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2005国际暨第八届全国头颈肿瘤大会

作者：杨雯君赵旭东张陈平王铸钢上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海第二医科大学医学遗传学教研室上海南方模式生物研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海第二医科大学医学遗传学教研室上海南方模式生物研究中心

目的克隆人PLAG1基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA 全部... 详细信息

目的克隆人PLAG1基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA 全部编码框序列。将PLAG1分别克隆至pCMV-EGFP和pMMTV-EGFR-stop 载体获得pCMV-EGFP/PLAG1和pMMTV-PLAG1表达载体。用pCMV-EGFP/PLAG1瞬时转染NIH3T3细胞以观察融合基因的表达及PLAG1的细胞内定位。经显微注射分别获得pCMV-EGFP/PLAG1和pMMTV—PLAG1转基因小鼠。结果从不同组织来源的RNA 克隆的PLAG1 eDNA 经测序后发现与GenBank中的PLAG1基因（GenBank No.U65002）比较有一多态性位点,相应氨基酸由苏氨酸变为脯氨酸。构建的组织非特异性表达载体pCMFV—EGFP/PLAG1和组织特异性表达载体pMMTV-PLAG1经酶切和测序鉴定,证实PLAG1序列及插入方向正确。用pCMV—EGFP/PLAG1转染NIH3T3细胞,在细胞水平证明PLAG1的表达及其在细胞核的定位。两种表达载体分别经显薇注射,获得了多个转基因阳性小鼠（Founders,G代）,经交配繁育,建立了相应的转基因小鼠模型。转基因的表达分别经RT-PCR 和Northern 杂交证实。表型观察发现pMMTV—PLAG1转基因小鼠系M42在出生后3个月内,100%的阳性小鼠发生唾液腺肿瘤。结论从多个肿瘤标本及正常胎盘组织克隆的PLAG1基因在同一位置与GenBank 中的相应序列相比,发现相同的核苷酸变异,说明这种核苷酸的变异并非由肿瘤组织内的基因突变或PCR 错配所致。可能是一个单核苷酸多态性（SNP）位点。PLAG1在细胞内定位于细胞核,符合转录因子的细胞核分布规律。PLAG1转基因小鼠的表型提示该基因的高表达与唾液腺肿瘤的发生密切相关。

关键词：多形性腺瘤基因1(PLAG1) 转基因小鼠唾液腺肿瘤

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半定量RT-PCR检测人唾液腺肿瘤PLAG1表达水平

半定量RT-PCR检测人唾液腺肿瘤PLAG1表达水平

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2005国际暨第八届全国头颈肿瘤大会

通过半定量RT-PCR 方法,定量检测PLAG1基因在人唾液腺肿瘤及相应的肿瘤旁正常唾液腺组织中的表达水平,了解PLAG1基因与人唾液腺肿瘤尤其是良性肿瘤的关系。【材料和方法】1.收集术中新鲜唾液腺肿瘤及瘤旁正常唾液腺组织标本共40对为实验... 详细信息

通过半定量RT-PCR 方法,定量检测PLAG1基因在人唾液腺肿瘤及相应的肿瘤旁正常唾液腺组织中的表达水平,了解PLAG1基因与人唾液腺肿瘤尤其是良性肿瘤的关系。【材料和方法】1.收集术中新鲜唾液腺肿瘤及瘤旁正常唾液腺组织标本共40对为实验组;舌癌及其癌旁正常组织1对,胎盘及脐带组织1对,共2对,作为对照组。分别取800ng 总RNA,35个循环,行RT-PCR。将GAPDH 持家基因作为内参照;***-PCR 法扩增人PLAGl cDNA 序列,克隆入pGEM-T easy 载体,酶切鉴定正确后用双链四色荧光标记法测序。【结果】1.应用半定量RT-PCR 方法,检测了在不同的组织中PLAG1表达情况。研究表明:唾液腺肿瘤PLAG1表达率为70%。其中,良性唾液腺肿瘤PLAG1表达率为84.38%(27/32),多形性腺瘤更是高达89.2%(25/28);而恶性唾液腺肿瘤PLAG1表达率仅为12.5%(1/8)。每个唾液腺肿瘤的瘤旁正常腺体组织均未检及PLAG1表达。1例胎盘组织表达PLAG1,而舌癌组织未及表达;2.对6例中国汉族人标本中PLAG1 cDNA 测序发现:PLAG1编码序列1372bp 处发生A→C 点突变。【结论】1.半定量RT-PCR 方法对不同的唾液腺肿瘤及瘤旁正常腺体组织中PLAG1表达情况检测结果进一步提示:PLAG1的激活和表达与唾液腺肿瘤尤其是良性唾液腺肿瘤的发生有一定的相关性;2.发生于PLAG1编码序列1372bp 处A→C 点突变可能为中国汉族人PLAG1的一个多态性位点。

