检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杜跃军南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景目前在美国PCa的发病率已经超过肺癌,成为第一位危害男性健康的肿瘤。我国仍属于PCa的低危国家,但由于经济发展带来的饮食结构西方化、预期寿命延长等暴露因素的改变,近年来国内部分发达地区的PCa发病率迅速升高。由于公众认知... 详细信息

研究背景目前在美国PCa的发病率已经超过肺癌,成为第一位危害男性健康的肿瘤。我国仍属于PCa的低危国家,但由于经济发展带来的饮食结构西方化、预期寿命延长等暴露因素的改变,近年来国内部分发达地区的PCa发病率迅速升高。由于公众认知度较低以及PSA筛查普及不足,在我国仅约6.2%的患者是由于PSA升高而被发现,大部分患者是以尿路症状或骨痛等转移症状而就诊,就诊患者的PSA中位数为46.1μg/L,1988—1995年上海PCa患者的5年生存率仅为36.5%,可见,虽然发病较低,但我国的PCa发病呈现晚期比率高及生存率低的特点。对所有临床和病理因素做统计学多变量分析显示,Gleason评分、血清PSA水平、前列腺包膜浸润以及阳性手术切缘等均是独立的癌肿发展预后因子,但单一最强地预测PCa预后的因素是病理分级。2007版中国泌尿外科疾病诊疗指南根据血清PSA、Gleason评分和临床分期将PCa分为低、中、高危三类。 PCa的发生和发展取决于肿瘤细胞增殖与死亡之间的平衡,而由一系列诱导或抑制基因调控的细胞凋亡则是其中的一个关键步骤。细胞凋亡的调控因子包括诱导/促进因子和抑制因子。Caspases家族、P53、Fas/FasL等是主要的诱导因子,而IAP家族、Clusterin、TRPM-2等则是主要的抑制因子。Bcl-2家族中Bcl-2、Bcl-XL抑制凋亡,Bax、Bad、Bak等则促进凋亡。多数研究显示,BCl-2、Survivin、Clusterin、TRPM-2等凋亡抑制因子在Pca组织中的表达高于正常前列腺及BPH,且随PCa恶性程度升高,凋亡抑制因子的表达多呈上升趋势,而P53、Bax等凋亡诱导因子则呈现相反的表达效应,提示细胞凋亡下调在促进Pca发生、进展中的作用。但是,关于BCl-2/Bax及Fas/FasL在Pca组织中表达的另外一些研究却显示其组内病例中癌细胞凋亡较正常组织有所增强,并且随Gleason评分升高,这一趋势更为明显。此外,既往AR表达与Pca分化及分级呈现负相关及AR缺失、细胞凋亡下调导致AIPC/HRPC发生的一贯观点在近来也受到了不断的挑战。Kinoshita等发现80%的HRPC中AR表达增加,而仅有20-30%HRPC的AR显著性缺失。刁伟鑫等的研究也显示对比AR（-）组及AR（+）组PCa,前者细胞凋亡较后者明显增强。上述一系列的研究结果显示,关于细胞凋亡在PCa演变过程中的作用目前尚难定论,PCa细胞凋亡的局部调控机制可能远较我们的预期要更为复杂。尽管具体效应总说纷纭,但细胞凋亡与PCa的发生、发展以及治疗效应的产生均有密切关系,在基因及其产物等不同水平阐明凋亡调控因子在PCa组织中的表达及其意义有助于PCa诊疗水平的不断提高。 PDCD5（programmed cell death 5）是北京大学人类疾病基因中心1999年在国际上首先报道的一个凋亡诱导基因。体外实验表明,PDCD5在宮颈癌、卵巢癌、肝癌等多种肿瘤细胞系中均可促进肿瘤细胞发生凋亡,并对放、化疗起协同作用。近年来,我们在国内外最先将PDCD5引入泌尿生殖系肿瘤发病机制的研究。应用免疫组化的方法首次检测了癌旁正常肾组织及肾透明细胞癌组织中PDCD5的表达,结果显示PDCD5在肾小管上皮细胞内表达较强,而在肾透明细胞癌组织中的表达则明显降低,并且随着肾肿瘤分期的上升以及恶性程度的增加,PDCD5的表达呈下降的趋势,说明PDCD5可能在不同程度上参与了肾癌发生、发展过程中的细胞凋亡调控。目前,对PDCD5的研究多局限于实验室阶段,迄今为止尚无在临床阶段对PDCD5在正常前列腺、BPH及PCa组织中的表达情况进行研究的报道。目的通过免疫组化方法探究PDCD5在正常前列腺、BPH及PCa组织中的表达特点,并对AR与PDCD5在PCa组织中表达的相关性进行研究,进而求证PDCD5通过调控细胞凋亡参与PCa发生、发展进程的可能性,以期筛选具有较好临床实用价值的PCa预后评估指标,并为在基因水平上进行PCa的防治寻找新的有效靶点。材料与方法 PCa组织标本22例均来源于近期在我院及外院行前列腺癌根治术患者,切片行病理证实后,参照Gleason分级标准,低危组11例（Gleason评分≤6）,中危组3例（Gleason评分=7）,高危组8例（Gleason评分≥8）。有6例外院标本临床资料欠缺,其余16例年龄58—71岁,平均65.1岁;血清PSA 22.5ng/ml～276.8ng/ml,平均67.6ng/ml;按照临床分期,Tlc期5例、T2a期3例、T2b期4例、T2c期3例、T3b期1例。所有患者术前均未接受放疗、化疗及内分泌治疗。BPH组织标本22例

