检索结果-内蒙古大学图书馆

海军军医大学学报 2025年第2期46卷 276-278页

作者：安平平郭杰潘雪宋姗姗周利华张善芳陈燕中国人民解放军陆军第九五四医院检验科山南856000 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院实验诊断科上海200433 上海市宝山区中西医结合医院呼吸与危重症医学科上海200433

1病例资料患者男,42岁,因“右侧胸壁闷痛症状持续半年、加重2周”于2024年1月8日收入海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院治疗。患者1周前于当地医院行胸部CT检查发现右胸膜占位性病变,疑似恶性肿瘤(间皮瘤可能性大)。患者既往体健... 详细信息

1病例资料患者男,42岁,因“右侧胸壁闷痛症状持续半年、加重2周”于2024年1月8日收入海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院治疗。患者1周前于当地医院行胸部CT检查发现右胸膜占位性病变,疑似恶性肿瘤(间皮瘤可能性大)。患者既往体健,否认外伤史及其他慢性病史,否认家族性遗传病及传染病史,否认粉尘、有毒化学物品及放射性物质接触史。入院体格检查:正常面容,神志清楚,全身皮肤黏膜无黄染、瘙痒,无皮疹、皮下出血,无皮下结节、瘢痕,无皮肤巨痣、黑痣突然增大等,全身浅表淋巴结无肿大;双侧胸廓未见明显异常,右侧胸廓叩诊浊音,左侧叩诊未闻及明显异常;心、肺、腹及四肢关节未见明显异常。

关键词：胸膜肿瘤黑色素瘤常规细胞学检查胸腔积液

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一种快速构建cRNA标准曲线检测基因表达方法的建立

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生物化学与生物物理进展 2003年第3期30卷 474-477页

作者：张燕沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

为了建立一种适于实验室乃至常规定量检测mRNA表达的、可快速构建cRNA标准曲线的方法 ,设计带有T7启动子序列和PolyT序列的引物对目的基因和内参照进行PCR ,克隆入载体作为体外合成cRNA的模板 ,快速构建cRNA标准 .结果表明 :该曲线的线... 详细信息

为了建立一种适于实验室乃至常规定量检测mRNA表达的、可快速构建cRNA标准曲线的方法 ,设计带有T7启动子序列和PolyT序列的引物对目的基因和内参照进行PCR ,克隆入载体作为体外合成cRNA的模板 ,快速构建cRNA标准 .结果表明 :该曲线的线性范围至少达 6个数量级 ,相关系数为 0 99.该法快速、简便。

关键词： cRNA 标准曲线检测基因表达 RT—PCR

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瘦素对小鼠Th17细胞生成的影响及相关机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2015年第6期35卷 442-447页

作者：卢龙坤韦腾飞朱力吴豫沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的探讨瘦素对Th17细胞生成的影响及相关机制。方法以瘦素基因敲除的ob／ob小鼠和同系野生小鼠为研究对象。流式细胞术检测Th17细胞比例，免疫磁珠法分选脾脏CD4＊T细胞，在体外培养中拈抗瘦素或添加不同浓度的瘦素以观察瘦素对Th17细... 详细信息

目的探讨瘦素对Th17细胞生成的影响及相关机制。方法以瘦素基因敲除的ob／ob小鼠和同系野生小鼠为研究对象。流式细胞术检测Th17细胞比例，免疫磁珠法分选脾脏CD4＊T细胞，在体外培养中拈抗瘦素或添加不同浓度的瘦素以观察瘦素对Th17细胞生成的影响，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）和Luminex检测技术分别检测经体外培养72h后小鼠脾脏CIM＊T细胞中与Th17细胞密切相关细胞因子等mRNA相对表达水平及培养上清液中蛋白的表达水平。结果ob／ob鼠外周血、脾脏中Th17细胞的比例均显著低于野生鼠[（0．49±0．03）％VS（1．29±0．1）％、（1．56±0．22）％VS（2．47±0．11）％]；体外培养中，野生鼠脾脏CD4＊T细胞经瘦素抗体处理后，Th17细胞的比例明显减少[（2．04±0．11）％VS（3．39±0．31）％]；ob／ob鼠脾脏CD4＊T细胞加入不同浓度瘦素后，Th17细胞比例则以剂量依赖的形式增加[（2．15±0．25）％，（3．12±0．37）％VS（1．41±0．13）％]；ob／ob鼠脾脏CD4＊T细胞经体外培养后RORγt、IL-17A和IL-6mRNA的相对表达量及上清中IL-17A和IL-6蛋白表达水平均低于野生鼠，但TGF-β和IL-23mRNA表达水平没有差异。结论瘦素缺乏可导致小鼠Th17细胞的生成显著减少，也造成RORγt、IL-17A和IL-6mRNA及IL-17和IL-6蛋白的表达水平显著降低。瘦素可能通过上调RORγt和IL-6的转录，促进Th17细胞的生成及效应分子分泌。

关键词：瘦素 Th17细胞白细胞介素17 RORγt

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结直肠癌循环肿瘤细胞及DNA的研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第3期22卷 393-398页

