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乙型肝炎病毒X蛋白和p14^ARF依赖性、非依赖性途径对肝癌细胞生长的影响

南方医科大学学报 2009年第6期29卷 1089-1093页

作者：余党会林静曲建慧祝峙李芳梅倪灿荣朱明华第二军医大学长海医院病理科上海200433 福建医科大学基础医学院组胚教研室福建福州350004 济南军区总医院传染科山东济南250031

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是否通过p14ARF途径影响肝癌细胞生长及其作用机制。方法将HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但不表达p14ARF的肝癌细胞株HepG2。实验分为pcDNA3、pcDNA3HBx、pcDNA3p14ARF、pcDNA3HBx+pcDNA3p14ARF4组。通过流式细胞仪比较各转染组HepG2细胞凋亡、细胞周期的变化情况。用含p53结合位点p21WAF1启动子荧光素酶活性检测和Western blotting观察各转染组细胞p14ARF、MDM2、p53、p21WAF1蛋白表达水平的变化。结果HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但无p14ARF表达的HepG2细胞,单转染HBx及p14ARF组其细胞凋亡率(14.11%、13.72%)、G0/G1期阻滞细胞数(63.62%、61.75%)、p21WAF1启动子荧光素酶活性(1.25±0.05、1.09±0.06)及p53、p21WAF1蛋白的表达较对照组(10.66%、57.42%、0.77±0.03)明显升高,而共转染组与单转染p14ARF组相比其p14ARF蛋白表达及上述各项指标(18.61%、66.74%、3.53±0.43)又进一步升高。结论HBx通过依赖及非依赖p14ARF途径诱导p53表达从而导致激活p21WAF1,进而引起细胞周期G0/G1期的阻滞及细胞凋亡的增加。

关键词：肝肿瘤 p53 p14^ARF p21^WAF1 乙型肝炎病毒X蛋自细胞周期凋亡

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溶脲脲原体感染影响因素分析

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中国公共卫生 2006年第6期22卷 749-750页

作者：梁翠玲陈建平秦石晓武俊青徐晨高尔生上海市计划生育科学研究所流行病与社会科学研究室上海第二医科大学组胚教研室

生殖道感染是男性不育的重要病因之一,在众多的生殖道感染病原体中,溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)在一般人群中有较高的检出率,在不育人群中检出率更高.研究结果显示,生殖道UU感染与精液质量下降有关.为了探讨UU感染与精液质... 详细信息

生殖道感染是男性不育的重要病因之一,在众多的生殖道感染病原体中,溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)在一般人群中有较高的检出率,在不育人群中检出率更高.研究结果显示,生殖道UU感染与精液质量下降有关.为了探讨UU感染与精液质量的关系,本文于2001－2003年选取男性科就医对象进行问卷调查、精液检验和UU培养,分析UU感染的影响因素.结果报告如下。[第一段]

关键词：溶脲脲原体感染影响因素分析精液质量下降生殖道感染 UU感染男性不育一般人群感染病原体问卷调查精液检验

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乙型肝炎病毒X蛋白羧基端氨基酸缺失对肝癌细胞生物学行为的影响

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中华医学杂志 2005年第12期85卷 825-830页

作者：刘晓红林静曹晓哲郑建明陈颖朱明华第二军医大学长海医院病理科上海200433 福建医科大学基础医学院组胚教研室

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)羧基端缺失了40个氨基酸的突变体(HBx3′-40)和野生型HBx对Huh7和SMMC-7721肝癌细胞的生物学行为的影响.方法脂质体和磷酸钙法介导pcDNA3HBx3′-40和pcDNA3HBx重组体转染HBV(-)的人肝癌细胞Huh7和***基因PCR... 详细信息