关键词：前列腺癌凋亡免疫组化 PDCD5 TFAR19 雄激素受体

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eNOS基因转移联合西地那非对大鼠低氧性肺动脉高压的预防作用

eNOS基因转移联合西地那非对大鼠低氧性肺动脉高压的预防作用

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作者：金强中国医科大学

学位级别：博士

本文拟建立大鼠低氧性PH模型，应用携带人类eNOS基因的重组腺病毒AdCMVceNOS基因导入，并联合口服枸橼酸西地那非，通过血流动力学、组织学、生化学、分子生物学等方法，研究腺病毒介导eNOS基因转移联合西地那非，预防急性低氧性肺血管... 详细信息

本文拟建立大鼠低氧性PH模型，应用携带人类eNOS基因的重组腺病毒AdCMVceNOS基因导入，并联合口服枸橼酸西地那非，通过血流动力学、组织学、生化学、分子生物学等方法，研究腺病毒介导eNOS基因转移联合西地那非，预防急性低氧性肺血管收缩(HPV)和慢性低氧性肺动脉高压(CHPH)的可行性、疗效及相关毒副作用，为此法用于临床奠定理论基础，为PH治疗开创出更为安全有效的新方法。研究材料： 1、实验材料：重组腺病毒载体AdCMVceNOS病毒DNA 由Dr Robert Gerard惠赠重组腺病毒载体AdCMVLacZ 东方肝胆医院惠赠pXC1载体加拿大Microbix Biosystems公司腺病毒E1区转化人胚胎肾细胞株293 加拿大Microbix Biosystems公司引物Vt01、Vt02、Vt001和Vt002 Takara公司合成I125-cGMP放射免疫试剂盒上海中医药大学小鼠抗人eNOS单克隆抗体 BD公司一氧化氮试剂盒南京建成生物工程研究所免疫组化试剂盒北京中杉生物技术公司弹力纤维染色试剂盒北京中杉生物技术公司ECL试剂盒北京中杉生物技术公司X-gal(5-溴-4-氯-β-吲哚-p-半乳糖苷) Takara公司枸橼酸西地那非辉瑞制药公司10％氮氧混合气沈阳液化空气有限公司100％氮气沈阳液化空气有限公司。 2、实验设备PCR仪德国BIOMETRA公司N02120MAX21g电子天平 NAVIGATOR公司TDL-40B离心机上海安亭科学仪器有限公司721型分光光度计上海精密科学仪器有限公司GC-2016放射免疫计数器科大创新股份有限公司TKR-200C小动物呼吸机江西特力麻醉呼吸设备有限公司。 3、实验动物Wistar大鼠126只沈阳军区总医院实验动物中心研究方法： 1、第一部分： (1)AdCMVceNOS病毒DNA用脂质体法体外转染293细胞，且在细胞内部包装。经PCR鉴定后在293细胞株内扩增，继而经CsC1密度梯度离心纯化及TCID50法测定滴度。 (2)雄性Wistar大鼠54只，随机分为对照(C)组、Ad-Lacz组和Ad-eNOS组，每组18只。分别应用病毒保存液、5×10<'9>PFU/mlAdCMVLacZ和AdCMVceNOS各600u1经气管导管注入大鼠肺脏。3、5和17天后，每组各取6只，测定HR和血压，并行肺组织X-gal染色、eNOS免疫组化染色、HE染色、eNOS Westemblot检测及cGMP和NO含量测定。转染病毒后5天的大鼠，同时行肝、脾、肾脏的组织化学染色。 2、第二部分：雄性Wistar大鼠36只，随机分为常氧(N)组、低氧(H)组、低氧LacZ(H-LacZ)组、低氧eNOS(H-eNOS)组、低氧西地那非(H-S)组和低氧eNOS-西地那非(H-eNOS-S)组，每组6只。