检索结果-内蒙古大学图书馆

上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 192-194页

作者：朱平陈洪陈新宇陈淑云杨洁张岚易静刘晶星上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025 上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

目的用透射电子显微镜(TEM)观察严重急性呼吸综合征(SARS)患者感染的Vero细胞,为SARS病原体的分离鉴定提供形态学资料。方法标本为上海市疾病控制中心送检的SARS患者鼻咽拭子接种感染的Vero细胞,对培养液负染色标本和Vero细胞超薄切... 详细信息

目的用透射电子显微镜(TEM)观察严重急性呼吸综合征(SARS)患者感染的Vero细胞,为SARS病原体的分离鉴定提供形态学资料。方法标本为上海市疾病控制中心送检的SARS患者鼻咽拭子接种感染的Vero细胞,对培养液负染色标本和Vero细胞超薄切片标本进行TEM观察。结果在负染色标本和超薄切片标本中均可观察到病毒,病毒颗粒为圆形或椭圆形,外周有冠状排列的纤突,病毒颗粒直径约80～160 nm,纤突长度约20～40 nm。感染细胞的病毒颗粒分布在细胞质中,主要在内质网和空泡内,可见群集的大小较一致的病毒颗粒。结论本例电镜所见病毒颗粒大小、形态与文献报道的SARS冠状病毒(SARS-CoV)相符。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒电子显微镜 Vero细胞病原体细胞形态学

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左侧视网膜剥夺鸽左前脑差异表达基因全长cDNA的克隆

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第4期20卷 457-462页

作者：金珠匡晶徐磊吕立夏许蕾李学礼王尧上海第二医科大学基础医学院生理教研室上海200025 上海体育学院生物化学教研室上海200433 同济大学基础医学院生物化学教研室上海200070

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆了一条由左侧视网膜剥夺造成左前脑差异表达EST片段的全长cDNA序列 ,同源性比较后认定 ,其为鸽e(r)基因 .该基因与人类及斑马鱼等脊椎动物e(r)基因的同源性非常高 ,但C端有明显差异 .RNA斑点杂交、... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆了一条由左侧视网膜剥夺造成左前脑差异表达EST片段的全长cDNA序列 ,同源性比较后认定 ,其为鸽e(r)基因 .该基因与人类及斑马鱼等脊椎动物e(r)基因的同源性非常高 ,但C端有明显差异 .RNA斑点杂交、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及Northern印迹等方法检测 ,该基因在不同组织中表达量有差异 .结果表明 ,鸽e(r)基因在左眼视网膜剥夺鸽的左前脑及肝、肾中的表达量较高 ,该基因的表达具有一定的组织表达特异性 .

关键词： eDNA末端快速扩增法(RACE) 组织表达特异性 e(r)基因脑鸽

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腺病毒介导mIFN-β基因转染的小鼠黑色素瘤细胞体内致瘤性及抗肿瘤作用的实验研究

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中国药理学通报 2004年第6期20卷 677-680页

作者：吴云徐容曹广文潘卫陈秋莉沈毅君卢海妹蔡春晓邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物教研室上海200433 复旦张江生物医药股份公司上海200000

目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞... 详细信息

目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞的致瘤性有无影响。结果　经腺病毒介导 ,mIFN β基因成功地导入B16细胞并获得有效表达 ;转mIFN β基因的B16细胞的体内致瘤性明显降低 ,并能抑制对侧野生型B16细胞的致瘤性。结论　该研究结果提示利用腺病毒载体携带IFN β基因来开发瘤苗治疗肿瘤具有良好的应用前景。目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞的致瘤性有无影响。结果　经腺病毒介导 ,mIFN β基因成功地导入B16细胞并获得有效表达 ;转mIFN β基因的B16细胞的体内致瘤性明显降低 ,并能抑制对侧野生型B16细胞的致瘤性。结论　该研究结果提示利用腺病毒载体携带IFN β基因来开发瘤苗治疗肿瘤具有良好的应用前景。

