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中国药理学与毒理学杂志 2003年第4期17卷 281-285页

作者：陈蓉芳张天宝印木泉朱江波郭苗莉第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

目的　为筛选、克隆小鼠短指 /缺指畸形肢体的特异表达基因 ,构建了GD18小鼠畸形肢体 (短指 /缺指 )与正常肢体的差异表达的cDNA消减文库。方法　应用抑制消减杂交技术 (SSH ) ,结合PCRcDNA合成法 ,将从总RNA中合成的双链cDNA ,酶切成... 详细信息

目的　为筛选、克隆小鼠短指 /缺指畸形肢体的特异表达基因 ,构建了GD18小鼠畸形肢体 (短指 /缺指 )与正常肢体的差异表达的cDNA消减文库。方法　应用抑制消减杂交技术 (SSH ) ,结合PCRcDNA合成法 ,将从总RNA中合成的双链cDNA ,酶切成平均大小为 4 0 0～ 6 0 0bp的片段 ,经接头连接 ,两次消减杂交和两次抑制性PCR后 ,将产物与T/A载体连接构建cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 ,菌液PCR筛选有插入片段的SSH克隆。结果　成功地构建了GD18小鼠畸形肢体(短指 /缺指 )差异表达的cDNA消减文库 ,从中挑取2 75个克隆进行菌液PCR分析 ,结果显示其中 2 5 5均得到 2 0 0～ 6 0 0bp插入片段。结论　SSH与PCR合成双链cDNA ,是一种自微量总RNA中构建高特异性的差异表达cDNA消减文库的有效方法。消减文库的构建 ,有助于筛选、克隆小鼠短指

关键词：短指少指基因表达基因文库

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化学物质诱发的小鼠肢体畸形动物模型的建立

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 658-660页

作者：陈蓉芳张天宝印木泉朱江波郭苗莉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不... 详细信息

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不同剂量和不同给药时间的胎鼠畸形率、畸形类型及特征。结果 :孕期第 12天一次给予 MNNG4 0 m g/ kg时 ,胎鼠畸形类型主要为肢体畸形 ,肢体畸形率以活胎计为 33.7% (31/ 92 ) ,以窝计为 81.8% (9/ 11) ,肢体畸形占畸形胎鼠的构成比为 10 0 %。畸形类型以短指 (趾 )和缺指 (趾 )最常见。四肢畸形的发生率和严重程度存在不对称性 ,依次为左后 >左前 >右后 >右前。掌跖骨缺失和骨化不全发生率较高 ,此外还有胫腓骨的缺失和骨化不全 ,特别是大体形态所见短肢是胫腓骨缺失所致。结论 :成功建立了小鼠肢体畸形动物模型。

关键词：肢体畸形动物模型化学物质诱发分子机制发育

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毒理学的挑战、机遇和发展趋势

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卫生毒理学杂志 2003年第1期17卷 2-5页

作者：张天宝第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

近几年来，有关21世纪毒理学面临的挑战和未来的发展趋势一直受到人们的关注，如2001年召开的国际独立学大会（ICT-IX）将此作为会议的主题。对此问题仁者见仁，智者见智。有人认为毒理学将迎来大发展的新时代，也有人认为毒理学的发展... 详细信息

近几年来，有关21世纪毒理学面临的挑战和未来的发展趋势一直受到人们的关注，如2001年召开的国际独立学大会（ICT-IX）将此作为会议的主题。对此问题仁者见仁，智者见智。有人认为毒理学将迎来大发展的新时代，也有人认为毒理学的发展不容乐观。但不管如何看，进一步明确毒理学面临的挑战，弄清其社会需求，正确把握发展趋势，抓住机遇，对发展我国的毒理学无疑是非常重要的。为此，浅谈一点个人的看法。

关键词：毒理学社会需求发展趋势安全性评价

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3种磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用

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第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2237-2239页

作者：王文良吴岳嵩焦炳华杨柳许建中娄永华第三军医大学附属西南医院骨科重庆400038 第二军医大学附属长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础医学部分子毒理学教研室上海200433

目的　比较 3种不同磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用。方法　PE颗粒、TI 6Al 4V颗粒、Co Cr Mo颗粒加入体外原代培养的人成骨细胞 ,噻唑蓝 (MTT)比色试验检测细胞存活和生长。用酶联免疫检测仪在 490nm波长处测定其吸光度值 ,... 详细信息

