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海军军医大学学报 2024年第5期45卷 606-612页

作者：杜涵赫明达庞妍刘清桂高俊灵王敏君海军军医大学(第二军医大学)基础医学院细胞生物学教研室上海200433 上海理工大学公利医疗技术学院精准医疗与再生医学系上海200135

生长分化因子15(GDF15)是TGF-β超家族的成员,在人体多种组织中表达。正常生理条件下GDF15在除胎盘和前列腺组织以外的其他组织中表达量均较低,随着衰老的发生、运动或压力的刺激,GDF15蛋白的表达水平明显增高。GDF15与其受体胶质细胞... 详细信息

生长分化因子15(GDF15)是TGF-β超家族的成员,在人体多种组织中表达。正常生理条件下GDF15在除胎盘和前列腺组织以外的其他组织中表达量均较低,随着衰老的发生、运动或压力的刺激,GDF15蛋白的表达水平明显增高。GDF15与其受体胶质细胞源性神经营养因子家族受体α样(GFRAL)蛋白结合后,可促进细胞内脂肪酸β氧化和脂质分解,从而缓解脂肪肝等的发展,同时也能降低机体的食物摄入量从而抑制肥胖。GDF15还可作为炎症因子调控衰老和纤维化相关疾病的发生。本文主要概述GDF15在衰老、代谢和炎症相关疾病中的调控作用,为开发以GDF15为靶点的疾病治疗策略提供思路。

关键词：生长分化因子15 衰老脂肪代谢炎症纤维化

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单细胞转录组测序在黑色素瘤中的研究进展

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海军军医大学学报 2024年第2期45卷 155-160页

作者：陈珂欣熊俊薛春雨海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院整形外科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院组织胚胎学教研室上海200433

黑色素瘤是皮肤癌中致死性最高的一种恶性肿瘤,其发生、发展机制复杂,具有高度侵袭性、转移性和致死性,患者预后差。因此,加强该病基础研究尤为重要。单细胞转录组测序作为近年来快速发展的新技术,以其特有的优势如探索细胞亚群的异质... 详细信息

黑色素瘤是皮肤癌中致死性最高的一种恶性肿瘤,其发生、发展机制复杂,具有高度侵袭性、转移性和致死性,患者预后差。因此,加强该病基础研究尤为重要。单细胞转录组测序作为近年来快速发展的新技术,以其特有的优势如探索细胞亚群的异质性、鉴定稀有细胞、使用生物信息算法揭示不同组织细胞的分化轨迹等,极大地推动了黑色素瘤的基础与临床研究发展。本文就黑色素瘤单细胞转录组测序研究中肿瘤异质性和肿瘤免疫方面的进展进行综述。

关键词：黑色素瘤单细胞测序免疫治疗肿瘤异质性

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黄连素-白及多糖-羧甲基壳聚糖复合敷料的设计和药效评价

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海军军医大学学报 2023年第6期44卷 718-725页

作者：龚彦溶王智博石磊王喻綮向兴张慧卿海军军医大学(第二军医大学)中医系中药方剂教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院上海200433

目的制备黄连素-白及多糖-羧甲基壳聚糖复合敷料(BBCCD),并评估其物理性能及药效。方法采用真空冷冻干燥法制备BBCCD。根据孔隙率、吸水率、透气率筛选最佳处方配比。通过扫描电子显微镜观察所制备的BBCCD的微观结构,抑菌圈法评价其抑... 详细信息

