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蚌埠医学院学报 2004年第5期29卷 385-387页

作者：王忠陈红袁文俊徐美英朱文忠安徽省黄山市532医院麻醉科安徽黄山245041 上海第二医科大学药理学教研室上海200025 第二军医大学生理学教研室上海200433 上海市胸科医院麻醉科上海200032 第二军医大学长海医院麻醉科上海200433

目的 :通过测定离体大鼠工作心脏冠脉流出液儿茶酚胺浓度 ,研究丙泊酚对离体大鼠心脏缺血再灌注损伤后心律失常及心肌代谢的保护作用。方法 :正常雄性SD大鼠 ,随机分成两大组 ,第一大组为正常大鼠组 ,随机分为对照组、丙泊酚 1 0 μmol... 详细信息

目的 :通过测定离体大鼠工作心脏冠脉流出液儿茶酚胺浓度 ,研究丙泊酚对离体大鼠心脏缺血再灌注损伤后心律失常及心肌代谢的保护作用。方法 :正常雄性SD大鼠 ,随机分成两大组 ,第一大组为正常大鼠组 ,随机分为对照组、丙泊酚 1 0 μmol组 (P1 0组 )、5 0 μmol组 (P5 0组 )、1 0 0 μmol组 (P1 0 0组 )四小组 (每组 1 0只 ) ;第二大组为儿茶酚胺耗竭组 ,随机分为生理盐水对照组 (SC组 )、耗竭组 (DC组 )、耗竭加丙泊酚 5 0 μmol组 (DP组 ) (每组 1 0只 )。建立大鼠离体工作心脏模型 ,测定冠脉流出液中儿茶酚胺和肌酸激酶 (CK)浓度 ,测量每组动物离体心脏单发室性期前收缩 (VBP)、连发室性期前收缩 (SALVO)、室性心动过速 (VT)、室性纤维性颤动 (VF)的发生频率。结果 :缺血前各组心律失常发生率都很低 ,各组儿茶酚胺含量测不出 ,CK值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。再灌注期间 ,P1 0、P5 0、P1 0 0、DC和DP组心律失常发生的频率、种类和严重程度均比对照组明显减轻 (P <0 .0 1 ) ,丙泊酚各组肾上腺素 (E)和去甲肾上腺素 (NE)显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,各组多巴胺含量差异均无显著性(P >0 .0 5 )。儿茶酚胺耗竭组中DC组和DP组冠脉流出液未测出儿茶酚胺 ;丙泊酚各组CK值明显低于对照组 (P <0 .0 1 )。结?

关键词：缺血再灌注丙泊酚心律失常大鼠

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随机对照试验的安全性评价

随机对照试验的安全性评价

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2004年全国卫生统计学术会议

作者：刘玉秀姚晨陈峰张高魁夏结来陈启光苏炳华第四军医大学卫生统计教研室，西安 226001 解放军总医院医学统计教研室，北京 100853 南京医科大学卫生统计教研室，南京 210019 东南大学医学院流行病学与生物统计系，南京 210009 上海第二医科大学生物统计教研室，上海 200025

临床试验的安全性评价是与有效性评价同样重要的一个方面。即便是已经上市的药品，也需要密切关注安全性问题。临床试验的阶段性不同，安全性评价的目的有所区别，本文主要综述和探讨药物上市前设立对照的临床试验中有关安全性评价的问题。

关键词：临床试验随机对照试验安全性评价药物试验卫生统计学

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美西律对QT延长综合症模型的作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第4期24卷 30-34+97页

作者：王红卫郑燕倩杨智昉李慈珍刘远谋上海第二医科大学生理教研室上海第二医科大学生理教研室上海 200025 中国

目的:制备LQT3模型(一种QT延长综合症),研究美西律对LQT3模型的作用。方法:用ATX Ⅱ制备LQT3模型,在钠通道、动作电位和心电图三个水平观察美西律对豚鼠LQT3模型的作用。结果:用ATX Ⅱ作用后,心肌细胞的钠通道长期开放模式的发生频率和... 详细信息

目的:制备LQT3模型(一种QT延长综合症),研究美西律对LQT3模型的作用。方法:用ATX Ⅱ制备LQT3模型,在钠通道、动作电位和心电图三个水平观察美西律对豚鼠LQT3模型的作用。结果:用ATX Ⅱ作用后,心肌细胞的钠通道长期开放模式的发生频率和开放时间常数显著性增加:动作电位APD50和APD90分别延长25.8％、26.1％;0期最大除极速度增加12％:QT间期和QTc分别增加12.8％和16.9％。在ATX Ⅱ存在的同时加入美西律(0.7 mmol/L),钠通道的开放几率明显降低。ATX Ⅱ(40 nmol/L)使动作电位时程延长后,美西律(1,5,15,45,70 μmol/L)使APD50分别缩短0.5％,6.7％,14.4％,19.4％,18.8％,同时也使APD90,Vmax呈相应的减小。在整体动物心电图记录中,美西律呈剂量依赖性缩短由ATX Ⅱ引起的QT和QTc延长效应。结论:美西律可以用来治疗LQT3。