首先经气道转基因(N、H和H-S组应用病毒保存液，H-LacZ组应用5×10<'9>PFU/ml AdCMVLacZ 600μl，H-eNOS和H-eNOS-S组应用5×10<'9>PFU/ml AdCMVceNOS 600gl经气管导管注入大鼠肺脏)。3天后，N组常氧(吸入空气)30min，其它组大鼠急性低氧(吸入10％氧气)30min。H-S和H-eNOS-S组大鼠在低氧前30min，应用0.3％西地那非25mg/kg灌胃，其它组大鼠灌入等量生理盐水(8.33ml/kg)。低氧结束后，测定大鼠体循环血压(SAP)、HR和MPAP，动脉血气分析，检测肺组织cGMP、NO含量。 3、第三部分：雄性Wistar大鼠36只，随机分为常氧(N)组、低氧(H)组、低氧LacZ(H-Lacz)组、低氧eNOS(H-eNOS)组、低氧西地那非(H-S)组和低氧eNOS-西地那非(H-eNOS-S)组，每组6只。首先经气道转基因(N、H和H-S组应用病毒保存液，H-LacZ组应用5×10<'9>PFU/ml AdcMVLacz 600μl，H-eNOS和H-eNOS-S组应用5×10<'9>PFU/ml AdCMVceNOS 600μl经气管导管注入大鼠肺脏)。之后常氧饲养3天，每日灌胃1次。3天后，N组常氧处理(吸入空气)2周，其它组慢性常压低氧处理(吸入10％氧气，每天8h)2周，并于每日低氧前30min灌胃。H-S和H-eNOS-S组应用的灌胃溶液含0.3％枸橼酸西地那非25mg/kg，其余各组灌入等容量生理盐水(8.33ml/kg)。低氧结束后，行血动力学检测、肺血管结构重塑指标检测、右室肥大指标检测、Hct检测，并行肺组织eNOS Westemblot检测及

关键词：肺动脉高压腺病毒介导 eNOS基因转移西地那非联合

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微小RNA与人类疾病的研究进展

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国际检验医学杂志 2007年第9期28卷 815-817页

作者：眭维国蓝慧娟陈洁晶（综述）戴勇王应雄（审校）中国人民解放军第一八一医院中心实验室广西桂林541002 广西师范大学生命科学学院桂林541004 深圳市第一人民医院 518000 重庆医科大学优生遗传教研室 400016

微小RNA（miRNA）是一类长约22nt的非蛋白编码RNA家族，它通过切割mRNA或者抑制翻译两种作用机制调控动植物生长发育。大量研究表明miRNA与人类疾病密切相关，其在肿瘤、心脏病、糖尿病和艾滋病等多种疾病中都起着重要作用。miRNA的深... 详细信息

微小RNA（miRNA）是一类长约22nt的非蛋白编码RNA家族，它通过切割mRNA或者抑制翻译两种作用机制调控动植物生长发育。大量研究表明miRNA与人类疾病密切相关，其在肿瘤、心脏病、糖尿病和艾滋病等多种疾病中都起着重要作用。miRNA的深入研究，将有助于对生物体各种生理、病理机制的理解，并最终可能为疾病诊断和治疗提供新的思路和理论基础。

关键词：微小RNA siRNA 基因间隔区 RNA诱导沉默复合体

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滋阴清热方对阴虚内热证SLE白细胞基因及蛋白表达谱的动态影响

