检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2009年第8期23卷 969-973页

作者：刘安堂于大志张盈帆朱鴷陈欢任安经方超平蔡在龙江华第二军医大学长征医院整形外科上海200003 第二军医大学长征医院生物化学与分子生物学教研室上海200003 第二军医大学长征医院生理学教研室上海200003 第二军医大学长海医院中心实验室

目的观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250±25)g。随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一... 详细信息

目的观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250±25)g。随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一侧不行手术作为对照侧。术后观察大鼠一般情况,于术后1、2、4、10、15和30周,分别取6只大鼠测量实验侧和对照侧股薄肌肌肉收缩能力、肌湿重维持率,HE染色观察肌纤维横截面积,实时定量PCR检测MAFbx/Atrogin-1mRNA相对表达量,Western blot检测MAFbx蛋白表达。结果36只大鼠全部成活,切口愈合好,实验侧肢体功能无障碍。实验侧肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉最大单收缩力维持率和肌肉强直收缩力维持率均呈先降低(术后1～4周)后增加(术后4～30周)的趋势。MAFbxmRNA相对表达量术后2周最高,为对照侧7倍;术后15～30周逐渐下降,为对照侧1.1～1.5倍;各时间点实验侧与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblot检测结果显示术后1～15周,实验侧肌肉内MAFbx蛋白相对表达量与对照侧相比,差异均有统计学意义(P<0.05);术后30周差异无统计学意义(P>0.05)。肌湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率分别与最大单收缩力维持率和最大强直收缩力维持率的相关系数为0.95、0.75和0.93、0.68(P<0.05)。MAFbxmRNA及蛋白相对表达量分别与肌肉湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率、最大单收缩力维持率、最大强直收缩力维持率的相关系数为—0.62(P<0.05)、—0.45(P>0.05)、—0.72(P<0.05)、—0.78(P<0.05)和—0.95(P<0.05)、—0.82(P<0.05)、—0.89(P<0.05)、—0.54(P>0.05)。结论移植肌肉功能降低与肌肉萎缩密切相关。MAFbxmRNA和蛋白表达增高,尤其在获得神经支配后4～15周仍持续升高,可能是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的一个联系点。

关键词：肌肉游离移植泛素蛋白连接酶肌肉萎缩肌肉收缩大鼠

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哺乳动物神经细胞的去分化及诱导

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生理科学进展 2009年第2期40卷 142-146页

作者：谢佳芯许家军第二军医大学人体解剖学教研室上海200433

去分化是近年来细胞生物学,特别是新兴的干细胞生物学领域一个倍受关注的课题。大量实验证明,哺乳动物神经系统中各类神经细胞(如神经元、Schwann细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等)在适当条件下均可发生不同程度的以细胞幼稚化、重... 详细信息

去分化是近年来细胞生物学,特别是新兴的干细胞生物学领域一个倍受关注的课题。大量实验证明,哺乳动物神经系统中各类神经细胞(如神经元、Schwann细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等)在适当条件下均可发生不同程度的以细胞幼稚化、重新进入细胞周期和获得多向分化的潜能为主要特征的去分化表现。本文就哺乳动物各类神经细胞的去分化及其诱导条件、对神经再生修复等的作用作一综述。

关键词：哺乳动物神经细胞去分化诱导神经再生

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融合蛋白Kininogen D5_(60-148)-TRAIL_(114-281)的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2009年第4期16卷 336-341页

作者：宗英王梁华孙铭娟董晓毅王燕陆国才焦炳华第二军医大学新药评价中心上海200433 第二军医大学生物化学和分子生物学教研室上海200433 第二军医大学病理生理学教研室上海200433

目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL114-281(pMAL-TRAIL)和pMAL-Kininogen D560-148-TRAIL114-281(pMAL-KT),重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果:成功构建原核表达载体pMAL-KD5、pMAL-TRAIL和pMAL-KT,并获得纯化的融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT。融合蛋白MBP-KT与MBP-KD5、MBP-TRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBP-KT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论:融合蛋白Kininogen D560-148-TRAIL114-281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础。

