检索结果-内蒙古大学图书馆

海军军医大学学报 2025年第1期46卷 40-47页

作者：林泽帅陈佳妮姚厚山李明明姚佳山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001 海军军医大学(第二军医大学)第二附属医院肛肠外科上海200003 海军军医大学(第二军医大学)第二附属医院药剂科上海200003

目的基于结直肠癌(CRC)患者化疗前血浆中的内源性代谢物,寻找潜在卡培他滨肝毒性易感标志物,建立预测模型。方法收集50例接受卡培他滨化疗的CRC患者化疗前血浆样本及化疗肝毒性不良反应随访记录。采用超高效液相色谱结合四极杆飞行时间... 详细信息

目的基于结直肠癌(CRC)患者化疗前血浆中的内源性代谢物,寻找潜在卡培他滨肝毒性易感标志物,建立预测模型。方法收集50例接受卡培他滨化疗的CRC患者化疗前血浆样本及化疗肝毒性不良反应随访记录。采用超高效液相色谱结合四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS)法进行非靶向代谢组学分析。基于生物信息学分析,采用差异分析、相关性分析、随机森林方法筛选肝毒性相关的内源性代谢物。将所有样本按照7∶3比例随机分成训练集和测试集,基于训练集数据建立预测卡培他滨化疗肝毒性的多因素logistic回归模型,通过ROC曲线分析评价模型在训练集、测试集及整个数据集中的预测效果。结果CRC患者化疗前血浆中肝毒性相关内源性代谢物主要集中在脂质内源性代谢物,经筛选发现鞘氨醇-1-磷酸、神经酰胺、半乳糖、花生四烯酸、酪氨酸、胆绿素、肉豆蔻酸、磷脂酰胆碱(35∶1)、磷脂酰乙醇胺(36∶1)、棕榈酸等可能是潜在的重要肝毒性易感标志物。基于以上标志物建立的卡培他滨化疗肝毒性预测模型在训练集、测试集、整个数据集中的AUC分别为0.946(95%CI 0.842~1.000)、0.920(95%CI 0.720~1.000)、0.912(95%CI 0.810~0.982)。结论利用CRC患者化疗前血浆中的内源性代谢物可以有效预测卡培他滨化疗肝毒性不良反应,这些肝毒性标志物指示易感患者具有脂质代谢紊乱相关的特征。

关键词：结直肠肿瘤卡培他滨肝毒性预测模型代谢组学生物学标志物

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重组牛痘病毒介导的微小基因表达产物OVA257～264在真核细胞中的抗原呈递效率

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第6期34卷 719-724页

作者：钱丽钱关祥上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室上海200025 上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的... 详细信息

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的诱导能力。结果表明四聚体的构建是成功的 ,进一步用已被重组牛痘病毒感染的L92 9 Kb 细胞作为抗原呈递细胞以诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的产生 ,并对活化后特异性CTL进行检测 ,从胞外IFN γ的分泌情况看 ,诱导后的整个群体细胞发生了活化与增殖 ,H 2Kb OVA四聚体对特异性T细胞进行的结合分析与经典的细胞毒效应相一致。可见 ,重组牛痘病毒介导的微小基因产物OVA2 57～ 2 64不仅能为MHC I类分子的合成提供更有效的肽来源 ,且能更有效诱导特异性CTL的产生。

关键词：四聚体重组牛痘病毒微小基因 CTL 抗原肽

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维甲酸对人胃癌细胞诱导分化的研究

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中华肿瘤杂志 1994年第1期16卷 15-17页

作者：孙月霞何震平程枫陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室

人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）处理后，将细胞接种裸鼠，观察其移植瘤生成率和瘤体重量比对照胃癌细胞显著降低和减小ｐ＜０．０１。透射电镜发现，胃癌细胞经ＲＡ作用后，其细胞形态发生改变，由椭圆形... 详细信息

