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母婴世界 2019年第4期 67-67页

作者：李晓茹白婧韩梅宁夏医科大学附属石嘴山市第二人民医院检验科宁夏石嘴山753000 宁夏医科大学基础医学院免疫与病原微生物教研室宁夏银川750001

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者中ENA抗体检验和血清体液免疫检验的应用价值.方法:在医院2016年5月至2018年8月期间诊治的SLE患者中选取47例作研究组样本,同期选取47例健康体检者作为对照组样本,对2组受检者进行ENA抗体检验和血清体... 详细信息

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者中ENA抗体检验和血清体液免疫检验的应用价值.方法:在医院2016年5月至2018年8月期间诊治的SLE患者中选取47例作研究组样本,同期选取47例健康体检者作为对照组样本,对2组受检者进行ENA抗体检验和血清体液免疫检验,并对比两组病例的检验结果差异.结果:①研究组受检者的六项抗体指标阳性率均高于对照组(均P<0.05);②研究组受检者的血清体液免疫指标IgA、IgG、IgM水平均高于对照组(均P<0.05).结论:ENA抗体检验和血清体液免疫检验在SLE诊断中的临床价值均较高,推荐应用.

关键词： SLE ENA抗体检验血清体液免疫检验健康体检人群

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长链非编码RNA AL049452在结直肠癌组织中的表达及临床意义

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温州医科大学学报 2017年第8期47卷 566-570页

作者：孙祥威胡盈盈徐剑峰张良毛晨晨郭刚强黄关立沈贤薛向阳温州医科大学附属第一医院胃肠外科浙江温州325015 温州医科大学附属第二医院妇产科浙江温州325027 温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035 温州医科大学附属第一医院肿瘤科浙江温州325015 温州医科大学附属第二医院胃肠外科浙江温州325027

目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)AL049452在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法:收集84例手术切除的结直肠癌及相应的癌旁正常组织,q RT-PCR检测lncRNA-AL049452的表达水平,用Mann-Whitney U检验分析lncRNA-AL049452表达水平和结直... 详细信息

目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)AL049452在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法:收集84例手术切除的结直肠癌及相应的癌旁正常组织,q RT-PCR检测lncRNA-AL049452的表达水平,用Mann-Whitney U检验分析lncRNA-AL049452表达水平和结直肠癌患者临床病理特征的关系,同时分析其对结直肠癌患者的总生存时间及无病生存时间的影响。绘制ROC曲线评价lncRNA-AL049452诊断结直肠癌的效能。结果:结直肠癌患者肿瘤组织lncRNA-AL049452的表达水平明显高于癌旁正常组织(P=0.0035),肿瘤更大的结直肠癌患者其lncRNA-AL049452的表达量更高(P=0.024)。生存曲线分析显示,高表达lncRNA-AL049452的结直肠癌患者的无病生存时间较低表达组更短(log-rank=4.208,P=0.034)。ROC曲线分析显示,lncRNA-AL049452诊断结直肠癌的曲线下面积为0.723(95%CI=0.613~0.832,P<0.001),敏感性和特异性分别为86.0%和51.2%。结论:肿瘤组织中高表达的lncRNA-AL049452可能参与了结直肠癌发生发展进程,是结直肠癌诊断和预后判断的新生物标记物。

关键词：长链非编码RNA AL049452 结直肠肿瘤生物学标记

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慢性乙型肝炎患者免疫球蛋白检验的价值研究

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健康必读 2018年第34期 15-15页

作者：李晓茹白婧韩梅宁夏医科大学附属石嘴山市第二人民医院宁夏石嘴山 753000 宁夏医科大学基础医学院免疫与病原微生物教研室宁夏银川 750001

目的:探究慢性乙型肝炎患者免疫球蛋白检验意义.方法:选取我院2017年7月至2 018年11月收治的重型慢性乙型肝炎26例、一般慢性乙型肝炎患者38例,并随机选取同期健康体检患者30例,均进行血清免疫球蛋白检测,并在对全体慢性乙型肝炎患者开... 详细信息

目的:探究慢性乙型肝炎患者免疫球蛋白检验意义.方法:选取我院2017年7月至2 018年11月收治的重型慢性乙型肝炎26例、一般慢性乙型肝炎患者38例,并随机选取同期健康体检患者30例,均进行血清免疫球蛋白检测,并在对全体慢性乙型肝炎患者开展相关治疗,根据治疗效果比较患者免疫球蛋白水平.结果:健康者、一般慢性乙型肝炎患者、重型慢性乙型肝炎患者IgA、IgG、IgM水平依次升高,且组间数据比较差异均具鲜明性(P＜0.05);经治疗后,病情改善患者以上指标与恶化组相比,差异具鲜明性(P＜0.05).结论:免疫球蛋白含量,可作为慢性乙型肝炎严重程度及预后情况的判断标准.