目的制备黄连素-白及多糖-羧甲基壳聚糖复合敷料(BBCCD),并评估其物理性能及药效。方法采用真空冷冻干燥法制备BBCCD。根据孔隙率、吸水率、透气率筛选最佳处方配比。通过扫描电子显微镜观察所制备的BBCCD的微观结构,抑菌圈法评价其抑菌效果,CCK-8法检测其细胞毒性。将新西兰兔血液样本随机分为医用纱布组、明胶海绵组、BBCCD组,通过体外凝血实验评价BBCCD的凝血效果(n=6)。将72只SD大鼠随机分为医用纱布组、明胶海绵组和BBCCD组,通过大鼠股静脉、肝脏及断尾止血实验分析止血时间(n=8);将54只SD大鼠随机分为空白组、壳聚糖敷料组和BBCCD组,采用伤口愈合率(n=6)和血清IL-1β、TNF-α、IL-10水平(n=4)测定及创面病理学变化综合评价BBCCD的促愈合效果。结果BBCCD中5%白及多糖溶液与5%羧甲基壳聚糖溶液的最佳体积比为1∶3。BBCCD为膜性海绵状多孔结构,无明显毒性,可吸收创面渗液而产生强黏附性,黄连素含量为(52.39±0.87)mg/g,对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均有抑菌效果。BBCCD组的体外凝血指数、股静脉创伤止血时间、肝脏创伤止血时间、断尾止血时间均优于明胶海绵组和医用纱布组(P均<0.01)。在皮肤创面修复的第3、5、7、14天,BBCCD组大鼠的伤口愈合率均高于壳聚糖敷料组和空白组(P均<0.05)。在皮肤创面修复的第7、14天,与壳聚糖敷料组和空白组相比,BBCCD组大鼠血清IL-10水平均升高,IL-1β、TNF-α水平均降低(P均<0.05)。病理结果显示,BBCCD在伤口愈合的初期可促进新生肉芽组织和毛细血管的生成,减少炎症反应,加速创面愈合。结论所制备的BBCCD性质稳定,具有良好的抑菌、止血及促创面愈合效果。

关键词：黄连素白及多糖羧甲基壳聚糖复合敷料止血创面愈合

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围妊娠期高血清叶酸水平雌性小鼠模型的建立及高血清叶酸水平对胚胎心脏发育的影响

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海军军医大学学报 2023年第6期44卷 666-671页

作者：郭姝怡高娟王瀚宇董家豪谢岩胡斯琦安心宇李桐帆薛赓海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433 海军青岛特勤疗养中心疗养五科青岛266071 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院学员四大队上海200433

目的通过高叶酸含量配方饲料结合血清叶酸检测建立围妊娠期高血清叶酸水平的雌性小鼠模型,并研究围妊娠期增补叶酸导致血清叶酸水平升高对后代心脏发育的影响。方法根据文献报道设计了正常叶酸含量(2.0 mg/kg)和高叶酸含量(10.0、20.0、... 详细信息

目的通过高叶酸含量配方饲料结合血清叶酸检测建立围妊娠期高血清叶酸水平的雌性小鼠模型,并研究围妊娠期增补叶酸导致血清叶酸水平升高对后代心脏发育的影响。方法根据文献报道设计了正常叶酸含量(2.0 mg/kg)和高叶酸含量(10.0、20.0、40.0 mg/kg)的配方饲料。30只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分成5组(每组6只),其中1组使用普通饲料喂养,其余4组分别使用上述4种配方饲料喂养。喂养2周后,根据血清叶酸水平对4组配方饲料喂养的雌鼠(24只)重新分组:正常血清叶酸组(血清叶酸水平<2000 pg/mL)、高血清叶酸组(2000 pg/mL≤血清叶酸水平<3000 pg/mL)、超高血清叶酸组(血清叶酸水平≥3000 pg/mL)。分组后继续使用相应的配方饲料饲养,并与普通饲料喂养的雄鼠合笼,以发现阴道栓当天作为孕0.5 d(E0.5)计算孕龄。获取不同孕龄的胎鼠心脏组织样本,通过H-E染色、免疫组织化学染色对孕10.5 d(E10.5)、孕11.5 d(E11.5)和孕13.5 d(E13.5)胎鼠心脏发育相关指标进行检测。结果随着饲料中叶酸含量的增加,雌鼠的平均血清叶酸水平呈现逐渐升高的趋势,但是不同组间血清叶酸水平差异没有统计学意义(P=0.163)。相较于正常血清叶酸组和高血清叶酸组,超高血清叶酸组胎鼠的心脏表现出间叶组织缺乏(E10.5)、心肌细胞减少且增生不活跃(E10.5)、心房与心室壁厚度均减少(E11.5,P均<0.001)、磷酸化组蛋白H3阳性率降低(E11.5,P均<0.001)、背侧间充质突出缺失(E13.5)、右心耳和心室流出道结构异常(E13.5)及原发孔型房间隔缺损等房室间隔缺损表现(E13.5)。结论通过围妊娠期增补叶酸结合血清叶酸检测构建高血清叶酸水平雌性小鼠模型的方法可行、有效。围妊娠期雌性小鼠增补叶酸导致的血清叶酸水平剧烈升高与后代心脏发育异常相关。

