检索结果-内蒙古大学图书馆

上海第二医科大学学报 1992年第1期12卷 37-41页

作者：何清波董才如毛敌雄辜丽军上海第二医科大学生物统计教研室上海第二医科大学化学教研室

文章采用欧氏距离,用七种系统聚类分析算法分析了35侏细菌细胞脂肪酸气相色谱图。结果表明可变类平均法、离差平方和法、可变法、类平均法和最长距离法的分类结果与常规分类结果符合程度高。最短距离法对样品间的微小差异不敏感,其分类... 详细信息

文章采用欧氏距离,用七种系统聚类分析算法分析了35侏细菌细胞脂肪酸气相色谱图。结果表明可变类平均法、离差平方和法、可变法、类平均法和最长距离法的分类结果与常规分类结果符合程度高。最短距离法对样品间的微小差异不敏感,其分类效果不及以上五种算法:中间距离法不具单调性。聚类分析树状谱的分类结果为12株幽门螺旋菌实验菌株自成一群,12株空肠弯由菌和4株结肠弯曲菌实验菌株聚在另一群,7株其他肠道杆菌聚为第三群。因此,从细菌化学分类学的角度来看,幽门螺旋菌不宜归属于弯曲菌属。

关键词：系统聚类分析幽门螺旋菌

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简便的窦房结细胞分离和穿孔膜片箝

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中国应用生理学杂志 1999年第1期15卷 89-92页

作者：李慈珍刘远谋王红卫杨建民上海第二医科大学生理教研室

用含胶原酶、弹性蛋白酶的无钙溶液和改良的回复式液体运动来酶解和机械分离兔心窦房结自律细胞。为防止“衰减”现象的出现（ｒｕｎｄｏｗｎ），运用含ＡｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎＢ的电极液作穿孔膜片箝。通过穿孔膜片箝的形成过程，记... 详细信息

用含胶原酶、弹性蛋白酶的无钙溶液和改良的回复式液体运动来酶解和机械分离兔心窦房结自律细胞。为防止“衰减”现象的出现（ｒｕｎｄｏｗｎ），运用含ＡｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎＢ的电极液作穿孔膜片箝。通过穿孔膜片箝的形成过程，记录分离细胞的自律性动作电位、慢内向离子流、外向钾流和起搏离子流Ｉｆ。

关键词：窦房结穿孔膜片箝游离跨膜离子流

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RT-PCR检测人烧伤愈合中TGF-β_1的表达

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上海医学 2000年第4期23卷 222-224页

作者：梅文瀚赵涵芳章有章上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

目的　通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达变化的研究 ,阐明TGF β1对促进愈合的调节作用。方法　取人深Ⅱ度烧伤后 5d、7d、12d手术切除的烧伤区皮肤组织 ,采用RT PCR后电泳扫描求积方法 ,检测各时... 详细信息

目的　通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达变化的研究 ,阐明TGF β1对促进愈合的调节作用。方法　取人深Ⅱ度烧伤后 5d、7d、12d手术切除的烧伤区皮肤组织 ,采用RT PCR后电泳扫描求积方法 ,检测各时相烧伤皮肤组织TGFβ1mRNA表达量的变化。结果　人深Ⅱ度烧伤皮肤TGFβ1mRNA在伤后 7d出现表达高峰 ,5d与 12d也有表达增强。结论　TGFβ1对烧伤患者创伤愈合有促进作用。

关键词：转化生长因子β1 烧伤愈合 RT-PCR mRNA

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聚合酶链反应测定婴儿尿人巨细胞病毒DNA

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中华医学杂志 1990年第10期70卷 560-562页

作者：董枫陈诗书上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

在利用建立的聚合酶链反应（PCR）技术测定尿中人巨细胞病毒（HCMV）的方法中,自行设计并合成了两对HCMV的DNA引物。经实验证明,这两对引物是HCMV特异和保守的顺序,对正常人基因组DNA和其它疱疹病毒无交叉反应。本方法可测出少至1015g（... 详细信息

