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广西医科大学学报 2005年第3期22卷 370-372页

作者：杨海波何琳惠池永斌王植柔广西医科大学微生物及免疫学教研室南宁530021 广西医科大学2003级上海第二医科大学免疫所广西肿瘤医院泌尿外科

目的:构建表达人类白细胞抗原-G(HLA-G)蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-G。方法:从孕妇绒毛组织中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增HLA-G的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果:经酶切鉴定及测序分析,证实已构... 详细信息

目的:构建表达人类白细胞抗原-G(HLA-G)蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-G。方法:从孕妇绒毛组织中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增HLA-G的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果:经酶切鉴定及测序分析,证实已构建表达HLA-G蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-G。结论:应用RT-PCR扩增及DNA连接技术成功构建HLA-G的真核表达载体。

关键词：人类白细胞抗原-G 克隆序列分析 RT—PCR

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树突状细胞在5/6肾切除大鼠中分布及与肾间质纤维化的关系

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上海医学 2004年第8期27卷 567-570,F005页

作者：周同吴开胤孙桂芝张玉梅张冬青胡庆沈陈玉英陈楠上海第二医科大学附属瑞金医院肾内科 200025 上海第二医科大学上海免疫学研究所上海第二医科大学细胞生物学教研室

目的　探讨树突状细胞 (DC)在 5 / 6肾切除大鼠肾小管间质中分布及其与肾间质纤维化的关系。方法　 5 4只SD大鼠均分为正常组、假手术组、模型组 (切除 5 / 6肾 ,建立慢性肾功能衰竭模型 )。分别于建模第1、4和 12周 ,采用免疫双标记染... 详细信息

目的　探讨树突状细胞 (DC)在 5 / 6肾切除大鼠肾小管间质中分布及其与肾间质纤维化的关系。方法　 5 4只SD大鼠均分为正常组、假手术组、模型组 (切除 5 / 6肾 ,建立慢性肾功能衰竭模型 )。分别于建模第1、4和 12周 ,采用免疫双标记染色及荧光图像分析法 ,观察CD1a +CD80 +DC在各组大鼠肾组织中的分布变化 ;采用免疫组织化学及半定量分析 ,观察黏附分子P 选择素以及转化生长因子 (TGF) β1、结缔组织生长因子 (CT GF)、α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)、Ⅲ型胶原 (ColⅢ )、纤维连接蛋白 (FN)在上述肾组织中的表达改变 ;此外采用Masson染色评定各组肾小管间质纤维化 (TIF)程度。结果　①模型组CD1a +CD80 +DC主要分布于肾小管、肾间质和肾血管 ,以肾间质最为明显 ;其分布数量于建模后第 12周较第 1、4周明显增多 (P <0 .0 1) ,且与肾功能指标血尿素氮 (BUN)、血肌酐 (SCr)、内生肌酐清除率 (Ccr)明显相关 (r值分别为 0 .2 5 4、0 .2 6 3、- 0 .36 7,P值<0 .0 5～ 0 .0 0 1) ;② 12周时 ,P 选择素、TGF β1、CTGF、α SMA、ColⅢ、FN以肾小管间质为主表达以及TIF程度均明显增加 ,并与CD1a +CD80 +DC分布数量成正相关 (r值分别为 0 .5 6 6、0 .4 77、0 .4 2 5、0 .2 88、0 .4 0 8、0 .4 95、0 .82 3,P值

关键词：树突状细胞肾切除大鼠分布肾间质纤维化

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肾组织粘附分子及树突状细胞与IgA肾病小管间质病变的关系

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肾脏病与透析肾移植杂志 2004年第6期13卷 530-533页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海第二医科大学细胞生物学教研室上海200025

目的 :观察粘附分子P 选择素与树突状细胞 (DC)在IgA肾病 (IgAN)患者肾组织中的表达与分布 ,探讨P 选择素及DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。　方法 :选择经肾活检和临床资料确诊的IgAN患者 4 5例 ,根据小管间质病变程度分为 ... 详细信息

