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大连医科大学学报 2015年第5期37卷 442-446页

作者：杜莉莉吕润潇杨晓漪辛娜马廷贤中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110013 第二军医大学附属长海医院研究生队上海200433 第二军医大学研究生队上海200433 中国医科大学

目的：比较不同氧浓度对人胎盘间充质干细胞生物学特性的影响。方法组织块培养法分离人胎盘间充质干细胞pMSCs，并利用流式细胞技术进行表面标志鉴定。将第3代pMSCs分别培养于常氧（21％O2）及不同浓度的低氧（5％O2、3％O2、1％O2、0．... 详细信息

目的：比较不同氧浓度对人胎盘间充质干细胞生物学特性的影响。方法组织块培养法分离人胎盘间充质干细胞pMSCs，并利用流式细胞技术进行表面标志鉴定。将第3代pMSCs分别培养于常氧（21％O2）及不同浓度的低氧（5％O2、3％O2、1％O2、0．5％O2）环境中，观察各组细胞形态，MTT检测细胞增殖情况，划痕实验检测细胞迁移能力，ELISA检测细胞VEGF分泌表达量情况。结果成功从人胎盘组织分离出间充质干细胞pMSCs，阳性表达CD29、CD44，阴性表达CD31、CD34、CD45、HLA－DR。低氧培养的pMSCs形态均一，细胞伸展为长梭形，漩涡状排列明显。与常氧组相比，一定范围内低氧（5％O2～1％O2）培养的pMSCs增殖、迁移增快，分泌VEGF增多，氧浓度越低，变化越明显。过低氧浓度（0．5％O2）培养的pMSCs增殖减慢，分泌VEGF减少。结论一定范围内的低氧可促进pMSCs增殖、迁移及分泌VEGF，氧浓度越低，促进作用越明显。而过低氧浓度则产生抑制作用。

关键词：胎盘间充质干细胞低氧生物学特性

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过表达microRNA-126诱导INS-1细胞凋亡

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宁夏医科大学学报 2015年第7期37卷 741-744,封4页

作者：高婷姬海玉胡甜甜张荣华扈启宽袁文俊宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004 第二军医大学生理学教研室上海200433

目的研究过表达microRNA-126对INS-1细胞(大鼠胰岛β细胞株)增殖和凋亡的影响。方法将INS-1细胞分为4组:阴性对照(NC)组、阳性对照(miR-375)组、miR-126过表达(miR-126m)组、miR-126低表达(miR-126in)组,分别转染nonsense segment、miR-375mimic、miR-126mimic、miR-126inhibitor,48h后予胰岛素刺激细胞12h。用实时定量RT-PCR方法检测转染效果;MTS法检测INS-1细胞增殖情况;电子显微镜下观察细胞超微结构的变化。结果 miR-126m组INS-1细胞的miR-126水平较NC组升高(P<0.01),miR-126in组miR-126水平较NC组降低(P<0.05);miR-126m组及miR-375组INS-1细胞活力较NC组及miR-126in组降低(P<0.05);电镜下可见miR-126m组及miR-375组INS-1细胞大量凋亡,细胞核折缝样改变,染色质高度浓缩、边集;NC组及miR-126in组偶见凋亡细胞。结论过表达microRNA-126可以显著降低INS-1细胞活力,诱导细胞凋亡,提示microRNA-126可能与糖尿病的发生有关。

关键词： microRNA-126 INS-1 细胞凋亡糖尿病

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胎盘间充质干细胞对小鼠小肠缺血再灌注损伤的作用

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解剖科学进展 2015年第4期21卷 371-374页

作者：杜莉莉杨晓漪吕润潇辛娜马玲中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110122 中国医科大学第二军医大学研究生队上海200433

目的探讨胎盘间充质干细胞(pMSCs)对小鼠小肠缺血再灌注损伤的作用。方法组织块培养法提取pMSCs,流式细胞技术鉴定。24只小鼠随机分为假手术组(Sham组),缺血30min再灌注6h组(I/R组)和再灌注1h尾静脉输入5×10 6个pMSCs组。缺血再灌... 详细信息

