检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2004年第3期20卷 408-413页

作者：章越沈亚领夏小霞孙爱友魏东芝周劲松张国钧王梁华焦炳华华东理工大学生物化学研究所生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海恰尔生物技术有限公司上海200336 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即... 详细信息

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即DO stat pH stat组合流加 ,有效的避免了发酵过程中 ,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加 ,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下 ,得到高效表达。菌体密度最终达到 30 0g L(WCW )以上 ,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的 4 2 % ,含量为 1 1g L。在整个发酵过程中 ,乙酸浓度接近于 0 ,且未使用任何特殊手段 ,如纯氧、加压等 ,简化了发酵工艺 ,降低了发酵成本 ,为TRAIL的工业化生产创造了条件。

关键词：重组大肠杆菌分批补料发酵 TRAIL 分离纯化

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外源性神经生长因子促神经端侧吻合后侧支发芽的作用

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第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1131-1132页

作者：李旭东季正伦何清濂王成海解放军第411医院整形外科上海200081 第二军医大学长海医院整形外科上海200433 长征医院整形外科上海200003 基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :通过研究周围神经端侧吻合后外源性神经生长因子 (NGF)的作用 ,探讨改善端侧吻合侧支发芽的方法。方法 :雄性 SD大鼠 2 0只 ,体质量 2 2 0～ 2 4 0 g,建立胫腓神经端侧吻合模型 ,随机分为 NGF组和生理盐水 (SAL)组 (n=10 ) ,NGF... 详细信息

目的 :通过研究周围神经端侧吻合后外源性神经生长因子 (NGF)的作用 ,探讨改善端侧吻合侧支发芽的方法。方法 :雄性 SD大鼠 2 0只 ,体质量 2 2 0～ 2 4 0 g,建立胫腓神经端侧吻合模型 ,随机分为 NGF组和生理盐水 (SAL)组 (n=10 ) ,NGF组术后 1周每日胫前肌注射 NGF 5 μg,SAL 组注射生理盐水 5 μl,术后 8周行 HRP逆行追踪和乙酰胆碱转移酶(Ch AT)活性测定。结果 :再生神经元存活百分率 (% ) ,NGF组运动神经元为 4 7.5± 13.1、感觉神经元为 4 5 .6± 6 .4 ,SAL 组运动神经元为 36 .7± 12 .2、感觉神经元为 32 .8± 8.5 ,两组比较均有显著差异 (P<0 .0 5 )。 NGF组 Ch AT活性为 (1.94±0 .2 3)× 10 1 2 Bq,达正常对照 (2 .39± 0 .38)× 10 1 2 Bq的 81% ,高于 SAL 组 [(1.72± 0 .33)× 10 1 2 Bq,占正常对照的 72 % ]。结论 :端侧吻合术后给予 NGF可以促进神经侧支发芽 ,提高神经元存活率。

关键词：神经再生端侧吻合侧支发芽HRP逆行追踪乙酰胆碱转移酶神经生长因子

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一株具有抗菌和细胞毒活性的海洋嗜盐菌XD20的筛选和鉴定

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 8-11页

作者：穆军焦炳华孙炳达刘杏忠第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学国家重点实验室北京100080

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体r... 详细信息

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体rDNA ITS区序列分析，并将所测得序列在NCBI数据库中进行相似性搜索，选取其中相似性较高的序列以邻接法构建系统进化树，将该菌株分类鉴定到种。结果：从我国东海海域C01站位（122°26′30″，30°43′48″）30m水深处分离获得一活性菌株XD20，是一嗜盐菌株，能耐受高达10．0％的盐浓度，合适的生长盐浓度范围为2．5％～7．5％；它对白念珠菌具有抑菌活性，对SMMC7721细胞株和HeLa细胞株具有细胞毒活性。以菌丝断裂方式产生节孢子，孢子大小及形态与Wallemia sebi相符；rDNAITS区测序发现，该菌株序列与Wallemia sebi的多条序列相似程度较高，且差异均在ITS1和ITS2区，属于可变区。结论：活性菌株XD20首次从海洋中分离获得，为一嗜盐海洋菌株，鉴定为Wallemia sebi（Fr．）Arx。

关键词：海洋嗜盐菌抗真菌活性细胞毒活性 XD20 海洋微生物

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人生长激素基因组DNA在家蚕BmN细胞中的瞬时表达

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第二军医大学学报 2003年第7期24卷 765-768页

