检索结果-内蒙古大学图书馆

肝脏 2006年第5期11卷 348-350页

作者：邵圣文戚中田上海第二军医大学微生物学教研室医学微生物学重点实验室200433

丙型肝炎病毒(HCV)基因组长度约9.6kb,仅含有单个开放阅读框架(ORF),编码一个由约3010个氨基酸残基(aa)组成的多蛋白。在宿主细胞和病毒蛋白酶的作用下,多蛋白被加工成至少10个成熟的HCV蛋白质:C,E1,E2,p7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A和NS5B... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)基因组长度约9.6kb,仅含有单个开放阅读框架(ORF),编码一个由约3010个氨基酸残基(aa)组成的多蛋白。在宿主细胞和病毒蛋白酶的作用下,多蛋白被加工成至少10个成熟的HCV蛋白质:C,E1,E2,p7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A和NS5B。HCVC蛋白由191个aa组成,相对分子质量为23000,称为p23蛋白。p23羧基端aa被蛋白酶降解,就得到相对分子质量为21000的成熟C蛋白,称为p21蛋白。p21是HCV的重要结构蛋白,它与HCVRNA结合后形成病毒核心。Xu等证实HCVC基因还可以编码产生一个新的蛋白——F蛋白。近年来F蛋白成为HCV研究的热点之一。[第一段]

关键词：丙型肝炎病毒 F蛋白 HCVRNA 相对分子质量 p21蛋白开放阅读框架氨基酸残基病毒蛋白酶

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细菌内毒素耐受小鼠肝细胞内信号转导相关分子的表达变化

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微生物与感染 2006年第4期1卷 225-228,237页

作者：栾洁周炳荣丁惠戚中田第二军医大学微生物学教研室医学微生物学重点实验室上海200433

目的探讨细菌脂多糖(LPS)相关的信号转导分子在内毒素耐受小鼠肝细胞内的变化和作用。方法将实验小鼠随机分为3大组:敏感组以LPS(2μg)合并半乳糖胺(D-GalN)直接攻击;耐受组预先以LPS(0．1μg)注射,再在不同耐受时间点(3 h、1 d、2 d、7... 详细信息

目的探讨细菌脂多糖(LPS)相关的信号转导分子在内毒素耐受小鼠肝细胞内的变化和作用。方法将实验小鼠随机分为3大组:敏感组以LPS(2μg)合并半乳糖胺(D-GalN)直接攻击;耐受组预先以LPS(0．1μg)注射,再在不同耐受时间点(3 h、1 d、2 d、7 d)以LPS(2μg)/D-GalN联合攻击。对照组注射生理盐水、D-GalN或LPS(0．1μg);利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western印迹法)测定各信号分子在转录和表达水平的变化。结果LPS刺激可显著诱导敏感组小鼠肝细胞的Toll样受体(TLR)-4基因转录和蛋白表达;而在LPS预处理的耐受组,TLR-4 mRNA和蛋白的水平均明显低于敏感组(P＜0．01);耐受组中白细胞介素受体相关激酶1(IRAK-1)基因的表达水平也比敏感组明显低(P＜0．01)。但是肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)的表达水平则不受LPS预处理的影响。NF-κB组分分析显示,敏感组IκB的降解明显高于耐受组;耐受组的p65亚基表达显著降低,而p50亚基表达升高。结论内毒素耐受可使NF-κB的p65亚基表达下调、p50亚基表达升高和抑制IκB的降解,而TLR-4和IRAK-1的表达下调是诱导产生内毒素耐受性的重要因素。

关键词：脂多糖耐受信号转导

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细菌内毒素耐受的研究进展

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微生物学免疫学进展 2006年第3期34卷 41-44页

作者：栾洁戚中田第二军医大学微生物学教研室医学微生物学重点实验室上海200433

细菌内毒素或细菌脂多糖,是临床上引起全身性炎症综合征的主要原因,细菌内毒素或脂多糖耐受也是临床常见的现象,近年来有关细菌LPS耐受机制的研究倍受关注。本文就细菌LPS耐受引起巨噬细胞的变化,对细菌LPS耐受的分子机制进行阐述。