目的探讨胎盘间充质干细胞(pMSCs)对小鼠小肠缺血再灌注损伤的作用。方法组织块培养法提取pMSCs,流式细胞技术鉴定。24只小鼠随机分为假手术组(Sham组),缺血30min再灌注6h组(I/R组)和再灌注1h尾静脉输入5×10 6个pMSCs组。缺血再灌注6h后观察肠道情况,HE染色观察肠组织形态,ELISA检测血清中二胺氧化酶(DAO)、TNF-α、IL-6及IL-10含量。结果 pM SCs阳性表达CD29,CD44。与Sham组相比,I/R组肠道损伤明显,肠黏膜上皮细胞脱落多,而pM SCs组肠道损伤轻,细胞脱落少。I/R组和pM SCs组小鼠血清中DAO、TNF-α、IL-6及IL-10含量明显多于Sham组(P<0.05)。与I/R组相比,pM SCs组小鼠血清中DAO、TNF-α、IL-6含量减少(P<0.05),IL-10含量增多(P<0.05)。结论 pM SCs可减轻小鼠小肠缺血再灌注损伤,机制与抑制再灌注后炎症反应相关。

关键词：胎盘间充质干细胞肠缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子α 白细胞介素6 小鼠

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锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

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中国病理生理杂志 2014年第5期30卷 876-880页

作者：朱晓彤杨瑞周露婷张晔李玲章卫平施广霞陈玉霞第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 大连医科大学病理生理学教研室辽宁大连116044

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-... 详细信息

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。

关键词：含锌指和BTB区蛋白20 重组腺病毒甲胎蛋白类转录调节

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2010至2013年度国家自然科学基金委员会医学科学部运动系统相关项目申请与资助情况分析

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中华骨科杂志 2014年第2期34卷 224-231页

作者：王琳琳熊鲲向川冯勇刘晓东徐芳薛丽香闫章才浙江大学基础医学院 310058 国家自然科学基金委员会医学科学部山西医科大学第二医院上海交通大学第六医院上海市杨浦区中心医院滨州医学院病理生理学教研室

目的分析2010至2013年资助“运动系统”疾病相关各分支学科的情况，对该领域的发展趋势提出思考与展望。方法统计国家自然科学基金2010至2013年度对“运动医学”等领域的资助数量和经费，分析各分支学科基础研究概况，并对研究前沿和热... 详细信息

目的分析2010至2013年资助“运动系统”疾病相关各分支学科的情况，对该领域的发展趋势提出思考与展望。方法统计国家自然科学基金2010至2013年度对“运动医学”等领域的资助数量和经费，分析各分支学科基础研究概况，并对研究前沿和热点问题进行初步分析。结果（1）国家自然科学基金给医学科学部H06申请代码下总资助项目819项，总资助经费达38100万元，其中研究项目系列总项目为476项（28501万元）；人才项目系列总项目为343项（9599万元）；（2）面上项目总资助项目数为563项（2．5223亿元）；青年科学基金总资助项目数为277项（6，142万元）；地区基金项目总资助项目数为60项（2，895万元）；（3）获得最多资助依次为H0605（骨、关节、软组织损伤与修复，256项）、H0609（骨、关节、软组织退行性病变，181项）、H0604（骨、关节、软组织医用材料，72项）、H0601（运动系统结构、功能和发育异常，63项）、H0606（骨、关节、软组织移植与重建，60项）；（4）骨组织工程相关领域平均资助率为22．5％，运动相关医学领域为20％，软骨组织工程相关领域为19．5％。在前沿和热点研究中，干细胞相关项目为25．4％、表观遗传学方面为29．1％、自噬相关项目为26．1％（2011年至2013年）；（5）在运动医学获资助项目数量前3位的单位分别为上海交通大学、浙江大学、第二军医大学，资助项目数和金额均呈一致性。结论组织工程研究、运动相关医学领域研究和软骨组织工程仍将会是运动医学领域国家自然科学基金资助的主流方向；干细胞、自噬或表观遗传等热点领域的研究是将来发展的重要方向。

