检索结果-内蒙古大学图书馆

中国热带医学 2016年第3期16卷 203-207页

作者：高伟高荣任浩第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

目的建立SR-BI表达抑制的肝癌细胞系,以作为研究SR-BI基因突变对HCV感染性影响的细胞模型。方法构建SR-BI短发夹状RNA(Short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒重组质粒Lv-SR-BI-sh RNA,挑取克隆进行PCR扩增和序列测定;将阳性重组质粒与慢病毒... 详细信息

目的建立SR-BI表达抑制的肝癌细胞系,以作为研究SR-BI基因突变对HCV感染性影响的细胞模型。方法构建SR-BI短发夹状RNA(Short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒重组质粒Lv-SR-BI-sh RNA,挑取克隆进行PCR扩增和序列测定;将阳性重组质粒与慢病毒辅助质粒共转染HEK2973T细胞,包装SR-BI sh RNA慢病毒并进行病毒滴度测定。SR-BI sh RNA慢病毒感染人肝癌细胞株Huh7和Huh7.5.1细胞,嘌呤霉素筛选,Real-time PCR和Western blot法检测SR-BI m RNA转录和蛋白表达。结果测序结果证实Lv-SR-BI-sh RNA慢病毒载体构建成功并获得HEK293T细胞中包装的慢病毒,Lv-SR-BI-sh RNA重组慢病毒感染Huh7和Huh7.5.1细胞,感染组SR-BI m RNA转录降低,蛋白表达降低。结论建立了SR-BI表达抑制的人肝癌细胞株Huh7-si SR-BI和Huh7.5.1-si SR-BI稳定细胞系。

关键词：人SR-BI 短发夹状RNA 肝癌细胞系构建筛选

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埃博拉病毒的研究进展

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第二军医大学学报 2015年第2期36卷 188-192页

作者：徐庆强唐海琳戚中田第二军医大学热带医学与公共卫生学系生物防御(微生物学)教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

埃博拉病毒是迄今发现的最凶险、对人类生命危害最大的病毒之一,能在人类和非人灵长类动物中引起严重的埃博拉出血热,病死率可高达90%,并且目前还没有有效的疫苗和治疗药物。面对埃博拉病毒带来的挑战,针对该病毒的实验室诊断、治疗药... 详细信息

埃博拉病毒是迄今发现的最凶险、对人类生命危害最大的病毒之一,能在人类和非人灵长类动物中引起严重的埃博拉出血热,病死率可高达90%,并且目前还没有有效的疫苗和治疗药物。面对埃博拉病毒带来的挑战,针对该病毒的实验室诊断、治疗药物以及疫苗的研究已经成为病毒学领域的热点。本文就埃博拉病毒的起源与流行、分子生物学特性、致病机制、病原检测及疫苗研究的新进展作一综述。

关键词：埃博拉病毒流行病学致病机制诊断疫苗

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2型登革病毒非结构蛋白NS3的表达及其相互作用蛋白的纯化

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第12期31卷 1588-1592页

作者：翁代慧雷迎峰董阳超韩佩君叶传涛杨敬王媛尹文第四军医大学基础部微生物学教研室陕西西安710032 第二炮兵总医院检验科北京100088 第四军医大学西京医院输血科陕西西安710032

目的构建2型登革病毒(DENV2)非结构蛋白3(NS3)与亲和标签融合蛋白的表达质粒,串联亲和纯化(TAP)法获得与NS3相互作用的蛋白。方法根据DENV2基因序列,设计引物;以DENV2 c DNA为模板,PCR扩增出NS3基因,经酶切后克隆至含有串联亲和标签(FLA... 详细信息

