼠自发活动及场景性恐惧条件化表达的影响。方法:以剂量递增法连续皮下注射(sc)盐酸吗啡7 d建立吗啡依赖小鼠模型,随机分成吗啡戒断1 d、吗啡戒断7 d、吗啡戒断21 d组,并设立生理盐水戒断1、7、21 d组... 详细信息

目的:研究不同戒断期对吗啡依赖小鼠自发活动及场景性恐惧条件化表达的影响。方法:以剂量递增法连续皮下注射(sc)盐酸吗啡7 d建立吗啡依赖小鼠模型,随机分成吗啡戒断1 d、吗啡戒断7 d、吗啡戒断21 d组,并设立生理盐水戒断1、7、21 d组作为对照,每组12～13只。戒断后采用旷场实验观察小鼠自发活动(检测穿梭格数、直立次数、理毛时间、中央区活动时间、进入中央次数及外周时间等指标);随后对小鼠进行场景性恐惧条件化,并于24 h后进行恐惧反应(僵直)的检测。结果:与生理盐水对照组相比,吗啡戒断1 d、7 d组小鼠的水平活动度(P<0．001,P<0．001)和进入中央区次数(P<0．001, P<0．05)明显降低;戒断1 d组小鼠垂直运动也显著下降(P<0．001);吗啡戒断1 d组的理毛行为增加(P<0．05);但各吗啡戒断组的中央区、外周活动时间无显著差异。吗啡处理还选择性损害了戒断1 d组小鼠的场景性恐惧条件化表达(P<0．05)。结论:戒断早期降低了吗啡依赖小鼠部分自发活动,同时损害了场景性恐惧条件化表达。

关键词：吗啡依赖物质戒断综合征自发活动恐惧

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人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因A3243G点突变对其亮氨酰化活性的影响

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遗传 2003年第4期25卷 383-387页

作者：汪振诚王学敏金由辛缪明永韩伟国焦炳华中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

化学法合成人线粒体野生型与A3243G点突变型tRNA^(Leu(UUR))基因,体外转录生成相应的tRNA^(Leu(UUR)),表达并纯化人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS),用mtLeuRS催化野生型与突变型tRNA^(Leu(UUR))与亮氨酸结合,分别检测两种类型tRNA^(Leu(UUR))的氨酰化动力学常数。结果表明,野生型tRNA^(Leu(UUR))的K_m/K_(cat)仅为突变型tRNA^(Leu(UUR))的63.9％,A3243G点突变使tRNA^(Leu(UUR))接受亮氨酸的能力明显下降,提示此为A3243G点突变致病机制之一。

关键词：人线粒体tRNA^Leu(UUR) 基因点突变氨酰化

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孕妇血浆中游离胎儿DNA短串联重复序列检测

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郑州大学学报（医学版） 2010年第4期45卷 589-591页

作者：陈晓蕾李新伟李杨陈辉雷冬梅李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 第二军医大学病原生物学教研室上海200433 漯河高等医学专科学校生物学教研室漯河462000 郑州大学第三附属医院病理科郑州450052

目的:建立一种简便、不依赖于胎儿性别和父本DNA的无创性产前诊断方法。方法:应用降落PCR和二次PCR扩增技术,结合母源DNA对照,以34例孕妇外周静脉血血浆作为标本,口腔上皮细胞拭子作为母源对照,孕妇配偶外周血DNA作为父源对照,检测正常... 详细信息

目的:建立一种简便、不依赖于胎儿性别和父本DNA的无创性产前诊断方法。方法:应用降落PCR和二次PCR扩增技术,结合母源DNA对照,以34例孕妇外周静脉血血浆作为标本,口腔上皮细胞拭子作为母源对照,孕妇配偶外周血DNA作为父源对照,检测正常孕妇血浆中游离胎儿DNAD17S1293、D21S11及DXS8377等基因位点。结果:34例孕妇血浆DNA中均检出非母源性等位基因条带,其中17例经父源DNA验证。结论:采用降落PCR和二次PCR扩增技术,可以提高孕早期微量游离胎儿DNA的扩增效率,准确、快捷地获得不依赖于父本DNA的胎儿遗传信息。

关键词：胎儿DNA 短串联重复序列降落PCR

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中国姥鲨软骨新生血管抑制因子的分离纯化及理化性质检测

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药物生物技术 1997年第1期4卷 17-21页

作者：王路焦炳华缪辉南第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :... 详细信息

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :SCDI的分子量为 16 10 0 D,等电点为 8.15;氨基酸组成分析表明 SCDI含有 2 0种氨基酸 ,其中以 L eu、Ile和

关键词：鲨鱼软骨新生血管抑制因子分离纯化

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TRAIL诱导突变细胞凋亡的分子机理——免疫监督机制的新模型

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中国肿瘤生物治疗杂志 1998年第3期5卷 231-234页

作者：王梁华第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途... 详细信息

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途径的逐步阐明,免疫监督已从细胞免疫水平向分子免疫水平过渡.本文在国内外对TRAIL及其受体研究的基础上,提出了一个免疫监督的新模型:突变细胞比正常细胞缺少某些细胞膜表面信号从而被机体凋亡信号所识别,机体利用凋亡信号诱导突变细胞凋亡的方式清除它们.这一机制的提出可能会补充免疫监督学说.