关键词：高分子量激肽原肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体血管生成抑制因子胰腺肿瘤细胞

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透皮促渗剂对双乌跌打损伤药方中胡椒碱体外经皮渗透的影响

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第二军医大学学报 2009年第4期30卷 454-456页

作者：顾圣莹丁雪鹰高静高申第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433

目的:研究不同透皮促渗剂对复方跌打损伤药方中主要成分胡椒碱体外经皮渗透的促进作用。方法:采用Franz扩散池,选择氮酮、丙二醇、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、油酸、薄荷油及其组合作为透皮促渗剂,以预处理的离体小鼠皮肤作为渗透屏障,HPLC... 详细信息

目的:研究不同透皮促渗剂对复方跌打损伤药方中主要成分胡椒碱体外经皮渗透的促进作用。方法:采用Franz扩散池,选择氮酮、丙二醇、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、油酸、薄荷油及其组合作为透皮促渗剂,以预处理的离体小鼠皮肤作为渗透屏障,HPLC法测定接收液中胡椒碱的含量。结果:与空白对照组相比,除丙二醇以外,其余透皮促渗剂均能显著提高胡椒碱的渗透速率(P<0.05),其中以氮酮与NMP合用促渗效果最好,渗透速率达到4.49μ***-2.h-1。结论:氮酮与NMP联用的复合促透剂促渗效果最好,适合作为本复方的透皮促渗剂。

关键词：双乌跌打损伤药方胡椒碱透皮促渗剂透皮吸收

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透皮促渗剂对双乌跌打损伤药方体外透皮吸收和体内药效的影响

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中国药学杂志 2009年第8期44卷 607-608,609-611页

作者：顾圣莹丁雪鹰高静高申第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433

目的考察透皮促渗剂对双乌跌打损伤药方体外透皮吸收和体内药理效应的影响。方法采用Franz扩散池,以小鼠离体皮肤为渗透屏障,比较不同透皮促渗剂对双乌跌打损伤复方中指标成分胡椒碱透皮吸收的影响,并在此基础上筛选最佳透皮促渗剂的比... 详细信息

目的考察透皮促渗剂对双乌跌打损伤药方体外透皮吸收和体内药理效应的影响。方法采用Franz扩散池,以小鼠离体皮肤为渗透屏障,比较不同透皮促渗剂对双乌跌打损伤复方中指标成分胡椒碱透皮吸收的影响,并在此基础上筛选最佳透皮促渗剂的比例和浓度。采用小鼠热板法和二甲苯致小鼠耳肿胀实验,平行比较了含与不含透皮促渗剂药方的消炎镇痛作用。结果月月月月酮和NMP合用促透效果最好,稳态渗透速率达到4.1712μg·cm-2·h-1。NMP与月月月月酮比为7:3,浓度为3%时,对胡椒碱的促透作用最强。双乌跌打损伤药方有明显的消炎镇痛作用,促透剂的加入可以进一步加强药效(P<0.1)。结论采用浓度为3%,以此月月月月酮复合促透剂可取得对胡椒碱的最大促透效果,并提高药方消炎镇痛的作用。

关键词：促渗剂双乌跌打损伤药方胡椒碱热板法耳肿胀

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覆盆子二氯甲烷萃取物中的化学成分

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第二军医大学学报 2009年第10期30卷 1199-1202页

作者：游孟涛李亚葵郭美丽第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的:研究覆盆子二氯甲烷萃取物的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等技术提取分离覆盆子化学成分,用EI-MS、ES-MS、1H NMR、13C NMR、HMQC及HMBC等光谱方法鉴定化合物结构。结果:得到10种化合物,鉴定其中... 详细信息