关键词： PLAG1 唾液腺肿瘤半定量 RT-PCR

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AML1-ETO转基因小鼠的建立及初步表型分析

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诊断学理论与实践 2005年第2期4卷 133-136页

作者：柳子星马志敏顾鸣敏孔辉王龙匡颖徐国江费俭王铸钢上海第二医科大学医学遗传学教研室上海200025 云南大理学院遗传学教研室大理671000 上海南方模式生物研究中心上海201203

目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链... 详细信息

目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链反应(PCR)方法检测融合基因的整合情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测融合基因的表达情况和组织表达谱。结果:PCR法共检出10只G0代转基因阳性小鼠,其中8个系均产下F1代小鼠,由此建立了8个AM L1-ETO转基因小鼠系。RT-PCR法证实AM L1-ETO融合基因在22系中稳定表达,但血常规、肝脏、脾脏等组织未见异常变化;对该系小鼠的组织表达谱检测表明,融合基因在肝脏、脾脏、心脏和肌肉组织存在不同程度的表达,但在脑组织中不表达。结论:AM L1-ETO融合基因能在转基因小鼠的骨髓等组织中表达,但尚不足以引发白血病,推测其他致病基因在小鼠白血病的发生中也起一定作用。

关键词：转基因小鼠 AML1-ETO融合基因逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 表型分析聚合酶链反应(PCR) RT-PCR法组织表达谱初步小鼠白血病融合蛋白基因质粒显微注射表达情况稳定表达异常变化不同程度肌肉组织致病基因受精卵

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鲍特菌属基因组比较研究进展

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国外医学（微生物学分册） 2005年第3期28卷 25-28页

作者：朱泳璋褚嘉佑郭晓奎中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所上海第二医科大学病原生物学教研室

鲍特菌属的百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌和支气管炎败血鲍特菌都是引起哺乳动物呼吸道感染的病原菌,宿主范围各不相同.本文从基因组一般结构、插入序列元件和菌种进化、菌种的特有基因和宿主范围限制、重要毒力因子等4个方面对三者进... 详细信息

鲍特菌属的百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌和支气管炎败血鲍特菌都是引起哺乳动物呼吸道感染的病原菌,宿主范围各不相同.本文从基因组一般结构、插入序列元件和菌种进化、菌种的特有基因和宿主范围限制、重要毒力因子等4个方面对三者进行了比较分析.

关键词：鲍特菌属细菌基因组呼吸道感染支气管炎基因表达

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孕妇对分娩方式的意愿及其原因

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中国妇幼保健 2005年第22期20卷 2920-2924页

作者：王炳顺周利锋高尔生朱丽萍高晓玲上海交通大学医学院(原上海第二医科大学)生物统计教研室 200025 上海市计划生育科学研究所生殖流行病学研究室上海市第一妇婴保健院/上海市妇女保健所

目的:探讨孕妇对分娩方式的意愿及其相应原因。方法:采用前瞻性研究设计,在产前检查时开展面对面问卷调查。结果:931例孕妇中有9.67%明确表示正常情况下会选择剖宫产分娩,选择剖宫产分娩的前3位主要原因是“怕到时试产失败再开刀,吃两... 详细信息