人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）处理后，将细胞接种裸鼠，观察其移植瘤生成率和瘤体重量比对照胃癌细胞显著降低和减小ｐ＜０．０１。透射电镜发现，胃癌细胞经ＲＡ作用后，其细胞形态发生改变，由椭圆形、核大、核周边缘凹陷切迹，转变为长圆形或近似梭形、核小、核周边缘光滑无切迹。流式细胞仪检测结果，ＲＡ处理的胃癌细胞，其细胞周期发生改变，停留在Ｇ１／０期细胞百分比率比对照胃癌细胞显著上升Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１，而增殖期Ｓ和Ｇ２＋Ｍ期细胞百分比率比对照细胞显著下降Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１。结果表明：ＲＡ可从细胞生物学、细胞周期动力学及细胞形态学水平逆转入胃癌细胞表型，使该细胞株有一定程度的诱导分化。

关键词：维甲酸胃肿瘤肿瘤细胞培养

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人SATB1基因5′上游序列的转录激活功能分析

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第2期21卷 221-226页

作者：李颖戴冰冰蔡蓉仇全于丽莉卢健上海第二医科大学生物化学与分子生物学教研室上海200025

在对人SATB1基因进行生物信息学分析的基础上 ,采用PCR技术 ,扩增人基因组DNA中SATB1基因 5′上游序列的 - 2 95 5～ - 9片段 ,构建了 3个分别由SATB1基因 5′上游 - 2 95 5～ - 9,- 172 7～ - 9和 - 76 0～ - 9序列片段驱动的报告载体 ... 详细信息

在对人SATB1基因进行生物信息学分析的基础上 ,采用PCR技术 ,扩增人基因组DNA中SATB1基因 5′上游序列的 - 2 95 5～ - 9片段 ,构建了 3个分别由SATB1基因 5′上游 - 2 95 5～ - 9,- 172 7～ - 9和 - 76 0～ - 9序列片段驱动的报告载体 -pGL3 SP2 94 6 luc ,pGL3 SP1718 luc和pGL3 SP75 1 luc ,分别瞬时转染JurkatT ,K5 6 2 ,U937和HeLa细胞 ,通过测定荧光素酶的表达活性 ,观察SATB1基因 5′上游序列片段 3个删除突变体在不同细胞内活性的差异 .结果显示 ,SATB1上游序列- 2 95 5 - 9在 4种细胞中的转录激活能力为U937>JurkatT >K5 6 2 ,在HeLa细胞中基本无激活 ,提示SATB1的转录激活可能具有一定的细胞类型特异性 .3种 5′删除突变体转录激活性由大至小顺序为 - 76 0 - 9>- 2 95 5 - 9>- 172 7 - 9,提示SATB1的核心启动子可能存在于其 5′上游序列的- 76 0至 - 9bp区域中 .

关键词： SATB1基因启动子报告基因分析转录调控

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嘌呤核苷磷酸化酶/氟达拉滨(PNP/fludarabine)自杀基因系统对人肝癌细胞系BEL7402体外杀伤效应的研究

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胃肠病学 2005年第1期10卷 3-9页

作者：李锋王楚张萍钱关祥上海第二医科大学生物化学与分子生物学教研室 200025

背景:肿瘤细胞内表达的自杀基因可将无毒性的前药转化为高毒性代谢产物以杀伤肿瘤细胞,嘌呤核苷磷酸化酶/氟达拉滨(PNP/fludarabine)自杀基因系统具有目前已知最强的旁观者效应,成为基因治疗领域中的研究热点。目的:研究PNP/fludarabin... 详细信息

背景:肿瘤细胞内表达的自杀基因可将无毒性的前药转化为高毒性代谢产物以杀伤肿瘤细胞,嘌呤核苷磷酸化酶/氟达拉滨(PNP/fludarabine)自杀基因系统具有目前已知最强的旁观者效应,成为基因治疗领域中的研究热点。目的:研究PNP/fludarabine自杀基因系统对人肝癌细胞系BEL7402的体外杀伤效应。方法:应用聚合酶链反应(PCR)从大肠杆菌K12菌株基因组DNA扩增PNP基因,通过8个甘氨酸的接头克隆至真核表达载体pEGFP鄄N1。将pEGFP鄄N鄄PNP以Lipofectamine2000转染BEL7402细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,命名为BEL7402/PNP。应用逆转录(RT)鄄PCR和RNA印迹法(Northernblotting)鉴定PNP基因的表达。分别应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和AnnexinV鄄FITC凋亡检测试剂盒检测PNP/fludarabine自杀基因系统对BEL7402细胞的细胞毒效应、旁观者效应和诱导凋亡作用。结果:RT鄄PCR和RNA印迹法证实转染的PNP基因能在BEL7402和BEL7402/PNP细胞中表达。低浓度fludarabine对经PNP基因转染的BEL7402细胞具有明显的细胞毒效应;旁观者效应检测显示,10%的BEL7402/PNP细胞与90%的BEL7402细胞混合,经低浓度fludarabine处理,90%的细胞可被杀死;细胞凋亡检测显示,PNP/fludarabine自杀基因系统对BEL7402细胞具有明显的诱导凋亡作用。结论:PNP/