目的:研究覆盆子二氯甲烷萃取物的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等技术提取分离覆盆子化学成分,用EI-MS、ES-MS、1H NMR、13C NMR、HMQC及HMBC等光谱方法鉴定化合物结构。结果:得到10种化合物,鉴定其中9种化合物,分别为二十六烷醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(Ⅲ)、对羟基苯甲醛(Ⅳ)、齐墩果酸(Ⅴ)、stigmast-5-en-3-ol,oleate(Ⅵ)、1H-2-indenone,2,4,5,6,7,7a-hexahydro-3-(1-methylethyl)-7a-methyl(Ⅷ)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(Ⅸ)、liballinol(Ⅹ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅹ均首次从该植物中分离得到。

关键词：覆盆子化学成分酚木质素

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PTEN在电离辐射诱导旁效应细胞中的表达变化

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第二军医大学学报 2009年第2期30卷 137-141页

作者：杨剑韩玲高娴第二军医大学海医系放射医学教研室上海200433

目的:研究PTEN基因在旁效应细胞中的表达变化。方法:采用未照射细胞与直接照射细胞按1:1共同培养,以及将直接照射细胞培养液离心加入未照射细胞中培养形成2种旁效应细胞模型,对比PTEN mRNA及蛋白表达在2种旁效应细胞、直接照射细胞、未... 详细信息

目的:研究PTEN基因在旁效应细胞中的表达变化。方法:采用未照射细胞与直接照射细胞按1:1共同培养,以及将直接照射细胞培养液离心加入未照射细胞中培养形成2种旁效应细胞模型,对比PTEN mRNA及蛋白表达在2种旁效应细胞、直接照射细胞、未照射细胞中的变化。结果:直接照射的PTEN蛋白表达与照射剂量有关,照射剂量越大其下调越为明显;PTEN蛋白表达下调程度与细胞的处理方式有关,以受照细胞培养液培养的旁效应细胞表达下调最为显著,且2种旁效应细胞中PTEN蛋白的表达下调程度均高于直接受照细胞(P<0.01)。结论:PTEN蛋白表达与低剂量电离辐射生物学效应及电离辐射旁效应的发生发展密切相关。

关键词： PTEN 电离辐射旁效应细胞增殖细胞周期

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纳米级二氧化钛对体外大鼠腔前卵泡生长发育成熟的影响

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第二军医大学学报 2009年第8期30卷 869-873页

作者：侯娟万旭英王飞许桂凤刘珍张天宝第二军医大学基础部卫生毒理学教研室上海200433

目的:采用大鼠腔前卵泡体外培养方法研究纳米级二氧化钛(TiO2)对大鼠卵泡发育及卵母细胞成熟的影响,揭示纳米TiO2有无雌性生殖毒性,为其安全性评价提供依据。方法:机械性分离大鼠腔前卵泡,单个卵泡在96孔板中连续培养。将卵泡随机分为5... 详细信息

目的:采用大鼠腔前卵泡体外培养方法研究纳米级二氧化钛(TiO2)对大鼠卵泡发育及卵母细胞成熟的影响,揭示纳米TiO2有无雌性生殖毒性,为其安全性评价提供依据。方法:机械性分离大鼠腔前卵泡,单个卵泡在96孔板中连续培养。将卵泡随机分为5组:3个25nmTiO2(12.5、25和50μg/ml)组、阴性对照组、微米级TiO2对照组。培养第10天诱导排卵,观察卵泡发育和卵母细胞成熟情况。结果:随着纳米级TiO2剂量增加,卵泡存活率、有腔形成率及卵丘-卵母细胞复合体(COCs)排出率呈下降趋势(P<0.05);与阴性对照组相比,微米级TiO2组对卵泡发育与卵母细胞成熟无明显影响;25μg/ml以上剂量纳米级TiO2组卵泡形态学明显异常,卵泡存活率及有腔形成率明显下降;50μg/ml纳米级TiO2可使处于成熟阶段的卵母细胞数减少。结论:25μg/ml剂量以上25nmTiO2可以抑制体外大鼠腔前卵泡的生长发育与卵母细胞成熟,而微米级TiO2在相同剂量下对卵泡的生长发育和卵母细胞的成熟无明显影响。提示纳米级TiO2有不同于微米级TiO2的毒作用性质,可能有雌性生殖毒性,应引起关注。