关键词：美西律 QT延长综合症膜片箝技术动作电位心电描记术

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银杏苦内酯B对豚鼠模拟缺血心室肌细胞L-型钙电流及胞内游离钙的影响

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生理学报 2003年第1期55卷 24-28页

作者：张志雄祁小燕徐有秋上海第二医科大学生理教研室上海200032 上海200025 上海中医药大学生理教研室

应用全细胞膜片钳及激光共聚焦技术 ,研究银杏苦内酯B(ginkgolideB ,GB)对豚鼠心室肌细胞L 型钙电流及胞内游离钙的作用 ,并探讨GB心肌保护作用的机制。实验结果显示 ,在指令电压为 0mV时 ,GB对生理状态下豚鼠心室肌细胞L 型钙电流无明... 详细信息

应用全细胞膜片钳及激光共聚焦技术 ,研究银杏苦内酯B(ginkgolideB ,GB)对豚鼠心室肌细胞L 型钙电流及胞内游离钙的作用 ,并探讨GB心肌保护作用的机制。实验结果显示 ,在指令电压为 0mV时 ,GB对生理状态下豚鼠心室肌细胞L 型钙电流无明显作用。在模拟缺血状态下 ,L 型钙峰值电流减小 3 7 71% ,但加入 1μmol/LGB后 ,可逆转缺血引起的L 型钙电流的降低 ,与缺血对照组比较 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。 1μmol/LGB能使由于模拟缺血而上移的L 型钙电流电压曲线回复正常。在生理状态下 ,0 1、1、10mol/LGB分别使心肌细胞内游离钙降低 10 5 8%(n =12 )、17 2 7% (n =12 )、16 3 5 % (n =10 ) ,与对照组相比有非常显著性差异。模拟缺血液灌流 12min时 ,细胞内游离钙浓度增加 2 0 15 % ,在模拟缺血液中分别加入 1μmol/Lnifedipine或 5mmol/LNiCl2 ,结果显示 :模拟缺血液灌流 12min ,与正常对照组相比细胞内钙分别增加 18 18% (P >0 0 5 )与 11% (P <0 0 5 )。在模拟缺血液中加入1mol/LGB灌流 12min时细胞内钙仅增加 9 60 % (n =12 ,P <0 0 0 1) ,与缺血对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结果表明 ,GB可逆转模拟缺血造成L 型钙电流的降低 ,同时可部分减轻由于缺血所造成的细胞内钙的超载

关键词：银杏苦内酯B 心室肌细胞缺血 L-型钙电流细胞内游离钙

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电离辐射调控脂质体介导的CDglyTK基因杀伤人肝癌细胞

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第1期35卷 64-70页

作者：厉兴君王克敏徐悦王中和夏爱娣陈诗书钱关祥上海第二医科大学生物化学教研室上海第二医科大学生物化学教研室上海第二医科大学生物化学教研室上海市第九人民医院放射科上海第二医科大学生物化学教研室上海第二医科大学生物化学教研室上海第二医科大学生物化学教研室人类基因治疗研究中心上海200025 人类基因治疗研究中心上海200025 人类基因治疗研究中心上海200025 上海200011 人类基因治疗研究中心上海200025 人类基因治疗研究中心上海200025 人类基因治疗研究中心上海200025

利用EGR 1启动子、CDglyTK构建pcDNA3 EGR CDglyTK重组载体 ,以pcDNA3 CMV CDglyTK质粒为对照 ,经阳离子脂质体LipofectAMINE介导转染人肝癌 740 2细胞株 ,给予不同剂量 γ射线照射 ,通过Northern印迹、Western印迹分析 ,结果表明电离... 详细信息