目的 :观察粘附分子P 选择素与树突状细胞 (DC)在IgA肾病 (IgAN)患者肾组织中的表达与分布 ,探讨P 选择素及DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。　方法 :选择经肾活检和临床资料确诊的IgAN患者 4 5例 ,根据小管间质病变程度分为 3组 :轻度组 2 9例 ,中度组 10例 ,重度组 6例 ;10例正常人肾组织作为对照。采用免疫组化法观察IgAN患者肾组织中P 选择素表达 ;免疫双标记染色与荧光图像分析法 ,观察CD1a+ CD80 + DC在肾组织中的分布 ,并探讨DC与患者肾小管间质病变及肾功能损害的关系。　结果 :①P 选择素在正常肾组织中基本不表达 ,在IgAN肾组织中以肾小管上皮细胞为主广泛高表达 ,重度组肾小管间质表达明显强于轻、中度组 ,且与肾小管间质病变程度轻重显著相关。②正常人肾组织中基本未见CD1a+ CD80 + DC分布 ,IgAN肾组织中以肾小管间质为主分布明显增多 ;其在患者肾小管间质的分布于重度组明显高于轻、中度组 ,亦与肾小管间质病变程度及血肌酐显著相关。此外 ,CD1a+ CD80 + DC在患者肾小管间质分布与P 选择素表达明显相关。　结论 :P 选择素尤其DC可能参与了IgAN肾小管间质病变的免疫病理损伤机制 ,且推测DC肾炎组织迁移聚集可能与P 选择素介导有关。

关键词：肾组织粘附分子树突状细胞 IgA肾病小管间质病变

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树突状细胞在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的分布与作用

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上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 174-177页

作者：孙桂芝周同吴开胤李晓陈玉英胡庆沈张冬青陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院细胞生物学教研室基础医学院上海市免疫学研究所

目的探讨粘附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的表达和分布,以及抗P-选择素单抗的抗粘附调抑作用。方法建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,随机将大鼠分为手术组和抗P-选择素单抗治疗组各18只,按不同梗阻... 详细信息

目的探讨粘附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的表达和分布,以及抗P-选择素单抗的抗粘附调抑作用。方法建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,随机将大鼠分为手术组和抗P-选择素单抗治疗组各18只,按不同梗阻时间(1、3、7d)再分为3组,另设假手术组(n=6)作为对照。分别采用免疫组化LSAB法和免疫双染与荧光图像分析法,观察P-选择素及DC在肾组织中表达和分布变化。结果大鼠UUO第1d起即见P-选择素以肾小管上皮细胞为主在肾小管间质中表达上调,伴随CD1a^+CD80^+DC在以肾间质为主部位的浸润;第3 d P-选择素明显表达,且CD1a^+CD80^+DC显著增多;至第7 d P-选择素表达遂下调,而CD1a^+CD80^+DC在肾间质分布聚集达峰,出现了明显的肾小管间质病理损伤经抗P-选择素单抗处理后,大鼠肾组织P-选择素表达受到抑制,CD1a^+CD80^+DC分布聚集减少,且肾小管间质病理损伤减轻。结论提示树突状细胞参与了肾小管间质纤维化早期病理损伤过程,其肾组织迁移聚集可能与P-选择素早期介导有关,抗P-选择素单抗对此具有抗粘附调抑和肾脏保护作用。

关键词：树突状细胞大鼠单侧输尿管梗阻肾组织粘附分子 P-选择素病理损伤

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黏附分子P-选择素与树突状细胞在人肾小管间质病变中的作用

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 501-504页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院上海市免疫学研究所基础医学院细胞生物学教研室

目的观察黏附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在人肾炎肾组织中的表达与分布,探讨P-选择素和DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。方法选择经肾活检和临床资料确诊的不同类型肾炎患者133例,根据小管间质病变分为三组:轻度组63例,... 详细信息

目的观察黏附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在人肾炎肾组织中的表达与分布,探讨P-选择素和DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。方法选择经肾活检和临床资料确诊的不同类型肾炎患者133例,根据小管间质病变分为三组:轻度组63例,中度组44例,重度组26例;10例正常人肾组织作为对照。采用免疫组化法观察肾炎患者肾组织中P-选择素的表达;利用免疫双染与荧光图像分析法,观察CD1a+CD80+DC在肾组织中的分布和改变,并探讨与肾小管间质病变和肾功能损害的关系。结果肾炎患者肾组织中P-选择素表达增强,在肾小管上皮细胞表达显著高于肾小球、肾间质和肾血管;而在肾小管间质表达于重度组又明显高于轻、中度组,并与肾小管间质病变程度显著相关。CD1a+CD80+DC在肾组织中分布面积、数量和密度均显著增多,且以肾小管间质为主,分布于肾小管、肾间质和肾血管;其在肾小管间质分布于重度组也明显高于轻、中度组,并与肾小管间质病变程度以及肾功能明显相关。此外,CD1a+CD80+DC肾小管间质分布状况亦与P-选择素表达显著相关。件论黏附分子;P-选择紊可能介导DC肾炎肾组织中迁移聚集,参与了肾脏免疫病理机制,并与肾小管间质病变密切相关。