目的:探讨孕妇对分娩方式的意愿及其相应原因。方法:采用前瞻性研究设计,在产前检查时开展面对面问卷调查。结果:931例孕妇中有9.67%明确表示正常情况下会选择剖宫产分娩,选择剖宫产分娩的前3位主要原因是“怕到时试产失败再开刀,吃两遍苦”、“怕阴道分娩时间长,风险大”以及“怕痛”,共占89.80%。多数孕妇愿意阴道分娩,主要原因是认识到了其对母婴健康的好处。孕妇产前对分娩方式的意愿对实际分娩方式有影响。影响孕妇对分娩方式选择意愿的因素有婚龄、家人对分娩方式的选择意向、对分娩的认识等。结论:多数孕妇愿意选择阴道分娩,选择剖宫产分娩者主要是出于对阴道分娩的惧怕心理,应当加强围产期保健,增强医生与孕妇生育知识的交流,从而减少孕妇因恐惧分娩疼痛等原因而要求的不合理剖宫产。

关键词：分娩方式剖宫产孕妇意愿

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Beagle犬动眼神经损伤模型的建立

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同济大学学报（医学版） 2005年第4期26卷 32-34页

作者：王旭辉李世亭潘庆刚马正行沈峰刘忠上海第二医科大学附属新华医院神经外科上海200092 同济大学附属同济医院神经外科上海200065 同济大学医学院生理教研室上海200092

目的建立具有良好可行性及可重复性的Beagle犬动眼神经损伤模型。方法10只雌性Beagle犬常规开颅暴露动眼神经海绵窦后段,将动眼神经锐性切断,再予直接端-端吻合。结果全部实验步骤均能被Beagle犬耐受,幕下段动眼神经暴露充分,神经损伤... 详细信息

目的建立具有良好可行性及可重复性的Beagle犬动眼神经损伤模型。方法10只雌性Beagle犬常规开颅暴露动眼神经海绵窦后段,将动眼神经锐性切断,再予直接端-端吻合。结果全部实验步骤均能被Beagle犬耐受,幕下段动眼神经暴露充分,神经损伤后可予直接缝合。结论Beagle犬动眼神经损伤动模型已经建立,并具有良好可重复性,可进一步用于动眼神经损伤后功能修复的研究。

关键词：动眼神经动物模型损伤 Beagle犬

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利扎曲普坦治疗偏头痛随机双盲多中心对照研究

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中国新药与临床杂志 2005年第3期24卷 219-222页

作者：王文昭赵忠新常履华邓丽影王维治谭兰苏炳华中国人民解放军第二军医大学附属长征医院神经内科上海200003 昆明医学院第一附属医院神经内科云南昆明650032 江西医学院第二附属医院神经内科江西南昌330006 哈尔滨医科大学第二临床医学院神经内科黑龙江哈尔滨150086 青岛大学医学院附属医院神经内科山东青岛266003 上海第二医科大学生物统计教研室上海200025

目的:评价利扎曲普坦片对偏头痛急性发作的有效性和安全性。方法:共入组偏头痛病例115例。其中先给利扎曲普坦后给安慰剂 57例,先给安慰剂后给利扎曲普坦 58例。治疗前 2组的一般资料、临床评价和实验室指标无显著差异。结果:利扎曲普... 详细信息

目的:评价利扎曲普坦片对偏头痛急性发作的有效性和安全性。方法:共入组偏头痛病例115例。其中先给利扎曲普坦后给安慰剂 57例,先给安慰剂后给利扎曲普坦 58例。治疗前 2组的一般资料、临床评价和实验室指标无显著差异。结果:利扎曲普坦组和安慰剂组的 2h内头痛消失率分别为(57±s5)%和 (37±4)% (P<0. 01)。利扎曲普坦组 2h内头痛缓解率为 (67±4)%,安慰剂组 2h内头痛缓解率为(50±5)% (P<0. 01)。治疗中,仅1例出现一过性的血小板减少,无肝、肾功能等影响。结论:利扎曲普坦治疗偏头痛安全性好,可作为治疗偏头痛急性发作的有效药物。