关键词：中国运动医学研究资助(主题)

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Obestatin抑制胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流

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宁夏医科大学学报 2014年第8期36卷 849-852页

作者：陶虹施劲松任安经袁文俊曾晓荣宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004 第二军医大学生理学教研室上海200433 南京军区总院南京210000 第二军医大学病理生理学教研室上海200433 四川泸州医学院心血管研究所泸州646000

目的观察obestatin对胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流的影响。方法应用穿孔全细胞膜片钳技术研究obestatin对培养的胰岛β细胞株INS-1细胞膜L型电压敏感钙通道电流(L-type calcium ion channel current,ICa,L)的影响。结果胰岛β细... 详细信息

目的观察obestatin对胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流的影响。方法应用穿孔全细胞膜片钳技术研究obestatin对培养的胰岛β细胞株INS-1细胞膜L型电压敏感钙通道电流(L-type calcium ion channel current,ICa,L)的影响。结果胰岛β细胞株INS-1细胞钳制膜电位为-20 mV时,分别给予胰岛β细胞株INS-1细胞0nM(对照组)和1、10、100nM obestatin灌流5min后,ICa,L峰值呈浓度依赖性降低,各组为给药前的(97±8)%、(91±7)%、(60±9)%和(45±6)%。其中,10nM和100nM obestatin灌流5 min后ICa,L峰值与对照组相比显著减小(P<0.01,n=5)。胰岛β细胞株INS-1细胞钳制膜电位分别为-30、-20、-10和0mV时,给予10nM obestatin之前,其ICa,L峰值分别为(-5.48±0.69)、(-5.70±0.68)、(-5.58±0.61)和(-3.90±0.44)pA/pF,灌流10nM obestatin 5 min后,ICa,L峰值分别下降至(-3.11±0.68)、(-3.60±0.99)、(-3.26±1.03)和(-2.28±0.71)pA/pF,均明显低于obestatin给药前(P<0.01,n=5)。结论 obestatin可抑制胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流。

关键词：肥胖抑制素胰岛β细胞株INS-1细胞电压依赖性L型钙通道膜片钳

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Salusins及其心血管效应

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生理科学进展 2013年第3期44卷 164-168页

作者：任安经林丽严晓红袁文俊第二军医大学病理生理学教研室上海200433 第二军医大学生理学教研室上海200433 武汉大学基础医学院生理学系武汉430071 宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004

Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血... 详细信息

Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖等一系列心血管效应。值得注意的是,作为由同一前体产生的两种多肽,salusin-α和salusin-β在动脉粥样硬化的发生发展中具有相反的作用。

关键词： salusins 心脏血管动脉粥样硬化

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iNOS在大鼠创伤模型心肌细胞凋亡中的作用

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基础医学与临床 2013年第6期33卷 675-679页

作者：燕子郭丽杨丽红高胜利王洁王瑾梁峰山西医科大学基础医学院生理学系山西太原030001 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001 山西医科大学附属第二医院骨科实验室山西太原030001 山西医科大学基础医学院病理学教研室山西太原030001 山西医科大学汾阳学院生理学教研室山西汾阳032200 山西医科大学附属太钢总医院胸心外科山西太原030003

目的观察iNOS在创伤大鼠模型心肌细胞凋亡中的作用。方法用Noble-Collip创伤仪制备大鼠创伤模型,用caspase-3活性和DNA ladder测定法观察心肌细胞凋亡,用Western blot测定心肌组织iNOS的蛋白表达,用化学发光法检测心肌组织一氧化氮(NO)... 详细信息