关键词：围妊娠期增补叶酸血清叶酸水平心脏发育动物模型

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缺血性脑卒中后小鼠脑组织中星形胶质细胞的异质性分析

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海军军医大学学报 2023年第7期44卷 778-784页

作者：范杏飞赵云鹏王多祥付瑞锋王越海军军医大学(第二军医大学)基础医学院组织胚胎学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)转化医学研究中心干细胞与再生医学研究室上海200433

目的基于单细胞测序技术对缺血性脑卒中(IS)后脑组织中星形胶质细胞的动态变化进行研究,以更好地理解星形胶质细胞在IS发生、发展中的作用。方法利用基因表达汇编(GEO)数据库下载IS小鼠脑组织测序数据(GSE227651),采用典型关联分析(C... 详细信息

目的基于单细胞测序技术对缺血性脑卒中(IS)后脑组织中星形胶质细胞的动态变化进行研究,以更好地理解星形胶质细胞在IS发生、发展中的作用。方法利用基因表达汇编(GEO)数据库下载IS小鼠脑组织测序数据(GSE227651),采用典型关联分析(CCA)法进行数据整合,通过t-分布随机近邻嵌入(tSNE)聚类降维分析获取不同的细胞亚群,使用SingleR包对不同细胞亚群进行注释;进一步通过tSNE聚类降维分析获取不同的星形胶质细胞亚群,并对不同星形胶质细胞亚群的数量改变和功能状态进行分析;利用Monocle包对不同星形胶质细胞亚群所处的发育阶段进行分析;利用CellChat包对星形胶质细胞与其他细胞亚群之间的配体-受体相互作用情况进行动态分析。结果下载获得GSE227651测序数据,整合聚类分析后将小鼠脑组织细胞聚类为19个细胞亚群,注释为16种不同的细胞类型。进一步对星形胶质细胞进行聚类分析,分为6个星形胶质细胞亚群,其中亚群0和亚群3在IS后第1天的数目占比相较于健侧对照降低,在IS后第3和第7天的占比逐渐升高;而亚群2和亚群5在IS后第1天的数目占比相较于健侧对照升高,在IS后第3和第7天的占比逐渐降低;亚群1和亚群4在IS后不同时间点的变化不大。根据功能分析将星形胶质细胞亚群2和亚群5定义为反应性星形胶质细胞,亚群0和亚群3定义为修复性星形胶质细胞,亚群1和亚群4定义为静息性星形胶质细胞。根据拟时序分析结果进一步将星形胶质细胞亚群2定义为急性反应性星形胶质细胞,亚群0定义为缺血损伤后修复性星形胶质细胞。细胞配体-受体相互作用分析显示,星形胶质细胞与星形胶质细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞、内皮细胞、巨噬细胞、上皮细胞和神经元的配体-受体作用关系随时间动态改变,在IS后第1天主要通过与NK细胞建立联系介导炎症反应,而在IS后第3天开始通过与内皮细胞和神经元联系介导神经血管功能的恢复。结论星形胶质细胞的功能状态在IS后随时间动态改变,在IS后的早期可能主要通过急性反应性星形胶质细胞介导损伤后的急性炎症反应,而从IS后第3天开始可能主要通过缺血损伤后修复性星形胶质细胞参与损伤后脑组织的功能重建。

关键词：缺血性脑卒中星形胶质细胞单细胞测序拟时序分析

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柯里拉京调控AMPK-自噬信号改善高脂高果糖饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝病

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中国药理学通报 2023年第9期39卷 1725-1730页

作者：汪晶莹杜宏梅陈明曹辉童宁叶明灯俞斐南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)药学部江苏南京210037 安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032

目的探究柯里拉京通过调控AMPK-自噬信号对高脂高果糖饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝病的影响。方法健康雄性8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和柯里拉京给药组,其中模型组和柯里拉京给药组小鼠于8周龄开始给予高脂高果糖饮食饲... 详细信息

