检索结果-内蒙古大学图书馆

丙型肝炎病毒是经血液传播的肝炎的主要病原体之一,目前全球的HCV感染者约1.7亿.HCV感染自然痊愈较为少见,大部分演变为慢性感染.病毒与免疫应答共存是HCV慢性感染的一个重要特点,HCV抗原特异性体液与细胞免疫应答均可在HCV慢性感染者体内检测到,然而这对于HCV的持续复制似乎并无遏制之力,这个特点也决定了发展丙型肝炎疫苗必然面临重重困难.HCV为单股正链RNA病毒,其基因组全长约9.5Kb,编码一个开放阅读框架,翻译成的一个多聚蛋白前体被宿主和病毒自身蛋白酶加工为结构蛋白非结构蛋白(NS3,NS4和NS5等).病毒RNA的频繁变异可能是HCV得以长期与免疫应答相抗衡的主要手段,也为人类对其的控制带来了难题.毫无疑问,用疫苗诱生中和抗体是预防病原微生物感染的最有效的特异性预防措施,然而,以HCV某一种或联合几种抗原作为疫苗接种动物模型,虽然能诱导相应的抗体反应,但并不能产生疫苗所要求的保护作用.于是,求助于细胞免疫应答成为人们的又一选择.随着对HCV生物学及其与人体相互作用过程了解的日益深入,种种初现希望的丙肝疫苗策略也开始浮出水面.本文对丙肝研究进展进行了介绍。

关键词：丙型肝炎肝炎疫苗微生物学免疫学

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IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响

IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：赵平高军曹洁潘卫戚中田夏英第二军医大学微生物学教研室(上海) 上海市中医医院病毒室(上海)

目的:探讨IL-12对一种结构优化的HBV核心抗原(HbcAg)DNA疫苗免疫效果的影响.方法:将小鼠IL-12基因插入结构优化的DNA疫苗pST-HBc,构成pST-HBc/IL12,将pST-HBc/IL12转染COS7细胞,ELIA检测培养上清中的HBcAg和小鼠IL-2.分别将pST-HBc/IL12和pST-HBc肌肉注射接种BALB/c小鼠,检测小鼠的体液和细胞免疫应答,结果:ELISA检测到培养上清液中的HBcAg和小鼠IL-12,pST-HBc/IL12诱导的抗-HBc总IgG阳转率和抗体水平不及pST-HBc,但其诱导的脾细胞增殖反应和细胞素性T淋巴细胞就均强于pST-HBc.结论IL-12可进一步增强这种HBcAgDNA诱导的细胞免疫应答,对于开发治疗性乙肝疫苗具有潜在的应用应答.

关键词：乙型肝炎病毒乙肝核心抗原 DNA疫苗白细胞介素免疫应答

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噬菌体展示重组人淋巴毒素突变体库及受体亲和筛选

噬菌体展示重组人淋巴毒素突变体库及受体亲和筛选

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：沈毅珺潘卫许燕王征杨彤谭靖伟吴劲松吴芳曹峰刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室(上海) 上海复旦张江生物医药股份有限公司(上海) 第二军医大学基础医学部微生物学教研室(上海) 上海复旦张江生物医药股份有限公司(上海)

淋巴毒素(Lymphotoin,LT)通过TNFR1受体传递凋亡信号,从而发挥抗肿瘤活性.对LT的受体结合区域进行多点随机突变,利用噬菌体展示重组人淋巴毒素(rhLT)R46,S106,L130三点随机突变组合文库和S106~F110区域随机突变体库.噬菌体库与固相比TN... 详细信息

淋巴毒素(Lymphotoin,LT)通过TNFR1受体传递凋亡信号,从而发挥抗肿瘤活性.对LT的受体结合区域进行多点随机突变,利用噬菌体展示重组人淋巴毒素(rhLT)R46,S106,L130三点随机突变组合文库和S106~F110区域随机突变体库.噬菌体库与固相比TNFR1受体进行亲和筛选,富集了能与TNFR1受体结合的rhLT突变体.随机挑选20个单克隆噬菌体进行ELISA受体结合鉴定,其中80﹪的克隆与TNFR1受体特异性结合,25﹪的克隆与TNFR1受体的结合能力高于野生型序列的rhLT.将结合力高的4个突变体克隆于pET32a(+)载体,经过大肠杆菌表达和纯化操作后检测这些突变体蛋白与TNFR1受体的结合活性和对L929细胞的杀伤活性,发现3个克隆的受体结合性质与其展示于噬菌体上时基本吻合,其中C199克隆与TNFR1的结合活性比野生型序列的rhLT提高了近30﹪,且其对L929细胞的杀伤活性提高了近90﹪.应用噬菌体展示技术对淋巴毒素进行体外进化研究的尝试为下一步的蛋白结构和功能研究提供了思路,可成为大分子药物开发的有效工具.

