检索结果-内蒙古大学图书馆

临床儿科杂志 1990年第5期8卷 347-349,353页

作者：陈诗书上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction PCR)又称体外基因扩增方法,是八十年代中期Mullis发明的一种新分子生物学技术,它能在一根试管内,将所研究的某个目的基因或某一DNA片段在数小时内扩增百万乃至千万倍,若配合适当的限制性内切酶... 详细信息

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction PCR)又称体外基因扩增方法,是八十年代中期Mullis发明的一种新分子生物学技术,它能在一根试管内,将所研究的某个目的基因或某一DNA片段在数小时内扩增百万乃至千万倍,若配合适当的限制性内切酶,毋需放射性同位素辅助就可直接分析基因的结构。只要一根毛发、一个精子。

关键词：聚合酶链反应分子生物学诊治技术

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全长及缺失VLDL受体基因转染的CHO细胞与β-VLDL的结合效应

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第4期16卷 478-482页

作者：冯宁周华屈伸邓耀祖冯宗忱陆国平龚兰生上海第二医科大学瑞金医院心内科上海200025 同济医科大学生化教研室武汉430030

为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ... 详细信息

为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ,转染全长 VLDLR重组体的 CHO细胞结合β- VLDL的能力明显高于转染 VLDLR缺失重组体的 CHO细胞 ,表明人VLDL受体在 CHO细胞中能有效表达 ,而缺失 5个重复序列的

关键词： VLDL受体基因表达 β-VLDL CHO细胞结合效应

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阳离子脂质体介导细胞因子基因对小鼠肝癌抑制的作用

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上海第二医科大学学报 1999年第6期19卷 504-507页

作者：王克敏赵宇张景迎夏爱娣陈诗书上海第二医科大学生化教研室上海市免疫研究所免疫生化室200025

目的观察阳离子脂质体介导细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２基因对小鼠肝癌的抑制作用。方法构建含细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２的质粒载体，用阳离子脂质体ＬｉｐｏｆeｃｔＡＭＩＮＥ或ＤＯＳＰＥＲ介导的含细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－... 详细信息

目的观察阳离子脂质体介导细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２基因对小鼠肝癌的抑制作用。方法构建含细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２的质粒载体，用阳离子脂质体ＬｉｐｏｆeｃｔＡＭＩＮＥ或ＤＯＳＰＥＲ介导的含细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２的质粒ＤＮＡ分别体外转染小鼠肝癌细胞株ＭＭ４５Ｔ．Ｌｉ，并在荷瘤小鼠体内分别直接注射上述阳离子脂质体－ＤＮＡ复合物，观察瘤体大小及小鼠生存期。结果两种阳离子脂质体介导的细胞因子转染后都具有生物学活性，转染效率为１０％左右，瘤内注射后均能延长荷瘤小鼠的生存期。ＤＯＳＰＥＲ介导细胞因子的治疗效果较佳。结论ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ或ＤＯＳＰＥＲ介导细胞因子ＴＮＦ－ａ及ＩＬ－２基因均具有抑制小鼠肝癌生长、延长荷瘤小鼠生存期的作用，ＤＯＳＰＥＲ的效果较好。

关键词：阳离子脂质体细胞因子肝癌基因转移基因治疗

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交叉试验设计资料的等效性检验

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中国临床药理学杂志 2001年第4期17卷 294-297页

作者：姚晨陈峰张高魁刘玉秀陈启光苏炳华上海第二医科大学生物统计教研室!上海　200025 南京东南大学医学院医学统计教研室!南京　210037 南京军区南京总医院!南京　210002 南通医学统计教研室!南通　226001 解放军总医院医学统计教研室!北京　100853

交叉试验是新药临床试验中常用的一种实验设计方法，一般用于比较两种或多种药物或处理的效应是否相同。本文探讨了交叉试验设计资料的两种等效性检验方法，即双单侧ｔ检验和可信区间法。对２×２的交叉试验，以及ｍ×ｍ交叉试... 详细信息