关键词：黏附分子 P-选择素树突状细胞肾小管间质病变肾组织

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树突状细胞在肾切除大鼠肾组织中分布及缬沙坦对其作用的影响

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 505-509页

作者：吴开胤周同孙桂芝张玉梅张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院上海市免疫学研究所基础医学院细胞生物学教研室

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用... 详细信息

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用免疫双染和荧光图像分析法观察CD1a+CD80+DC在各组大鼠肾组织中的分布变化;免疫组化法观察P-选择素和各纤维化相关指标在肾组织中的表达;Masson染色评定各组肾小管间质纤维化(TIF)程度。结果模型组CD1a+CD80+DC主要分布于肾小管、肾间质和肾血管,以肾间质最为明显;其分布数量于12周较1周、4周明显增多,且与慢性肾功能减退呈正相关;12周时,P-选择素和各纤维化相关指标以肾小管间质为主表达和TIF程度明显增加,并与CD1a+CD80+DC分布数量呈正相关;经缬沙坦治疗后,CD1a+CD80+DC分布减少,P-选择素和各纤维化相关指标表达下降,TIF程度减轻及肾功能改善。结论 DC可能启动或参与了肾小管间质纤维化形成,并与肾功能损害程度密切相关,缬沙坦对此具有明显的抑制和肾脏保护作用。

关键词：树突状细胞肾切除术大鼠 DC 肾组织缬沙坦肾功能肾血管

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黏附分子与树突状细胞在大鼠肝和肾缺血-再灌注损伤中作用及抗黏附干预的影响

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中华急诊医学杂志 2004年第5期13卷 315-318,i001页

作者：周同孙桂芝张玉梅陈金联张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学附属瑞金医院肾内科 200025 上海第六人民医院消化科上海第二医科大学上海免疫学研究所上海第二医科大学细胞生物学教研室

目的　探讨黏附分子P 选择素、ICAM 1及树突状细胞 (DC)在大鼠肝和肾缺血再灌注损伤中作用 ,以及抗P 选择素单抗的抗黏附抑制及其防治效果。方法　分别建立肝和肾缺血再灌流损伤大鼠模型 ,随机分为P 选择素单抗治疗组 (n =2 0 )和非... 详细信息

目的　探讨黏附分子P 选择素、ICAM 1及树突状细胞 (DC)在大鼠肝和肾缺血再灌注损伤中作用 ,以及抗P 选择素单抗的抗黏附抑制及其防治效果。方法　分别建立肝和肾缺血再灌流损伤大鼠模型 ,随机分为P 选择素单抗治疗组 (n =2 0 )和非治疗组 (n =2 0 ) ,按不同再灌注时间 (1,3,6和 2 4h)再分为 4组 ,每组 5只 ,另设两组另设假手术组 (n =5 )作为对照。采用免疫组化LSAB法和免疫双染与荧光图像分析法 ,分别观察和比较各组大鼠肝、肾组织P 选择素、ICAM 1表达及DC分布变化。结果　 (1)缺血再灌注 1h起 ,P 选择素即以肝窦内皮细胞或肾小管上皮细胞为主于肝和肾内广泛高表达 ,至 2 4h仍维持一定水平 ;ICAM 1于缺血再灌注 6h起持续以肝窦和肾血管为主表达上调和明显增强。 (2 )CD1a+CD80 + DC自再灌注 1h起以肝窦和肾小管间质为主分布数量逐渐增多 ,至 2 4h达峰 ,并与大鼠肝、肾功能密切相关。 (3)经抗P 选择素单抗处理后 ,大鼠肝、肾组织P 选择素和ICAM 1表达受到抑制 ,CD1a+CD80 + DC分布及数量减少 ,组织病理损伤及肝、肾功能也相应减轻和改善。结论　DC可能通过黏附分子尤其P 选择素早期介导的肝、肾组织内迁移聚集 ,参与启动了肝、肾缺血再灌注时的免疫病理损伤过程 ,而抗P 选择素单抗对此具有抗?