关键词：干扰素-β 瘤苗腺病毒黑色素瘤

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重组人淋巴毒素随机点突变组合文库的构建

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生物工程学报 2004年第1期20卷 43-48页

作者：沈毅珺潘卫徐容潘欣王罗春王征曹峰谭靖伟吴劲松吴芳刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 上海复旦张江生物医药股份有限公司上海201203

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因... 详细信息

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因操作将这三个单点随机突变体库拼接并克隆于pMD_18T载体建立三点组合突变体文库 ,DNA测序鉴定突变位点的随机性和多样性 ,原核表达该变异体库 ,体外测定生物学活性。成功获得rhLT三点随机点突变组合文库 ,其转化克隆数达到 1 5× 10 5,是多样性理论值的 4 5倍。 5 0个样品的序列分析显示各个位点的核苷酸和氨基酸序列的突变都呈随机性分布。对原核表达的 30个样品进行生物学活性测定 ,结果 70 % (2 1个 )的样品无活性、2 3 3% (7个 )的样品活性低于rhLT、6 7% (2个 )的样品活性高于rhLT。成功构建了rhLT随机点突变组合文库 ,该库不仅在一级结构上具有良好的随机性和多样性 ,而且具有生物学活性的多样性 ,为应用噬菌体展示等高通量筛选策略对淋巴毒素进行体外分子进化和结构与功能的深入研究打下了基础。

关键词：淋巴毒素随机突变分子进化点突变组合文库

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含EGFP的人BMP2表达载体在人皮肤成纤维细胞中的表达

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上海第二医科大学学报 2004年第12期24卷 1007-1010页

作者：邹嫣琼王英陈玉英胡庆沈李慧易静上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正... 详细信息

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后 ,采用RT PCR和免疫组化染色方法分别检测人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白质水平上的表达情况。结果转染后的NIH3T3和正常人皮肤成纤维细胞均能转录人BMP2mRNA和表达人BMP2蛋白 ,同时显示绿色荧光。结论 pcBE真核表达载体可在正常人皮肤成纤维细胞内有效表达人BMP2蛋白 ,并以其荧光报告基因起示踪作用。

关键词： BMP2 人皮肤成纤维细胞正常人真核表达载体 EGFP基因转染绿色荧光蛋白 RNA 转录报告基因

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柯萨奇病毒激活ERK信号途径的初步研究

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 595-596页

作者：陈宏新陈洪陈淑芸刘晶星上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎和扩张性心肌病的主要病原体.CVB3在其感染过程中致细胞产生病变效应,直至死亡.CVB3感染也能引起细胞凋亡[1],但其病变机制尚不清楚.胞外信号调节激酶1/2(extracellular sig... 详细信息

柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎和扩张性心肌病的主要病原体.CVB3在其感染过程中致细胞产生病变效应,直至死亡.CVB3感染也能引起细胞凋亡[1],但其病变机制尚不清楚.胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)是促分裂原活化蛋白激酶家族中一类,参与了细胞生长、转化、分化以及细胞的生存和死亡等功能的调节[2].ERK途径参与HIV-1等多种病毒基因的表达和复制[3].本研究利用CVB3感染HeLa细胞后以磷酸化ERK1/2说明ERK1/2的活化状况,初步了解CVB3感染与宿主细胞ERK1/2的关系,为进一步阐明CVB3感染后的信号传导途径奠定基础.

关键词：柯萨奇病毒 ERK信号途径胞外信号细胞生长 CVB3 病毒感染

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问号钩端螺旋体全基因组的更新注释

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上海第二医科大学学报 2004年第6期24卷 421-425页

作者：宋卫峰赵蔚郭晓奎上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释,并寻找可能的新致病基因。方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP/NCBI数据库中比较,初步预测基因功... 详细信息

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释,并寻找可能的新致病基因。方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP/NCBI数据库中比较,初步预测基因功能,对可能的致病基因及其编码产物运用多种生物学软件进行深入分析。结果未知CDSs中有82个与NCBI数据库中的编码蛋白序列有很高的同源性,其中LA0063和LA3291编码金属蛋白酶,可能与致病有关。结论通过钩端螺旋体黄疸出血群赖株全基因组数据库中功能未知的CDSs进行定期比对,可以不断完善该数据库的功能注释,同时可以发现新的致病基因,有助于钩端螺旋体病致病机理的最终阐明。