交叉试验是新药临床试验中常用的一种实验设计方法，一般用于比较两种或多种药物或处理的效应是否相同。本文探讨了交叉试验设计资料的两种等效性检验方法，即双单侧ｔ检验和可信区间法。对２×２的交叉试验，以及ｍ×ｍ交叉试验（ｍ＞２）中单纯比较两种处理时，双单侧ｔ检验与可信区间法是等价的；对复杂的对比情形只能用可信区间法。交叉试验的等效性检验是基于交叉试验方差分析中的误差均方计算的。

关键词：临床试验交叉设计等效性检验双单侧检验可信区间

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绿色荧光蛋白GFP在转化细胞和肿瘤细胞中的表达

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上海第二医科大学学报 2000年第5期20卷 408-411页

作者：于丽莉陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室人类基因治疗研究中心上海200025

目的在肿瘤基因治疗研究中建立一个用绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)为标记基因的合适条件。　方法用带有GFP突变体的质粒转染到表达细胞 ,观察GFP瞬时表达的情况 :1 直接测定GFP在COS- 7细胞中的表达并观察表达的稳定性... 详细信息

目的在肿瘤基因治疗研究中建立一个用绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)为标记基因的合适条件。　方法用带有GFP突变体的质粒转染到表达细胞 ,观察GFP瞬时表达的情况 :1 直接测定GFP在COS- 7细胞中的表达并观察表达的稳定性 ;2 比较不同启动子驱动的 pcDNA3 - EGFP和 pSVK3 -S6 5T两种质粒在不同肿瘤细胞中的转染效率 ;3 用LacZ基因与GFP基因共转染 48h后 ,通过FACS分选测定两种基因在同一细胞中的表达情况。　结果在不同条件下的活细胞中有GFP基因表达 ,且表达具有稳定性 ,表达持续约 2周左右 ;CMV启动子和SV4 0 启动子调控的GFP对不同肿瘤细胞株的转染效率有差异。当两种基因共转染后用FACS分选 ,选出GFP细胞带有LacZ基因细胞在 1∶4时可达 85 %以上。　结论通过GFP表达可连续而直接地观察活细胞中的基因表达 ,利用GFP可快速地挑选带有靶基因的细胞。

关键词： GFP表达标记基因肿瘤基因治疗绿色荧光蛋白

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用多聚酶链反应直接检测鼻咽癌组织中EB病毒DNA

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上海医学 1991年第10期14卷 584-586页

作者：卢健魏洋沈清吴婷蒋松娟陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室黄浦区中心医院病理科

鼻咽癌患者体内 EB(Epstein-Barr)病毒的检测,目前常用血清学的方法,特异性和敏感性较差,对 WHO-Ⅰ型者阳性检出率亦较低,近年来用核素标记的探针进行分子杂交,可提高检出率,但需用放射性核素和较多的新鲜癌组织。本文介绍用多聚酶链反... 详细信息

鼻咽癌患者体内 EB(Epstein-Barr)病毒的检测,目前常用血清学的方法,特异性和敏感性较差,对 WHO-Ⅰ型者阳性检出率亦较低,近年来用核素标记的探针进行分子杂交,可提高检出率,但需用放射性核素和较多的新鲜癌组织。本文介绍用多聚酶链反应(PCR)直接检测石蜡包埋鼻咽癌组织中 ER病毒 DNA 的方法。

关键词：鼻咽肿瘤 EB病毒聚合酶链反应

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NB_4细胞生物学特性与维甲酸诱导分化机理研究

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中华物理医学杂志 1996年第3期18卷 159-162页

作者：石学耕史桂英朱军陈赛娟陈竺上海第二医科大学生物物理教研室 200025 附属瑞金医院血液学研究所

研究了NB_4细胞多项生物学参数及三种维甲酸(RA)对NB_4细胞增殖分化的影响,以探求RA诱导分化的机理。形态学观察、细胞生长曲线、DNA含量分析、Brda掺入、膜分化抗原测定、硝基蓝四唑(NBT)试验等研究表明,NB_4细胞DI=1.73,T_D=24.9小时,... 详细信息