作者：张昕泂胡惠民董良陆长德第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所上海200031

目的 :探讨内含子对外源基因在真核细胞中表达的作用。方法 :直接将含有 4个内含子和自身信号肽的 1.5 kb全长人生长激素基因直接克隆至真核表达载体 pc DNA3.0 ,然后利用脂质体转染家蚕 Bm N细胞 ,收取细胞上清 ,PAGE电泳和Western印... 详细信息

目的 :探讨内含子对外源基因在真核细胞中表达的作用。方法 :直接将含有 4个内含子和自身信号肽的 1.5 kb全长人生长激素基因直接克隆至真核表达载体 pc DNA3.0 ,然后利用脂质体转染家蚕 Bm N细胞 ,收取细胞上清 ,PAGE电泳和Western印迹分析鉴定表达产物 ;将全长基因序列、缺失第 1内含子基因序列和 c DNA序列的表达载体 ,分别转染细胞后检测各片段表达产物之间的差异。结果 :测序结果表明人生长激素基因组 DNA在细胞内正确转录、剪接。蛋白质电泳分析和免疫学检测证明转染细胞能够有效合成并分泌蛋白质。 EL ISA检测发现 3种基因片段中 ,全长的基因序列在表达效果上要高于后两者 (P<0 .0 5 ) ,其中缺失第 1内含子的序列表达效率较 c DNA序列明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :在家蚕细胞中能够正确表达带有自身内含子和信号肽的人源蛋白基因 ;

关键词：人生长激素基因组 DNA 家蚕 BmN细胞瞬时表达基因表达

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玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 920-921页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建姜华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷... 详细信息

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷.药理实验中证实苯丙素苷能抑制血小板聚集和大鼠中性白细胞花生四烯酸(AA)代谢物白三烯(LTB4)的生成[3].本研究在此基础上,进一步探讨苯丙素苷抗血小板聚集的作用机制.

关键词：玄参苯丙素苷 XS-8 血小板 cAMP 血浆 PGI2/TXA2

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂减轻草酸钙结晶肾损伤的实验研究

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中国中西医结合肾病杂志 2014年第10期15卷 857-860,I0001页

作者：汪丽谌卫彭忠将刘长城张彩虹郭志勇第二军医大学附属长海医院肾内科上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对草酸钙结晶模型小鼠肾结晶沉积的作用,初步探讨SAHA对减轻草酸钙结晶肾损伤的机制。方法:24只ICR雄性小鼠随机分为4组,即空白对照组(A组)... 详细信息

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对草酸钙结晶模型小鼠肾结晶沉积的作用,初步探讨SAHA对减轻草酸钙结晶肾损伤的机制。方法:24只ICR雄性小鼠随机分为4组,即空白对照组(A组)和实验组(B、C、D组);B组:50 mg/kg的生理盐水(NS)+100 mg/kg乙醛酸盐,C组:50 mg/kg的DMSO+100 mg/kg乙醛酸盐,D组:50 mg/kg的SAHA+100 mg/kg乙醛酸盐;实验组给予乙醛酸盐6 h前分别予以NS、DMSO、SAHA 50 mg/kg等量腹腔注射,7 d后处死全部小鼠。检测各组小鼠肾组织钙含量水平,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)的含量或活力,并且在光镜下观察各组小鼠肾组织切片中草酸钙结晶的分布,免疫组化及其半定量分析比较骨桥蛋白(OPN)、CD44分子在肾脏中的表达情况。结果:与B、C组相比,D组小鼠的肾组织钙含量和MDA含量显著下降(P均<0.05),肾组织切片冯库萨染色显示草酸钙结晶沉积明显减少(P<0.05),OPN与CD44表达水平也明显下降(P<0.05)。而B组与C组肾结晶形成的差异无统计学意义。结论:研究结果首次证实SAHA对减少小鼠草酸钙肾结晶形成有预防作用,而且其机制可能与抑制氧化应激和降低OPN、CD44表达水平有关。

关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂草酸钙结晶氧化应激 CD44 CD44

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基因芯片技术在脑创伤研究中的应用

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医学综述 2004年第12期10卷 736-739页

作者：蒋平吕军焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般＜500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术.它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交,杂交后的信号用激光扫描仪检测,计算机分析检测... 详细信息

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般＜500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术.它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交,杂交后的信号用激光扫描仪检测,计算机分析检测结果,可获得类似于传统的点杂交的分子杂交数据,比较各组织间靶基因表达谱的差异,以达到快速、高效、高通量及平行性地分析生物信息的目的.