关键词：慢性乙型肝炎免疫球蛋白诊断

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人巨细胞病毒临床株UL133基因序列遗传变异分析

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中国病原生物学杂志 2016年第7期11卷 584-589,595页

作者：郭刚强叶思思杨敏叶璐璐林刻智李宝青张丽芳薛向阳温州医科大学微生物学和免疫学教研室浙江温州325035 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325035 温州医科大学基础医学实验中心浙江温州325035 温州医科大学附属第二医院检验科浙江温州325000

目的研究人巨细胞病毒（HCMV）临床感染株的UL133基因序列特征。方法采集HCMV-DNA阳性者的临床标本,PCR扩增UL133基因全序列,阳性扩增产物克隆到pEASYTM载体后进行序列测定,结合来自于NCBI数据库的15条序列进行UL133基因多态性分析。结... 详细信息

目的研究人巨细胞病毒（HCMV）临床感染株的UL133基因序列特征。方法采集HCMV-DNA阳性者的临床标本,PCR扩增UL133基因全序列,阳性扩增产物克隆到pEASYTM载体后进行序列测定,结合来自于NCBI数据库的15条序列进行UL133基因多态性分析。结果获得20例HCMV感染者的UL133全长序列。多态性分析显示HCMV临床株UL133基因核苷酸变异率为0～9.7%,氨基酸变异率为0～40.2%;不同感染者UL133序列5＇端的第32-45位发生了相对集中的非同义突变,其他部分序列较少出现氨基酸缺失及错义突变。其中1例临床感染者UL133序列在163-166位核苷酸出现移码突变。综合NCBI数据库的15株序列分析显示,UL133序列分为G1、G2、G3、G4、G5、G6等6个型,但未发现基因型与HCMV感染的临床表现具有显著关联性。编码蛋白翻译后修饰位点包括酪蛋白激酶磷酸化位点（CKP）,蛋白激酶C位点（PKC）以及NLS_BP核定位信号（NLS_BP）。与Toledo株相比,有1株发生移码突变,其他临床株UL133基因编码产物翻译后修饰位点相对保守。结论 HCMV UL133基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列高度保守,但仍具有一定的多态性。这种多态性与HCMV感染临床症状的关系尚待进一步研究。

关键词：人巨细胞病毒 UL133基因多态性

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呼吸道合胞病毒合并肺炎克雷伯菌感染所致肺炎与TLR4-NF-κB信号通路关系的初步研究

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安徽医科大学学报 2015年第9期50卷 1252-1258页

作者：王云黄升海吴璇李振兴于莉汪旻旻安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 安徽省第二人民医院输血科合肥230061

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)合并肺炎克雷伯菌(Kp)感染SD大鼠后,初步研究其所致肺炎与TLR4-NF-κB信号转导通路的关系。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、RSV组、Kp组及RSV+Kp组,以RSV、Kp滴鼻感染SD大鼠,分别于感染后第0、1、3... 详细信息

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)合并肺炎克雷伯菌(Kp)感染SD大鼠后,初步研究其所致肺炎与TLR4-NF-κB信号转导通路的关系。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、RSV组、Kp组及RSV+Kp组,以RSV、Kp滴鼻感染SD大鼠,分别于感染后第0、1、3、5、7天不同时间点,测量其体重、肺指数(LI)的变化;HE染色观察肺的病理学改变;RT-PCR法检测肺组织中TLR4、NF-κB的mRNA表达;Western blot检测NF-κB蛋白的表达;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量的变化。结果与正常对照组相比,RSV组和Kp组均存在弥漫性肺泡间隔增厚和炎症细胞浸润,且随感染时间的延长,肺泡结构破坏逐渐加重,LI、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA、NF-κB蛋白、TNF-α和IL-1β的表达均升高,并与RSV和Kp感染之间存在时间依赖性关系;RSV+Kp组LI、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA、NF-κB蛋白、TNF-α和IL-1β的表达量进一步升高,肺组织炎症明显加剧。结论 RSV和Kp混合感染具有协同作用,加重肺部炎症;RSV合并Kp感染可能通过TLR4-NF-κB途径诱导肺部炎症反应,释放细胞因子TNF-α和IL-1β等。