滋阴清热方对阴虚内热证SLE白细胞基因及蛋白表达谱的动态影响

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第三届世界中西医结合大会

作者：范瑞强赖梅生陈达灿吴元胜禤国维李红毅吴晓霞黄咏菁朱晓浚韩凌危建安孙静张娴周丹曲永彬金培志广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科广东省中医院皮肤科中山大学第二附属医院皮肤科广东省中医院中心实验室广东省中医院中心实验室广东省中医院中心实验室广东省中医院中心实验室广东省中医院中心实验室广东省佛山市顺德区中西医结合医院深圳市中医院南方医科大学中医药学院中医外科教研室

研究背景：系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)作为一种严重危害健康的自身免疫性疾病,其病因、发病机制尚未完全阐明,治疗至今仍是世界难题。目前西医仍主要用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,长期应用会带来明显的毒副作... 详细信息

研究背景：系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)作为一种严重危害健康的自身免疫性疾病,其病因、发病机制尚未完全阐明,治疗至今仍是世界难题。目前西医仍主要用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,长期应用会带来明显的毒副作用。临床实践证明中两医结合治疗 SLE 临床疗效突出,可减少药物的毒副作用,提高 SLE 患者的生存质量。阴虚内热是 SLE 的基本证型,滋阴清热法是治疗 SLE 基本法则。现代研究认为 SLE 的发生是由多基因共同作用的结果。研究 SLE 基因调控网络和蛋白质相互作用网络的动态变化将有助于我们对 SLE 发病的深入了解。目的：观察滋阴清热方治疗阴虚内热证 SLE 的疗效,研究 SLE 患者治疗前、中(治疗6周)、后(治疗12周)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)基因及蛋白表达谱的动态改变,了解阴虚内热证 SLE 患者基因及蛋白表达模式与正常人之间的异同,从基因及蛋白水平探讨中医药治疗机理,为构建中医药治疗 SLE 的基因与蛋白表达谱研究方法与平台打下基础。方法：1．研究对象：女性阴虚内热证 SLE 病例来自2005年11月至2006年11月在广东省中医院门诊就诊的确诊病人,轻、中度活动(5≤SLEDAI≥25分),如使用了糖皮质激素,则维持量为10～25mg/d,3个月内不加量,如使用过非甾体抗炎药则需停药一刷以上,如使用过其他免疫抑制剂则需停药半年以上。健康对照组来自于广州中医药大学健康大学生和健康志愿者,共15例,均为女性。治疗组总共纳入18例,其中退出2例, 失访1例,有效病例共15例,平均年龄：31．60±9．37岁;健康对照组平均年龄：28．4±6．50岁。两组年龄经两样本 t 检验,方差齐性(P=0．098),差异无统计学意义(P=0．289)。2．治疗与疗效观察：入选病例用滋阴清热方制成胶囊,每次5粒,每日3次口服治疗3个月,每两周进行中医症候积分评估,并在中药治疗前、治疗6周、治疗12周时评定活动度积分,检测患者血清补体 C3、C4水平、抗核抗体(ANA)、抗双链 DNA 抗体(Ds-DNA)、血常规、尿常规等指标,提取 PBMC 总 RNA 和总蛋白质,-70℃保存备用,将完成3次观察的合格病例的样品进行基因芯片与蛋白芯片的检测。所有病例均按病例资料收集要求与规范详细填写《病例观察报告表》。3．基因芯片实验与分析方法：人类基因表达谱芯片由微芯生物公司采用 cDNA 直接点样生产,共有8064 个基因点,采用 Cy3单荧光标记探针,数据经标准化校正,计算基因表达量在实验组和对照组间的比值(Ratio),按 Ratio 大于2 或小于0．5作为表达差异的显著性标准。运用国际通用的 GeneCluster 2软件对标准化后数据进行 SOMs(self-organizing maps;自组图)分析、功能分类分析和聚类分析。4．蛋白芯片实验与分析方法：采用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI)方法建立 SLE 患者治疗前、治疗6周、治疗12周以及正常对照组 PBMC 蛋白质表达数据,利用浙江大学肿瘤研究所余捷凯等研究设计的 ZUCIPDAS 软件包找出蛋白质荷峰,建立判别模型,采用基因芯片表达数据库与 Expasy 蛋白数据库交连比对分析方法初步确定蛋白质荷峰的可能名称与功能。结果：1．糖皮质激素配合滋阴清热方治疗可以较快缓解阴虚内热证 SLE 患者病情,改善自觉症状,SLEDAI 积分、中医症候积分治疗后显著下降,C3、C4水平上升,患者病情有明显改善。中医症候积分与 SLEDAI 积分呈正相关,提示中医症候评分可以较客观地综合反映患者的病情。2．经归一化等数据处理后得到2946个基因表达数据。对其中至少三次独立实验处理过程中存在明显的表达差异的数据进行自组图分析分为25类共167个基因,3次表达经重复测量数据的方差分析,差异有显著性意义(P=0．000),其中有20个基因前后比较差异有统计学意义(P＜0．05)：其中人免疫球蛋白 K 链 c 区(IGKC)基因,治疗后下调,低于正常人,其余19个基因(Arp2、ARCN1、CRY2、DAF、DPYSL2、FMR1、FYN、GRO3、 LFNG、IVNS1ABP、P125、PBEF、PRKCB1、PSCDBP、PTPRE、SCP2、TMEM2、TNF、ZFP103)尽管治疗前与正常对照组比较正常、下调或上调各不相同,但治疗后较治疗前均表现为上调。3．对87个前、中、后三次样品具有相似性表达变化的基因数据进行了聚类分析,下调的有21个,上调的有66个。下调基因主要有免疫应答相关基因(DXS1357E、LY117、IGHG3、 IGKC、IGL@、PTP

