检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1998年第4期19卷 319-322页

作者：曹广文崔龙高军戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病... 详细信息

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病毒产生细胞和５－ＦＣ治疗人肝癌裸鼠模型，并用ＰＣＲ法确定体内基因转移效果，骨髓涂片检查体内基因治疗对造血细胞的影响。结果：转ＣＤ基因对ＬｏＶｏ细胞的致瘤性无影响，全身给予５－ＦＣ治疗６０ｄ，转ＣＤ基因的大肠癌肿瘤明显缩小；ＣＥＡ启动子调控的ＣＤ（ＣＥＡ／ＣＤ）基因修饰的ＬｏＶｏ细胞形成的肿瘤在５－ＦＣ作用下消退。重组病毒在体内可以感染肿瘤、骨髓细胞，给予５－ＦＣ后取得了一定的抗肝细胞癌效果。ＣＥＡ／ＣＤ治疗组未发现明显的骨髓抑制，而ＬＴＲ调控ＣＤ的治疗组出现了明显的骨髓抑制。结论：组织特异性转录调控序列调控的ＣＤ基因体内基因治疗，较普通启动子调控的ＣＤ基因具有明显的安全性和有效性。

关键词：大肠肿瘤肝肿瘤胞嘧啶脱氨酶基因治疗裸鼠

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胞嘧啶脱氨酶基因的体外前药转换胃癌细胞的杀伤作用研究

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中华消化杂志 1998年第2期18卷 72-75页

作者：程慧玉张忠兵李石张兴荣朱玉平第二军医大学长征医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ... 详细信息

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ基因稳定整合到宿主细胞基因组中，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析了ＣＤ基因的表达；转基因胃癌细胞在前药５－ＦＣ作用下呈现明显的选择性生长抑制效应。且观察到强效的“旁观者效应”。结论为胃癌组织基因治疗提供了极有意义的资料。

关键词：胃肿瘤基因疗法胞嘧啶脱氨酶

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酪氨酸酶启动子调控的CD基因治疗恶性黑色素瘤

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 205-208页

作者：曹广文戚中田潘欣张晓琴高军崔龙孔宪涛第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学长征医院实验诊断科

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎ... 详细信息

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎａ中调控ＣＤ基因（ＴｙｒＣＤ）。测体外表达和体内抗肿瘤作用。结果：来源于Ｂ１６基因组的Ｔｙｒ启动子重要反式作用位点未见突变。该Ｔｙｒ启动子可使ＣＤ基因在Ｂ１６中特异表达。转ＴｙｒＣＤ的Ｂ１６可以抑制亲代细胞的成瘤作用。含ＴｙｒＣＤ的重组病毒可在体内感染黑色素瘤细胞和骨髓细胞。体内注射５氟胞嘧啶后可使黑色素瘤消退，并对骨髓细胞有保护作用。结论：来源于正常组织或肿瘤组织的Ｔｙｒ启动子指导的ＣＤ基因在恶性黑色素瘤ｉｎｖｉｖｏ基因治疗方面是安全。

关键词：酪氨酸酶胞嘧啶脱氨酶黑色素瘤基因治疗

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丙肝病毒ns3基因转基因小鼠的产生

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癌变．畸变．突变 1998年第4期10卷 193-198页

作者：张树忠李建秀戚中田胡以平第二军医大学基础部生物学教研室第二军医大学基础部微生物学教研室

通过受精卵原核显微注射的途径，产生带有可诱导型丙肝病毒非结构蛋白３基因（ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ３ｇｅｎｅ）的重组载体的转基因小鼠。采用ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交方法，在２１只新生鼠中筛选到３只... 详细信息

通过受精卵原核显微注射的途径，产生带有可诱导型丙肝病毒非结构蛋白３基因（ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ３ｇｅｎｅ）的重组载体的转基因小鼠。采用ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交方法，在２１只新生鼠中筛选到３只建立者小鼠。其中２只与非转基因小鼠进行交配，分别得到８只和６只Ｆ１代小鼠。进而对其基因组ＤＮＡ进行检测，发现其中４只为转基因阳性个体。这些小鼠的获得，为ｎｓ３转基因品系的建立和ＮＳ３蛋白的生物学作用研究准备了条件。

关键词：丙肝病毒转基因小鼠 ns3

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假单孢杆菌外毒素基因的克隆及用于裸鼠大肠癌基因治疗

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第二军医大学学报 1998年第2期19卷 106-109页

作者：曹广文戚中田粟山茂树潘欣张晓琴杜平第二军医大学基础医学部微生物学教研室日本奈良医科大学第三内科

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（Ｃ... 详细信息

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（ＣＥＡ）启动子调控的逆转录病毒载体。共转染法体外研究ＰＥＡ基因表达对报告基因表达的特异抑制作用。用ＤＮＡ体内直接转染法于裸鼠体内观察ＰＥＡ基因的抗人类肿瘤作用。结果：所克隆的ＰＥＡ序列与已报道序列基本相同。ＣＥＡ启动子调控的ＰＥＡ基因可在大肠癌细胞中特异性抑制荧光素酶基因表达，在裸鼠体内对人大肠癌模型的直接转染能特异抑制人大肠肿瘤的生长。结论：ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因作为治疗基因。

关键词：假单孢杆菌外毒素大肠肿瘤基因疗法

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肿瘤坏死因子突变体60的纯化及变性、复性的初步研究

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药物生物技术 1998年第3期5卷 140-144页

作者：周凯王梁华焦炳华第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433

TNFα突变体 60 (TNF60 )蛋白在大肠杆菌中高效表达 ,菌体超声破碎后 ,以低浓度尿素反复洗涤包涵体 ,经 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤层析初步纯化 ,对重组蛋白浓度、氧化还原剂等复性参数进行优化和选择 ,复性后组分以 Sephadex G- 2 5... 详细信息