目的构建2型登革病毒(DENV2)非结构蛋白3(NS3)与亲和标签融合蛋白的表达质粒,串联亲和纯化(TAP)法获得与NS3相互作用的蛋白。方法根据DENV2基因序列,设计引物;以DENV2 c DNA为模板,PCR扩增出NS3基因,经酶切后克隆至含有串联亲和标签(FLAG-StrepⅡ)的哺乳真核表达载体p CI-SF,获得重组表达质粒p CI-NS3-SF;将上述重组质粒通过转染试剂LipofectamineTM2000瞬时转染进入HEK293T细胞,Western blot法验证NS3融合蛋白的表达;通过TAP法分离纯化与NS3相互作用的蛋白。结果成功构建了NS3融合蛋白表达载体,利用TAP系统分离得到与NS3蛋白相互作用的宿主蛋白。结论串联亲和纯化法可以有效的分离与DENV2 NS3相互作用的细胞蛋白。

关键词：登革病毒 NS3 串联亲和纯化

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医学微生物学实验教学改革探讨

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基础医学教育 2015年第4期17卷 315-317页

作者：朱勇喆戚中田赵平任浩第二军医大学微生物学教研室上海200433

医学微生物学是一门重要的医学基础课程,实践性强,因此实验教学是理论与实践相结合的重要途径。为更好地提高医学微生物学实验教学,从实验内容设计、实验教学方法和实验操作指导等方面进行改革,使学生能够"心到、眼到、手到"... 详细信息

医学微生物学是一门重要的医学基础课程,实践性强,因此实验教学是理论与实践相结合的重要途径。为更好地提高医学微生物学实验教学,从实验内容设计、实验教学方法和实验操作指导等方面进行改革,使学生能够"心到、眼到、手到",激发学习的积极性和主动性。

关键词：医学微生物学教学改革实验教学

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TXNIP可能通过促进细胞自噬增强HCV复制

TXNIP可能通过促进细胞自噬增强HCV复制

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中华医学会2015年医学病毒学大会

作者：王世杰唐紫薇戚中田赵平第二军医大学微生物学教研室上海 200433

背景：前期我们对HCVcc 感染的Huh7 细胞进行基因芯片以及深度测序分析，结果均显示硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)mRNA 明显升高，用siRNA 抑制Huh7 细胞内TXNIP 的表达不影响HCV 的细胞侵入，但HCV的复制水平显著下降。目的：鉴于TXNIP ... 详细信息

背景：前期我们对HCVcc 感染的Huh7 细胞进行基因芯片以及深度测序分析，结果均显示硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)mRNA 明显升高，用siRNA 抑制Huh7 细胞内TXNIP 的表达不影响HCV 的细胞侵入，但HCV的复制水平显著下降。目的：鉴于TXNIP 在细胞氧化应激、自噬、脂代谢等过程中均发挥重要的调控作用以及这些过程对HCV 复制的重要影响，本研究拟探讨TXNIP 影响HCV 复制的可能机制。

关键词： TXNIP HCV 细胞自噬

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RIP3介导程序性坏死与炎症研究进展

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生命的化学 2015年第5期35卷 650-656页

作者：徐玉林丁翠玲王文戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIP3/RIPK3)是RIP家族中的一员,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性,通过与RIP1形成坏死复合体能够介导caspase非依赖的细胞坏死。研究发现,RIP3也参与众多感染和无菌性炎性... 详细信息

受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIP3/RIPK3)是RIP家族中的一员,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性,通过与RIP1形成坏死复合体能够介导caspase非依赖的细胞坏死。研究发现,RIP3也参与众多感染和无菌性炎性疾病的病理进程。本文就RIP3在细胞程序性坏死方面的调控机制和其在坏死依赖性与非依赖性炎症方面作一综述。

关键词： RIP3 RIP1 程序性坏死坏死复合体炎症

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肠道病毒71型复制周期研究进展

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中国病毒病杂志 2015年第2期5卷 144-149页

作者：陈生林朱勇喆戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

人类肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）属于小RNA病毒科肠道病毒属。自1969年首次从美国加利福尼亚1名患有中枢神经系统疾病的手足口病婴儿粪便样本中分离出EV71病毒以来,手足口病在世界各地曾多次出现大流行,多发于5岁以下儿童,可... 详细信息

