检索结果-内蒙古大学图书馆

上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 192-194页

作者：朱平陈洪陈新宇陈淑云杨洁张岚易静刘晶星上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025 上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

目的用透射电子显微镜(TEM)观察严重急性呼吸综合征(SARS)患者感染的Vero细胞,为SARS病原体的分离鉴定提供形态学资料。方法标本为上海市疾病控制中心送检的SARS患者鼻咽拭子接种感染的Vero细胞,对培养液负染色标本和Vero细胞超薄切... 详细信息

目的用透射电子显微镜(TEM)观察严重急性呼吸综合征(SARS)患者感染的Vero细胞,为SARS病原体的分离鉴定提供形态学资料。方法标本为上海市疾病控制中心送检的SARS患者鼻咽拭子接种感染的Vero细胞,对培养液负染色标本和Vero细胞超薄切片标本进行TEM观察。结果在负染色标本和超薄切片标本中均可观察到病毒,病毒颗粒为圆形或椭圆形,外周有冠状排列的纤突,病毒颗粒直径约80～160 nm,纤突长度约20～40 nm。感染细胞的病毒颗粒分布在细胞质中,主要在内质网和空泡内,可见群集的大小较一致的病毒颗粒。结论本例电镜所见病毒颗粒大小、形态与文献报道的SARS冠状病毒(SARS-CoV)相符。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒电子显微镜 Vero细胞病原体细胞形态学

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柯萨奇-腺病毒受体基因的原核表达和多克隆抗体制备

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上海第二医科大学学报 2004年第9期24卷 726-730页

作者：吴赟陈洪黄孝天陈宏新刘晶星上海第二医科大学基础医学院微生物教研室上海200025

目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新... 详细信息

目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新西兰兔,ELISA检测抗血清滴度。结果重组质粒转化的大肠杆菌M15经IPTG诱导表达及亲和纯化后得到滴度较高的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot显示其分子量约为26 kd,具有特异的抗原性,主要以包涵体形式存在于菌体中。纯化的融合蛋白免疫新西兰兔后产生的抗体,经ELISA检测抗体滴度>1:32 000。结论CAR胞外段基因的克隆表达和多克隆抗体的制备,为进一步研究该受体在以腺病毒载体为基础的基因治疗中的作用及柯萨奇病毒的致病机制奠定了基础。

关键词：胞外段腺病毒受体多克隆抗体滴度基因重组质粒新西兰兔克隆表达诱导表达纯化

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阳离子脂质体介导的基因转染真核细胞的研究

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上海第二医科大学学报 2005年第10期25卷 1025-1029页

作者：李劲松叶展赵涵芳陈诗书上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000＞Gene... 详细信息

目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000＞GenePORTs＞LipofectAMINE.在细胞融合度为60% ～ 70%,脂质体/DNA为3 μL/μg,脂质体的量为3 μL,转染时间为5 h时,转染效率最高.转染结束后表达时间可以达一个月.结论 LipofectAMINE2000转染效率最佳,并优化了其最佳转染条件.

关键词：脂质体转染绿色荧光蛋白

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核骨架/核基质结合区及其功能研究的进展

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上海第二医科大学学报 2005年第5期25卷 525-527页

作者：李颖卢健上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的... 详细信息

长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的生物学功能仍在进一步的研究中,本文主要就MARs的结构、在转录调控中的作用及其它一些研究进展作一综述。

关键词：核基质结合区功能研究核骨架 MARs 转录调控生物学活性生物学功能结合试验真核生物染色体

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2型糖尿病相关基因的研究进展

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上海第二医科大学学报 2005年第6期25卷 634-637页

作者：吴怡赵涵芳上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在... 详细信息

随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在很多多态性位点,如:该基因SNP43、SNP19、SNP64等,都与糖尿病发病有一定关联。青少年起病的成人型糖尿病(MODY)是2型糖尿病的一种,其特点是早期发病(通常25岁以下),伴有胰岛素分泌功能障碍。肝细胞核因子4α(HNF4α)、葡萄糖激酶(GCK)、肝细胞因子1α(HNF1α)、胰岛素启动因子(IPF1)、肝细胞因子1β(HNF1β)和神经元分化因子/β细胞E框反式激活物2(NeuroD1/BETA2)是分别引起6种MODY的因素。这些基因的突变可导致代谢功能障碍,从而引发对β细胞的毒性作用,还可以引起胰腺发育不良。还有一些细胞因子基因,如:IL6基因,该基因的启动子的多态性也与2型糖尿病发病有很大关联。

关键词：相关基因 2型糖尿病发病胰岛素分泌功能障碍 cAPN10基因肝细胞核因子4 组织蛋白酶L 成人型糖尿病 HNF-4α HNF-1α 代谢功能障碍细胞因子基因 IL-6基因多态性位点青少年起病葡萄糖激酶分子生物胰岛素能降低血糖

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埃必定对人血白细胞呼吸爆发和氧自由基的抑制作用

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中国药理学通报 1998年第3期14卷 243-244页

作者：陈秀青褚云鸿上海医科大学基础医学院药理学教研室第二军医大学神经生物学教研室

目的观察埃必定对人血白细胞呼吸爆发和氧自由基的影响，初步探讨埃必定的抗炎作用机制。方法用化学发光法测定人血白细胞受调理的酵母多糖刺激发生呼吸爆发的活性氧、碱性二甲基亚砜－鲁米诺体系产生的超氧阴离子自由基（Ｏ·２）... 详细信息

