检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2019年第10期39卷 800-804页

作者：苗根丁翠玲刘延刚戚中田第二军医大学海医系微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室200433

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科、黄病毒属,主要通过伊蚊叮咬传播.2015年起,ZIKV在南美暴发流行,大部分感染者无临床表现,部分孕妇感染引发新生儿小头畸形、成人吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome)、脊髓炎等神经系统并... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科、黄病毒属,主要通过伊蚊叮咬传播.2015年起,ZIKV在南美暴发流行,大部分感染者无临床表现,部分孕妇感染引发新生儿小头畸形、成人吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome)、脊髓炎等神经系统并发症.本文从ZIKV生物学特征、传播途径、临床诊治、ZIKV相关脊髓炎的病例报道和可能的致病机制等方面综述了ZIKV相关脊髓炎的最新研究进展,为进一步了解认识和研究ZIKV相关脊髓炎提供参考.

关键词：寨卡病毒脊髓炎致病机制

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新型隐球菌临床菌株中CNAG＿01032基因的鉴定和功能研究

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菌物学报 2019年第8期38卷 1341-1349页

作者：邱文兰咏哲王迪黄劲廖万清康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025 第二军医大学上海长征医院真菌学研究所上海200003

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检... 详细信息

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检测突变株和野生型菌株经典毒力因子变化情况;使用API 20C AUX测试系统测试突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况;使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测。结果显示:成功构建以临床株C1、C2为背景的CNAG-01032基因敲除突变株;突变株在37℃生长、黑色素产生与野生型菌株无显著差异,但荚膜厚度分别比C1、C2减少16.4%、18.2%;两基因敲除菌株均不能分解利用纤维二糖;致病性与野生型菌株无显著差异。新型隐球菌CNAG01032基因可能参与临床来源菌株IFM56800、IFM56769的荚膜合成和纤维二糖的代谢。

关键词：病原性真菌基因敲除荚膜纤维二糖

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应用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除小窝蛋白1基因的神经细胞构建与功能鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2018年第5期29卷 453-457页

作者：权力江爱民卢彦宗朱耐伟朱勇喆第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学学员旅学员1队上海200433 第二军医大学学员旅学员9队上海200433

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑系统建立小窝蛋白1(CAV-1)基因敲除的神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),并验证其对流行性乙型脑炎病毒(JEV)的易感性。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,基于人源CAV-1基因的外显子区(EXON)序列设计小向导RNA(sg... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑系统建立小窝蛋白1(CAV-1)基因敲除的神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),并验证其对流行性乙型脑炎病毒(JEV)的易感性。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,基于人源CAV-1基因的外显子区(EXON)序列设计小向导RNA(sgRNA),将sgRNA连接到载体PX459质粒上。将重组质粒转染至SHSY5Y细胞中,使用嘌呤霉素筛选稳定敲除CAV-1蛋白的SH-SY5Y细胞,并用免疫印迹法验证CAV-1蛋白的敲除效果。免疫荧光法比较CAV-1基因敲除的SH-SY5Y株与野生型细胞株对JEV感染性的差异。结果经酶切和测序鉴定,重组真核表达质粒构建正确,转染并筛选的单克隆细胞中没有CAV-1蛋白的表达,成功构建CAV-1基因敲除的SH-SY5Y细胞株。与野生型SH-SY5Y细胞株相比,CAV-1基因敲除的细胞株对JEV的感染性下降约90%(P<0.001)。结论利用CRISPR/Cas9系统成功构建CAV-1基因敲除的SH-SY5Y细胞株,该细胞株可用于进一步研究CAV-1蛋白在JEV感染中的作用机制。

关键词：基因编辑小窝蛋白神经细胞流行性乙型脑炎病毒

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1株肠道病毒71型毒株的分离与鉴定

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中国热带医学 2018年第1期18卷 17-21页

作者：许耘川朱勇喆王娟娟上海交通大学医学院附属新华医院检验科上海200092 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell,RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)来分析EV71的分离效... 详细信息