关键词：细菌脂多糖耐受巨噬细胞

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丙型肝炎病毒感染模型的研究进展

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热带医学杂志 2006年第1期6卷 91-93页

作者：龚育平戚中田第二军医大学微生物学教研室全军医学微生物学重点实验室上海200433

丙型肝炎病毒(HCV)自然宿主范围很窄,建立理想的实验模型便成为研究其生物学特征及进行药物筛选和疫苗效果评价的关键之一。本文就近年来在HCV感染模型这方面的研究进展作一综述。

关键词：丙型肝炎病毒细胞模型动物模型复制子

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HIV-1 HXB2株蛋白酶在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定

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中国生物制品学杂志 2006年第2期19卷 108-112页

作者：贾建安周波钱宝华蒋少华陈秋莉潘欣赵平任浩温宗梅邓松华卢洪洲潘卫第二军医大学微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理学教研室合肥230032 上海长海医院输血科上海200433 上海市公共卫生中心上海201508

目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1GagP2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选。方法根据HIV-1HXB2株PRDNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DN... 详细信息

目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1GagP2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选。方法根据HIV-1HXB2株PRDNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体进行测序。将HIV-1PRDNA克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE鉴定,并用HIV阳性血清进行免疫反应性的鉴定。结果合成的使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经测序显示其编码氨基酸序列与原始序列完全一致。所构建的HIV-1PR原核表达质粒pQE30-pr,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为14000的HIV-1PR蛋白,纯化的目的蛋白浓度为7.74mg/ml。ELISA检测该蛋白与HIV阳性血清呈特异性反应。结论已成功合成并克隆了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经表达及纯化的HIV-1PR蛋白具有免疫学特性。

关键词：人免疫缺陷病毒蛋白酶基因表达大肠杆菌 HIV-1 HXB2

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一株具有抗菌和细胞毒活性的海洋嗜盐菌XD20的筛选和鉴定

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 8-11页

作者：穆军焦炳华孙炳达刘杏忠第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学国家重点实验室北京100080

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体r... 详细信息

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体rDNA ITS区序列分析，并将所测得序列在NCBI数据库中进行相似性搜索，选取其中相似性较高的序列以邻接法构建系统进化树，将该菌株分类鉴定到种。结果：从我国东海海域C01站位（122°26′30″，30°43′48″）30m水深处分离获得一活性菌株XD20，是一嗜盐菌株，能耐受高达10．0％的盐浓度，合适的生长盐浓度范围为2．5％～7．5％；它对白念珠菌具有抑菌活性，对SMMC7721细胞株和HeLa细胞株具有细胞毒活性。以菌丝断裂方式产生节孢子，孢子大小及形态与Wallemia sebi相符；rDNAITS区测序发现，该菌株序列与Wallemia sebi的多条序列相似程度较高，且差异均在ITS1和ITS2区，属于可变区。结论：活性菌株XD20首次从海洋中分离获得，为一嗜盐海洋菌株，鉴定为Wallemia sebi（Fr．）Arx。

关键词：海洋嗜盐菌抗真菌活性细胞毒活性 XD20 海洋微生物

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能结合HCV E2蛋白的人CD81模拟肽的筛选与活性鉴定

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热带医学杂志 2006年第10期6卷 1055-1057,1067页

作者：廖小玲曹洁吴淑梅赵平高军戚中田第二军医大学微生物教研室军队医学微生物学重点实验室上海200433 第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的用CD81单克隆抗体筛选噬菌体随机展示十二肽库,以期得到可模拟人CD81功能位点、能抑制HCVE2与其受体—人CD81分子结合的小肽。方法用CD81单抗从噬菌体随机展示十二肽库中筛选人CD81模拟肽,用ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;以阳性噬菌体免... 详细信息