关键词：嘌呤核苷磷酸化酶氟达拉滨自杀基因系统肝癌细胞系 BEL7402 体外杀伤效应

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造血系统来源的细胞株和人急性淋巴细胞白血病细胞...

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中华微生物学和免疫学杂志 1989年第5期9卷 277-281页

作者：仇一华陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室

本文报导用Southern、Northern印迹法及快速mRNA检测法，对4株处于分化较早阶段的造血系统来源的HL-60、Jurkat、Daudi、Raji细胞株及17例急性淋巴细胞白血病（ALL）中的T细胞受体（TCR）β基因的重排及转录物进行测定。①Jurkat细胞的T... 详细信息

本文报导用Southern、Northern印迹法及快速mRNA检测法，对4株处于分化较早阶段的造血系统来源的HL-60、Jurkat、Daudi、Raji细胞株及17例急性淋巴细胞白血病（ALL）中的T细胞受体（TCR）β基因的重排及转录物进行测定。①Jurkat细胞的TCR β基因有重排，而HL-60、Daudi及Raji细胞无重排。②9例T-ALL中有8例发生TCR β基因重排，但在3例B-ALL中有2例，5例非T非B-ALL中也有3例发生TCRβ基因重排。③Jurkat细胞的TCRβ转录物为1.3Kb及1.0Kb（不完全产物）。部分B细胞出现不完全转录物。④8例T-ALL有6例表达，5例非T非B-ALL中有4例表达，3例B-ALL有1例表达。但表达水平有明显差异。说明向T系发育分化的细胞大多数发生TCRβ基因的重排和表达；但有些非T系的白血病细胞也有TCRβ基因的重排。某些T-ALL细胞TCRβ基因重排后无转录物测出，反之有些白血病细胞无明显重排却有部分转录。这些现象可能与细胞异常分化和白血病发生、发展有关。

关键词：白血病 T细胞受体基因

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单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查

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中华内分泌代谢杂志 1994年第3期10卷 183-184页

作者：王亚新何友爱张来仪于丽莉陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室

单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查王亚新，何友爱，张来仪，于丽莉，陈诗书人生长激素（ｈｕｍａｎｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ，ｈＧＨ）缺乏可有多种原因引起。ｈＧＨ基因缺失是其中之一，命名为单纯性生长激素缺乏症Ｉ－Ａ型（Ｉ... 详细信息

单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查王亚新，何友爱，张来仪，于丽莉，陈诗书人生长激素（ｈｕｍａｎｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ，ｈＧＨ）缺乏可有多种原因引起。ｈＧＨ基因缺失是其中之一，命名为单纯性生长激素缺乏症Ｉ－Ａ型（ＩＧＨＤ－ＩＡ）。我们在１９８８年用...

关键词：遗传病单纯性生长激素缺乏症家系调查

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肿瘤相关抗原p572肽的修饰及其功能分析

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现代免疫学 2004年第6期24卷 470-476页

作者：仇全李颖钱关祥上海第二医科大学生物化学与分子生物学教研室上海200025

由于大多数肿瘤相关抗原是自身抗原 ,且免疫耐受通常保护个体避免发生自身免疫反应 ,所以用肿瘤相关抗原在体内刺激抗肿瘤T细胞反应时 ,免疫耐受是很难克服的障碍之一。一般认为 ,免疫耐受主要针对肿瘤的一些明显表位 ,而与HLA低亲和力... 详细信息

