检索结果-内蒙古大学图书馆

医疗卫生装备 2009年第8期30卷 1-5页

作者：潘欣祁建城郑兴东龙明何流李广波第二军医大学微生物学教研室上海200433 国家生物防护装备工程技术研究中心天津300161 上海拓领医药科技有限公司上海200042

目的:研制一种可自动控制的中动物饲养隔离系统。方法:根据生物安全工作的实际实验流程设计整个隔离系统及其相关的传递链、消毒链、空气负压隔离系统、动物福利系统和自动控制系统。结果:隔离系统结构图符合专利申报、生产组装要求,样... 详细信息

目的:研制一种可自动控制的中动物饲养隔离系统。方法:根据生物安全工作的实际实验流程设计整个隔离系统及其相关的传递链、消毒链、空气负压隔离系统、动物福利系统和自动控制系统。结果:隔离系统结构图符合专利申报、生产组装要求,样机进入动物实验验证阶段。结论:该智能化系统有望为高等级生物安全实验室受病原体感染的中动物实验提供安全防护硬件支撑。

关键词：自动控制中动物隔离器生物安全

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丙型肝炎病毒包膜E2蛋白DNA疫苗主要诱导HVR1中和抗体

丙型肝炎病毒包膜E2蛋白DNA疫苗主要诱导HVR1中和抗体

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中国医师协会输血分会2009年第三届输血学术年会

作者：乐爱平陈志辉童一民邵圣文南昌大学第一附属医院输血科南昌330006 第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433 湖州师范学院医学院创新实验室湖州313000

目的：探讨HCV包膜E2蛋白DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的可行性。方法：构建HCV包膜蛋白截除疏水性羧基末端的表达质粒pcDNA3-1-1b661以及同时截除疏水性羧基末端和高变区1(HVR1)的表达质粒pcDNA3.1-1b661△，转染293T细胞，以Weste... 详细信息

目的：探讨HCV包膜E2蛋白DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的可行性。方法：构建HCV包膜蛋白截除疏水性羧基末端的表达质粒pcDNA3-1-1b661以及同时截除疏水性羧基末端和高变区1(HVR1)的表达质粒pcDNA3.1-1b661△，转染293T细胞，以Western blot和ELISA检测细胞内和培养上清中的HCVE2蛋白，将2种表达质粒以及空载体分别肌注免疫BALB/c小鼠，检测小鼠血清的E2及HVR1抗体，以HCV假病毒模型分析小鼠血清的中和活性。结果：2种E2表达质粒均能有效表达HCV E2蛋白，缺失HVR1不影响E2蛋白的表达和分泌。两种质粒免疫均可有效诱导小鼠的体液免疫应答，但pcDNA3.1-1b661免疫血清对HCV假病毒颗粒(HCVpp)的中和活性明显高于pcDNA3.1-1b661△免疫血清。pcDNA3.1-1b661免疫血清中的HVR1抗体量仅占总E2抗体的一小部分，却是中和抗体的重要成分。结论：表达E2蛋白的DNA疫苗能有效诱导HCV中和抗体的产生，HVR1不仅是重要的中和抗体表位，而且能增强E2蛋白其他抗原表位的抗体应答。

关键词：丙型肝炎病毒 HCV包膜E2蛋白 DNA疫苗中和抗体诱导表达

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合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用

合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：王文王锦红缪晓辉 Mark A Feitelson 戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 上海长征医院感染科上海200003 Department of Biology College of Science and TechnologyTemple UniversityPhiladelphiaPA 19122Unit

目的：建立用合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物的ELISA方法，并进行初步应用。方法：利用已经筛选到的5种与乙型肝炎病毒X抗原(HBx)诱导肝癌相关的细胞蛋白URG4、URG7、URG11、S15a和Suil，作为原发性肝癌的筛查和早期诊断的... 详细信息