在利用建立的聚合酶链反应（PCR）技术测定尿中人巨细胞病毒（HCMV）的方法中,自行设计并合成了两对HCMV的DNA引物。经实验证明,这两对引物是HCMV特异和保守的顺序,对正常人基因组DNA和其它疱疹病毒无交叉反应。本方法可测出少至1015g（1 fg）的病毒DNA。对47例疑为HCMV感染患儿的检测结果和病毒分离法测定结果相比较,其中31例两者皆为阳性;12例皆为阴性,4例本方法狲定阳性,病毒分离法为阴性,但同时测定血清HCMV-1gM呈阳性反应,支持本方法的结果。以上结果表明,本方法的特异性和敏感性都不低于病毒分离法,并具有操作简便、反应周期短、对长期保存并已消失感染性的样品也有效等优点,适于临床推广。

关键词：巨细胞病毒 DNA 尿液诊断

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人转化生长因子基因重组克隆及高效表达

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上海医学 2000年第2期23卷 84-87页

作者：于丽莉赵涵芳刘军章有章上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）得到全长ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２中，构建了在ＰＬ ... 详细信息

目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）得到全长ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２中，构建了在ＰＬ启动子控制的含有ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ重组子，转化到大肠杆菌ＲＲ１菌株中，进行温敏诱导表达。结果　表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳染色后，显示其相对分子质量为１２．５ ×１０３，计算机灰度扫描分析，表达产物约占全菌蛋白的２０％左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实，表达产物为ＴＧＦβ１，细胞实验显示其具有一定的生物活性。结论　在大肠杆菌中表达出具有活性的人ＴＧＦβ１。这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础。

关键词： TGFβ1 基因工程基因表达克隆烧伤

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人血小板内皮舒张因子合酶互补脱氧核糖核酸克隆

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中国循环杂志 1996年第10期11卷 622-625页

作者：王华梁龚兰生孔宪涛蔡伟箐于金德戚文航吴春芳王海英赵函芳陈诗书程枫王亚新卢健上海第二医科大学附属瑞金医院心内科上海第二医科大学生化教研室

目的：建立人血小板互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）文库，筛选出血小板内皮舒张因子合酶（ＮＯＳ）ｃＤ－ＮＡ克隆。方法：用新鲜血小板悬液纯化血小板，提取总核糖核酸（ＲＮＡ），以ＲＮＡ为模板合成ｃＤＮＡ，将ｃＤＮＡ连接λｇｔ１... 详细信息

目的：建立人血小板互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）文库，筛选出血小板内皮舒张因子合酶（ＮＯＳ）ｃＤ－ＮＡ克隆。方法：用新鲜血小板悬液纯化血小板，提取总核糖核酸（ＲＮＡ），以ＲＮＡ为模板合成ｃＤＮＡ，将ｃＤＮＡ连接λｇｔ１１臂，用噬菌体包装蛋白包装，然后转染宿主菌Ｙ１０９０建库。用地高辛标记探针进行杂交，挑出阳性克隆，扩增后纯化脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）。将重组ＤＮＡ用ＥｃｏＲＩ酶解，电泳，并将插入片段切下，纯化得到内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ。结果：从血小板中获得ＲＮＡ约１．５ｍｇ，ＲＮＡ变性电泳可见较清晰的１８Ｓ和２８Ｓ条带且无ＲＮＡ降解。第一条ｃＤＮＡ链产量为１．８２μｇ，第二条链为３．７９μｇ，放射性自显影显示双链ｃＤＮＡ分子大小范围在０．５～５．０ｋｂ，大部分位于１．０～４．０ｋｂ之间。人血小板内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ克隆约３．０ｋｂ左右。结论：人血小板内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ克隆约３．０ｋｂ，与其它组织的相似。

关键词：血小板内皮舒张因子合酶 DNA 克隆

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我国彝族HLAD区基因的寡核苷酸分型

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中华微生物学和免疫学杂志 1993年第4期13卷 219-225页

作者：费虹明王伟成上海第二医科大学生物学教研室上海第二医科大学病理生理教研室上海市免疫研究所免疫遗传研究室

本文对云南楚雄地区80余名彝族人用第11届国际组织相容性会议（IHWC）提供的引物和序列特异的寡核苷酸（SSO）探针，应用聚合酶链反应（PCR）技术进行了HLA D区基因的分型。共检出等位基因DRB1 24个，DQA1 7个，DQB1 12个，DPB1 13个。D... 详细信息