关键词：系统性红斑狼疮滋阴清热方阴虚内热证基因表达谱蛋白表达谱 SELDI

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治疗性基因沉默在神经系统疾病中的研究

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天津医科大学学报 2006年第1期12卷 144-146页

作者：唐晓燕汤华天津医科大学生命科学中心实验室天津300070

近期,RNA的内源性细胞基因沉默机制--RNA干扰(RNA interference,RNAi)--在蠕虫、果蝇、鼠和人类中被发现.这个发现开辟了RNA治疗的领域并且使应用RNA为基础的基因沉默技术治疗人类疾病的发展前景更为乐观.神经系统疾病是一类适用于RNA... 详细信息

近期,RNA的内源性细胞基因沉默机制--RNA干扰(RNA interference,RNAi)--在蠕虫、果蝇、鼠和人类中被发现.这个发现开辟了RNA治疗的领域并且使应用RNA为基础的基因沉默技术治疗人类疾病的发展前景更为乐观.神经系统疾病是一类适用于RNA疗法的疾病.此类疾病是发达国家人口死亡的主要原因,并呈上升趋势,目前缺乏有效的治疗方法,因此急需一种崭新的针对此类疾病分子病理的治疗方法.

关键词： RNA干扰神经系统疾病基因沉默治疗

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重组腺病毒介导的人类eNOS基因转染治疗大鼠慢性缺氧性肺动脉高压

重组腺病毒介导的人类eNOS基因转染治疗大鼠慢性缺氧性肺动脉高压

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作者：周锦中国医科大学

学位级别：博士

目的肺动脉高压（Pulmonary artery hypertension，PAH）是与许多心肺血管疾病相关的一种危及生命的并发症，亦是心血管外科围手术期难题之一。临床上表现为进行性肺动脉压力增高，右心功能下降，最后导致右心功能衰竭而死亡。引发PAH... 详细信息