关键词：呼吸道合胞病毒肺炎克雷伯菌肺炎 TLR4 NF-κB 炎性因子

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等离子体体外抑制白假丝酵母菌生长的实验研究

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安徽医科大学学报 2015年第12期50卷 1819-1820,1827页

作者：杜文辉黄升海李卉杨春俊徐钰安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院皮肤科合肥230022 安徽医科大学第二附属医院皮肤科合肥230601

选择白假丝酵母菌ATCC10231作为实验菌株,以低温等离子体对其进行照射,观察照射后菌落生长情况。经低温等离子体照射30、60、120、180 s后,在培养基中心照射位置处,出现明显的抑菌环,随着照射时间的延长,抑菌环逐渐增大;连续观察3 d,抑... 详细信息

选择白假丝酵母菌ATCC10231作为实验菌株,以低温等离子体对其进行照射,观察照射后菌落生长情况。经低温等离子体照射30、60、120、180 s后,在培养基中心照射位置处,出现明显的抑菌环,随着照射时间的延长,抑菌环逐渐增大;连续观察3 d,抑菌环没有改变。低温等离子体在体外可抑制白假丝酵母菌的生长,为其将来成为治疗白假丝酵母菌感染的一种新手段提供了实验室依据。

关键词：低温等离子体白假丝酵母菌抑制

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肝癌细胞不同制悬方法建立裸鼠移植瘤模型的比较

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胃肠病学和肝病学杂志 2014年第12期23卷 1440-1443页

作者：裘铠杰李大川胡彦建李红影吴德全张凤民胡彦华哈尔滨医科大学附属第二医院普通外科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科黑龙江哈尔滨150086 黑龙江中医药大学基础医学院生物化学教研室哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室

目的比较肝癌细胞不同制悬方法建立裸鼠皮下瘤及原位瘤模型,优选建模方法。方法将肝癌细胞分别采用PBS缓冲液(PBS组)、无血清DMEM溶液(DMEM组)和含10%血清的DMEM溶液(血清DMEM组)3种液体制悬后注入裸鼠皮下建立肝癌裸鼠皮下瘤模型,比较... 详细信息

目的比较肝癌细胞不同制悬方法建立裸鼠皮下瘤及原位瘤模型,优选建模方法。方法将肝癌细胞分别采用PBS缓冲液(PBS组)、无血清DMEM溶液(DMEM组)和含10%血清的DMEM溶液(血清DMEM组)3种液体制悬后注入裸鼠皮下建立肝癌裸鼠皮下瘤模型,比较皮下瘤的体积、瘤重及成瘤率;将肝癌细胞分别采用PBS缓冲液(PBS组)、无血清DMEM溶液(DMEM组)和含10%血清的DMEM溶液(血清DMEM组)3种液体制悬后注入裸鼠肝脏建立肝癌裸鼠原位瘤模型,比较原位瘤的成瘤率。结果3组裸鼠皮下瘤模型的皮下瘤体积及瘤重相比,差异无统计学意义(P>0.05),但是PBS组及DMEM组的成瘤率(90%和100%)明显高于血清DMEM组(40%),差异有统计学意义(P<0.05);裸鼠原位瘤模型中PBS组的成瘤率(90%)明显高于DMEM组(40%)及血清DMEM组(20%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用PBS缓冲液或无血清DMEM溶液对肝癌细胞稀释制悬可以有效建立裸鼠皮下瘤模型,采用PBS缓冲液对肝癌细胞稀释制悬可以有效建立裸鼠原位瘤模型。

关键词：肝癌细胞裸鼠移植瘤动物模型

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人IgMμ链恒定区各肽段的基因合成原核表达及免疫原性分析

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安徽医科大学学报 2013年第9期48卷 995-1000页

作者：张婧章萍萍祁培培吴莉莉刘超潘卫邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 安庆医药高等专科学校安庆246052

目的全基因合成并原核表达免疫球蛋白M的重链(IgMμ链)及其各肽段,与天然的IgM、IgMμ链和IgG进行免疫原性的分析比较,进一步了解IgMμ链恒定区的结构与功能。方法根据GenBank数据库IgMμ链恒定区(CH1-CH4)的cDNA序列并进行必要的大肠... 详细信息