关键词： TRAIL 免疫监督模型免疫监督分子肿瘤免疫

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高密度发酵制备重组人OCIF活性域多肽融合蛋白

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微生物学通报 2004年第6期31卷 53-56页

作者：张兴群王梁华焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器国家重点实验室第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433

以补料分批发酵方式在 3 7L发酵罐上实现了人破骨细胞形成抑制因子活性域多肽(OCIFAD)的高密度发酵融合表达。通过参数控制。发酵液最终OD6 0 0 达 1 2 5 (相当于 35g湿菌体 L) ,表达量占菌体总蛋白 40 %左右 ,含量超过 0 6g L ,并且... 详细信息

以补料分批发酵方式在 3 7L发酵罐上实现了人破骨细胞形成抑制因子活性域多肽(OCIFAD)的高密度发酵融合表达。通过参数控制。发酵液最终OD6 0 0 达 1 2 5 (相当于 35g湿菌体 L) ,表达量占菌体总蛋白 40 %左右 ,含量超过 0 6g L ,并且 90 %呈可溶性而直接具有生物学活性。直链淀粉树脂亲和层析法一步纯化 ,纯度达 90

关键词：破骨细胞形成抑制因子融合蛋白发酵补料-分批培养

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变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：张树忠胡以平梅长林第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海长征医院肾内科

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导... 详细信息

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导致。由于PKD1基因结构复杂及同源序列的干扰,使其突变检测不仅操作繁琐,而且影响了结果的准确性。本研究采用变性高压液相层析技术 (denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)分别对涵盖PKD1全部编码区(含46 个外显子)的72组PCR扩增片段进行分析,结果分别从85位健康者和19个汉族人ADPKD家系的67位家庭成员中检测出9个正常多态性位点和11个致病突变,后者包括8个错义突变、2个无义突变和1个移码突变,有10个致病突变是新发现的。突变检出率达到57．89％。并发现检出的突变存在以下特点:(1)突变散布在PKD1各外显子内,未见突变热点出现;(2)突变以DNA碱基转换为主;(3)大多数突变位于基因中GC重复序列区附近;(4)均以杂合基因的形式存在,支持“二次打击”致病假说;(5)致病突变常引发编码氨基酸所带电荷与亲水性的改变;(6)PKD1突变位点可能影响起病时的表现症状,尤其是同一家系的个体间表现更为突出。总之,同以前采用单链构象多态性方法(SSCP)相比,DHPLC分析技术不仅操作周期短,而且突变检出率明显提高,随着该检测条件的进一步完善和检测费用的降低,有望成为进行ADPKD患者发病前基因突变检测,甚至产前诊断的有效常规途径。

关键词：多囊肾病高压液相层析突变检测 ADPKD

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可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

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生物工程学报 2004年第3期20卷 408-413页

作者：章越沈亚领夏小霞孙爱友魏东芝周劲松张国钧王梁华焦炳华华东理工大学生物化学研究所生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海恰尔生物技术有限公司上海200336 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即... 详细信息

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即DO stat pH stat组合流加 ,有效的避免了发酵过程中 ,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加 ,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下 ,得到高效表达。菌体密度最终达到 30 0g L(WCW )以上 ,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的 4 2 % ,含量为 1 1g L。在整个发酵过程中 ,乙酸浓度接近于 0 ,且未使用任何特殊手段 ,如纯氧、加压等 ,简化了发酵工艺 ,降低了发酵成本 ,为TRAIL的工业化生产创造了条件。

关键词：重组大肠杆菌分批补料发酵 TRAIL 分离纯化

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植物多糖抗衰老作用的研究进展

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生物技术通讯 2014年第4期25卷 588-590页

作者：毛宇奇张建鹏第二军医大学基础医学部生物技术队 2010级上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰老... 详细信息

植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰老机制已成为植物多糖生物学活性研究中的热点之一。我们简要综述了国内外植物多糖抗衰老作用的研究进展。

关键词：植物多糖抗衰老自由基超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶端粒酶

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