研究了NB_4细胞多项生物学参数及三种维甲酸(RA)对NB_4细胞增殖分化的影响,以探求RA诱导分化的机理。形态学观察、细胞生长曲线、DNA含量分析、Brda掺入、膜分化抗原测定、硝基蓝四唑(NBT)试验等研究表明,NB_4细胞DI=1.73,T_D=24.9小时,T_c、T_s、T(??)分别为5.1、15.4、4.4小时;NB_4细胞诱导分化过程中,前48小时伴有明显的细胞增殖;RA诱导分化作用不表现细胞周期特异性。在浓度为10^(-8)mol/L下,三种RA的效应强度为9c-RA>ATRA>13c-RA。实验结果对阐明RA诱导早幼粒白血病细胞分化的作用机理,解释其临床疗效与副反应有一定价值,并对评价新型RA提供依据。

关键词： NB4细胞维甲酸诱导分化白血病

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PET脑视功能区自动提取的研究

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上海第二医科大学学报 2003年第1期23卷 24-27页

作者：张剑戈王成潘家普郭万华李培勇江旭峰朱承谟上海第二医科大学生物医学工程教研室上海200025 瑞金医院核医学科

目的建立自动提取脑部功能区的方法。方法通过非线性的空间变换将PET图像经过图像配准和图像形变两个步骤,归一化到Talairach坐标系,根据图谱中脑功能区的坐标,在3D图像中提取相应的功能区;为验证功能区提取的有效性,对志愿者带眼罩和... 详细信息

目的建立自动提取脑部功能区的方法。方法通过非线性的空间变换将PET图像经过图像配准和图像形变两个步骤,归一化到Talairach坐标系,根据图谱中脑功能区的坐标,在3D图像中提取相应的功能区;为验证功能区提取的有效性,对志愿者带眼罩和不带眼罩各14例,加光刺激,提取视区并染色,计算经小脑归一化后的平均密度值。结果两组视区平均密度值显著性差异(P<0.001);视区位置符合解剖学定义。结论自动提取功能区的方法是有效的。

关键词：视区配准空间归一化 PET 断层显像技术

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丹参有效部位(丹参-9403)对骨折愈合的骨计量学研究

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中国中西医结合杂志 2000年第S1期20卷 116-117页

作者：符诗聪史炜镔张昊杜宁张凤华王晓达秦国伟周天锡佘其龙胡庆沈江兰英上海市第二医科大学附属瑞金医院伤科上海200025 中国科学院上海药物所植化室上海市第二医科大学生物物理教研室

丹参对骨折愈合有益,这是近年来广大临床与从事骨伤科科研的医务工作者所公认的事实,我们在运用丹参注射液观察其对骨折愈合的影响之后,又开始了用丹参有效部位观察其对骨折愈合的研究工作,现继续报道如下。材料与方法1 实验动物与手术... 详细信息

丹参对骨折愈合有益,这是近年来广大临床与从事骨伤科科研的医务工作者所公认的事实,我们在运用丹参注射液观察其对骨折愈合的影响之后,又开始了用丹参有效部位观察其对骨折愈合的研究工作,现继续报道如下。材料与方法1 实验动物与手术方法健康成年 Wistar 大鼠60只,体重180～200g,雌雄各半,由中国科学院上海分院实验动物中心提供。将大鼠麻醉后仰卧位固定于鼠板上,手术取前臂前外侧切口,长约0.8cm,切开皮肤,深筋膜,从前臂伸肌与屈肌之间,桡动脉外侧分离暴露桡骨中段,在旋前圆肌止点下方1mm 处用骨剪咬断桡骨,造成双侧标准骨折,逐层缝合后随机分组。

关键词：丹参有效部位大鼠活血祛瘀药骨折愈合

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D-半乳糖对大鼠空间学习记忆行为与脑海马结构电生理以及突触形态学的影响(英文)

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中国临床康复 2005年第37期9卷 172-175页

作者：原淑娟张志雄吴定宗邱虹丁文龙上海中医药大学上海中医药大学生理学教研室上海市201203 上海第二医科大学解剖学教研室上海市200025

背景:学习记忆障碍是衰老的主要表现之一,D-半乳糖致衰老模型是近年来常用的动物模型,长期D-半乳糖处理可引起动物神经细胞形态学的改变。目的:对D-半乳糖引起拟衰老改变时大鼠的空间学习记忆行为进行观察,并结合其体内诱导海马齿状回... 详细信息