目的探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell,RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)来分析EV71的分离效果。分别利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹分析(Western Blotting)方法来鉴定EV71病毒特异性核酸和蛋白。扩增EV71VP1区全长基因,对其序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果手足口病疑似病例咽拭子标本接种RD细胞传代至第2代后出现CPE。RT-PCR和Western Blotting检测结果均显示,感染组RD细胞中有EV71病毒特异性条带,暂命名为EV71分离株2016SHYP001。序列分析结果显示,2016SHYP001株病毒的VP1区核苷酸与C型代表株的同源性较高,为93.1%~98.3%;其中与C4a亚型代表株的同源性最高,为98.3%。进化树分析发现本地流行株与深圳地区流行株的亲缘较近。结论成功分离出一株新的EV71病毒株2016SHYP001,其株型为C4a亚型。

关键词：手足口病肠道病毒71型病毒分离基因型

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维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

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第二军医大学学报 2017年第5期38卷 548-553页

作者：王世杰张卫张龙严罗正汉尹昊瓒唐紫薇戚中田赵平第二军医大学热带医学与公共卫生学系微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 第二军医大学海军医学系学员5队上海200433 第二军医大学学员旅10队上海200433

目的探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染。方法用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达。用维拉帕米处理Huh7.5.... 详细信息

目的探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染。方法用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达。用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV(HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况。用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响。结果与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P<0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P<0.05)。进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P<0.05)。结论维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的。

关键词：维拉帕米丙型肝炎病毒硫氧还蛋白互作蛋白转录启动子

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结直肠癌组织肿瘤浸润的免疫细胞特征及与预后关联

结直肠癌组织肿瘤浸润的免疫细胞特征及与预后关联

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浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会

作者：叶乐乐施昕妤林康明常文军薛向阳温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室海军军医大学(原第二军医大学)热带医学与公共卫生学系卫生毒理学教研室

肿瘤微环境中浸润的免疫细胞是肿瘤发生发展的重要因素。本研究旨在构建一种有效预测结直肠癌患者预后的免疫细胞模型,为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的防治和预后评估提供新的方向。本研究纳入GEO数据库1497例样本和TCGA数据库的62... 详细信息

肿瘤微环境中浸润的免疫细胞是肿瘤发生发展的重要因素。本研究旨在构建一种有效预测结直肠癌患者预后的免疫细胞模型,为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的防治和预后评估提供新的方向。本研究纳入GEO数据库1497例样本和TCGA数据库的621例CRC样本,以及来自中国温州和上海两个中心的1008例结直肠腺癌标本。利用CIBERSORT法评估CRC标本22种浸润免疫细胞特征,COX单因素分析进一步探讨了浸润免疫细胞与CRC预后(无病生存期DFS、总生存时间OS)的关联性。通过筛选并选择TAN、TAM及Tregs 3种免疫细胞在对1008例CRC组织标本行免疫组化分析。以来自温州的CRC样本作为训练队列,统计分析这3种免疫细胞与CRC临床特征及预后的相关性,并构建模型,进一步通过上海样本进行测试及验证。结果显示,22种免疫细胞不同程度与CRC预后(DFS、OS)相关。测试队列检测结果显示,TAN、TAM及Tregs三种免疫细胞与肿瘤分化、淋巴结转移等临床特征相关,是CRC预后的独立因素。本研究利用TAN、TAM及Tregs三种细胞构建了一个针对CRC患者的预后评估模型,并在测试队列及验证队列中确认了这一模型的预测价值,结果显示高风险组的CRC患者相对于低风险组患者有更短的DFS及OS。此外,TAN、TAM及Tregs可影响CRC患者对放化疗的反应性,在经放化疗的患者中,高风险组的预后差距更大。总之,肿瘤组织浸润免疫细胞参与了CRC的发生发展过程,与预后相关,并影响放化疗的效果。

关键词：结直肠癌肿瘤微环境免疫细胞

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丙型肝炎疫苗的研究进展

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国际生物制品学杂志 2017年第3期40卷 134-138页