目的肺动脉高压（Pulmonary artery hypertension，PAH）是与许多心肺血管疾病相关的一种危及生命的并发症，亦是心血管外科围手术期难题之一。临床上表现为进行性肺动脉压力增高，右心功能下降，最后导致右心功能衰竭而死亡。引发PAH的原因很多，其中慢性缺氧是PAH的重要原因，并在病程的发展过程中亦起着重要的作用。慢性缺氧性肺动脉高压（Chronic hypoxic pulmonary hypertension，CHPH）主要见于慢性阻塞性肺疾病，分流性先天性心内畸形等疾病，其发生发展主要包括三个重要病理过程：即肺血管收缩、肺血管结构重建和原位血栓形成。NO（nitric oxide，NO）作为内皮衍化舒张因子（Endothelium derived relaxing factor，EDRF），在内皮血管舒张中起重要作用，因其直接松弛肺血管平滑肌，从而产生明显的肺血管舒张，并且具有抑制肺血管平滑肌细胞的增殖和迁移，抑制血小板聚集等作用，在维持肺循环稳定中起重要的作用。NO生成或作用不足与PAH的发病息息相关，故对PAH病人重建NO功能有着十分重要的意义。一氧化氮合酶（Nitric oxide synthase，NOS）是NO合成中关键的限速酶，业已证实，NO的合成受内皮细胞中NOS的表达及其活性的调节。在调节正常和低氧肺循环中，内皮型NOS（eNOS）起主要的作用。美国FDA已经核准，可将NO用于PAH的治疗。然而，NO生物半衰期短（15～30s）、易产生耐受性、副作用明显且使用不便等而使其临床应用受限。随着基因工程及NO体系分子生物学研究的进展，应用重组eNOS基因转染治疗PAH已成为可能。近年来，通过NOS基因转移的方式来恢复NO的生成，在体内和体外重组NOS基因异构体的表达均取得了重建NO功能，发挥降低肺动脉压力的治疗作用。目前此类研究正方兴未艾，很可能成为今后治疗PAH最有潜力的新方法。据目前所知，实现外源基因导入治疗PAH的途径，可通过血管内皮、外膜以及呼吸道上皮等。本研究通过建立CHPH模型，并经呼吸道途径将AdCMVceNOS转染入大鼠体内。旨在探讨重组eNOS转基因治疗PAH的可行性、效果及其可能机制，为基因治疗PAH的临床应用提供理论依据。材料 1．实验动物雄性Wistar大鼠150只，体重220～280g，由沈阳军区总医院实验动物中心提供。实验主要仪器小型动物呼吸机（Harvard 638型，美国）；多功能监测仪（Datex Ohmeda S／5，芬兰）；压力换能器（Edwards LifeSciences，美国）；低温高速离心机（Sorvall ST—70，美国）；台式离心机（Sigma，美国）； JUNG—CM1800型切片机（上海）；超声粉碎机及水平电泳仪（Biorad，美国）；水浴式电转印槽（DYY—Ⅲ40B型，北京六一仪器厂）；生化培养箱（LRH—150B，广州医疗器械厂）； K—8D电热恒温水浴槽（上海精宏实验设备有限公司）； Olympus光学显微镜（日本）；微量加样器（德国GILSON公司）；分析天平（上海天平仪器厂）； PTC—100型PCR仪（美国）；紫外分光光度计（德国EPPENDORF公司）； N02120MAX21g电子天平（NAVIGATOR公司）； PE 7000全自动荧光定量PCR仪（美国Perkin Elmer公司）；凝胶自动分析成像系统（Chem image 5500，美国）。实验试剂小鼠抗人eNOS单克隆抗体（BD公司）； ECL试剂盒（北京中杉生物技术公司）；重组腺病毒载体AdCMVceNOS质粒DNA（由Dr Robert Gerard惠赠）； pXC1载体（加拿大Microbix Biosystems公司）；腺病毒E1区转化人胚胎肾细胞株293（加拿大Microbix Biosystems公司）；琼脂糖、溴化乙锭（GENE公司）；一氧化氮试剂盒（南京建成生物公司）； Trizol（Invitrogen公司）； RT PCR试剂盒（德国QIAGEN公司）；

关键词：肺动脉高压基因治疗重组腺病毒一氧化氮合酶基因转移

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先天性肛门直肠畸形胚胎发育、基因表达及远期生活质量的研究

先天性肛门直肠畸形胚胎发育、基因表达及远期生活质量的研究

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作者：白玉作中国医科大学

学位级别：博士

前言先天性肛门直肠畸形是最常见的消化道畸形，其发生率约为1／5000～1／1500，是世界卫生组织常规监测的先天畸形之一。该畸形严重影响儿童的生活质量，给社会和家庭带来了沉重的负担。肛门直肠畸形的病因至今仍不清楚。人们... 详细信息