关键词：偏头痛多中心研究随机对照试验双盲法利扎曲普坦

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人新的生长激素异形体基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中华内分泌代谢杂志 2004年第2期20卷 148-150页

作者：胡三梅章国卫陈凤玲李荣英陈家伦陆振虞宋怀东上海第二医科大学医学遗传学教研室 200025 上海第二医科大学附属瑞金医院内分泌代谢科

目的　构建含新的生长激素异形体 (GHv)基因全长编码区的pGEM TEasy质粒和GHv 谷胱甘肽转硫酶 (GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白。方法　采用克隆和亚克隆技术构建GHv GST融合基因的表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1并... 详细信息

目的　构建含新的生长激素异形体 (GHv)基因全长编码区的pGEM TEasy质粒和GHv 谷胱甘肽转硫酶 (GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白。方法　采用克隆和亚克隆技术构建GHv GST融合基因的表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1并用异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导其表达GHv GST融合蛋白 ,谷胱甘肽 Sepharose 4B纯化试剂盒纯化融合蛋白。结果　含GHv GST融合基因表达质粒的大肠杆菌表达出相对分子质量约 43 0 0 0的GHv GST融合蛋白 ,SDS PAGE结果显示纯化的融合蛋白为单一条带。结论　成功构建成GHv GST融合基因的表达质粒并且GHv GST融合蛋白在大肠杆菌BL2 1中有高表达。上述工作为制备多抗 ,深入研究GHv基因的功能奠定了基础。

关键词：生长激素异形体基因克隆大肠杆菌表达

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全基因组扫描寻找强直性脊柱炎的易感基因位点

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遗传学报 2004年第3期31卷 217-220页

作者：顾鸣敏袁文涛杨珏琴张静熊晓燕姚芳娟陆振虞王铸钢黄薇范丽安上海第二医科大学医学遗传学教研室上海200025 国家人类基因组南方研究中心上海201203 上海第二医科大学免疫学教研室上海200025 上海市免疫学研究所上海200025

为了寻找中国人群强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的易感基因位点,采用全基因组扫描法对9个强直性脊柱炎家系进行基因分型、参数连锁分析和非参数连锁分析.在参数连锁分析中,D6S276位点的最大LOD值为3.8821(θ=0.0),精细分析... 详细信息

为了寻找中国人群强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的易感基因位点,采用全基因组扫描法对9个强直性脊柱炎家系进行基因分型、参数连锁分析和非参数连锁分析.在参数连锁分析中,D6S276位点的最大LOD值为3.8821(θ=0.0),精细分析显示距D6S276位点附近的D6S1691和D6S1618的LOD值分别为1.5717(θ=0.1)及2.0056(θ=0.1).在非参数连锁分析中,位于D6S276附近的LOD值高达5.0623,非参数连锁分析的NPL值为3.7561,最小P值为0.000233.上述结果提示,D6S276与强直性脊柱炎之间存在较强的连锁关系,D6S1691-D6S276-D6S1618区域可能存在强直性脊柱炎的易感基因位点.此外,D3S1292、D4S1535和D18S64的最大LOD值分别为1.2768(θ=0.2)、1.1246(θ=0.2)和1.1851(θ=0.1),提示这些标记与AS之间存在一定的连锁关系.

关键词：强直性脊柱炎全基因组扫描连锁分析易感基因位点

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幽门螺杆菌基因组特征及研究进展

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细胞生物学杂志 2004年第1期26卷 15-18页

作者：杨贵珍刘钟滨郭晓奎同济大学医学院微生物教研室上海200331 上海第二医科大学微生物教研室上海200025

幽门螺杆菌是胃相关疾病:慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和MALT淋巴瘤的一个重要的病原体。其毒力因子包括:尿素酶、鞭毛蛋白、粘附素、细胞毒素相关蛋白和空泡毒素等,通过对全基因序列分析研究,对幽门螺杆菌的致病机制有了进一步的了解。

关键词：幽门螺杆菌基因组研究进展胃炎消化性溃疡胃癌

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