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上海第二医科大学学报 2004年第1期24卷 38-40页

作者：曾晖胡梅洁张曙乔敏敏章永平史桂英吴云林上海第二医科大学瑞金医院消化内科上海200025 上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025

目的研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导S... 详细信息

目的研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导SGC-7901凋亡的作用。结果随药物浓度的增加和作用时间的延长,苦参碱对胃癌细胞的杀伤作用逐渐增强(P<0.01);低分化的AGS较中分化的SGC-7901更为敏感。透射电镜、流式细胞术检测均显示苦参碱能够诱导胃癌细胞凋亡。结论苦参碱在体外对胃癌细胞具有杀伤作用,且呈明显的量效和时效关系;低分化的胃癌细胞株AGS对苦参碱更为敏感;苦参碱对胃癌细胞株的体外杀伤作用与其诱导胃癌细胞凋亡有关。

关键词：苦参碱体外胃癌杀伤作用癌细胞

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白细胞介素-34在类风湿关节炎中的作用

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中华风湿病学杂志 2016年第7期20卷 480-481页

作者：王苗苗马梓健李霞张彦大连医科大学附属第二医院风湿免疫科 116027 河北医科大学第三医院风湿免疫科大连医科大学基础医学院免疫学教研室

IL-34是2008年被发现的一种新型细胞因子，可由神经元、角质形成细胞和成骨细胞等分泌，其主要功能为刺激单核细胞生长、增殖以及向巨噬细胞分化；促进破骨细胞、骨髓细胞的存活、增殖和分化。

关键词：类风湿关节炎白细胞介素角质形成细胞细胞分化细胞因子成骨细胞细胞生长破骨细胞

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超重症联合免疫缺陷小鼠细胞免疫功能特征研究

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中国免疫学杂志 1992年第2期8卷 82-86页

作者：陈桦马宝骊畅波李彦汪歌上海市免疫学研究所基础免疫研究一室上海第二医科大学免疫学教研室上海200025 中国医学科学院医学实验动物研究所

超重症联合免疫缺陷小鼠(B.C.B-17scid-beige)是将自然杀伤细胞(NK)缺陷基因(bg 基因)导入重症联合免疫缺陷病小鼠(C.B-17scid)体内得到的一种新品系小鼠.为确定该鼠基本细胞免疫特征,我们测定了该鼠 T、NK 和淋巴因子激活的杀伤细胞(L... 详细信息

超重症联合免疫缺陷小鼠(B.C.B-17scid-beige)是将自然杀伤细胞(NK)缺陷基因(bg 基因)导入重症联合免疫缺陷病小鼠(C.B-17scid)体内得到的一种新品系小鼠.为确定该鼠基本细胞免疫特征,我们测定了该鼠 T、NK 和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)等的功能,以及聚肌胞(poly I-C)对该鼠 NK 细胞活性的影响。该小鼠脾淋巴细胞不能针对 T 细胞有丝分裂原刀豆蛋白(ConA)的刺激而产生增殖反应。同正常对照小鼠相差非常显著(P<0.01)。该鼠 NK 细胞活性(对 YAC-1细胞杀伤活性)明显低于亲代 scid 小鼠和正常小鼠(P<0.01),经聚肌胞(100μg/只)预先刺激后该鼠 NK 细胞活性未见增加.而亲代 scid 小鼠则有明显增加。该鼠脾脏细胞经白细胞介素—2刺激后,LAK 细胞活性(对 P815细胞杀伤活性)明显低于亲代 scid 小鼠和正常小鼠(P<0.01)。上述结果表明 B、C、B-17scid-beige 小鼠是一种 T、NK和 LAK 细胞联合免疫缺陷小鼠,该鼠 B 细胞功能也是缺陷的(详见它文)。上述缺陷是 scid 基因和 bg 基因共同作用的结果,该动物为建立人—免疫缺陷动物模型提供了一种更为理想的受体小鼠,并为基础免疫学研究提供了一种新的研究工具。

关键词： T细胞免疫缺陷 Scid-hu模型

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心理应激对大鼠颞下颌关节组织结构的影响

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科技导报 2010年第10期28卷 32-36页

作者：肖朋张丽侯敏刘海霞新疆医科大学第二附属医院口腔科乌鲁木齐830028 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐830000 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室乌鲁木齐830000 不详