关键词：问号钩端螺旋体基因组皮肤破损染色体

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哺乳动物的促分裂原活化蛋白激酶信号途径

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上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 221-224页

作者：陈宏新刘晶星上海第二医科大学基础医学院病原生物学教研室，上海200025

促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一类表达于所有真核细胞的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够被诸如细胞因子、生长因子、神经递质、激素、细胞应急以及细胞粘附等各种刺激因素激活。MAPK途径的基本组合包括MAPK、MAPK激酶(MKK)和MAPK激酶激酶(MKKK... 详细信息

促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一类表达于所有真核细胞的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够被诸如细胞因子、生长因子、神经递质、激素、细胞应急以及细胞粘附等各种刺激因素激活。MAPK途径的基本组合包括MAPK、MAPK激酶(MKK)和MAPK激酶激酶(MKKK)三种保守的成分,由此建立一个连续的激活途径。哺乳动物的MAPK可以大致归纳为5类:ERK1/2(MAPK^(erk1/2))、P38(MAPK^(p38))、JNK(MAPK^(jnk))、ERK3/4(MAPK^(erk3/4))和ERK5(MAPK^(erk5))。MAPK家族在各种细胞活动中具有重要作用,如增殖、分化、发育、转化及凋亡等。文章讨论了哺乳动物MAPK的功能和调节。

关键词：促分裂原活化蛋白激酶信号途径哺乳动物真核细胞细胞外信号

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苦参碱体外对胃癌细胞的杀伤作用

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上海第二医科大学学报 2004年第1期24卷 38-40页

作者：曾晖胡梅洁张曙乔敏敏章永平史桂英吴云林上海第二医科大学瑞金医院消化内科上海200025 上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025

目的研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导S... 详细信息

目的研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导SGC-7901凋亡的作用。结果随药物浓度的增加和作用时间的延长,苦参碱对胃癌细胞的杀伤作用逐渐增强(P<0.01);低分化的AGS较中分化的SGC-7901更为敏感。透射电镜、流式细胞术检测均显示苦参碱能够诱导胃癌细胞凋亡。结论苦参碱在体外对胃癌细胞具有杀伤作用,且呈明显的量效和时效关系;低分化的胃癌细胞株AGS对苦参碱更为敏感;苦参碱对胃癌细胞株的体外杀伤作用与其诱导胃癌细胞凋亡有关。

关键词：苦参碱体外胃癌杀伤作用癌细胞

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微生物胶原酶

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微生物学杂志 2004年第2期24卷 34-37页

作者：李文俊郭晓奎姜叙诚上海第二医科大学病理学教研室上海200025 上海第二医科大学微生物教研室上海200025

某些微生物可以分泌微生物胶原酶。微生物胶原酶具有和脊椎动物胶原酶相似的生物学作用 ,可以降解细胞外基质的主要成分—胶原 ,其活性依赖于Ca2 + 等二价金属阳离子。但微生物胶原酶又具有许多不同于脊椎动物胶原酶的生物学特性。它不... 详细信息

某些微生物可以分泌微生物胶原酶。微生物胶原酶具有和脊椎动物胶原酶相似的生物学作用 ,可以降解细胞外基质的主要成分—胶原 ,其活性依赖于Ca2 + 等二价金属阳离子。但微生物胶原酶又具有许多不同于脊椎动物胶原酶的生物学特性。它不仅可以降解天然不溶性胶原纤维 ,也可以降解变性的可溶性胶原蛋白、人工合成的胶原酶底物以及其它细胞外基质糖蛋白。越来越多的研究表明 ,微生物胶原酶在一些微生物致病过程中起重要作用 ,是某些微生物的重要毒力因子。而且微生物胶原酶也被越来越广泛地应用于生命科学基础研究和临床某些疾病治疗 ,具有极为广阔的应用前景。

关键词：微生物胶原酶胶原疾病治疗毒力因子蛋白质生物学作用

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