人类肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）属于小RNA病毒科肠道病毒属。自1969年首次从美国加利福尼亚1名患有中枢神经系统疾病的手足口病婴儿粪便样本中分离出EV71病毒以来,手足口病在世界各地曾多次出现大流行,多发于5岁以下儿童,可引起发热和口腔、手、足部的溃疡或斑疹等症状。少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。如果病情发展快,导致重症患儿死亡[1]。

关键词：肠道病毒71型入侵受体翻译复制装配释放

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丙型肝炎无干扰素全口服治疗临床Ⅲ期试验进展

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中国病毒病杂志 2015年第3期5卷 228-233页

作者：唐紫薇任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）为黄病毒属的单股正链RNA病毒,主要通过血液传播,慢性化程度高。目前的标准治疗是聚乙二醇干扰素（pegylated IFN-α）联合利巴韦林（ribavirin,RBV）。自1989年首次鉴定出HCV以来[1],HCV的干扰... 详细信息

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）为黄病毒属的单股正链RNA病毒,主要通过血液传播,慢性化程度高。目前的标准治疗是聚乙二醇干扰素（pegylated IFN-α）联合利巴韦林（ribavirin,RBV）。自1989年首次鉴定出HCV以来[1],HCV的干扰素治疗虽然有缓慢的进展,如长效干扰素的使用,但仍无法摆脱其不良反应多、持续病毒学应答率（sustained virologic response，SVR）不够高及使用不便等缺点。近几年，丙型肝炎的抗病毒治疗研究突飞猛进。

关键词：丙型肝炎病毒无干扰素抗病毒治疗临床Ⅲ期试验

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PTEN通过下调自噬活性抑制登革病毒2型感染

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微生物与感染 2015年第1期10卷 13-18页

作者：高婷婷秦照玲王岩陶清源任浩赵平戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

为探讨PTEN、细胞白噬与登革病毒2型(DENV-2)感染之间的关系及可能机制,本研究将DENV-2以不同感染复数(MOI)和不同持续时间感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),蛋白免疫印迹法检测PTEN表达及指示细胞自噬的LC3型别转换情况;进一步构建pLen... 详细信息

为探讨PTEN、细胞白噬与登革病毒2型(DENV-2)感染之间的关系及可能机制,本研究将DENV-2以不同感染复数(MOI)和不同持续时间感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),蛋白免疫印迹法检测PTEN表达及指示细胞自噬的LC3型别转换情况;进一步构建pLenti-PTEN和pLenti-shPTEN表达质粒,包装成慢病毒,感染HUVEC以建立稳定表达细胞系,并检测PTEN过表达及敲低对自噬标记尤其是LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、DENV-2 capsid蛋白和mRNA水平及子代病毒颗粒感染性的影响。结果显示,PTEN下调可抑制细胞自噬水平,继而降低DENV-2 capsid蛋白表达和子代病毒颗粒释放,提示DENV-2感染HUVEC发生的PTEN蛋白表达下调很可能是宿主细胞本身的一种针对DENV-2感染的保护性反应。

关键词：登革病毒人脐静脉血管内皮细胞 PTEN 自噬

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乙型脑炎病毒入侵人神经细胞的内吞机制

乙型脑炎病毒入侵人神经细胞的内吞机制

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中华医学会2015年医学病毒学大会

作者：徐庆强曹明媚宋洪元陈生林钱汐晶赵平任浩唐海琳王岩朱勇喆戚中田第二军医大学微生物学教研室全军医学微生物学重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海 200433

背景：乙型脑炎病毒(JEV)是一种蚊媒传播病毒，其感染具有嗜神经性，易造成严重的中枢神经系统(CNS)疾病及其并发症.JEV 入侵神经细胞是导致乙型脑炎发生的先决条件，而目前对于JEV 侵入神经细胞的作用机制仍不清楚.

关键词：乙型脑炎病毒神经细胞入侵肌动蛋白表皮生长因子受体

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