利用EGR 1启动子、CDglyTK构建pcDNA3 EGR CDglyTK重组载体 ,以pcDNA3 CMV CDglyTK质粒为对照 ,经阳离子脂质体LipofectAMINE介导转染人肝癌 740 2细胞株 ,给予不同剂量 γ射线照射 ,通过Northern印迹、Western印迹分析 ,结果表明电离辐射可诱导转染pcDNA3 EGR CDglyTK肿瘤细胞中CDglyTK的表达 ,并呈剂量依赖性 ;而在pcDNA3 CMV CDglyTK实验组中无此诱导特性。转染pcDNA3 EGR CDglyTK的肿瘤细胞单独给予 8Gy的 γ 射线处理未见细胞明显死亡 ,而电离辐射与前药 [5 FC(fluorocytosine) +GCV]的联合大大增强了杀伤肿瘤细胞的作用。研究结果证实EGR 1启动子具有电离辐射诱导特性 ,同时提示CMV启动子无此特性 ;5 FC与GCV的配伍有协同效应 ,电离辐射可明显增强肿瘤细胞对 5 FC、GCV的敏感性 ,其细胞毒性大于单独自杀基因或单独放疗。

关键词：电离辐射 CDglyTK EGR-1启动子阳离子脂质体

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sOVA-linker-β2m融合蛋白构建表位特异的靶结构

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 345-349页

作者：钱丽张兴黔钱关祥上海第二医科大学生物化学教研室 200025

目的　构建融合基因sOVA linker β2m ,探讨通过内源性途径递呈的肽在细胞表面形成MHCⅠ类分子复合物的情况。方法　构建了真核表达载体pcDNA3/sOVA linker β2m及不含有 β2m基因的对照载体 ,以研究 β2m是否能在此过程中起到辅助的作... 详细信息

目的　构建融合基因sOVA linker β2m ,探讨通过内源性途径递呈的肽在细胞表面形成MHCⅠ类分子复合物的情况。方法　构建了真核表达载体pcDNA3/sOVA linker β2m及不含有 β2m基因的对照载体 ,以研究 β2m是否能在此过程中起到辅助的作用。结果　RT PCR与原位杂交结果显示在各转导细胞中均有融合基因的正确表达 ,且二者的表达水平差异无显著性 (P >0 .0 5 )。进一步对细胞内、细胞表面H 2Kb OVA复合物的分布进行分析 ,表明各转导细胞中均有正确的蛋白质分子翻译合成 ,并能表达在细胞表面 ,但融合有 β2m基因的EL4 /eb2m细胞的表达量远远高于没有融合 β2m基因的转导细胞EL4 /OVA。结论　β2m基因与特异性抗原肽的融合 ,易于形成稳定的MHCⅠ类分子复合物 ,提高抗原呈递效率。

关键词： β2m基因 MHCⅠ类分子基因表达卵清白蛋白

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不同浓度腺苷对正常及“缺血”绵羊浦肯野纤维I_f离子流的影响

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上海第二医科大学学报 2003年第3期23卷 227-230页

作者：富冀枫胡优敏张照徐有秋上海第二医科大学生理教研室上海200025

目的研究不同浓度腺苷(Ado)对正常、“缺血”浦肯野纤维起搏离子流If的影响。方法成年绵羊离体心室浦肯野纤维分为对照组、10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组、缺血加10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组。用双微电极电压钳制术,分别观察在膜电位-70... 详细信息

目的研究不同浓度腺苷(Ado)对正常、“缺血”浦肯野纤维起搏离子流If的影响。方法成年绵羊离体心室浦肯野纤维分为对照组、10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组、缺血加10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组。用双微电极电压钳制术,分别观察在膜电位-70-(-120mV)各指令电位的If幅值和激活时间。结果 10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组If幅值降低,激活曲线向超极化方向移位,呈一定的剂量依赖性,但激活时间无明显改变。“缺血”液灌流后If幅值降低(n=10,P<0.05-0.01),激活曲线向超极化方向移位,激活时间延长;缺血加10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado组则If幅值进一步减少(n=10,P<0.05-0.01),加剧了“缺血”对If离子流的抑制作用(n=10,P<0.05),也呈一定的剂量依赖性。结论 10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado对正常自律活动有抑制作用,呈一定的剂量依赖性,“缺血”时,10^(-6)-10^(-4)mol/L Ado能使已受抑的自律活动进一步受抑,也呈一定的剂量依赖性。

关键词：腺苷起搏离子流心肌缺血双微电极电压钳制术剂量依赖性心电生理学

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核心蛋白聚糖对肾间质成纤维细胞特性作用的研究

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中华肾脏病杂志 2003年第5期19卷 310-314页

作者：王伟铭陈楠卢健陈诗书董德长上海第二医科大学附属瑞金医院肾脏科 200025 上海第二医科大学生化教研室

目的通过基因转染技术,将核心蛋白聚糖(DCN)转染成纤维细胞,观察DCN在成纤维细胞中的表达,及其表达的DCN对肾间质成纤维细胞特性的影响,探索肾脏疾病基因治疗的途径。方法在成功构建重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的基础上,采用Lipofect... 详细信息