关键词：淋巴毒素随机突变噬菌体展示亲和筛选抗肿瘤活性

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HCV结构蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

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嘉兴学院学报 2004年第3期16卷 101-103页

作者：李菲朱诗应嘉兴学院生物与化学工程学院浙江嘉兴314001 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -... 详细信息

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -CEE,为

关键词：丙型肝炎病毒结构蛋白杆状病毒表达栽体克隆

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腺病毒介导mIFN-β基因转染的小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性

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安徽医科大学学报 2004年第2期39卷 97-100页

作者：吴云徐容曹广文潘卫陈秋莉沈毅蔡春晓邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433 复旦张江生物医药股份公司上海200000

目的　研究腺病毒 (Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性。方法　用Ad为载体将mIFN β基因导入B16细胞 ,观察mIFN β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变。结果　当MOI为 5 0～ 10 0 ,即可获得... 详细信息

目的　研究腺病毒 (Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性。方法　用Ad为载体将mIFN β基因导入B16细胞 ,观察mIFN β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变。结果　当MOI为 5 0～ 10 0 ,即可获得较高的转染效率 ,达 90 %± 1% ,转染细胞能表达分泌mIFN β并具有生物学活性 ;AdmIFN β感染对B16细胞的增殖能力无影响 ,但能显著提高细胞表面MHC Ⅰ类抗原的表达。结论　Ad载体具有较高的转移效率 ,并能使其携带的mIFN β基因有效表达 ;AdmIFN β转染的B16细胞的免疫原性显著增强。提示利用Ad载体携带有效的目的基因来治疗肿瘤甚至开发瘤苗是可行的。

关键词：腺病毒 mIFN-β基因转染小鼠黑色素瘤体外生物学特性瘤细胞

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新型噬菌体展示载体pCANTAB5S的构建

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安徽医科大学学报 2004年第2期39卷 83-86页

作者：徐容潘卫沈毅陈秋莉潘欣冯春芝戚中田刘彦君邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433 复旦张江生物医药股份公司上海200000

目的　进一步改造噬菌体展示载体 ,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库。方法　以 pCANTAB5X IFN α2b重组质粒为模板 ,在上游引物中引入XbaⅠ、SacⅠ酶切位点 ,在下游引物中引入SacⅠ、StuⅠ、SalⅠ酶切位点 ,将用该引物扩增的IFN... 详细信息

目的　进一步改造噬菌体展示载体 ,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库。方法　以 pCANTAB5X IFN α2b重组质粒为模板 ,在上游引物中引入XbaⅠ、SacⅠ酶切位点 ,在下游引物中引入SacⅠ、StuⅠ、SalⅠ酶切位点 ,将用该引物扩增的IFN α2b衔接片段PCR产物克隆到pMD18 T中 ,再将该片段用XbaⅠ和SalⅠ酶切并将之插入pCANTAB5L的XbaⅠ和SalⅠ位点中 ,经SacⅠ酶切 ,线性载体片段自连 ,构成新型噬菌体展示载体 pCANTAB5S。结果　限制酶切位点SacⅠ被引入到噬菌体展示载体 ,并校正了pCANTAB5L载体StuⅠ、SalⅠ等位点的读框。结论　成功构建了含读框正确的SacⅠ等多个克隆位点的新型噬菌体展示载体pCANTAB5S ,可用于各种外源随机多肽文库的有效展示。

关键词：噬菌体 pCANTAB5S 遗传学质粒遗传载体肽库

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海洋微生物来源抗生素的研究

海洋微生物来源抗生素的研究

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2004中国微生物学会学术年会

作者：焦炳华穆军许强芝缪辉南中国微生物学会干扰素专业委员会第二军医大学生物化学与分子生物学教研室(上海)

海洋微生物包括海洋细菌、海洋真菌和海洋放线菌,其种类约为陆生微生物的20倍以上.海洋微生物其特殊的生存环境(高盐、高压、低温、低光照和寡营养),从而可合成一些结构新颖的抗生素,这是陆地微生物所不具备的.从海洋微生物中筛选新抗生... 详细信息

海洋微生物包括海洋细菌、海洋真菌和海洋放线菌,其种类约为陆生微生物的20倍以上.海洋微生物其特殊的生存环境(高盐、高压、低温、低光照和寡营养),从而可合成一些结构新颖的抗生素,这是陆地微生物所不具备的.从海洋微生物中筛选新抗生素,实际上是由陆生资源发掘向整个自然界的延伸.开发海洋微生物资源的意义是重大的,表现在几个方面:①海洋丰富的微生物资源为新药发现提供了多样的物种基础,它的开发将使人类进一步认识自然;②新抗生素由于结构与作用机制可能有别于陆生来源的抗生素,将极大地克服目前的抗药性,同时为新药的合成提供新的"母核";③微生物易于培养、发酵,可无限再生而无需过度开采野生资源.

关键词：海洋微生物海洋细菌海洋真菌海洋放线菌抗生素新抗生素新药发现物种基础抗药性母核

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人胚胎原始生殖细胞的定位与体外分离培养的初步研究

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解剖科学进展 2004年第B8期10卷 39-39页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生第二军医大学基础部组织胚胎学教研室，上海200433 第二军医大学附属第一医院妇产科，上海200433 第二军医大学基础部微生物学教研室，上海200433 BurnhamInstitute SanDiegoCA92037USA

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分... 详细信息

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织培养，第一次传代后，用碱性磷酸酶标记。

关键词：人胚胎原始生殖细胞碱性磷酸酶体外分离组织化学法生殖系肠系膜胎生发育阶段初步研究

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