目的全基因合成并原核表达免疫球蛋白M的重链(IgMμ链)及其各肽段,与天然的IgM、IgMμ链和IgG进行免疫原性的分析比较,进一步了解IgMμ链恒定区的结构与功能。方法根据GenBank数据库IgMμ链恒定区(CH1-CH4)的cDNA序列并进行必要的大肠杆菌密码子优化,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)体外基因合成人IgMμ链恒定区全长(CH1-CH4)及其截断片段CH1-CH2和CH3-CH4。原核表达并纯化相应的3种融合蛋白PET32a-rMμCH1-CH4、PET32a-rMμCH1-CH2和PET32a-rMμCH3-CH4,并分别免疫BALB/c小鼠。同时设天然人IgM、IgMμ链和IgG免疫组为对照。再用ELISA法检测6种血清,分析比较其抗原性及免疫原性。结果利用OE-PCR方法体外成功合成1 359 bp的IgMμ链(CH1-CH4)全长基因、651 bp的IgMμ链CH1CH2和708 bp的IgMμ链CH3CH4,并构建相应原核表达质粒PET32a-rMμ1-4、PET32a-rMμ1-2和PET32a-rMμ3-4,血清ELISA检测结果显示:①IgG免疫原性>IgM>IgMμ链>rMμ1-4>rMμ1-2>rMμ3-4;②IgM免疫的血清与IgG有较强的交叉反应性,IgG免疫的血清与IgM也存在较强的交叉反应性;IgMμ链和重组μ链的各肽段免疫的血清与IgG均无明显的交叉反应性。结论重组的IgMμ链及其各肽段与天然IgMμ链有着相似的免疫原性和特异性,为基因工程得到抗人IgMμ链单克隆抗体奠定了研究基础。

关键词：免疫球蛋白M 免疫球蛋白μ链酶联免疫吸附测定法单克隆抗体

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人和羊IgG对噬菌体展示细菌免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的体外进化筛选

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安徽医科大学学报 2013年第8期48卷 867-872页

作者：吴莉莉祁培培章萍萍王锦红张婧何婷潘卫邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 安庆医药高等专科学校安庆246052

目的使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点。方法通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A... 详细信息

目的使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点。方法通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A、B、D、E和链球菌(C和G群)蛋白G(SpG)的B2、B3各单结构域片段,构建由该6个片段随机组合的噬菌体展示文库。再分别使用人和羊IgG对文库进行体外亲和筛选,以期能够获得具有特异优势结合能力的组合分子,并在Phage ELISA的水平上进一步验证筛选结果。结果成功构建了符合进行体外进化筛选要求的噬菌体展示单结合结构域随机组合文库后,经过6轮人IgG诱导筛选,文库的展示片段大小统一为3个结构域组合分子,E-B-B3;经过6轮羊IgG诱导筛选,文库的展示片段大小也统一为4个结构域组合分子,D-A-B3-B3。Phage ELISA进一步验证最终组合序列的对人和羊IgG的结合能力。结论首次得到两种天然SpA、SpG分子中不存在的,且分别特异地与人和羊IgG具有强结合作用的新型组合分子E-B-B3、D-A-B3-B3,在人和羊IgG的纯化和检测具有很大的应用前景。

关键词：细菌噬菌体免疫球蛋白G 定向分子进化基因文库

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人IgG四亚类对噬菌体展示Ig结合蛋白单结构域随机组合文库的体外进化筛选

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生物工程学报 2012年第9期28卷 1093-1105页

作者：祁培培丁莹莹吴莉莉陈秋莉王锦红刘超廖文婷张婧曹洁潘卫中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032

金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SpA)和链球菌蛋白G(Streptococcal protein G,SpG)是细菌产生的特异结合宿主抗体的细菌免疫球蛋白结合蛋白(Immunoglobulin(Ig)-binding proteins,IBPs)的代表分子。SpA和SpG均包含由多个序列高度同源的结合结构域重复组成的抗体结合区,各单结构域都具有完全的结合IgG的功能。为研究这些单结构域随机组合能否产生具有新结合特性的组合分子,将SpA的A、B、C、D、E以及SpG的B2、B3共7个单结合结构域随机组合构建成噬菌体展示文库后,应用人IgG1、2、3、4为诱饵分子对该文库进行4轮筛选,获得了SpA天然分子中不存在的单结构域排列组合分子D-C。在筛选过程中,阴性对照噬菌体的逐渐减少、展示两个结构域以上的噬菌体比例不断增多,尤其是D-C组合的选择性富集和其随机连接肽的严格筛选都显示了筛选的有效性和D-C组合的重要性。噬菌体ELISA进一步证实D-C与人IgG四亚类的结合能力远强于天然SpA分子。该研究应用分子进化技术首次获得了一种与人IgG四亚类具有结合优势的新型组合分子D-C,不仅可为IgG纯化、制备、检测等方面的应用提供新的候选分子,还为细菌IBP结构功能的进一步研究提供新的手段。

关键词：噬菌体免疫球蛋白结合蛋白进化筛选 IgG 亚类

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