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)羧基端缺失了40个氨基酸的突变体(HBx3′-40)和野生型HBx对Huh7和SMMC-7721肝癌细胞的生物学行为的影响.方法脂质体和磷酸钙法介导pcDNA3HBx3′-40和pcDNA3HBx重组体转染HBV(-)的人肝癌细胞Huh7和***基因PCR及Western印迹方法检测质粒DNA片断插入和HBx蛋白质的表达.借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期、凋亡和裸鼠成瘤实验以及氯霉素乙酰转移酶(CAT)-ELISA法对转染细胞的生物学活性进行检测.结果 pcDNA3HBx3′-40组细胞生长速度明显快于pcDNA3HBx和pcDNA3组;pcDNA3HBx3′-40组克隆形成率明显高于pcDNA3HBx和pcDNA3组(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示pcDNA3HBx3′-40表达能加速Huh7细胞由G0/G1期→S期的进程;但细胞凋亡检测显示无血清诱导的SMMC-7721细胞HBx3′-40组能部分取消HBx的促凋亡效应,并且该组几乎丧失了HBx的反式激活作用;裸鼠成瘤实验显示,pcDNA3HBx3′-40组成瘤体积明显大于pcDNA3HBx组和pcDNA3组,瘤体重量间差异具有统计学意义(P<0.05).表明HBx3′-40对肝癌细胞的生长具有明显促增殖作用.结论 HBx碳端缺失了40个氨基酸的突变体转染细胞对比野生型HBx显示促增殖能力明显增强,推测HBx通过缺失突变修饰其生物学功能,取消了野生型HBx的反式激活功能和抗增殖效应.另一方面,HBx 114～154个氨基酸位点的缺失可能导致p53无法发挥其抑癌作用.

关键词：乙型肝炎病毒 X蛋白羧基端氨基酸肝癌细胞生物学行为

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辅酶A口服剂与泛硫乙胺对家兔食饵性高脂血症作用的比较

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 919-921页

作者：董娜潘静薇张妲张海燕杨群芳陈红第二军医大学长海医院神经内科上海200433 上海第二医科大学基础部药理学教研室上海200025

目的:比较辅酶A口服剂(辅酶A+辅酶A保护剂)与泛硫乙胺口服给药对家兔食饵性高脂血症的作用。方法:56只雄性新西兰白兔随机分为7组,每组8只。其中1组饲以普通饲料作为正常对照组,另外6组饲以高脂饮食20d制备高脂血症模型,20d后随机选择3... 详细信息

目的:比较辅酶A口服剂(辅酶A+辅酶A保护剂)与泛硫乙胺口服给药对家兔食饵性高脂血症的作用。方法:56只雄性新西兰白兔随机分为7组,每组8只。其中1组饲以普通饲料作为正常对照组,另外6组饲以高脂饮食20d制备高脂血症模型,20d后随机选择3组每日给予辅酶A保护剂[825mg/(kg·d)]+高中低3个剂量的辅酶A[100、800、1500U/(kg·d)]。其余3组分别给予辅酶A前体药———泛硫乙胺[1200mg/(kg·d)]、辅酶A保护剂[825mg/(kg·d)]、辅酶A原药[800U/(kg·d)],口服给药20d。治疗前后测定动物血总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平。结果:给药20d后,辅酶A口服剂高、中剂量组动物总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著降低,其效果与泛硫乙胺无显著差别。大剂量辅酶A可降低家兔三酰甘油水平,泛硫乙胺无此作用,辅酶A原药未见明显的降脂作用。结论:辅酶A口服剂治疗高脂血症效果可能优于泛硫乙胺。

关键词：高脂血症辅酶A 泛硫乙胺

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鞍侧腔颅神经鞘的发育及其显微解剖研究

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上海第二医科大学学报 2005年第5期25卷 491-494,514页

作者：王永谦谭多盛王秉玉丁美修上海第二医科大学第九人民医院神经外科上海200011 甘肃省河西医学高等专科学校解剖组胚教研室

目的研究鞍侧腔外侧壁和穿行颅神经鞘结构,为此区手术提供解剖学基础。方法采用45例胚胎标本和10例成人尸颅标本,对鞍侧腔行组织学连续切片和显微解剖观察。结果胚胎14周后鞍侧腔外侧壁发育形成二层结构,外层由脑膜层组成,内层由基质纤... 详细信息

目的研究鞍侧腔外侧壁和穿行颅神经鞘结构,为此区手术提供解剖学基础。方法采用45例胚胎标本和10例成人尸颅标本,对鞍侧腔行组织学连续切片和显微解剖观察。结果胚胎14周后鞍侧腔外侧壁发育形成二层结构,外层由脑膜层组成,内层由基质纤维包绕第Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ和Ⅴ1颅神经复合体组成;脑膜鞘伴随动眼神经和滑车神经,进入鞍侧腔直至前床突区,但其远侧端仅有周围神经鞘包裹。Meckel腔止于三叉神经节后份,三叉神经分支仅有周围神经鞘包裹。脑膜鞘内的蛛网膜颗粒可能是鞍区脑膜瘤的来源之一。结论了解鞍侧腔外侧壁膜结构及其与颅神经鞘的关系,以利于术中保护颅神经功能。