前言先天性肛门直肠畸形是最常见的消化道畸形，其发生率约为1／5000～1／1500，是世界卫生组织常规监测的先天畸形之一。该畸形严重影响儿童的生活质量，给社会和家庭带来了沉重的负担。肛门直肠畸形的病因至今仍不清楚。人们仅仅知道肛门直肠畸形的发生是胚胎期直肠发育发生障碍的结果，至今仍没有完全阐明正常肛门直肠胚胎发育的演变规律，对肛门直肠畸形在胚胎期发生的具体机制更是知之甚少。目前认为，肛门直肠畸形的发生是遗传因素和环境因素共同作用的结果。流行病学和动物实验表明遗传因素在其发病过程中发挥重要作用。由于肛门直肠畸形发病机制和病理改变十分复杂，常合并其他畸形，且疾病谱广，表型多种多样，遗传方式不清楚，涉及的相关基因不止一个，因而人类肛门直肠畸形致病基因的研究非常复杂。人类肛门直肠畸形的致病基因至今没有得到定位，甚至没有明确的候选基因。因此从胚胎学和分子水平探索人类先天性肛门直肠畸形的发病机制和致病基因具有十分重要的意义。本研究包括以下内容：①胚胎发育：应用乙烯硫脲致畸制作Wistar大鼠肛门直肠畸形的动物模型，连续动态观察胎龄12.5天到20天胎鼠肛门直肠在时空上的形态变化过程，探讨先天性肛门直肠畸形胚胎发生的演变规律。②基因表达：应用RT-PCR技术和基因表达谱芯片技术，检测肛门直肠畸形患儿和无畸形儿的直肠末端某些发育相关基因表达状况，探讨这些基因与人类先天性肛门直肠畸形发生的关系，为寻找人类先天性肛门直肠畸形的致病基因提供线索。③生活质量调查：从身体J心理和社会等方面，调查和评估肛门直肠畸形病人术后30年以上生活质量状况。实验材料动物：WIStar大鼠由中国医科大学第二临床学院医学实验动物中心提供。病例：①标本来源：19例经我科手术治疗的先天性肛门直肠畸形患儿，男10例，女9例。年龄2天一3岁。术中无菌条件下取直肠末端后壁肠组织，置于液氮中保存。术中收集后天性肛展、直肠外伤等5例无畸形患儿直肠齿状线上约Icm以内水平处肠组织做对照，标本处理同前。②随访的8 例病人为30年前经我科手术治疗的肛门直肠畸形病人。试剂：①原位末端标记细胞凋亡检测试剂盒购于武汉博士德公司。② 逆转录试剂盒购于大连宝生物工程公司。部张芯片由上海博星基因芯片有限责任公司提供的发育相关基因表达谱芯片，型号：GCS。方法 ①胚胎发育：用乙烯硫豚致畸孕鼠产生泄殖腔畸形和无肛畸形胎鼠。胎龄 12．5天一20天的正常及泄殖腔发育畸形的胎鼠正中矢状面连续切片，HE染色，连续动态对比观察泄殖腔及肛门直肠的发育过程。部分切片 TUNEL染色，观察细胞凋亡的分布。 ②基因表达：应用RT—PCR方法检测HOXdl3基因在16例肛门直肠畸形病人和5例无畸形儿直肠末端的表达水平。应用基因表达谱芯片技术对 3例先天性肛门直肠畸形患儿的直肠末端组织和无畸形儿直肠末端组织的基因表达谱进行检测。 ③生活质量调查：随访8例肛门直肠畸形病人（年龄33岁一41岁入应用自行设计的肛门直肠畸形病人术后30年以上生活质量问卷评估该8例病人和对照组（24例健康成人）的生活质量状况。包括排便功能、饮食、工作、性生活、社交娱乐、心理情绪6方面10项内容。 ·2· 结果 ①胚胎发育：泄殖腔发育过程中，胎龄15天前的正常鼠胚，尿直肠隔将泄殖腔分为腹侧的尿生殖窦和背侧的直肠两部分，二者共同相通于泄殖腔管。尿直肠隔下降与泄殖腔膜的距离逐渐减小，直至胚胎15天时与

关键词：肛门直肠畸形,大鼠,胚胎,发育,泄殖腔,尿直肠隔,逆转录多聚酶链反应,基因表达,基因芯片,生活质量

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首届祖国大陆、香港、台湾生殖医学研讨会会议纪要

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生殖医学杂志 2001年第2期10卷 67-69页

作者：周灿权于丛一中山医科大学第一附属医院生殖医学中心广州510080

首届祖国大陆、香港、台湾生殖医学研讨会于2000年9月15～17日在珠海市隆重举行。本次大会由广州中山医科大学生殖医学研究中心、台湾长庚纪念医院、香港大学妇产科学系、《生殖医学杂志》编委会联合主办。出席会议的代表来自祖国大陆... 详细信息