目的用CD81单克隆抗体筛选噬菌体随机展示十二肽库,以期得到可模拟人CD81功能位点、能抑制HCVE2与其受体—人CD81分子结合的小肽。方法用CD81单抗从噬菌体随机展示十二肽库中筛选人CD81模拟肽,用ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;以阳性噬菌体免疫BALB/c小鼠,分析小鼠免疫血清对阳性噬菌体与HCVE2结合的阻断作用;以HCVE2蛋白包被酶标板,检测阳性噬菌体对HCVE2与人CD81分子结合的抑制作用。结果对十二肽库进行3轮筛选后,经ELISA和DNA测序,鉴定出3个(C4,C13和C16)阳性克隆,与人CD81无同源序列。阳性噬菌体克隆C16免疫小鼠血清能阻断该克隆与HCVE2的结合。C16克隆能以剂量依赖的方式竞争性抑制HCVE2蛋白与人CD81的结合。结论用人CD81单抗从噬菌体随机展示肽库中筛选出的阳性噬菌体克隆所编码的小肽在功能上能模拟人CD81与HCVE2的结合活性,能竞争性抑制HCVE2与人CD81分子的结合,在抗HCV药物及疫苗研究中具有潜在应用价值。

关键词：丙型肝炎病毒噬菌体肽库 CD81分子模拟肽

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丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及患者血清F抗体流行率的研究

丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及患者血清F抗体流行率的研究

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第六次全国医学分子微生物学及生物技术研讨会

作者：邵圣文戚中田第二军医大学微生物学教研室军队医学微生物学重点实验室上海200433

本文对丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及患者血清F抗体流行率进行了研究。结果表明，HCVF65蛋白具有抗原性,可用来检测血清中F抗体;HCV感染者血清中存在F抗体;兔源性F抗体可用来检测HCV F蛋白。

关键词：肝炎病毒蛋白抗原血清抗体

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血管生成抑制素Endostatin的表达、纯化及活性研究

血管生成抑制素Endostatin的表达、纯化及活性研究

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：贺祥王路潘卫曹明媚芮耀诚戚中田夏英第二军医大学微生物学教研室上海200433 上海市中医医院上海200032

血管生成抑制素(vascular endothelial growth inhibitor,endostatin)是近年来发现的一种强效新生血管抑制剂.本研究在从人胎肝组织成功克隆到其基因的基础上,构建endostatin的全分子表达载体,并通过原核表达系统进行表达,表达率为28.5... 详细信息

血管生成抑制素(vascular endothelial growth inhibitor,endostatin)是近年来发现的一种强效新生血管抑制剂.本研究在从人胎肝组织成功克隆到其基因的基础上,构建endostatin的全分子表达载体,并通过原核表达系统进行表达,表达率为28.5％.经过肝素Sephrose亲和层析及Sephcaryl S-200分子筛纯化后,纯度达90.5％.通过生物学效应检测,发现endostatin可明显抑制体外培养的内皮细胞增殖,6μg/ml时使细胞在36h内完全凋亡;其对部分肿瘤细胞(如Hela、A549、HepG2)的增殖亦有一定的抑制作用.研究提示endostatin在肿瘤及新生血管性疾病的治疗中有潜在的应用前景.

关键词：血管生成抑制素纯化内皮细胞生物学效应

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肿瘤坏死因子配体和受体:肿瘤或炎症性疾病治疗的靶点

肿瘤坏死因子配体和受体:肿瘤或炎症性疾病治疗的靶点

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：焦炳华王梁华潘卫倪健第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433 上海国际抗体组药物产业化研究院上海201203

肿瘤坏死因子家族(TNF)可通过它们相应的受体介导信号传导,从而引起一系列的生物学效应.某些TND成员或其衍生物已成为肿瘤等疾病的治疗药物;另一方面,TNF家族及其受体与炎症和某些自身免疫性疾病的关系密切,因此它们又可作为此类疾病治... 详细信息

肿瘤坏死因子家族(TNF)可通过它们相应的受体介导信号传导,从而引起一系列的生物学效应.某些TND成员或其衍生物已成为肿瘤等疾病的治疗药物;另一方面,TNF家族及其受体与炎症和某些自身免疫性疾病的关系密切,因此它们又可作为此类疾病治疗的极佳靶点.

关键词：肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子受体治疗药物药物靶点

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