通过观察处于心理应激状态的大鼠颞下颌关节组织结构的变化,探讨心理应激对大鼠颞下颌关节组织结构的影响。将48只成年Wistar雄性大鼠随机分为实验组和空白对照组,其中实验组36只,空白对照组12只。对实验组施加电击、制动、气候箱、食... 详细信息

通过观察处于心理应激状态的大鼠颞下颌关节组织结构的变化,探讨心理应激对大鼠颞下颌关节组织结构的影响。将48只成年Wistar雄性大鼠随机分为实验组和空白对照组,其中实验组36只,空白对照组12只。对实验组施加电击、制动、气候箱、食物诱惑等刺激,使实验组大鼠处于心理应激状态。将实验组分别于3周、6周和刺激去除后6周时间点各处死12只;对照组12只同实验组最后一批一起处死。取颞下颌关节制作病理切片,光镜下分别观察关节盘、关节软骨、关节骨质和滑膜的病理变化。结果显示,实验组出现一些关节软骨变薄、胶原纤维脱落、关节盘裂隙等病变,其中6周组病变最为严重,恢复组出现修复性改变。各组间病变总体变化有差异,P<0.01。其中,实验3周组、实验6周组与对照组之间病变有差异,实验6周组与恢复组之间病变有差异,P<0.05;其余组与组之间差异无统计学意义,P>0.05。由此推测,长时间心理应激状态对大鼠的颞下颌关节组织结构有影响。应激状态去除后,其颞下颌关节的病理性改变有所恢复。

关键词：心理应激大鼠颞下颌关节

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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中HCMV基因表达谱及其特异性抗体特征

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病毒学报 2023年第1期39卷 113-123页

作者：施昕妤谢尚丹项超丽李宝青陈朝生薛向阳章慧娣温州医科大学基础医学院、分子病毒学与免疫学研究所、微生物与免疫学教研室温州325000 浙江大学医学院免疫研究所杭州310000 温州医科大学附属第二医院温州325000 温州医科大学附属第一医院温州325000

人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染是系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的重要病因,并会加剧疾病进展。然而,SLE患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中HCMV基因的表达谱及其特异性抗体特征尚未完全阐明,并且HCMV蛋白特异性抗体水平与SLE患者临床特征的相关性尚未得到证实。通过Poly(A)建库的mRNA转录组测序(Poly(A)RNA-Seq)检测3例SLE患者和3例健康对照者(Healthy control,HC)的PBMC中的HCMV基因表达谱。然后在10例SLE患者和10例HC的链特异性建库的mRNA转录组测序(strand-specific RNA-seq)结果中验证检测到的HCMV基因。除此之外,通过免疫信息学分析筛选HCMV基因的B细胞表位。ELISA用于检测120例SLE患者和75例HC血清中的HCMV特异性抗体水平,并将其与患者的临床特征相关联。本研究在SLE患者和HC的PBMC中检测到8个HCMV基因。免疫信息学分析筛选出7个HCMV基因的优势B细胞表位。与HC相比,SLE患者血清中UL32和UL82特异性抗体显著降低。UL32特异性抗体可能与SLE患者血细胞功能异常有关。UL82特异性抗体可能参与SLE患者免疫系统功能异常和肾脏功能障碍。受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)分析表明,其中UL32特异性抗体可以有效区分SLE患者和HC。

关键词：人巨细胞病毒系统性红斑狼疮外周血单个核细胞 B细胞表位

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不明原因早期自然流产患者蜕膜巨噬细胞及白细胞介素1活性的研究

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中华妇产科杂志 1999年第11期34卷 688-689页

作者：崔澂王慧贤杨彦忠王惠兰郝淑维解放军白求恩医学高等专科学校微生物及寄生虫学教研室石家庄050081 河北医科大学基础医学院微生物及免疫学教研室河北医科大学基础医学院第二医院河北医科大学基础医学院第四医院

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白细胞介素-34对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖及趋化因子表达的影响

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中华风湿病学杂志 2016年第4期20卷 220-223,F0003页