本文对云南楚雄地区80余名彝族人用第11届国际组织相容性会议（IHWC）提供的引物和序列特异的寡核苷酸（SSO）探针，应用聚合酶链反应（PCR）技术进行了HLA D区基因的分型。共检出等位基因DRB1 24个，DQA1 7个，DQB1 12个，DPB1 13个。DRB1基因座频率最高的是DRB1 * 1202（13.8%）。DR2组检出四种等位基因，除已命名的1501和1502外，还检出两种新的等位基因DRB1 * 15Y1和15Y2。DR4组检出五种等位基因，其中以DRB1* 0405频率最高（3.08%）。DR6中等位基因DRB1 * 1404频率最高（8.71%），仅次于1201。DR8均为DRB1 *0803。DR9等位基因DRB1 * 0901频率也较高（7.07%）。DRB3基因能检出DRB3 * 0101，0202，0301三种等位基因，未检出0201。其他基因座最高频率在DQA1是DQA1 * 0301（23.3%），DQB1是DQB1 * 0301（26.3%），DPB1是DPB1 * 0501（23.4%）。各亚区等位基因经检验均符合Hardy-Weinberg平衡。

关键词：寡核苷酸分型基因彝族

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HLA－DRB1基因位点多态性的PCR－RFLP分析

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生物化学杂志 1996年第6期12卷 674-680页

作者：黄啸宇王亚新王福庆陈诗书上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室上海第二医科大学免疫学教研室

设计并建立一套适合国内应用的改良ＰＣＲ－ＲＦＬＲ方法，分５组特异性扩增ＤＮＡ样品，随后进行酶切定型分析，准确检测了编码ＤＲ抗原特异性的ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因位点的多态性，该法采用分组扩增，不发生与其它ＤＲＢ位点等位基因... 详细信息

设计并建立一套适合国内应用的改良ＰＣＲ－ＲＦＬＲ方法，分５组特异性扩增ＤＮＡ样品，随后进行酶切定型分析，准确检测了编码ＤＲ抗原特异性的ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因位点的多态性，该法采用分组扩增，不发生与其它ＤＲＢ位点等位基因的交叉扩增，不仅适合纯合子的区分而且可以清楚准确地检测杂合子样品，已报道过的ＤＲＢ１位点编码的特异性组合都可以通过这个方法得到准确分析。所使用的Ⅱ类限制性内切酶均价格便宜、易购。

关键词：人白细胞抗原 DRB1基因聚合酶链反应 RFLP

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多类别多评估者的kappa分析

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中国卫生统计 1995年第6期12卷 20-22页

作者：栾建安王纪宪苏炳华朱长青北京医科大学生物统计教研室上海第二医科大学生物统计教研室

ｋａｐｐａ统计量是度量评估者之间一致性程度的指标．本文主要介绍多类别多评估者情况下的ｋａｐｐａ。及加权ｋａｐｐａ。的计算，同时也介绍了在评估者之间的分类独立条件下的大样本的方差的近似算法。

关键词：卫生统计评估者一致性 kappa分析

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黄芪促进高糖环境下肾间质成纤维细胞表达肝细胞生长因子的作用

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中国中西医结合杂志 2004年第S1期24卷 141-144页

作者：牟姗张庆怡倪兆慧赵涵芳童菊芳上海第二医科大学附属仁济医院肾内科 200001 上海第二医科大学生化教研室上海市消化病研究所

目的体外研究高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时肝细胞生长因子(HGF)表达,同时进一步观测了黄芪延缓糖尿病肾病进展是否与影响 HGF 表达相关。方法将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,分不同时间段采用 RT-PCR 方法检测 HGF mR... 详细信息

目的体外研究高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时肝细胞生长因子(HGF)表达,同时进一步观测了黄芪延缓糖尿病肾病进展是否与影响 HGF 表达相关。方法将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,分不同时间段采用 RT-PCR 方法检测 HGF mRNA 转录水平,ELISA 方法检测 HGF 蛋白分泌。之后用黄芪含药血清刺激细胞,观察 HGF 表达情况。结果高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有 HGF 表达,之后表达逐渐下降。说明 HGF 表达与高糖作用存在相关性。结果进一步证实,黄芪含药血清可以显著刺激细胞表达 HGF。结论黄芪可以通过诱导 HGF 的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。

关键词：肝细胞生长因子糖尿病肾病黄芪

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