目的通过基因转染技术,将核心蛋白聚糖(DCN)转染成纤维细胞,观察DCN在成纤维细胞中的表达,及其表达的DCN对肾间质成纤维细胞特性的影响,探索肾脏疾病基因治疗的途径。方法在成功构建重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的基础上,采用LipofectAMINE脂质体介导质粒DNA转染逆转录病毒包装细胞PA317,进行逆转录病毒的包装。以NIH 3T3细胞作为指标靶细胞进行病毒滴度测定。重组逆转录病毒在Polybrene的辅佐下感染正常大鼠肾间质成纤维细胞,并应用G418筛选。所得抗G418细胞克隆FB(LDCNSN)应用PCR和逆转录-PCR分析外源基因的整合和表达。采用Western印迹检测转基因细胞FB(LDCNSN)培养细胞上清液中DCN蛋白的检测。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪分别测定细胞增殖和细胞周期,观察DCN对肾间质成纤维细胞增殖和细胞周期的影响。结果重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的质粒DNA经LipofectAMINE介导,转染PA317包装细胞。G418筛选出抗性克隆,扩增。收集含重组逆转录病毒细胞上清液,在Polybrene的辅佐下感染大鼠肾间质成纤维细胞,并获得抗G418的细胞克隆FB(LDCNSN)。PCR和逆转录-PCR分析外源基因DCN的整合和表达,电泳可见1.1kb的条带。Western印迹分析FB(LDCNSN)细胞培养上清液中DCN蛋白质,证实FB(LDCNSN)表达DCN蛋?

关键词：核心蛋白聚糖肾间质成纤维细胞特性转化生长因子逆转录病毒基因疗法

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核心蛋白聚糖基因治疗肾功能衰竭大鼠的实验研究

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中华肾脏病杂志 2003年第6期19卷 355-359页

作者：王伟铭陈楠卢健王朝晖李娅陈诗书董德长上海第二医科大学附属瑞金医院肾脏科 200025 上海第二医科大学生化教研室

目的利用已转染核心蛋白聚糖(DCN)的成纤维细胞可表达DCN,以中和肾功能衰竭(肾衰)大鼠肾组织内增高的TGF-β1活性,探索基因治疗肾功能不全的新途径。方法选用雄性SD大鼠在无菌条件下采用5/6肾脏大部分切除。假手术组(A组)6只,5/6肾切... 详细信息

目的利用已转染核心蛋白聚糖(DCN)的成纤维细胞可表达DCN,以中和肾功能衰竭(肾衰)大鼠肾组织内增高的TGF-β1活性,探索基因治疗肾功能不全的新途径。方法选用雄性SD大鼠在无菌条件下采用5/6肾脏大部分切除。假手术组(A组)6只,5/6肾切除肾衰大鼠模型建立后随机分组,手术对照组(不予任何处理,为B组)10只,空白对照组[成纤维细胞FB(LXSN)细胞处理组,为C组110只,治疗组[FB(LDCNSN)细胞处理组,为D组]10只。4周后观察体重、血脂、肾功能、肾组织病理学变化,并应用免疫组织化学方法检测肾组织内TGF-β1和DCN的表达。结果经不同处理4周后,各组大鼠在体重和血脂方面各组之间差异无显著性意义。D组大鼠BUN、Scr水平与C组相比有显著下降(P<0.05),而与其基础值相比较虽有所升高,但差异无显著性意义。D组肾衰大鼠4周后,DCN在肾组织内的表达明显增加,与各组比较,差异有显著性意义;而TGF-β1的表达与B组和C组比较差异无显著性意义。同时,病理上也显示D组大鼠肾间质损害明显减轻,与B组和C组比较,差异有显著性意义。结论通过转染DCN的成纤维细胞转导至肾脏,可在肾脏局部表达DCN。高表达的DCN可改善肾纤维化,延缓肾衰的进程。

关键词：核心蛋白聚糖基因治疗肾功能衰竭实验研究基因转染肾间质

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成纤维细胞生长因子受体的结构与功能

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上海第二医科大学学报 2003年第2期23卷 176-179页

作者：叶展赵涵芳钱关祥上海第二医科大学生化教研室上海200025

目前已发现的成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)家族至少有19个成员(FGF1-19)[1],它们在发育、血管生成、创伤愈合中有重要作用.而它们的功能是通过与成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor, FGFR... 详细信息

目前已发现的成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)家族至少有19个成员(FGF1-19)[1],它们在发育、血管生成、创伤愈合中有重要作用.而它们的功能是通过与成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor, FGFR)结合后,经过信号传递系统,激活相应的基因而实现的.本文主要介绍FGFR结构和功能的基础知识与研究近况.

关键词：成纤维细胞生长因子受体结构功能信号传递

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