目的：建立用合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物的ELISA方法，并进行初步应用。方法：利用已经筛选到的5种与乙型肝炎病毒X抗原(HBx)诱导肝癌相关的细胞蛋白URG4、URG7、URG11、S15a和Suil，作为原发性肝癌的筛查和早期诊断的血清标志物，根据上述5种蛋白的序列合成多肽(L4A/L4B、L7B、L11-1/L11-3/L11-4、L12A/L12B和SuilA/SuilB)，作为检测抗原，建立检测上述标志物抗体的间接ELISA方法，并进行敏感性、特异性、精密性评价及临床应用。结果：以合成多肽为包被抗原的间接ELlSA检测方法，敏感性为93.5％、特异性为97.9％、试验内和试验间变异系数分别为3.8％～5.6％和7.4％～10.3％;检测161份肝癌、肝硬化及乙型肝炎患者血清样本中，1种指标以上阳性检出率分别为90.4％、92.6％和61.7％，2种指标以上阳性检出率分别为78.6％、70.6％和48.3％;39份正常献血员血清中，1种指标以上阳性检出率为12.2％，2种指标以上阳性率为6.3％。结论：所建立的检测原发性肝癌血清标志物的ELISA方法，可用于原发性肝癌高危人群的筛选和小肝癌的早期诊断，可作为目前的AFP和MRI诊断方法的有益补充。

关键词：原发性肝癌免疫学检验血清抗体多肽抗原

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巨噬细胞过氧化物酶体与鼠伤寒沙门菌相互作用的初步分析

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解放军医学杂志 2008年第4期33卷 407-409页

作者：潘欣第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的观察巨噬细胞过氧化物酶体在鼠伤寒沙门菌感染中的作用。方法将感染及未感染鼠伤寒沙门菌的鼠巨噬细胞RAW264.7以氮气压迫法裂解,逐级离心,用制备的TassC多抗磁珠纯化得到粗提液,用Western blot法鉴定TassC多抗磁珠与细胞结合物的性... 详细信息

目的观察巨噬细胞过氧化物酶体在鼠伤寒沙门菌感染中的作用。方法将感染及未感染鼠伤寒沙门菌的鼠巨噬细胞RAW264.7以氮气压迫法裂解,逐级离心,用制备的TassC多抗磁珠纯化得到粗提液,用Western blot法鉴定TassC多抗磁珠与细胞结合物的性质;用pDs Red2-Perxi质粒转染RAW264.7细胞以标记细胞中的过氧化物酶体,用三维荧光显微镜观察感染细胞中过氧化物酶体(红色)与表达绿色荧光蛋白的鼠伤寒沙门菌突变株的相互作用。结果Western blot分析显示TassC多抗磁珠可以结合细胞内的TassC,并与细胞内的过氧化物酶体结合,也可以与感染细胞中的iNOS结合,而未感染样本中未检测到iNOS。磁珠洗脱物中未检测到溶酶体标志物LAMP1,也未检测到受染菌标志物;免疫荧光显示感染的巨噬细胞中过氧化物酶体聚集在鼠伤寒沙门菌突变株SCV周围,甚至发生重叠,随感染时间延长(1h或24h),过氧化物酶体数量增加(1.2倍或1.3倍),而胞内菌数量下降。结论TassC可能定位于过氧化物酶体而不是溶酶体;感染鼠伤寒沙门菌的巨噬细胞中iNOS可能与过氧化物酶体结合而参与杀灭微生物的作用。

关键词：巨噬细胞过氧化物酶体类沙门菌,鼠伤寒

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HIV-1 HXB2株蛋白酶的原核表达、纯化及其Gag蛋白CAP2NC的切割活性分析

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第二军医大学学报 2008年第4期29卷 365-370页

作者：陈铭潘欣贾建安何俊蒋少华陈璐姚静娟陈秋莉曹洁潘卫第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理学教研室合肥230032 第二军医大学长征医院感染科上海200003

目的:原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(protease,PR),用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选及构建新的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)类药物体外筛选模型。方法:根据HIV-1 HXB2株PR DN... 详细信息