目的观察埃必定对人血白细胞呼吸爆发和氧自由基的影响，初步探讨埃必定的抗炎作用机制。方法用化学发光法测定人血白细胞受调理的酵母多糖刺激发生呼吸爆发的活性氧、碱性二甲基亚砜－鲁米诺体系产生的超氧阴离子自由基（Ｏ·２）、ＶｉｔＣ－Ｃｕ２＋酵母多糖产生的羟自由基（·ＯＨ）及过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的释放，观察了埃必定对上述体系产生的自由基的影响。结果埃必定对白细胞的呼吸爆发有显著的抑制作用；对Ｏ·２、·ＯＨ有清除作用，呈剂量依赖性，对Ｈ２Ｏ２无清除作用。结论埃必定对人血白细胞呼吸爆发具有抑制作用。

关键词：埃必定白细胞呼吸爆发氧自由基化学发光

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右心耳壁厚及梳状肌间凹深度测定对起搏电极定位的意义

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上海第二医科大学学报 2005年第10期25卷 1072-1074页

作者：陈玉华沈卫峰章惠英何正瑞顾峻张俊峰王瑾周军上海第二医科大学宝钢医院心内科上海201900 上海第二医科大学瑞金医院心内科上海第二医科大学基础医学院人体解剖学教研室

目的通过测量右心耳壁厚度及梳状肌间凹深度,为临床心房起搏电极的定位提供解剖学基础。方法将50具经福尔马林处理尸体的右心耳,按水平距离和垂直距离分成内上、外上、内中、外中、内下、外下6个区域,测量各区的心肌壁厚度及梳状肌间凹... 详细信息

目的通过测量右心耳壁厚度及梳状肌间凹深度,为临床心房起搏电极的定位提供解剖学基础。方法将50具经福尔马林处理尸体的右心耳,按水平距离和垂直距离分成内上、外上、内中、外中、内下、外下6个区域,测量各区的心肌壁厚度及梳状肌间凹。另用5具尸体于福尔马林处理前后行上述数据测定,以获得心壁厚度和梳状肌间凹深度的增减百分率,并对50具处理尸体的测值作校正。结果50具经福尔马林处理尸体和5具未经福尔马林处理尸体的心耳壁厚度和梳状肌间凹的深度作比较,无统计学差异(P>0.05);但女性右心耳较男性小(P<0.05)。结论经福尔马林处理尸体的测值校正后能反映新鲜尸体的情况。右心耳内上、外上区域(梳状肌间凹的深度>6 mm)适宜翼状电极定位。内上、外上及内中区域(心耳壁厚度≥2 mm)用螺旋电极定位是安全的;女性患者电极定位要注意安全。

关键词：右心耳壁厚梳状肌间凹深导管电极起搏

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含EGFP的人BMP2表达载体在人皮肤成纤维细胞中的表达

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上海第二医科大学学报 2004年第12期24卷 1007-1010页

作者：邹嫣琼王英陈玉英胡庆沈李慧易静上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正... 详细信息

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后 ,采用RT PCR和免疫组化染色方法分别检测人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白质水平上的表达情况。结果转染后的NIH3T3和正常人皮肤成纤维细胞均能转录人BMP2mRNA和表达人BMP2蛋白 ,同时显示绿色荧光。结论 pcBE真核表达载体可在正常人皮肤成纤维细胞内有效表达人BMP2蛋白 ,并以其荧光报告基因起示踪作用。

关键词： BMP2 人皮肤成纤维细胞正常人真核表达载体 EGFP基因转染绿色荧光蛋白 RNA 转录报告基因

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柯萨奇病毒激活ERK信号途径的初步研究

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 595-596页

作者：陈宏新陈洪陈淑芸刘晶星上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎和扩张性心肌病的主要病原体.CVB3在其感染过程中致细胞产生病变效应,直至死亡.CVB3感染也能引起细胞凋亡[1],但其病变机制尚不清楚.胞外信号调节激酶1/2(extracellular sig... 详细信息

柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎和扩张性心肌病的主要病原体.CVB3在其感染过程中致细胞产生病变效应,直至死亡.CVB3感染也能引起细胞凋亡[1],但其病变机制尚不清楚.胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)是促分裂原活化蛋白激酶家族中一类,参与了细胞生长、转化、分化以及细胞的生存和死亡等功能的调节[2].ERK途径参与HIV-1等多种病毒基因的表达和复制[3].本研究利用CVB3感染HeLa细胞后以磷酸化ERK1/2说明ERK1/2的活化状况,初步了解CVB3感染与宿主细胞ERK1/2的关系,为进一步阐明CVB3感染后的信号传导途径奠定基础.

关键词：柯萨奇病毒 ERK信号途径胞外信号细胞生长 CVB3 病毒感染

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问号钩端螺旋体全基因组的更新注释

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上海第二医科大学学报 2004年第6期24卷 421-425页

作者：宋卫峰赵蔚郭晓奎上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释,并寻找可能的新致病基因。方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP/NCBI数据库中比较,初步预测基因功... 详细信息

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释,并寻找可能的新致病基因。方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP/NCBI数据库中比较,初步预测基因功能,对可能的致病基因及其编码产物运用多种生物学软件进行深入分析。结果未知CDSs中有82个与NCBI数据库中的编码蛋白序列有很高的同源性,其中LA0063和LA3291编码金属蛋白酶,可能与致病有关。结论通过钩端螺旋体黄疸出血群赖株全基因组数据库中功能未知的CDSs进行定期比对,可以不断完善该数据库的功能注释,同时可以发现新的致病基因,有助于钩端螺旋体病致病机理的最终阐明。

关键词：问号钩端螺旋体基因组皮肤破损染色体

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