目的　比较 3种不同磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用。方法　PE颗粒、TI 6Al 4V颗粒、Co Cr Mo颗粒加入体外原代培养的人成骨细胞 ,噻唑蓝 (MTT)比色试验检测细胞存活和生长。用酶联免疫检测仪在 490nm波长处测定其吸光度值 ,可间接反映活细胞数量。结果　不同浓度、不同磨损颗粒对原代培养成骨细胞成活无明显影响。结论　不同浓度、不同磨损颗粒对原代培养成骨细胞成活无明显影响。

关键词：磨损颗粒成骨细胞人工关节无菌性松动细胞培养

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Bax、Bcl-2及FHIT在胰腺癌中的表达及意义

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胰腺病学 2003年第1期3卷 30-32页

作者：蔡清萍张军初王梁华付志仁焦炳华王强第二军医大学长征医院普外科上海200003 第二军医大学基础部卫生毒理教研室

目的研究胰腺癌组织及细胞中Bax/Bcl-2蛋白和FHIT mRNA的表达,探讨FHIT与凋亡相关因子在胰腺癌中的关系。方法应用ABC免疫组织化学方法检测胰腺癌细胞和组织标本中Bax与Be1-2蛋白,RT-PCR检测其中FHIT mRNA的表达。结果 38例胰腺癌中Ba... 详细信息

目的研究胰腺癌组织及细胞中Bax/Bcl-2蛋白和FHIT mRNA的表达,探讨FHIT与凋亡相关因子在胰腺癌中的关系。方法应用ABC免疫组织化学方法检测胰腺癌细胞和组织标本中Bax与Be1-2蛋白,RT-PCR检测其中FHIT mRNA的表达。结果 38例胰腺癌中Bax蛋白阳性17例(45％),Bcl-2蛋白阳性表达22例(58％),FHIT mRNA异常表达为21例(56％)。转染有外源性FHIT的1990细胞(1990 pFHIT)Bax表达阳性率有升高,Bcl-2/Bax比值下降。结论 Bax、Bcl-2及FHIT都通过调控凋亡参与胰腺癌的病理过程。FHIT诱导凋亡可能与Bax上调表达有关。

关键词：凋亡相关基因 FHIT 胰腺肿瘤

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xylE转基因小鼠的繁育及其纯合子的筛选

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中国比较医学杂志 2003年第4期13卷 200-203页

作者：陈建泉罗金平黄建成国祥曹洁印木泉徐少甫上海转基因研究中心上海201203 上海第二军医大学卫生毒理学教研室

目的　进行转基因小鼠的繁育与纯合子转基因小鼠的筛选。方法　选用致突变xylE转基因原代小鼠 31号和 9号进行传代 ,自F2 起采用全同胞交配繁育至F3。结果　转基因能遗传且各世代转基因小鼠表型无异常 ,亦未见近交衰退现象。经不同世代... 详细信息

目的　进行转基因小鼠的繁育与纯合子转基因小鼠的筛选。方法　选用致突变xylE转基因原代小鼠 31号和 9号进行传代 ,自F2 起采用全同胞交配繁育至F3。结果　转基因能遗传且各世代转基因小鼠表型无异常 ,亦未见近交衰退现象。经不同世代载体回收和转化检验表明 ,靶基因功能未因世代传递而改变 ,并从 31号系的F3中筛选出一只纯合雄鼠 ,经与非转基因雌鼠交配所产 4窝 2 8只小鼠 ,PCR Southern检测均呈阳性 ,证实为一纯合子。结论　xylE转基因能遗传 ,4个世代内便筛选出纯合子小鼠 ,极大地缩短了育种周期。

关键词：转基因小鼠纯合子染色体繁育

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青八宝丹皮肤用药毒性和过敏性实验研究

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辽宁中医杂志 2003年第11期30卷 947-948页

作者：万春发毕洁上海市中医医院门诊部上海200041 第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