目的:原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(protease,PR),用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选及构建新的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)类药物体外筛选模型。方法:根据HIV-1 HXB2株PR DNA序列设计引物,在PR序列上游添加自切割位点MGTVSFNF 8个氨基酸编码获得PR107 DNA编码序列,将PR107 DNA克隆至原核表达载体pET-32a,序列测定后转化大肠杆菌BL21 DE3进行诱导表达。表达产物经用Ni-NTA亲和柱纯化,经复性后,进行靶蛋白CAP2NC切割试验,SDS-PAGE检测切割结果。结果:成功合成了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1 PRl07的DNA编码序列,序列测定显示其编码氨基酸序列与原始序列完全一致;成功构建了HIV-1 PR原核表达质粒pETa2a—PR107,转化大肠杆菌BL21 DE3经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为30 000的HIV-1 PR融合蛋白,纯化的目的蛋白浓度为2.54 mg/ml;纯化蛋白经复性后具有对底物蛋白CAP2NC的切割活性,该作用能被PI药物抑制。结论:成功构建大肠杆菌偏好密码子带自切割位点的HIV-1 PR原核表达载体pET32a—PR107,在大肠杆菌中表达,经纯化复性获得了具有切割活性的HIV-1 PR融合蛋白。

关键词： HIV 蛋白酶基因表达切割

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丙型肝炎病毒的细胞入侵和相关受体

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生命的化学 2008年第1期28卷 36-39页

作者：刘媛丁惠戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)入侵细胞的过程由多种细胞受体介导,目前已鉴定出人CD81、SR-BI、LDLr、L-SIGN、DC-SIGN、ASGPR、Claudin-1等为HCV的受体。对HCV入侵机制的研究,有助于对HCV入侵的各个环节进行阻断和干预,从而达到... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)入侵细胞的过程由多种细胞受体介导,目前已鉴定出人CD81、SR-BI、LDLr、L-SIGN、DC-SIGN、ASGPR、Claudin-1等为HCV的受体。对HCV入侵机制的研究,有助于对HCV入侵的各个环节进行阻断和干预,从而达到预防或/和治疗的目的。近年来,HCVpp及HCVcc模型的建立为HCV入侵细胞的研究提供了重要平台。该文从HCV细胞入侵的研究模型、HCV的细胞受体和HCV入侵细胞的影响因素三方面,综述HCV细胞入侵的研究进展。

关键词：丙型肝炎病毒细胞入侵受体 HCVpp HCVcc

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地震灾后常见的病原体与疫病防控

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第二军医大学学报 2008年第6期29卷 590-593页

作者：戚中田第二军医大学基础部微生物学教研室、军队医学微生物学重点实验室、上海市医学生物防护重点实验室上海200443

大地震后常发生疫病流行,灾后常流行的疫病主要是:肠道传染病(痢疾、伤寒和副伤寒、霍乱、手足口病、甲肝和戊肝等)、虫媒传染病(疟疾、黑热病、乙脑等)、动物源性疾病(鼠疫、肾综合征出血热、炭疽等)、土壤和疫水传播的疾病(破伤风、... 详细信息

大地震后常发生疫病流行,灾后常流行的疫病主要是:肠道传染病(痢疾、伤寒和副伤寒、霍乱、手足口病、甲肝和戊肝等)、虫媒传染病(疟疾、黑热病、乙脑等)、动物源性疾病(鼠疫、肾综合征出血热、炭疽等)、土壤和疫水传播的疾病(破伤风、气性坏疽、钩端螺旋体病等)、呼吸道疾病(麻疹、风疹和流感等)以及食源性疾病(细菌或细菌毒素引起的食物中毒等)。本文就灾后疫病的主要病原体及所致疫病的综合防控原则与方法做一介绍。

关键词：地震疾病暴发流行病原体预防和控制

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抗震救灾部队官兵皮肤病发病率及其影响因素分析

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第二军医大学学报 2008年第7期29卷 741-743页

作者：张迁常文军朱诗应阮芳铭曹广文第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学卫生勤务学系流行病学教研室上海200433 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 第二军医大学海军医学系军队卫生教研室上海200433

目的:调查汶川映秀镇抗震救灾部队官兵皮肤病的发病情况,分析其影响因素,并对营区内杀虫措施效果进行评价。方法:2008年6月15日至6月20日,以映秀镇的两支抗震救灾部队为研究对象,回顾性调查部队官兵在震后1个月内的皮肤病发病情况、帐... 详细信息