目的观察iNOS在创伤大鼠模型心肌细胞凋亡中的作用。方法用Noble-Collip创伤仪制备大鼠创伤模型,用caspase-3活性和DNA ladder测定法观察心肌细胞凋亡,用Western blot测定心肌组织iNOS的蛋白表达,用化学发光法检测心肌组织一氧化氮(NO)的含量,ELISA法测定心肌组织硝基酪氨酸(NT)含量。结果机械创伤后心肌细胞凋亡显著增加(P<0.01),心肌组织iNOS的表达显著升高(P<0.01),同时心肌组织NO2-/NO3-和NT含量明显增加(P<0.01);给予iNOS选择性抑制剂1 400 W可显著降低心肌细胞凋亡(P<0.05),且显著降低心肌组织NO2-/NO3-和NT的含量(NO2-/NO3-:P<0.01;NT:P<0.05)。结论创伤时iNOS通过引起NO及过氧亚硝酸阴离子增加,进而导致心肌细胞凋亡。

关键词：心脏损伤一氧化氮合酶一氧化氮过氧亚硝酸阴离子凋亡

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转化医学在机械性创伤致继发性心脏损伤研究中的应用

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医学与哲学（B） 2013年第1期34卷 4-6页

作者：燕子梁峰郭丽高胜利王洁刘慧荣山西医科大学基础医学院生理学系山西太原030001 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001 山西医科大学附属太钢总医院胸心外科山西太原030003 山西医科大学附属第二医院骨科实验室山西太原030001 山西医科大学汾阳学院生理学教研室山西汾阳032200 首都医科大学基础医学院生理学与病理生理学系北京100069

当前转化医学受到国内外医学工作者的广泛关注,然而在实际应用工作中,面临着基础研究和临床应用如何有效结合。本文以机械性创伤致继发性心脏损伤的研究课题为例,系统介绍了"临床-实验室-临床"模式的具体实施方法及存在的问题... 详细信息

当前转化医学受到国内外医学工作者的广泛关注,然而在实际应用工作中,面临着基础研究和临床应用如何有效结合。本文以机械性创伤致继发性心脏损伤的研究课题为例,系统介绍了"临床-实验室-临床"模式的具体实施方法及存在的问题,以促进转化医学在医学研究中的顺利开展。

关键词：转化医学机械性创伤心脏

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机械创伤通过增加活性氧和NO导致心肌细胞凋亡

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山西医科大学学报 2013年第2期44卷 87-91,165页

作者：燕子郭丽杨丽红卫小红王洁王瑾梁峰山西医科大学基础医学院生理学系太原030001 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西医科大学第二临床医学院骨科实验室山西医科大学基础医学院病理学教研室临汾职业技术学院山西医科大学附属太钢总医院胸心外科

目的观察机械创伤后活性氧和一氧化氮(NO)水平的变化规律,并探讨其在创伤致心肌细胞凋亡中的作用。方法使用Noble-Collip创伤仪制备大鼠机械创伤模型。创伤后0,3,6,12,24 h检测各指标。同时在创伤后随即给予FeTMPyP,按照2 mg/kg剂量腹... 详细信息

目的观察机械创伤后活性氧和一氧化氮(NO)水平的变化规律,并探讨其在创伤致心肌细胞凋亡中的作用。方法使用Noble-Collip创伤仪制备大鼠机械创伤模型。创伤后0,3,6,12,24 h检测各指标。同时在创伤后随即给予FeTMPyP,按照2 mg/kg剂量腹腔注射,溶剂对照组给予等量生理盐水,创伤后12 h比较各指标。采用光泽精加强发光法测定心肌组织超氧阴离子的含量,应用化学发光法检测心肌组织NO的含量,通过ELISA方法测定心肌组织硝基酪氨酸(NT)含量,使用TUNEL和caspase-3活性测定两种方法观察心肌细胞凋亡情况。结果机械创伤后心肌细胞凋亡显著增高(P<0.01),心肌组织超氧阴离子水平和NO含量显著升高(P<0.01),且二者结合的产物过氧亚硝基(ONOO-)也明显增加(P<0.01);给予ONOO-清除剂可显著降低心肌组织NT水平(P<0.01),且显著降低心肌细胞凋亡(P<0.01)。结论机械创伤通过使活性氧和NO水平增加而导致心肌细胞凋亡。

关键词：心脏损伤超氧阴离子一氧化氮凋亡过氧亚硝基

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