作者：吴康邓安梅颜宏利第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,尽管联合应用手术、化疗、放疗可提高患者的生存率,但仍有大量患者因术后转移和复发死亡。循环肿瘤细胞及循环肿瘤DNA对结直肠癌的早期诊断、疗效监测、预后评估以及个体化治疗方案制定均有重要意义,已... 详细信息

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,尽管联合应用手术、化疗、放疗可提高患者的生存率,但仍有大量患者因术后转移和复发死亡。循环肿瘤细胞及循环肿瘤DNA对结直肠癌的早期诊断、疗效监测、预后评估以及个体化治疗方案制定均有重要意义,已成为近年来研究的热点。本文对近年来结直肠癌循环肿瘤细胞及循环肿瘤DNA的检测技术及其在早期诊断、疗效监测和预后判断中的应用进展作一综述。

关键词：结直肠癌循环肿瘤细胞循环肿瘤DNA

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一种新型炎症诱导型腺病毒表达系统的功能研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第4期27卷 337-342页

作者：蔡刚聂小蒙管政张军沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433 第二军医大学附属长海医院呼吸内科

目的构建一种新型炎症诱导型重组腺病毒载体用于生理调控型基因治疗。方法构建携带IL-1β增强子（-3690／-2720）／IL-6启动子（-590／＋2）重组体（IL1／IL6）的荧光素酶报告质粒和重组腺病毒载体，体外转染HepG2和RAW264．7细胞，... 详细信息

目的构建一种新型炎症诱导型重组腺病毒载体用于生理调控型基因治疗。方法构建携带IL-1β增强子（-3690／-2720）／IL-6启动子（-590／＋2）重组体（IL1／IL6）的荧光素酶报告质粒和重组腺病毒载体，体外转染HepG2和RAW264．7细胞，观察各种细胞外刺激对IL1／IL6启动子活性调控的变化，并以动物实验观察炎症因子能否在体内通过调控IL1／IL6的启动活性而控制目的基因的表达。结果经荧光素酶分析显示IL1／IL6的本底启动活性较低，可经多种细胞外刺激而诱导活化，且具有较广泛的活性诱导范围；在体内，它可随炎症反应程度的变化而自主地调控外源基因的表达。结论携带IL1／IL6重组体启动子的重组腺病毒载体可作为生理反应调控型基因治疗载体用于全身性炎症、自身免疫性疾病等的治疗与研究。

关键词：基因治疗腺病毒载体可调控型启动子炎症反应

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可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系

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中华医学杂志 2005年第5期85卷 318-323页

作者：杨佳荟沈茜赵东宝蔡青韩星海第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433 第二军医大学附属长海医院风湿免疫科上海200433

目的　检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础... 详细信息

目的　检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础。方法　采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者 (n=51)以及健康体检者 (n=30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系。结果　与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0 05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0 05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者 (P<0 05);血清抗dsDNA抗体( +)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种 )异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( -)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0 05)。

关键词： ICOS SLE 患者 CD45RO 抗dsDNA抗体 T细胞亚群外周血水平活动结论

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ICOS共刺激途径中MAPK家族信号分子对活动期SLE患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第9期27卷 835-842页

作者：蔡刚杨佳荟蔡青汪怀周赵东宝韩星海沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433 第二军医大学附属长海医院风湿免疫科上海200433

目的研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激途径中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族信号分子对活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用。方法体外分离纯化活动期SLE患者和正常人外周总T细胞、CD4^+和CD8^+ T细胞,予以抗C... 详细信息

目的研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激途径中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族信号分子对活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用。方法体外分离纯化活动期SLE患者和正常人外周总T细胞、CD4^+和CD8^+ T细胞,予以抗CD3/抗ICOS刺激,通过Western blot检测信号分子的活化水平,ELISA检测培养上清细胞因子表达,~3H-TdR法测定细胞的增殖水平。结果活动期SLE病人CD4^+或CD8^+ T细胞经ICOS共刺激后,胞外信号调节激酶(ERK)的活化水平明显低于正常人,CD4^+或总T细胞分泌IL-2明显低于正常人,PD98059抑制ERK活化可致细胞增殖水平下降与IL-2分泌减少,SB-203580抑制p38MAPK活化可致IL-10分泌减少,细胞因子IL-2能明显促进T细胞的增殖水平。结论活动期SLE患者ICOS共刺激T细胞增殖功能降低与其ERK信号活化障碍所致的IL-2分泌减少密切相关,MAPK家族信号分子在ICOS共刺激不同T细胞亚群增殖与细胞因子分泌中具有不同的作用。

关键词：系统性红斑狼疮丝裂原活化蛋白激酶细胞因子细胞增殖可诱导共刺激分子

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miR-146a调节原发性胆汁性肝硬化患者单核细胞对LPS以及PolyI：C的反应

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第5期33卷 339-345页

作者：黄元兰陈燕孙懿邓安梅仲人前第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的分析原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者单核细胞对内毒素（LPS）和多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸（PolyI：C）刺激呈现出的高反应性是否与miR-146a有关。方法以10μg／rnl的LPS或PolyI：C分别刺激PBC患者和健康个体的外周血单核细胞，采用E... 详细信息