目的探究柯里拉京通过调控AMPK-自噬信号对高脂高果糖饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝病的影响。方法健康雄性8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和柯里拉京给药组,其中模型组和柯里拉京给药组小鼠于8周龄开始给予高脂高果糖饮食饲养4周,柯里拉京给药组小鼠同时腹腔注射柯里拉京20 mg·kg-1,隔天给药1次,连续给药4周,对照组和模型组给予等剂量生理盐水。造模和给药结束后小鼠处死并记录其肝质量,HE染色、油红O染色、Masson染色观察肝组织病理学特征,试剂盒检测血清和肝脏组织中生化指标,Western blot检测肝脏自噬和p-AMPK水平。结果实验结果发现,模型组小鼠肝质量增加,血清中AST、ALT明显升高,肝脏中出现了大量的脂肪空泡和严重的脂质沉积并有轻度的胶原纤维增生,肝脏中TG水平明显升高,柯里拉京干预后小鼠肝质量降低,肝脏病理改变得到明显改善,TG水平降低;Western blot结果发现,模型组肝脏中Atg7和Atg5等自噬相关蛋白水平明显降低,p-AMPK水平也明显降低,柯里拉京干预后明显升高p-AMPK,并上调自噬水平。结论柯里拉京可以改善高脂高果糖饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝病,其机制可能是通过促进AMPK磷酸化进而上调自噬水平。

关键词：高脂高果糖饮食非酒精性脂肪肝柯里拉京 p-AMPK 自噬

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地舒单抗联合免疫检查点抑制剂在非小细胞肺癌骨转移中的临床研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第5期31卷 528-534页

作者：朱志朋(综述) 虞淦军许炜(审阅) 海军军医大学第二附属医院骨肿瘤科上海200003 海军军医大学基础医学院免疫学教研室暨免疫与炎症全国重点实验室上海200433

地舒单抗联合免疫检查点抑制剂在临床治疗骨转移的非小细胞肺癌中取得了良好的治疗效果,其可能通过影响TME、调节T细胞功能、打破中央耐受以及直接作用于RANKL表达的免疫细胞等多种途径来增强抗肿瘤免疫应答。基于一系列临床研究的探索... 详细信息

地舒单抗联合免疫检查点抑制剂在临床治疗骨转移的非小细胞肺癌中取得了良好的治疗效果,其可能通过影响TME、调节T细胞功能、打破中央耐受以及直接作用于RANKL表达的免疫细胞等多种途径来增强抗肿瘤免疫应答。基于一系列临床研究的探索证明其联合治疗可以明显增加患者的无症状生存期和总生存期,提高患者的生存质量。目前联合疗法已经写入肺癌骨转移的指南用药。但现研究仍存在用药机制不明,缺少大型随机对照研究的数据支持及联合用药的用法指南,以及安全性、实用性评估等问题。本文综述了相关研究进展,为出现骨转移的非小细胞肺癌的治疗提供参考。

关键词：地舒单抗免疫检查点抑制剂非小细胞肺癌骨转移临床研究

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青春期社会隔离致实验动物抑郁行为的脑机制研究进展

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海军军医大学学报 2023年第10期44卷 1219-1227页

作者：齐天胡婷王伟海军军医大学(第二军医大学)基础医学院上海200433 海军军医大学(第二军医大学)心理系军事应激心理学教研室上海200433

青春期社会隔离作为一种应激源会导致动物和人类的社会行为以及神经内分泌系统网络功能改变。大量研究发现暴露于社会隔离压力会诱发大脑不同区域功能发生特异性改变,以及下丘脑-垂体-肾上腺轴的激活,多巴胺、5-羟色胺、γ-氨基丁酸、... 详细信息

青春期社会隔离作为一种应激源会导致动物和人类的社会行为以及神经内分泌系统网络功能改变。大量研究发现暴露于社会隔离压力会诱发大脑不同区域功能发生特异性改变,以及下丘脑-垂体-肾上腺轴的激活,多巴胺、5-羟色胺、γ-氨基丁酸、谷氨酸等神经递质的合成释放及其受体的敏感度改变,这些改变会诱发动物及人类出现不同程度的抑郁样行为,与抑郁症的发生密切相关。青春期是大脑神经网络、功能和化学重组的关键时期,相较于成年期社会隔离,青春期社会隔离会产生持续、难以逆转的消极影响,大大增加个体发生精神疾病的风险。本文就青春期社会隔离致抑郁的相关脑机制进行综述,探讨青春期社会隔离对大脑发育、内分泌、神经递质以及胶质细胞的特异影响,讨论其与抑郁发生的相关性。