关键词：脑创伤和损伤基因芯片表达谱芯片 mRNA 法医学

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鲨鱼肝刺激物对大鼠急性肝损伤和肝脏线粒体功能的影响

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第二军医大学学报 2005年第5期26卷 531-534页

作者：范秋领黄才国金艳冯波李闻捷魏善建缪辉南焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的研究鲨鱼肝刺激物(sHSS)对硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠急性肝损伤和肝线粒体功能的影响。方法雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,随机分3组对照组、模型组、治疗组,每组8只。以400mg/kgTAA2次腹腔注射建立大鼠急性肝损伤模型,治疗组在注... 详细信息

目的研究鲨鱼肝刺激物(sHSS)对硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠急性肝损伤和肝线粒体功能的影响。方法雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,随机分3组对照组、模型组、治疗组,每组8只。以400mg/kgTAA2次腹腔注射建立大鼠急性肝损伤模型,治疗组在注射TAA前1h腹腔注射80mg/kgsHSS,对照组注射等体积的生理盐水,24h后观察大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝中丙二醛(MDA)含量的变化,以及TAA和sHSS对肝线粒体呼吸功能、线粒体肿胀和膜电位的影响。结果治疗组大鼠血清中ALT、AST的水平明显低于模型组,而模型组MDA含量明显高于治疗组和正常组(P<0.05);治疗组大鼠肝脏线粒体ADP诱导的3态氧消耗、呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化率(OPR)明显高于TAA模型组(P<0.05);注射TAA和sHSS后,线粒体肿胀和跨膜电位没有明显的变化。结论sHSS能明显抑制TAA造成的急性肝损伤和脂质过氧化,改善因TAA而受损的线粒体呼吸功能。

关键词：硫代乙酰胺鲨鱼肝刺激物肝损伤脂质过氧化线粒体功能

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肿瘤脂类异常代谢的研究进展

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中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第1期8卷 15-19页

作者：缪明永第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

脂类是三大营养素之一,除与能量供应和储存密切相关外,还具有两方面作用：一是细胞的主要构建分子,脂类分子包括磷脂（甘油磷脂和鞘磷脂等）和胆固醇,是细胞膜的主要成分,脂类代谢改变直接影响细胞膜合成和细胞增殖;二是细胞生命活动中... 详细信息

脂类是三大营养素之一,除与能量供应和储存密切相关外,还具有两方面作用：一是细胞的主要构建分子,脂类分子包括磷脂（甘油磷脂和鞘磷脂等）和胆固醇,是细胞膜的主要成分,脂类代谢改变直接影响细胞膜合成和细胞增殖;二是细胞生命活动中的重要活性分子,脂类分子及其代谢中间物可参与细胞多种信号转导,炎症、血管调节等,并与细胞增殖、细胞黏附和运动等密切相关。

关键词：脂类异常代谢膜合成三大营养素细胞增殖甘油磷脂活性分子细胞生命细胞黏附信号转导

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鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗小鼠急性肝损伤作用

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 227-228页

作者：范秋领金艳黄才国冯波魏善建缪辉南焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

肝刺激物(hepatic stimulator substance,HSS)是从初断乳大鼠肝和部分肝切除后的再生肝中发现的一种肝脏刺激因子,它存在于新生肝和再生肝的肝细胞胞液中,能刺激肝细胞有丝分裂,促进肝细胞再生和肝细胞DNA的合成.与其他肝细胞因子不同,... 详细信息

肝刺激物(hepatic stimulator substance,HSS)是从初断乳大鼠肝和部分肝切除后的再生肝中发现的一种肝脏刺激因子,它存在于新生肝和再生肝的肝细胞胞液中,能刺激肝细胞有丝分裂,促进肝细胞再生和肝细胞DNA的合成.与其他肝细胞因子不同,HSS的作用只有组织特异性,而没有种属特异性,目前已从猪、狗、兔等多种动物的乳肝组织及人胎肝组织提取出HSS.大量研究证明,从哺乳动物提取的HSS对CCl4、D-(+)-氨基半乳糖、硫代乙酰胺(TAA)、乙醇造成的大鼠急性肝损伤有明显的保护作用[1,2].研究表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况[3].本文探讨了其对小鼠急性肝损伤的影响.

关键词：肝刺激物肝细胞增殖急性肝损伤

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