关键词：鞍侧腔神经鞘解剖研究显微发育 Meckel腔解剖学基础鞍区脑膜瘤蛛网膜颗粒外侧壁解剖观察连续切片滑车神经动眼神经前床突区神经分支神经功能组织学复合体颅神经膜结构标本胚胎组成包裹周围

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垂体囊的胚胎发育和显微解剖研究

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中国临床解剖学杂志 2005年第2期23卷 137-141页

作者：王永谦丁美修谭多盛王秉玉上海第二医科大学附属第九人民医院神经外科上海200011 河西医学高等专科学校组胚教研室甘肃张掖730000

目的:研究垂体囊的形态发育和显微解剖结构,观察垂体囊的组成及其与周围毗邻结构的关系。方法:采用45例胚胎标本和10例成人尸颅标本,对垂体囊和鞍侧腔行组织学连续切片和显微解剖观察。结果:垂体囊是由Rathke,s囊周围基质发育形成的致... 详细信息

目的:研究垂体囊的形态发育和显微解剖结构,观察垂体囊的组成及其与周围毗邻结构的关系。方法:采用45例胚胎标本和10例成人尸颅标本,对垂体囊和鞍侧腔行组织学连续切片和显微解剖观察。结果:垂体囊是由Rathke,s囊周围基质发育形成的致密结缔组织囊,17周后逐渐与鞍隔和蝶骨膜融合而形成成人垂体囊的最终形态。成人约20%的标本垂体囊与颈内动脉窦内段紧密相贴,二者之间没有静脉间隙。结论:垂体囊侧凸是垂体腺胚胎发育的结果,与垂体瘤侵犯海绵窦类似,需引起临床重视。

关键词：垂体囊胚胎发育显微解剖

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鞍侧腔的胚胎发育及其临床意义

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中国临床解剖学杂志 2005年第2期23卷 133-136,141页

作者：王永谦丁美修郭智霖谭多盛上海第二医科大学附属第九人民医院神经外科上海200011 河西医学高等专科学校组胚教研室甘肃张掖730000

目的:研究鞍侧腔形态结构及其内容物的胚胎发育。方法:对45例不同胚(胎)龄时期的鞍旁结构行组织学连续切片,观察鞍侧腔壁结构及其内容物的形态学变化过程。结果:鞍侧腔的发育可分为3个时期:(1)胚龄6～10周时,形成此区的最初边界;(2)胎... 详细信息

目的:研究鞍侧腔形态结构及其内容物的胚胎发育。方法:对45例不同胚(胎)龄时期的鞍旁结构行组织学连续切片,观察鞍侧腔壁结构及其内容物的形态学变化过程。结果:鞍侧腔的发育可分为3个时期:(1)胚龄6～10周时,形成此区的最初边界;(2)胎龄11～16周时,显示鞍侧腔的构建过程,其腔壁约在胚胎14～16周形成。此期鞍侧腔外侧壁外层由脑膜层组成,内层由基质纤维包绕Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ和Ⅴ1神经复合体组成;而其内侧壁主要由垂体囊和基质纤维构成;(3)胎龄17周至出生后鞍侧腔诸壁及其内容物充分发育。结论:(1)鞍侧腔位于蝶鞍外侧区骨膜-硬膜间隙内,由脑神经、颈内动脉、丛状静脉管(海绵窦)及胶原纤维组成。(2)这些静脉管仅有内皮、纤维细胞和结缔组织构成。

关键词：鞍侧腔海绵窦胚胎发育组织学

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从微生物寻找免疫节育抗原的研究

从微生物寻找免疫节育抗原的研究

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第十届全国生殖生物学学术研讨会

作者：徐晨石建莉杨征敏王程国艳李定王一飞周元聪刘小龙上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室中科院上海生物化学与细胞生物学研究所蛋白质组学重点实验室上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室上海第二医科大学组胚教研室上海市生殖医学重点实验室中科院上海生物化学与细胞生物学研究所蛋白质组学重点实验室中科院上海生物化学与细胞生物学研究所蛋白质组学重点实验室

本研究对溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)与人精子膜蛋白之间是否存在交叉反应抗原进行了探讨。提取UU中的蛋白质,以兔抗人精子膜蛋白抗血清为一抗与UU蛋白质进行Western blot反应。发现UU蛋白质中61kDa、50kDa和25kDa三个组份... 详细信息

