检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2010年第2期31卷 152-156页

作者：李淑华方美玉刘世建常文军王珊珊曹广文第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 广州军区疾病预防控制中心微生物研究室广州510000

目的建立一种单管巢式多重RT-PCR方法,以用于临床对于不同型别登革病毒混合感染的检测并分型。方法将1-4型登革病毒RNA混合,首先用1-4型病毒通用外引物进行一步法RT-PCR,然后以混合病毒RT-PCR产物为模板,在同一反应管内同时加入4对（5... 详细信息

目的建立一种单管巢式多重RT-PCR方法,以用于临床对于不同型别登革病毒混合感染的检测并分型。方法将1-4型登革病毒RNA混合,首先用1-4型病毒通用外引物进行一步法RT-PCR,然后以混合病毒RT-PCR产物为模板,在同一反应管内同时加入4对（5条）型特异性引物进行巢式多重PCR,结果用EB染色的3%琼脂糖凝胶电泳观察;并将其检测敏感性和特异性与该方法的单一病毒模板RNA扩增进行比较。结果经反应条件的优化,混合病毒模板单管巢式多重PCR可以在同一反应管内同时扩增出4条病毒特异性目的条带,分别为482、119、290、389 bp。其敏感性和特异性与单一病毒RNA的扩增相当,对模板RNA检测的敏感性可以达到66.068 copies/μl。结论该方法简便、快速、敏感、特异,可以根据扩增目的片段的大小进行诊断和分型,对于临床登革病毒混合感染病例的诊断和快速分型有应用价值。

关键词：登革病毒混合感染单管巢式多重聚合酶链反应

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新型甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1114-1117页

作者：邵圣文周洪昌徐伯赢刘小青方静王岳陈志辉湖州师范学院医学院微生物学教研室 313000 第二军医大学微生物学教研室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、分子病毒与遗传工程国家重点实验室第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋... 详细信息

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋白为包被抗原,测定小鼠血清中2009HA抗体总量或交叉反应抗体含量,分别用2009H1N1和1918H1N1两种假病毒（pp）测定抗体中和活性.结果 25 μg或200μg的2009HA质粒加强免疫小鼠后,4～16周内两组小鼠血清中2009HA总抗体水平以及对2009H1N1pp的中和抗体滴度相似（P〉0.05）,都含有与1918HA蛋白交叉反应抗体,对1918H1N1pp的交叉中和抗体滴度相似（P〉0.05）.结论小剂量2009HA质粒DNA疫苗能够诱导小鼠产生持久的高水平中和抗体,对于预防新现流感病毒具有潜在应用价值.

关键词：新型甲型流感病毒血凝素 DNA疫苗中和抗体假病毒

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构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库

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安徽医科大学学报 2010年第6期45卷 729-733页

作者：黄德圣潘卫曹洁庞强唐萍廖文婷李存枚陈秋莉邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通... 详细信息

目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3'端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANT-AB5S,克隆产物转化***5α,提取原代库质粒转化***1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为1.87×107cfu,滴度为1.3×1014TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性。结论成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求。

关键词：细菌噬菌体/遗传学

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军医院校微生物学教学改革探讨

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2010年第2期12卷 115-117页

作者：王文任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

针对医学微生物学的知识结构特点、学科迅速发展的现状,以及军队院校的特色,初步探讨了新形势下开展医学微生物学教学工作应注意的"三个结合",即基础知识教学与临床实践相结合;更新书本内容与国际先进知识理念相结合;突出军... 详细信息

针对医学微生物学的知识结构特点、学科迅速发展的现状,以及军队院校的特色,初步探讨了新形势下开展医学微生物学教学工作应注意的"三个结合",即基础知识教学与临床实践相结合;更新书本内容与国际先进知识理念相结合;突出军队院校特色与国际国内形势相结合,并据此提出具体的措施。

关键词：微生物学教学改革军医院校

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人精液源性病毒感染增强因子研究进展

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国际生物制品学杂志 2010年第2期33卷 76-79页

作者：张华群(综述) 曹洁潘卫(审校) 第二军医大学微生物学教研室上海200433

人精液前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phosphatase, PAP）多肽片段形成的淀粉样原纤维具有促进人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）感染的作用，这些原纤维被称为精液源性病毒感染增强因子（semen-derived enhan... 详细信息

人精液前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phosphatase, PAP）多肽片段形成的淀粉样原纤维具有促进人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）感染的作用，这些原纤维被称为精液源性病毒感染增强因子（semen-derived enhancer of viral infection, SEVI），其中PAP第248—286位多肽片段（PAP248-286）促进HIV感染的作用最强。具有阳离子特性的SEVI可通过静电作用捕获HIV颗粒而促进HIV感染。近期研究报道，SEVI对异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒感染也有增强作用，可能与前列腺癌发生有关。某些多聚阴离子化合物和绿茶多酚成分能明显抑制SEVI活性。研究SEVI生物学特性及其功能对于HIV等病毒感染的防治具有重要意义。

关键词： HIV感染静电作用抑制化学性精液源性病毒感染增强因子前列腺酸性磷酸酶

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中华按蚊热激蛋白40（HSP40）cDNA序列的全长扩增

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国际医学寄生虫病杂志 2010年第3期37卷 132-135页

作者：李云华朱诗应孙庆文朱淮民第二军医大学病原生物学教研室上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学数理教研室上海200433