背景:学习记忆障碍是衰老的主要表现之一,D-半乳糖致衰老模型是近年来常用的动物模型,长期D-半乳糖处理可引起动物神经细胞形态学的改变。目的:对D-半乳糖引起拟衰老改变时大鼠的空间学习记忆行为进行观察,并结合其体内诱导海马齿状回长时程增强以及海马CA3区突触形态学的变化予以探讨。设计:随机对照观察。单位:上海第二医科大学解剖学教研室,上海中医药大学生理学教研室。材料:实验于2000-08/2001-04在上海中医药大学生理学教研室完成。选取3月龄雄性Wistar大鼠22只,随机分正常组和D-半乳糖组,11只/组。D-半乳糖(上海化学试剂二厂),Morris水迷宫(上海中医药大学老年所提供,自制)。方法:正常组每天皮下注射生理盐水1mL,D-半乳糖组每天皮下注射D-半乳糖800mg/kg,连续给药6周。大鼠空间学习记忆行为以Morris水迷宫潜伏期作为判定标准;应用体内记录单脉冲刺激穿通纤维在海马齿状回诱发的群体电位,测量高频刺激前后单脉冲刺激诱发的电位幅值变化,将高频刺激前的记录作为基线值,进行组间比较;应用透射电镜结合图像分析对大鼠海马CA3区突触形态结构进行观察。水迷宫潜伏期采用重复测量设计的方差分析,长时程增强各时段群体电位峰值潜伏期的组间差异采用t检验,长时程增强的诱导率用χ2检验,用XY-540型生物图像处理系统对电镜突触照片进行测量,对所得数据进行t检验。主要观察指标:①主要结局:Morris水迷宫潜伏期测试成绩以及长时程增强诱导率、群体电位的变化。②次要结局:海马CA3区突触形态结构的变化。结果:实验纳入大鼠22只,水迷宫测试中无脱落,其后在电生理实验中正常组和D-半乳糖组各有1只死亡,最后每组随机抽取3只用于电镜观察。①两组Morris水迷宫潜伏期成绩的比较:与正常组比较,D-半乳糖组寻找水下平台潜伏期明显延长[(14.77±10.10),(51.36±12.45)s,P<0.05]。②高频刺激前正常组与D-半乳糖组海马齿状回诱发电位的比较:两组群体电位幅值及群体电位潜伏期均无明显差异[(1.05±0.47),(0.91±0.41)mV;(5.46±2.09),(5.38±2.26)ms;P>0.05]。③两组齿状回长时程增强诱导率比较:与正常组比较,高频刺激后D-半乳糖组明显降低(80%,20%,χ2=7.20,P<0.01)。④两组高频刺激后不同时间段的群体电位比值的比较:与正常组比较,D-半乳糖组于高频刺激后20,30,60min均明显降低(1.104±0.196,0.919±0.162;1.354±0.212,0.999±0.219;1.236±0.174,0.875±0.311;P<0.05)。⑤两组大鼠海马CA3区突触结构各参数的比较:与正常组比较,D-半乳糖组海马CA3区突触后致密物厚度变薄[(40.60±18.26),(26.35±8.15)nm,P<0.05],突触间隙宽度增大[(17.69±6.28),(26.95±5.67)nm,P<0.05],突触活性区长度缩短[(265.13±76.50),(229.13±90.68)nm,P<0.05]。结论:皮下注射D-半乳糖可损害大鼠的空间学习记忆能力,降低大鼠在体海马齿状回长时程增强诱导率,使长时程增强增幅降低,并可显著影响大鼠脑海马CA3区的突触超微结构。提示D-半乳糖对大鼠海马齿状回长时程增强诱导的抑制和对CA3区突触形态结构的影响,是其导致空间学习记忆行为障碍的基础。

关键词：半乳糖迷宫学习长时程增强突触海马

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