作者：王苗苗王冰马梓健张彦李霞陈海英河北医科大学第三医院免疫风湿科石家庄050051 大连医科大学基础医学院免疫学教研室大连医科大学附属第二院免疫风湿科

目的初步探讨IL-34对RA患者滑膜成纤维细胞（FLS）增殖及趋化因子表达的影响。方法选取RA患者FLS进行培养，用四甲基偶氮唑盐（MTY）法检测IL-34对细胞增殖的影响。采用蛋白芯片AAH-CYT-G1000试剂盒检测IL-34刺激组和对照组RAFLS分泌趋... 详细信息

目的初步探讨IL-34对RA患者滑膜成纤维细胞（FLS）增殖及趋化因子表达的影响。方法选取RA患者FLS进行培养，用四甲基偶氮唑盐（MTY）法检测IL-34对细胞增殖的影响。采用蛋白芯片AAH-CYT-G1000试剂盒检测IL-34刺激组和对照组RAFLS分泌趋化因子的水平。流式细胞术检测RAFLS表面IL-34受体的表达。2组问比较采用t检验。结果RA患者FLS增殖能力在IL-34刺激后明显增强，且在刺激后72h达最大值；IL-34刺激的FLS分泌人上皮中性粒细胞活化肽（ENA-78）、IL-8、生长相关癌基因（GRO）、单核细胞趋化蛋白（MCP）-1等趋化因子水平明显高于对照组，ENA-78分另1为（397．1±8．2）pg／ml、（54．0±2．9）pg／ml（t=127．61，P〈0．01）；IL．8分另0为（2017±36）pg／ml、（778±102）pg／ml（t=36．67，P〈O．01）；GRO分别为（4935±160）pg,／ml、（2746±188）pg]ml（t=43．60，P〈0．01）；MCP-1分别为（46798±1293）pg／ml、（27813±2329）pg／ml（t=22．43，P〈0．01）。RAFLS表面高表达IL-34受体。结论IL-34促进RAFLS增殖以及趋化因子表达，可能是IL-34参与RA发病的重要机制之一。

关键词：关节炎类风湿成纤维细胞白细胞介素34 趋化因子类

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中介素对脂多糖诱导巨噬细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化及细胞焦亡的影响

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中华风湿病学杂志 2022年第12期26卷 813-819,I0002页

作者：景刚张军锋朱爱萍杨佳常思佳黄太平王艳红山西医科大学第二医院检验科太原030001 山西中医药大学基础医学院晋中030619 山西医科大学微生物学与免疫学教研室太原030001

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3... 详细信息

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)阻滞剂LY294002组。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞NLRP3炎症小体的激活情况及炎症因子IL-1β和IL-18表达,碘化丙锭(PI)染色法检测细胞焦亡的改变。计量资料以±s表示,组间差异比较采用方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组[(0.83±0.09),(0.49±0.04)]比较,脂多糖组磷酸化(p)-PI3K/PI3K(0.44±0.05),p-Akt/Akt(0.27±0.06)比值均显著降低,与脂多糖组相比,脂多糖+中介素组细胞中p-PI3K/PI3K(1.22±0.18),pAkt/Akt(0.83±0.09)比值均显著升高(F=31.40,P<0.001;F=50.88,P<0.001)。与对照组比较,脂多糖组(脂多糖和ATP)可刺激RAW264.7细胞炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体(NLRP3,caspase-1,ASC)的mRNA及蛋白表达上调;与脂多糖组相比,中介素处理可抑制炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体表达,这种效应可被PI3K/Akt通路的阻滞剂LY294002所阻断。Real-time PCR结果显示,IL-1βmRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.11),脂多糖组为(8.32±0.61),脂多糖+中介素组为(8.32±0.55),脂多糖+中介素+LY组为(7.23±0.41)(F=15.42,P<0.001);IL-18 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.17),脂多糖组为(1.82±0.21),脂多糖+中介素组为(1.14±0.15),脂多糖+中介素+LY组为(1.53±0.11)(F=18.16,P<0.001);NLRP3 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.13),脂多糖组为(2.58±0.18),脂多糖+中介素组为(1.07±0.17),脂多糖+中介素+LY组为(1.33±0.32)(F=15.98,P<0.001);caspase-1 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.09),脂多糖组为(6.20±0.19),脂多糖+中介素组为(3.43±0.06),脂多糖+中介素+LY组为(5.50±0.45)(F=18.39,P<0.001);ASC mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.21),脂多糖组为(4.58±0.48),脂多糖+中介素组为(2.07±0.51),脂多糖+中介素+LY组为(3.33±0.32)(F=15.19,P<0.001)。蛋白质免疫印迹结果显示,IL-1β蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±14)%],脂多糖+中介素组为[(112±11)%],脂多糖+中介素+LY组为[(171±27)%](F=21.25,P<0.001);IL-18蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(183±16)%],脂多糖+中介素组为[(115±19)%],脂多糖+中介素+LY组为[(179±23)%](F=19.62,P<0.001);NLRP3蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(149±15)%],脂多糖+中介素组为[(106±10)%],脂多糖+中介素+LY组为[(144±15)%](F=14.35,P<0.001);ASC蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±12)%)],脂多糖+中介素组为[(110±18)%],脂多糖+中介素+LY组为(192±8)%(F=15.79,P<0.001)。结论中介素通过调节PI3K/Akt活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡。