目的分析原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者单核细胞对内毒素（LPS）和多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸（PolyI：C）刺激呈现出的高反应性是否与miR-146a有关。方法以10μg／rnl的LPS或PolyI：C分别刺激PBC患者和健康个体的外周血单核细胞，采用ELISA检测培养基内IL-1B、IL-6、TNF-d、IFN-a水平的变化，采用RT-PCR检测二者单核细胞内miR-146a、miR-21、let-7e、miR-155、miR-125b表达变化情况。同时通过改变单核细胞系THP-1细胞株内miR-146a的表达来研究miR-146a在单核细胞对LPS和PolyI：C刺激诱导活化中的调控作用。结果LPS或PolyI：C诱导PBC患者单核细胞释放炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-a和IFN-仅的能力显著强于健康个体单核细胞，但二者诱导PBC患者单核细胞表达miR-146a的能力弱于健康个体。在LPS或PolyI：C的刺激下，改变THP-1细胞内miR-146a可以调节部分炎症因子的释放。结论在接受到LPS或PolyI：C刺激后，PBC患者单核细胞内miR-146a表达受损是导致单核细胞过度活化的原因之一。

关键词： miR-146a 原发性胆汁性肝硬化固有免疫炎症因子

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SLE患者外周血T细胞亚群ICOS与CD28共表达水平与疾病的关系

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第3期25卷 248-251页

作者：杨佳荟沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的　观察系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus ,SLE)病人外周血CD4 +及CD8+T细胞表面可诱导共刺激分子 (inducibleco stimulator ,ICOS)及CD2 8共表达水平 ,探讨ICOS和CD2 8共表达水平与SLE疾病的关系。方法　采用三色流式细... 详细信息

目的　观察系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus ,SLE)病人外周血CD4 +及CD8+T细胞表面可诱导共刺激分子 (inducibleco stimulator ,ICOS)及CD2 8共表达水平 ,探讨ICOS和CD2 8共表达水平与SLE疾病的关系。方法　采用三色流式细胞术检测SLE病人 (n =51 )及正常人 (n =30 )外周血CD4 +及CD8+T细胞表面ICOS与CD2 8共表达水平 ,并结合SLE病人疾病活动程度、临床表现等进行分析。结果　与正常人相比 ,SLE活动期和稳定期病人外周血CD4 +T细胞中仅表达ICOS不表达CD2 8(即CD2 8- ICOS+)的细胞比例明显升高 ,但活动期病人和稳定期病人之间并无差异 ;活动期病人外周血CD8+T细胞上同时表达CD2 8和ICOS的细胞 (即CD2 8+ICOS+细胞 )和CD2 8- ICOS+细胞比例都明显升高 ;同一SLE病人在疾病活动期CD4 +和CD8+T细胞中CD2 8+ICOS+的细胞比例和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例明显高于该病人经过治疗病情稳定时 ;初发未治疗SLE病人仅CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞的比例比复发病人明显升高 ;血清抗dsD NA抗体 ( + )病人和血清免疫球蛋白含量 (IgG、IgA和IgM中任何一种 )异常升高的病人外周血CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( )和血清免疫球蛋白含量正?

关键词： CD28 ICOS 外周血T细胞亚群共表达 SLE患者水平 CD8^+T细胞 erythematosus CD4^+T细胞抗dsDNA抗体免疫球蛋白含量可诱导共刺激分子系统性红斑狼疮流式细胞术检测人外周血疾病活动程度 SLE活动期细胞表面临床表现

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可调控性鼠PLP-Ig嵌合体重组腺病毒载体的构建和表达

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 667-670页

作者：张燕刘梦蕾沈茜第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的 :构建和表达可调控鼠蛋白脂质蛋白 (PLP) 免疫球蛋白重组腺病毒载体。方法 :采用常规分子生物学方法 ,从WT 1杂交瘤细胞中抽提总RNA ,克隆小鼠Ig重链Fc基因。将编码PLP13 9-151的DNA与信号肽设计在引物上 ,经两次克隆可形成可分泌... 详细信息

目的 :构建和表达可调控鼠蛋白脂质蛋白 (PLP) 免疫球蛋白重组腺病毒载体。方法 :采用常规分子生物学方法 ,从WT 1杂交瘤细胞中抽提总RNA ,克隆小鼠Ig重链Fc基因。将编码PLP13 9-151的DNA与信号肽设计在引物上 ,经两次克隆可形成可分泌型PLP Ig。经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架连接 ,鉴定后在HEK2 93细胞中包装。获得高滴度病毒后 ,用Westernblot鉴定目的基因的表达。结果 :PLP Ig重组腺病毒经测序、限制性内切酶酶切分析及PCR等鉴定 ,同预期结果相一致。Westernblot检测病毒感染的细胞 ,发现目的基因得到特异性表达且可被四环素调节。结论 :构建了可调控的小鼠PLP Ig重组腺病毒载体并得到正确表达 ,为进一步基因治疗实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)

关键词： PLP-Ig 腺病毒载体可调控性载体小鼠

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