作者：罗正汉王世杰赵平第二军医大学微生物学教研室上海200433

HCV感染是严重的全球公共卫生问题。尽管新一代直接抗HCV药物上市后，丙型肝炎的治愈率显著提高，但一种能有效预防HCV感染的疫苗对于最终消灭丙型肝炎依然非常重要。此文对制约丙型肝炎疫苗研究的因素进行了分析，并对进入临床试验的... 详细信息

HCV感染是严重的全球公共卫生问题。尽管新一代直接抗HCV药物上市后，丙型肝炎的治愈率显著提高，但一种能有效预防HCV感染的疫苗对于最终消灭丙型肝炎依然非常重要。此文对制约丙型肝炎疫苗研究的因素进行了分析，并对进入临床试验的主要疫苗的类型、特征进行概述。

关键词：肝炎丙型病毒性肝炎疫苗免疫应答临床试验

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外泌体在病毒感染中的研究进展

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生命的化学 2017年第4期37卷 601-606页

作者：江爱民朱耐伟朱勇喆第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学学员旅九队上海200433

外泌体(exosome)是细胞向胞外分泌的一种囊泡,直径约40~100 nm。外泌体与免疫、肿瘤以及病毒类疾病的发生发展有着密切的联系,已成为上述领域内的研究热点。文章就外泌体在病毒感染中的研究进展作一综述。

关键词：外泌体病毒感染

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丙型肝炎病毒诱发肝细胞肝癌的分子机制

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微生物与感染 2017年第5期12卷 310-319页

作者：高荣徐力徐杰任浩第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是影响人类健康的恶性肿瘤之一,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是其主要致病因素之一。HCV诱发的HCC是由病毒和宿主免疫介导的多步骤复杂过程,从慢性炎症发展到肝硬化和肝癌,病毒和宿主... 详细信息

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是影响人类健康的恶性肿瘤之一,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是其主要致病因素之一。HCV诱发的HCC是由病毒和宿主免疫介导的多步骤复杂过程,从慢性炎症发展到肝硬化和肝癌,病毒和宿主因子共同参与此过程。其中,宿主基因突变是导致HCC发生的危险因素之一,全面了解HCV诱发HCC的分子机制将有助于解决此问题。

关键词：丙型肝炎病毒肝细胞肝癌分子机制

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宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白与丙型肝炎病毒感染的相互作用研究

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中华传染病杂志 2016年第10期34卷 597-602页

作者：唐紫薇王世杰王文博赵平戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

目的：探究宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）与 HCV 复制的关系以及 TXNIP 促进HCV 复制的分子机制。方法利用转录组芯片和转录组深度测序技术对细胞培养的 HCV（HCVcc）感染的 Huh7细胞进行转录组分析，并通过反转录-实时荧光定量 ... 详细信息

目的：探究宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）与 HCV 复制的关系以及 TXNIP 促进HCV 复制的分子机制。方法利用转录组芯片和转录组深度测序技术对细胞培养的 HCV（HCVcc）感染的 Huh7细胞进行转录组分析，并通过反转录-实时荧光定量 PCR 和高通量测序差异表达的 TXNIP 进行细胞差异表达验证；同时观察 TXNIP 表达水平对 HCV 感染的影响。结果转录组芯片检测发现， HCVcc 感染的 Huh7细胞中 TXNIP mRNA 较未感染的对照细胞上调约3．7倍；转录组深度测序表明， TXNIP mRNA 在 HCVcc 感染后36、60 h 均明显上调（t 值分别为24．90、8．27，均 P 〈0．01）；细胞实验证明，小干扰 RNA（siRNA）干扰 TXNIP 表达可降低 HCVcc 感染，而过表达 TXNIP 可促进 HCV 感染；HCV 感染可诱导 Huh7细胞 TXNIP 上调而不能诱导 Huh7．5．1细胞 TXNIP 上调；α干扰素、β干扰素和λ干扰素处理细胞均可上调 TXNIP 的表达。结论 HCV 感染诱导 TXNIP 表达上调，而 TXNIP 表达上调可促进 HCV 复制，宿主蛋白 TXNIP 在 HCV 复制、感染及免疫逃逸中具有重要作用。

关键词：肝炎病毒属硫氧还原蛋白结合蛋白干扰素类

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