本研究对溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)与人精子膜蛋白之间是否存在交叉反应抗原进行了探讨。提取UU中的蛋白质,以兔抗人精子膜蛋白抗血清为一抗与UU蛋白质进行Western blot反应。发现UU蛋白质中61kDa、50kDa和25kDa三个组份与人精子膜蛋白之间存在交叉反应,通过亲和层析纯化出UU 25kDa蛋白质。根据N-端氨基酸测序结果克隆出该基因。在Swiss-prot 数据库中搜索,发现UU 25kDa蛋白质与human nuclear autoantigenic sperm

关键词：人精子膜蛋白共同表位微生物

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静脉麻醉药物联合使用对大鼠脑缺血离体损伤的影响

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上海第二医科大学学报 2004年第11期24卷 897-900页

作者：沈永倩薛庆生郭强苏于布为上海第二医科大学瑞金医院麻醉科上海200025 上海第二医科大学基础医学院组胚教研室

目的研究静脉麻醉药物依托咪酯联合芬太尼或氯胺酮对大鼠脑缺血损伤离体实验模型———皮层和海马脑片缺氧缺糖损伤的影响。方法制备大鼠皮层和海马脑片 ,随机分为对照组 (C)、损伤组 (I)、依托咪酯组 (E)、芬太尼组 (F)、氯胺酮组 (K)... 详细信息

目的研究静脉麻醉药物依托咪酯联合芬太尼或氯胺酮对大鼠脑缺血损伤离体实验模型———皮层和海马脑片缺氧缺糖损伤的影响。方法制备大鼠皮层和海马脑片 ,随机分为对照组 (C)、损伤组 (I)、依托咪酯组 (E)、芬太尼组 (F)、氯胺酮组 (K)、依托咪酯 +芬太尼组 (E +F)和依托咪酯 +氯胺酮组 (E +K) ,每组脑片 10片。脑缺血损伤离体模型采用脑片缺氧缺糖损伤孵育10min和恢复正常孵育 2h方案 ,通过三苯基氯化四唑氮 (TTC)染色光密度测定法观察脑片损伤程度 ,Fluo 3荧光染色定量和激光共聚焦扫描显微镜定性观察脑片细胞内Ca2 + 浓度变化。结果与对照组比较 ,损伤组脑片TTC染色光密度显著降低 ;细胞内Ca2 + 浓度显著增高 (P <0 .0 1)。与损伤组比较 ,使用麻醉药物的各组皮层和海马脑片TTC染色光密度显著增加 ,细胞内Ca2 + 浓度也明显降低 (P <0 .0 1) ,但单独药物组和联合药物组比较TTC染色光密度和细胞内Ca2 + 浓度无差异 ,激光共聚焦扫描显微镜定性观察结果与Fluo 3荧光染色比色结果一致。结论依托咪酯联合芬太尼或氯胺酮对大鼠皮层和海马脑片的离体脑缺血损伤具有保护作用。

关键词：静脉麻醉大鼠脑缺血损伤依托咪酯芬太尼氯胺酮

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Schwann细胞在壳聚糖纤维上的立体培养

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解剖学杂志 2004年第6期27卷 630-633页

作者：丁文龙汪洋李锋上海第二医科大学解剖学教研室上海200025 复旦大学上海医学院解剖与组胚学系

目的 :探讨壳聚糖纤维与体外培养Schwann细胞的相容性和亲和力。方法 :新生SD鼠的臂丛和坐骨神经组织块种植于壳聚糖纤维支架上培养Schwann细胞。结果 :壳聚糖纤维支架上的Schwann细胞为橄榄形或椭圆形 ,细胞在纤维上分裂、迁移 ,形成... 详细信息

目的 :探讨壳聚糖纤维与体外培养Schwann细胞的相容性和亲和力。方法 :新生SD鼠的臂丛和坐骨神经组织块种植于壳聚糖纤维支架上培养Schwann细胞。结果 :壳聚糖纤维支架上的Schwann细胞为橄榄形或椭圆形 ,细胞在纤维上分裂、迁移 ,形成链状结构 ,细胞突起的末端呈扁平状膨大 ,伸出爪形伪足贴附于纤维。结论 :壳聚糖纤维不仅与Schwann细胞的相容性良好。

关键词： Schwann细胞支架臂丛组织块髓鞘坐骨神经培养结论亲和力立体

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