TNFα突变体 60 (TNF60 )蛋白在大肠杆菌中高效表达 ,菌体超声破碎后 ,以低浓度尿素反复洗涤包涵体 ,经 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤层析初步纯化 ,对重组蛋白浓度、氧化还原剂等复性参数进行优化和选择 ,复性后组分以 Sephadex G- 2 5脱盐 ,经 Superdex 75凝胶过滤再次纯化。获得了纯度 >97% ,具有增强 rh TNFα细胞毒活性的 TNF60蛋白。

关键词：突变体变性复性纯化肿瘤坏死因子

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肝脏相关性疾病的组织特异性基因治疗

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胃肠病学和肝病学杂志 1998年第2期7卷 106-109页

作者：曹广文戚中田上海第二军医大学微生物学教研室

组织特异性基因治疗是ｉｎｖｉｖｏ基因治疗的首要问题。这种基因治疗包括靶向感（转）染和靶向表达，前者包括定位转染和导向转染，后者就是应用组织特异性转录调控序列和ｍＲＮＡ稳定序列而使治疗基因在靶细胞高效表达。肝脏的结构特... 详细信息

组织特异性基因治疗是ｉｎｖｉｖｏ基因治疗的首要问题。这种基因治疗包括靶向感（转）染和靶向表达，前者包括定位转染和导向转染，后者就是应用组织特异性转录调控序列和ｍＲＮＡ稳定序列而使治疗基因在靶细胞高效表达。肝脏的结构特性和肝脏疾病的重要性决定了肝病组织特异性基因治疗是重要的和可行的。肝肿瘤。

关键词：肝病基因治疗组织特异性

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细胞凋亡DNA断裂的分子机制

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国外医学（免疫学分册） 1998年第1期21卷 6-10页

作者：周炳荣焦炳华杜平上海第二军医大学微生物学教研室

细胞凋亡是细胞在其生长、发育、增殖中具有十分重要作用的生物现象,这种死亡形式的发生机制目前是一个十分热门的课题,而可直接或间接诱导细胞凋亡的药物或试剂,是目前研究细胞凋亡方面又一个十分兴旺的领域。细胞在死亡因素作用下,是... 详细信息

细胞凋亡是细胞在其生长、发育、增殖中具有十分重要作用的生物现象,这种死亡形式的发生机制目前是一个十分热门的课题,而可直接或间接诱导细胞凋亡的药物或试剂,是目前研究细胞凋亡方面又一个十分兴旺的领域。细胞在死亡因素作用下,是如何发生死亡的,以及诸如肿瘤的发生、生长和治疗过程中常常发生的肿瘤抗性现象等,均与细胞凋亡的发生或抑制有着十分密切的关系,细胞凋亡的基本特征是 DNA 断裂,而 DNA 断裂与一种或一类对 DNA 发生酶切作用的核酸内切酶有直接的关系,本文仅就细胞凋亡与 DAN 断裂有关的核酸内切酶作一综述。

关键词：细胞凋亡 DNA断裂核酸内切酶

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002　细胞凋亡DNA断裂的分子机制

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国际免疫学杂志 1998年第1期21卷 6-10页

作者：周炳荣焦炳华杜平上海第二军医大学微生物学教研室

细跑凋亡是细胞在其生长、发育、增殖中具有十分重要作用的生物现象，这种死亡形式的发生机制目前是一个十分热门的课题，而可直接或间接诱导细胞凋亡的药物或试剂，是目前研究细胞凋亡方面又一个十分兴旺的领域。细胞在死亡因素作用下... 详细信息

细跑凋亡是细胞在其生长、发育、增殖中具有十分重要作用的生物现象，这种死亡形式的发生机制目前是一个十分热门的课题，而可直接或间接诱导细胞凋亡的药物或试剂，是目前研究细胞凋亡方面又一个十分兴旺的领域。细胞在死亡因素作用下，是如何发生死亡的，以及诸如肿瘤的发生、生长和治疗过程中常常发生的肿瘤抗性现象等，均与细胞凋亡的发生或抑制有着十分密切的关系，细胞凋亡的基本特征是DNA断裂，而DNA断裂与一种或一类对DNA发生酶切作用的核酸内切酶有直接的关系，本文仅就细胞凋亡与DAN断裂有关的核酸内切酶作一综述。

关键词：细胞凋亡 DNA断裂核酸内切酶

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庚型肝炎病毒的分子生物学研究进展

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国外医学（病毒学分册） 1998年第3期5卷 83-86页

作者：任浩朱分禄第二军医大学微生物学教研室上海200433

庚型肝炎病毒（GBV－C／HGV）为单股正链RNA病毒，属黄病毒家族成员。GBV-C／HGV与丙型肝炎病毒（HCV）有许多相似之处，但又有其自身特点。本文对GBV－C／HGV的基因组结构及变异、病毒多蛋白前体的加工、感染途径与致病性及检测方法等... 详细信息

庚型肝炎病毒（GBV－C／HGV）为单股正链RNA病毒，属黄病毒家族成员。GBV-C／HGV与丙型肝炎病毒（HCV）有许多相似之处，但又有其自身特点。本文对GBV－C／HGV的基因组结构及变异、病毒多蛋白前体的加工、感染途径与致病性及检测方法等进行了综述。

关键词：庚型肝炎病毒分子生物学基因组结构致病性

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