为探讨青八宝丹用药安全性评价研究 ,通过白兔皮肤用药及豚鼠皮肤致敏试验 ,显示青八宝丹对皮肤粘膜无毒性、无刺激性、无过敏性。

关键词：青八宝丹毒性试验过敏性试验

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五种多环芳烃对大鼠子宫雌激素受体影响的实验研究

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卫生研究 2002年第3期31卷 154-156页

作者：杨建军印木泉第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

采用大鼠子宫湿重实验和体外雌激素受体结合实验评价了 5种多环芳烃的拟雌激素活性。结果表明苯并 (a)芘、7,12 -二甲基苯并蒽和 2 ,3,6 ,7-二苯并蒽的中、高剂量可导致初断乳大鼠子宫湿重明显增加 (P 0 0 5 )。苯并 (a)芘、7,12 -二... 详细信息

采用大鼠子宫湿重实验和体外雌激素受体结合实验评价了 5种多环芳烃的拟雌激素活性。结果表明苯并 (a)芘、7,12 -二甲基苯并蒽和 2 ,3,6 ,7-二苯并蒽的中、高剂量可导致初断乳大鼠子宫湿重明显增加 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。苯并 (a)蒽和 1,2 -苯并菲各剂量均不引起大鼠子宫湿重明显增加 (P >0 0 5 )。苯并 (a)芘、7,12 -二甲基苯并蒽和 2 ,3,6 ,7-二苯并蒽能明显抑制雌二醇与雌激素受体的结合 (P <0 0 1)。苯并 (a)蒽和 1,2 -苯并菲各剂量均不能明显抑制雌二醇与雌激素受体的结合 (P >0 0 5 )。通过体内外实验表明苯并 (a)芘、7,12 -二甲基苯并蒽和 2 ,3,6 ,7-二苯并蒽具有明显的拟雌激素活性 ,而苯并 (a)蒽和 1,2

关键词：多环芳烃大鼠子宫雌激素受体实验研究

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人支气管上皮细胞c-Ha-ras^(V12G)基因转染细胞系促癌剂检测模型的建立

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第二军医大学学报 2002年第1期23卷 54-56页

作者：吴涛印木泉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及... 详细信息

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及血清抗性等表型改变对受试细胞进行了恶性程度检测。结果 :(1)在促癌剂 PMA作用下 ,BEAS- 2 B基因转染细胞发生了恶性转化 ;(2 )表达突变 ras基因的上皮细胞 ,在大剂量 PMA(>1μmol)的急性刺激 (2 4h)下 ,可诱导细胞死亡 ;(3)随着细胞恶性程度的增加 ,某些促癌剂的促细胞分化作用将减弱 ,并有生长刺激作用。结论 :该模型可用于促癌剂的检测及促癌作用机制研究。

关键词：基因转染细胞佛波醇酯促癌剂支气管上皮细胞

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2,3,6,7二苯并蒽对大鼠生殖内分泌影响的研究

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卫生毒理学杂志 2002年第2期16卷 82-83页

作者：杨建军印木泉第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433

目的　探讨 2 ,3 ,6 ,7 二苯并蒽对切除卵巢大鼠生殖内分泌和子宫雌激素受体的影响。方法　应用放射免疫法 (RIA)和放射配体受体法。结果　 2 ,3 ,6 ,7 二苯并蒽在皮下注射 5d后 ,低及高剂量均可导致切除卵巢的大鼠子宫湿重明显增加 (P ... 详细信息

目的　探讨 2 ,3 ,6 ,7 二苯并蒽对切除卵巢大鼠生殖内分泌和子宫雌激素受体的影响。方法　应用放射免疫法 (RIA)和放射配体受体法。结果　 2 ,3 ,6 ,7 二苯并蒽在皮下注射 5d后 ,低及高剂量均可导致切除卵巢的大鼠子宫湿重明显增加 (P <0 0 1 )。低及高剂量组大鼠子宫雌激素受体数量与对照组比 ,差异无显著性 (P >0 0 5) ,但高剂量组大鼠子宫雌激素受体亲和力明显高于对照组 (P <0 0 5)。低及高剂量组血清中卵泡刺激素 (FSH)含量与对照组比 ,差异无显著性 (P >0 0 5) ,低及高剂量组血清中黄体生成素 (LH)含量明显降低 (P <0 0 1 ,P <0 0 5) ,高剂量组血清中催乳素(PRL)含量明显增加 (P <0 0 5)。结论　 2 ,3,6,7 二苯并蒽雌激素活性的作用机制可能是干扰下丘脑—垂体—卵巢轴对生殖内分泌的调控。

关键词： 2,3,6,7-二苯并蒽生殖内分泌子宫雌激素放射免疫法放射配体受体法 RIA

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