关键词：卵泡卵母细胞纳米级二氧化钛毒性试验

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肾透明细胞癌转移相关的CD99选择性剪接异构体的筛选

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第二军医大学学报 2009年第4期30卷 355-359页

作者：林丽萍武旗常文军侯建国张宏伟谭晓洁曹广文第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433

目的:寻找人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中CD99转移相关选择性剪接异构体,探讨CD99选择性剪接异构体表达与ccRCC转移的关系。方法:通过选择性剪接数据库(alternative splicing database,ASD)对CD99基因可能存... 详细信息

目的:寻找人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中CD99转移相关选择性剪接异构体,探讨CD99选择性剪接异构体表达与ccRCC转移的关系。方法:通过选择性剪接数据库(alternative splicing database,ASD)对CD99基因可能存在的选择性剪接异构体进行预测。运用自行设计的5对特异性引物,采用RT-PCR技术,在转移组织、发生及未发生转移的癌组织、癌旁组织的各混合样本中检测6种预测异构体的表达,再对电泳所获条带进行克隆、测序。在各个组织样本中检测CD99Ⅰ、CD99Ⅱ和新型CD99选择性剪接异构体(CD99-Ⅲ)的表达。结果:从6种预测异构体中筛选出一种新型异构体(CD99-Ⅲ)。该异构体在转移组织中表达率(8/9)高于未发生转移的原发癌组织(10/21,P<0.05)。CD99Ⅰ型在样本中均表达,CD99Ⅱ型在发生转移的原位癌组织中表达率(6/9)远高于未转移的原发癌组织(3/21,P=0.008)。结论:CD99-Ⅲ为一种新型选择性剪接异构体,且CD99Ⅱ型、CD99-Ⅲ的表达可能与ccRCC的转移进展有关。

关键词： CD99 肿瘤剪接异构体

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常氧酸性环境对肝癌细胞HepG2 HIF-1α蛋白表达及其活性的影响

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第二军医大学学报 2009年第1期30卷 5-8页

作者：徐佳骏彭兆云康志敏刘昀徐伟刚陶恒沂孙学军第二军医大学海军医学系潜水医学教研室上海200433

目的:观察常氧酸性环境对体外肝癌细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α蛋白表达及其活性的影响,初步探讨其在肿瘤生长中的作用。方法:体外培养肝癌细胞HepG2,以MTT法测定常氧酸性环境(AP组,pH6.5)作用20h后细胞存活率,... 详细信息

目的:观察常氧酸性环境对体外肝癌细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α蛋白表达及其活性的影响,初步探讨其在肿瘤生长中的作用。方法:体外培养肝癌细胞HepG2,以MTT法测定常氧酸性环境(AP组,pH6.5)作用20h后细胞存活率,并与正常培养细胞(SD组,pH7.2)作比较;Western印迹法检测AP组和SD组HepG2细胞核内HIF-1α蛋白表达的变化;应用转录因子DNA结合ELISA试剂盒(TransAMTM)分析AP组和SD组HepG2细胞核内HIF-1DNA结合活性的变化;免疫细胞化学法和Western印迹法检测各组HepG2细胞内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达的变化。结果:常氧酸性环境(pH6.5)作用20h后,AP组细胞存活率为(98.71±1.79)%,与SD组相比轻微降低,但无统计学意义(P>0.05)。Western印迹结果表明,AP组HepG2细胞核内HIF-1α和胞内VEGF蛋白条带平均灰度值分别是SD组的(9.34±1.67)倍和(3.42±0.83)倍,组间均有统计学差异(P<0.01)。AP组HepG2细胞核内HIF-1DNA结合活性明显高于对照组(P<0.01)。结论:常氧酸性环境能显著提高HepG2细胞HIF-1蛋白含量及其DNA结合活性,同时其下游基因VEGF蛋白含量增加,推测除低氧环境外,酸性环境也可能是导致恶性肿瘤中HIF-1高表达的原因之一。

关键词：酸性环境低氧诱导因子血管内皮生长因子 HepG2细胞

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