目的为获取中华按蚊感染约氏疟原虫后24 h的高表达基因热激蛋白40（HSP40）cDNA的全长序列. 方法运用抑制性消减杂交技术（suppression substractive hybridization,SSH）构建中华按蚊感染约氏疟原虫后24 h的差异表达基因文库,从高表... 详细信息

目的为获取中华按蚊感染约氏疟原虫后24 h的高表达基因热激蛋白40（HSP40）cDNA的全长序列. 方法运用抑制性消减杂交技术（suppression substractive hybridization,SSH）构建中华按蚊感染约氏疟原虫后24 h的差异表达基因文库,从高表达文库中获得长度为363 bp的HSP40基因的cDNA片段,运用RACE技术对其cDNA序列进行全长扩增. 结果获得中华按蚊HSP40 cDNA的全长序列,总长度为1 159 bp,开放阅读框为1 014 bp,编码337个氨基酸. 结论获得了中华按蚊HSP40 cDNA的全长序列.

关键词：疟原虫热激蛋白差异表达基因全长扩增

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ELISA方法检测肝癌血清标志物的应用

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中国生物制品学杂志 2010年第3期23卷 307-309页

作者：王文王锦红缪晓辉 Mark A Feitelson 戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 上海长征医院感染科上海200003 Department of Biology College of Science and TechnologyTemple University

目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324... 详细信息

目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324份HBV感染后的肝癌、肝硬化及肝炎患者血清样本中,2种或2种以上指标阳性比例分别为77.6%、76.1%和52.5%,肝癌患者3种或3种以上指标阳性比例较肝硬化和肝炎患者分别高39.9%和310%;在正常献血员、药物性肝炎、酒精性肝炎及其他类型的癌症患者中,87.5%～100%的患者肝癌血清标志物分子≤1种;URG7是最早出现的抗体阳性标志物分子,URG11和S15a抗体则在进展后期或已发展为肝癌的患者血清中呈优势比例出现。结论5种肝癌血清标志物分子与肝癌发生的风险呈正相关,已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法可用于肝癌高危人群的筛选及小肝癌的早期诊断,作为目前AFP和MRI诊断方法的有益补充。

关键词：肝癌血清标志物 ELISA

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丙型肝炎病毒受体与抗病毒新药研究

丙型肝炎病毒受体与抗病毒新药研究

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中华医学会2010’全国临床微生物及感染免疫学术研讨会

作者：戚中田第二军医大学微生物学教研室上海 200433

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2009甲型H1N1流感病毒新进展

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医学研究生学报 2010年第1期23卷 90-93页

作者：李广波潘欣第二军医大学微生物学教研室上海医学硕士研究生200433

甲型猪源性流感病毒属正粘病毒科,其可引起猪、禽和人的上呼吸道感染。2009年3月在美国和墨西哥的流感样患者的呼吸道标本中检测出新的不能分型的甲型流感病毒,并经确认为甲型H1N1流感病毒(简称2009甲型H1N1流感病毒)。这种病毒在美国... 详细信息

甲型猪源性流感病毒属正粘病毒科,其可引起猪、禽和人的上呼吸道感染。2009年3月在美国和墨西哥的流感样患者的呼吸道标本中检测出新的不能分型的甲型流感病毒,并经确认为甲型H1N1流感病毒(简称2009甲型H1N1流感病毒)。这种病毒在美国和墨西哥引起暴发流行,并蔓延到世界各地,引起一些感染者死亡。文中综述了2009甲型H1N1流感病毒在基因分型、抗原特征、传播特点、致病特点、治疗等方面与已知各流感病毒不同的特征。

关键词：甲型H1N1流感病毒流感病毒基因型抗原变异 RT—PCR

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改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中的有效氯含量

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中国卫生检验杂志 2010年第3期20卷 531-532,569页

作者：阮芳铭左晋桐沈志雷周利梅俞镔炯朱时应曹广文张迁常文军第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室上海200433 空军青岛航空医学鉴定训练中心山东青岛266071 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的：研究与验证改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中有效氯含量的效果。方法：取漂白粉精片、二氯异氰尿酸钠和三氯异氰尿酸消毒液各3个样品,每一样品的有效氯含量按本法各测定5次,以此进行精密度试验;另各取10份同一漂白粉精片和... 详细信息

目的：研究与验证改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中有效氯含量的效果。方法：取漂白粉精片、二氯异氰尿酸钠和三氯异氰尿酸消毒液各3个样品,每一样品的有效氯含量按本法各测定5次,以此进行精密度试验;另各取10份同一漂白粉精片和二氯异氰尿酸钠消毒液,分别用本法和国标碘量法测定其有效氯含量,比较两种方法的测定结果。结果：精密度平行对照实验显示,测定3种不同含氯消毒剂有效氯含量（%）,其标准差（SD）和相对标准偏差（RSD）分别为：SD=±0.27～0.42,RSD=0.73%～1.12%（漂白粉精片）、SD=±0.35～0.57,RSD=0.86%～1.40%（二氯异氰尿酸钠）和SD=±0.42～0.65,RSD=0.80%～1.25%（三氯异氰尿酸）;本法与国标碘量法比较,两者测定结果的均值经t检验无显著性差异（P0.05）。结论：本法测定结果的精确度与国标碘量法基本一致,适用于平时及野外特殊条件下饮水消毒中有效氯含量的测定。

关键词：有效氯含量测定结果碘量法地震二氯异氰尿酸钠三氯异氰尿酸含氯消毒剂漂白粉饮水消毒两种方法

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