关键词：青春期社会隔离抑郁脑机制

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抑制转化生长因子β和Notch信号通路诱导人胆囊上皮细胞分化为功能性肝细胞样细胞

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海军军医大学学报 2023年第5期44卷 542-550页

作者：王紫君杜涵徐守佳李俊霖王敏君陈费海军军医大学(第二军医大学)基础医学院细胞生物学教研室上海200433 上海拜羡生物科技有限公司上海201318

目的通过小分子化合物改变细胞命运,诱导人胆囊上皮细胞(hGBEC)分化为具有功能的肝细胞样细胞。方法在基质胶中对原代hGBEC进行三维培养,生长培养基中添加B27添加剂、N2添加剂、N-乙酰半胱氨酸、表皮生长因子、肝细胞生长因子等。添加... 详细信息

目的通过小分子化合物改变细胞命运,诱导人胆囊上皮细胞(hGBEC)分化为具有功能的肝细胞样细胞。方法在基质胶中对原代hGBEC进行三维培养,生长培养基中添加B27添加剂、N2添加剂、N-乙酰半胱氨酸、表皮生长因子、肝细胞生长因子等。添加小分子化合物/蛋白因子对细胞进行诱导分化,筛选出关键作用因子。采用PCR、qPCR和免疫荧光染色检测干细胞标志物及肝细胞相关标志物的表达情况,通过脂肪BODIPY-493染色、糖原过碘酸希夫染色和白蛋白ELISA检测评估细胞的肝样功能。结果三维培养的hGBEC表达造血干细胞抗原CD133、上皮细胞黏附分子、肝细胞核因子4α等肝脏干细胞和肝前体细胞标志物。TGF-β信号通路抑制剂和Notch信号通路抑制剂是诱导hGBEC分化的关键作用因子。分化条件下所得细胞表达肝细胞功能标志物α1-抗胰蛋白酶、细胞色素P4503A4、白蛋白和延胡索酰乙酰乙酸水解酶,可以贮存糖原,具有合成脂肪的能力,能够分泌白蛋白。结论hGBEC可在体外长期培养,通过抑制TGF-β和Notch信号通路可初步诱导其分化为具有部分肝功能的肝细胞样细胞。

关键词：胆囊上皮细胞转化生长因子β Notch信号通路肝细胞细胞分化

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巨噬细胞在间充质干细胞治疗骨关节炎中的作用

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海军军医大学学报 2024年第6期45卷 764-769页

作者：张文博陈祖祥刘镇孙爱军单乐天赵东宝海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院风湿免疫科上海200433 浙江省骨伤研究所杭州311400 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院人体解剖学教研室上海200433

间充质干细胞(MSC)治疗骨关节炎是目前研究前沿与热点。研究证明,巨噬细胞在MSC治疗骨关节炎中起重要作用,MSC促进巨噬细胞向选择性活化巨噬细胞(M2表型)极化是其治疗骨关节炎的重要机制,这一机制涉及MSC分泌的一些蛋白和miRNA调控。此... 详细信息

间充质干细胞(MSC)治疗骨关节炎是目前研究前沿与热点。研究证明,巨噬细胞在MSC治疗骨关节炎中起重要作用,MSC促进巨噬细胞向选择性活化巨噬细胞(M2表型)极化是其治疗骨关节炎的重要机制,这一机制涉及MSC分泌的一些蛋白和miRNA调控。此外,MSC旁分泌物质(如外泌体)治疗骨关节炎展现出与MSC相似的疗效和机制。本文对巨噬细胞在骨关节炎发生、发展中的作用,MSC对巨噬细胞的影响,以及巨噬细胞在MSC治疗骨关节炎中的作用与机制进行综述,为临床积极开展MSC治疗骨关节炎奠定理论基础。

关键词：巨噬细胞骨关节炎间充质干细胞微RNA 外泌体

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