目的:调查汶川映秀镇抗震救灾部队官兵皮肤病的发病情况,分析其影响因素,并对营区内杀虫措施效果进行评价。方法:2008年6月15日至6月20日,以映秀镇的两支抗震救灾部队为研究对象,回顾性调查部队官兵在震后1个月内的皮肤病发病情况、帐篷卫生条件和杀虫措施实施情况等内容,采用χ2检验确定差异显著性。结果:映秀镇抗震救灾部队官兵在震后1个月的皮肤病发病率为42.20%,其中虫咬性皮炎和毛囊炎的构成比分别为82.05%和15.38%;震后1、2、4周的皮肤病发病率水平明显高于震前水平(P<0.05),震后4周发病率的升高与在山上过夜相关;采用2.5%溴氰菊酯等杀虫剂对帐篷内外环境进行杀虫,皮肤病发病率由震后2周的26.61%降低至震后3周的0.92%(P<0.05)。结论:抗震救灾部队官兵在震后皮肤病的发病率明显升高,震后恶劣的卫生环境、蚊虫叮咬是官兵皮肤病的主要因素,定期杀虫能有效降低皮肤病的发病率。

关键词：地震皮肤疾病发病率虫咬和虫螫

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丙型肝炎病毒高变区1模拟表位的交叉反应性分析

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病毒学报 2008年第4期24卷 249-254页

作者：杨苗赵平边中启任艳丽龚育平戚中田第二军医大学微生物学教研室全军医学微生物学重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 成都军区昆明总医院感染病中心昆明650032

研究丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)高变区1(Hypervariable region 1,HVR1)抗原表位的交叉反应性,获取高反应性的抗原表位。设计并合成5种HVR1模拟表位基因,构建编码HVR1模拟表位的表达载体,表达并纯化表位蛋白。ELISA法检测表位... 详细信息

研究丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)高变区1(Hypervariable region 1,HVR1)抗原表位的交叉反应性,获取高反应性的抗原表位。设计并合成5种HVR1模拟表位基因,构建编码HVR1模拟表位的表达载体,表达并纯化表位蛋白。ELISA法检测表位蛋白与35份HCV抗体阳性血清的交叉反应性。包装HCV假病毒(HCVpseudotype particles,HCVpp),评价表位蛋白免疫BALB/c鼠血清在假病毒感染Huh7.5细胞中的作用。结果表明,表达纯化的5种表位蛋白(P1、P2、P5、P6、P8)均可与HCV抗体阳性血清反应,阳性反应率分别为54.3%(P1)、62.9%(P2)、80%(P5)、68.6%(P6)、54.3%(P8)。表位蛋白P6、P8免疫BALB/c鼠血清对HCV假病毒感染Huh7.5细胞具明显的抑制作用。结果提示,选取的HVR1模拟表位在HCV感染免疫与疫苗研制中可能具有潜在的价值。

关键词：丙型肝炎病毒高变区1 模拟表位交叉反应性

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鼠伤寒沙门菌感染巨噬细胞铁稳态相关基因mRNA表达谱

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微生物学杂志 2008年第3期28卷 15-20页

作者：潘欣第二军医大学微生物学教研室上海200433

用荧光定量PCR法检测鼠RAW264.7巨噬细胞感染与未感染鼠伤寒沙门菌后18种铁穗态相关基因的表达,评估宿主与病原体相互作用中铁稳态效应。研究显示,活的鼠伤寒沙门菌感染巨噬细胞1 h后可以诱导转铁蛋白受体表达,引起细胞内动态铁池相关... 详细信息

用荧光定量PCR法检测鼠RAW264.7巨噬细胞感染与未感染鼠伤寒沙门菌后18种铁穗态相关基因的表达,评估宿主与病原体相互作用中铁稳态效应。研究显示,活的鼠伤寒沙门菌感染巨噬细胞1 h后可以诱导转铁蛋白受体表达,引起细胞内动态铁池相关基因的mRNA水平上长。基因表达分析显示,沙门菌通过诱导铁氧还原酶(Steap3)、铁膜转运蛋白(Dmt1)、铁调节因子Tfr2/Hfe以及铁调节蛋白(Irp1和Irp2)的表达主动吸收铁,而经铁转运蛋白(Fpn1)的铁外流并无明显改变。沙门菌在感染后1h积极地驱动了转铁蛋白介导的铁吸收程序。

关键词：巨噬细胞沙门菌铁稳态

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