关键词：巨噬细胞脂多糖类细胞焦亡 NLRP3炎症小体中介素 PI3K/Akt信号通路

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C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达

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上海第二医科大学学报 2005年第6期25卷 562-564,571页

作者：蔡蓉戴冰冰梅文瀚李珂卢健上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室人类基因治疗中心上海200025

目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。

关键词： C/EBPε U937细胞 PI3K γ基因磷脂酰肌醇-3激酶增强子结合蛋白 Western pcDNA3 真核表达载体 RT-PCR 核内转录因子过量表达电穿孔转染细胞克隆稳定转染 blot 转染细胞转录调控水平

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IL-15对异基因抗原刺激下人CD8+T细胞增殖分化影响的初步研究

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中国免疫学杂志 2018年第11期34卷 1607-1611,1616页

作者：冯富刘艳君刘桂欢张华朱漫漫朱平刘久敏余玉明(指导教师) 南方医科大学第二临床医学院广东省人民医院泌尿外科(广东省医学科学院)广州510080 南方医科大学基础医学院免疫学教研室广州510515

目的:探讨IL-15对异基因抗原刺激下人CD8^+T细胞增殖分化的影响。方法:在IL-15存在的条件下,将从健康志愿者外周血中新鲜分离的CD8^+T细胞与HLA-A,-B,-DR完全错配的异体抗原提呈细胞(APCs)进行混合淋巴细胞培养(MLRs)。经9 d培养后,对... 详细信息

目的:探讨IL-15对异基因抗原刺激下人CD8^+T细胞增殖分化的影响。方法:在IL-15存在的条件下,将从健康志愿者外周血中新鲜分离的CD8^+T细胞与HLA-A,-B,-DR完全错配的异体抗原提呈细胞(APCs)进行混合淋巴细胞培养(MLRs)。经9 d培养后,对诱导后产生的CD28^-CD8^+和CD28^+CD8^+T细胞亚群进行细胞毒功能测定和表型检测,并对CD8^+T细胞增殖分化过程中CD28分子的动态变化规律进行监测。结果:在IL-15诱导及异基因抗原刺激下,CD8^+T细胞增殖分化后产生的CD28+CD8^+T细胞具有细胞毒作用,与外周血新鲜分离的类似细胞相比,其高表达了Fas L、颗粒霉素-B和穿孔素;而CD28^-CD8^+抑制性T细胞不具有细胞毒作用,与外周血新鲜分离的类似细胞相比,低表达了Fas L、颗粒霉素-B和穿孔素。在异基因抗原提呈细胞刺激下,IL-15可诱导CD8^+T细胞增殖分化过程中CD28^-/CD28+细胞数比例升高(从0. 24到1. 01),并可诱导CD28+T细胞上的CD28分子丢失。结论:IL-15通过调节CD28分子的表达影响异基因抗原对CD8^+T细胞的增殖分化。

关键词： IL-15 人CD8+T细胞同种异基因 CD28

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