由于大多数肿瘤相关抗原是自身抗原 ,且免疫耐受通常保护个体避免发生自身免疫反应 ,所以用肿瘤相关抗原在体内刺激抗肿瘤T细胞反应时 ,免疫耐受是很难克服的障碍之一。一般认为 ,免疫耐受主要针对肿瘤的一些明显表位 ,而与HLA低亲和力的潜在表位则可能不受免疫耐受的影响。基于这一假设 ,我们设计合成了三条人端粒酶逆转录酶 (hTERT )相关的抗原肽 ,p5 72 (RLFFYRKSV )、pY5 72 (YLFFYRKSV )和pF5 72 (FLFFYRKSV ) ,p5 72是近期研究较多的一条与HLA A2 1分子低亲和力的 9肽 ,pY5 72和pF5 72是我们根据 9肽氨基酸位置特点突变合成 ,理论上它们与HLA A2 1分子的亲和力要高于p5 72 ,用T2细胞模型检测证实了这一点。DC细胞是最强的抗原提呈细胞 ,我们在试验中用DC细胞负载不同的肽在体外刺激特异性CTL的分化。

关键词：人端粒酶逆转录酶免疫耐受表位树突状细胞细胞毒淋巴细胞

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人原发胃癌,裸鼠人胃癌移植瘤有人胃细胞株中...

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中华肿瘤杂志 1991年第6期13卷 433-435页

作者：孙月霞何震平上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室 200025

我们对人原发胃癌组织及相应“正常”胃组织、不同传代的裸鼠人原发性胃癌移植瘤及三种不同人胃癌细胞株进行胃蛋白酶原(PG)和乳酸脱氢酶(LDH)活力及其同功酶谱的比较。结果表明,人“正常”胃组织PG同功酶基因高度表达, PG活力较高; LD... 详细信息

我们对人原发胃癌组织及相应“正常”胃组织、不同传代的裸鼠人原发性胃癌移植瘤及三种不同人胃癌细胞株进行胃蛋白酶原(PG)和乳酸脱氢酶(LDH)活力及其同功酶谱的比较。结果表明,人“正常”胃组织PG同功酶基因高度表达, PG活力较高; LDH同功酶谱呈H型, LDH活力较低。而原发胃癌组织、裸鼠人胃癌移植瘤组织及三种人胃癌细胞株的PG同功酶基因均低度表达, PG活力均比“正常”胃组织呈非常显著性降低(P＜0.001); LDH同功酶均呈M型, LDH活力均比人“正常”胃组织呈非常显著性增高(P＜0.001, P＜0.01)。实验结果提示:裸鼠人胃癌移植瘤与原发胃癌组织性质接近,可作为研究胃癌分子生物学的模型。

关键词：胃蛋白酶原同功酶酶谱胃癌细胞株

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cmv-3′LTR嵌合启动子对逆转录病毒载体MFG滴度及外源基因表达的影响

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病毒学报 2003年第3期19卷 235-239页

作者：戴冰冰梅文瀚王家敏杨蓉钱关祥卢健上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室上海200025

为减轻逆转录病毒载体介导的外源基因的沉默,进一步提高逆转录病毒载体MFG介导的外源基因的表达水平,同时探讨逆转录病毒3′端长末端重复序列(long terminalrepeat,LTR)内U3区对病毒基因表达的影响,将逆转录病毒载体3′端LTR内的U3区用... 详细信息

为减轻逆转录病毒载体介导的外源基因的沉默,进一步提高逆转录病毒载体MFG介导的外源基因的表达水平,同时探讨逆转录病毒3′端长末端重复序列(long terminalrepeat,LTR)内U3区对病毒基因表达的影响,将逆转录病毒载体3′端LTR内的U3区用cmv核心增强子、启动子序列替代,同时去除了3个与逆转录病毒载体启动子甲基化有关的序列NCR、DR,并以egfp为报告基因,构建了MFG egfp和MFG egfp cmv表达载体。结果显示:利用cmv启动子替代MFG载体3′端LTR的U3启动子序列,会显著降低MFG载体的病毒滴度及其介导的外源报告基因的表达。提示利用cmv启动子替代病毒载体的3′端LTR内的U3区,并不是提高MoMLV(moloneymurineleukemivirus)逆转录病毒载体介导外源基因的表达及其病毒滴度的理想策略。结果也同时提示:在MoMLV逆转录病毒3′端LTR的U3区,可能存在与病毒RNA加工、成熟及稳定性有关的信号序列。

关键词：嵌合启动子逆转录病毒载体外源基因基因表达

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