关键词：黏附分子树突状细胞大鼠肝缺血肾缺血再灌注损伤抗黏附治疗

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P-选择素与树突状细胞在IgA肾病肾小管间质病变中变化的临床意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 764-764页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科 200025 上海第二医科大学上海市免疫学研究所 200025 上海第二医科大学细胞生物学教研室 200025

IgA肾病病理改变中广泛存在或伴随着肾小管间质损害,黏附分子介导的炎细胞浸润是肾小管间质免疫炎症反应重要前提.树突状细胞(DC)是功能最强的专职抗原递呈细胞,其炎症组织迁移依赖于黏附分子P-、E-选择素介导.为此我们探讨了IgA肾病患... 详细信息

IgA肾病病理改变中广泛存在或伴随着肾小管间质损害,黏附分子介导的炎细胞浸润是肾小管间质免疫炎症反应重要前提.树突状细胞(DC)是功能最强的专职抗原递呈细胞,其炎症组织迁移依赖于黏附分子P-、E-选择素介导.为此我们探讨了IgA肾病患者肾组织中P-选择素表达和DC分布变化,以及与肾小管间质病变之间的关系。

关键词： IgA肾病肾小管间质病变 P-选择素树突状细胞黏附分子临床意义介导表达依赖变化

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用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第12期23卷 982-984页

作者：蒋黎华史桂英石学耕范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所200025 上海第二医科大学细胞生物学教研室

目的　建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法　pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及... 详细信息

目的　建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法　pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及竞争肽共同孵育 ,FACs检测细胞表面的平均荧光强度 ,以达到 5 0 %抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果　通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加 β2微球蛋白和 /或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度 ,对方法进行评估 ,结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论　在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后 ,本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。

关键词：竞争结合法检测 HLAⅠ类分子抗原呈递能力

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树突状细胞在肾缺血-再灌注损伤中的分布与作用

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中国危重病急救医学 2003年第12期15卷 726-729页

作者：孙桂芝周同张玉梅张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 上海第二医科大学上海免疫学研究所上海200025 上海第二医科大学细胞生物学教研室上海200025

目的 :探讨树突状细胞 (DC)在肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织中的分布与作用 ,以及抗 P 选择素单克隆抗体 (单抗 )对 DC的影响。方法 :建立肾缺血再灌注损伤大鼠模型 ,随机分为 P选择素单抗治疗组(n=2 0 )和非治疗组 (n=2 0 ) ,按不同再灌... 详细信息

目的 :探讨树突状细胞 (DC)在肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织中的分布与作用 ,以及抗 P 选择素单克隆抗体 (单抗 )对 DC的影响。方法 :建立肾缺血再灌注损伤大鼠模型 ,随机分为 P选择素单抗治疗组(n=2 0 )和非治疗组 (n=2 0 ) ,按不同再灌注时间 (1、3、6和 2 4 h)再各分为 4组 ;另设假手术组 (n=5 )作为对照。采用荧光图像分析法观察 CD1 a+ CD80 + DC在各组大鼠肾组织中的分布 ;采用免疫组织化学 (组化 )链霉菌抗生物素过氧化物酶复合物 (L SAB)法检测 P 选择素在上述肾组织中的表达。结果 :1 CD1 a+ CD80 + DC在假手术组大鼠肾组织中分布甚少 ;而在非治疗组显著增多 (P<0 .0 0 1 ) ,且主要分布于肾小管、肾间质和肾血管 ,以肾小管间质最为明显 ,其分布和数量自再灌注 1 h起出现增多 ,于 2 4 h时为最高 (P<0 .0 1 ) ,并与大鼠血尿素氮和肌酐呈正相关 (P均 <0 .0 5 )。2缺血再灌注 1 h后 ,P 选择素在肾组织中广泛表达 ,以肾小管上皮细胞为主。 3经抗 P选择素单抗治疗后 ,大鼠肾组织 P选择素的表达下调 ,随之 CD1 a+ CD80 + DC分布及数量减少 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1 ) ,继而肾组织病理损伤和肾功能也相应减轻和改善。结论 :DC可能参与了缺血再灌注肾损伤的炎症免疫病理过程 ,并可能与

关键词：缺血-再灌注损伤肾树突状细胞黏附迁移 P-选择素

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