首届祖国大陆、香港、台湾生殖医学研讨会于2000年9月15～17日在珠海市隆重举行。本次大会由广州中山医科大学生殖医学研究中心、台湾长庚纪念医院、香港大学妇产科学系、《生殖医学杂志》编委会联合主办。出席会议的代表来自祖国大陆、香港、台湾和美国的生殖医学基础及临床学者以及各地生殖医学研究和工作机构的代表和相关专业公司的代表共约400人。大会汇集了大陆、香港、台湾生殖医学界的主要权威，包括祖国大陆的庄广伦教授和葛秦生教授、香港的何柏松教授和杨树标博士及梁家康医生、台湾的宋永魁教授和李茂盛博士等，并邀请中国科学院动物研究所陈大元教授、西北农林科技大学窦忠英教授和来自美国纽约大学的张进和冯怀亮博士、新加坡国立大学的Tongya博士作了精彩的报告。会议共收到论文175篇，其中大会及分组会议发言60篇，墙报陈列60篇。整个会议日程安排有序而紧凑，内容先进、丰富，使与会者在短短的3天内对两岸三地和世界生殖医学发展的现状和最新研究进展有了进一步的了解，对生殖医学所面临的挑战和不足进行了深刻探讨。会议的规模和成果以及会议所反映的我国生殖医学的水平均是空前的。会议开幕式由广州中山医科大学生殖医学研究中心周灿权主持，广东省卫生厅黄智琼副厅长和中山医科大学附属第一医院詹文华院长参加了会议的开幕式并作了热情洋溢的讲活，葛秦生教授和庄广伦教授先后致辞。开幕式后，首先由中山医科大学生殖医学研究中心庄广伦教授进行了“辅助生育新进展”的报告，内容总结了生殖医学的最新研究进展和研究热点及其所面临的挑战与不足，其内容涵盖了超排卵方案面临的挑战、卵泡浆内单精子注射(ICSI)是否取代常规体外受精(IVF)、胚胎植入前诊断(PGD)、囊胚培养、原核评分评估胚胎发育潜能的参考价值、卵子和卵巢组织冷冻的新突破、核移植技术在辅助生育领域中应用的可能性、人类胚胎干细胞的医学应用前景等生殖医学的新课题。西北农林科技大学胚胎工程实验室窦忠英教授作了关于胚胎干细胞(ES细胞)应用与研究进展的专题报告。报告综述了ES细胞广阔的应用前景在于：ES细胞具有发育成各种组织细胞、组织器官(多能性)和动物个体的能力(全能性)，在一定条件下经定向诱导分化作为种子细胞，发育为各种组织细胞或组织器官，用于临床克隆治疗及为组织器官移植提供材料，是目前组织工程的研究热点。ES细胞可无限克隆增殖，理论上，经核移植技术可克隆出成千上万的动物个体，对于加快良种家畜繁殖，保护濒危珍稀野生动物意义重大，ES细胞对制作转基因动物、研究基因调控和胚胎发育生物学等方面均具有重要的科学研究价值。

关键词：生殖医学体外授精-胚胎移植卵泡浆内单精子注射胚胎植入前诊断

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进一步提高儿童肾脏疾病的诊治水平

引用

江苏医药 2000年第2期26卷 80-81页

作者：陈荣华南京医科大学小儿肾脏病研究中心 210029

自1979年第一届全国小儿肾脏病学术会议召开至今已有20年.20年来,在广大小儿肾脏病学者的共同努力下,我国小儿肾脏病的实验和临床研究均取得了令人鼓舞的成绩,对于小儿肾脏疾病的认识,包括肾小球疾病和肾小管疾病,无论在深度和广度上都... 详细信息

自1979年第一届全国小儿肾脏病学术会议召开至今已有20年.20年来,在广大小儿肾脏病学者的共同努力下,我国小儿肾脏病的实验和临床研究均取得了令人鼓舞的成绩,对于小儿肾脏疾病的认识,包括肾小球疾病和肾小管疾病,无论在深度和广度上都有很大的提高.随着人类基因组计划的实施和完成,医学生物学正面临着一次更深刻的革命.面对21世纪,总结过去,展望未来,我国小儿肾脏病学者应加强实验和临床研究,进一步提高儿童肾脏疾病的临床诊断和治疗水平,推动我国小儿肾脏病事业的发展.

关键词：肾疾病诊断治疗儿童

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细胞因子基因转导人肿瘤细胞的实验研究

细胞因子基因转导人肿瘤细胞的实验研究

引用

第七次全国基因结构表达与调控学术讨论会

作者：东诗书第二医科大学生化教研室分子生物学实验室人类基因治疗研究中心

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