检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第26期9卷 179-181页

作者：张毅苏敏蔡琰上海第二医科大学附属仁济医院神经内科神经生物学实验室上海市200001

目的:观察体外培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2无血清培养条件下分化成神经细胞过程中,细胞内脂质过氧化的主要产物-丙二醛和自由基清除剂超氧化物歧化酶的变化,探讨脂质过氧化反应程度和抗氧化能力与细胞老化的相关性。方法:实验于2004-0... 详细信息

目的:观察体外培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2无血清培养条件下分化成神经细胞过程中,细胞内脂质过氧化的主要产物-丙二醛和自由基清除剂超氧化物歧化酶的变化,探讨脂质过氧化反应程度和抗氧化能力与细胞老化的相关性。方法:实验于2004-04/2005-02在上海第二医科大学附属仁济医院神经内科神经生物学实验室进行。①建立神经细胞老化实验模型:传代培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2中加入无血清培养液后,在37℃、含体积分数为0.05的CO2的空气中培养,24h后换培养液,以后每隔3d更换培养液;按不同的培养天数分为培养1,7和14d组,各组在培养至相应的天数后终止培养。②评估神经细胞变化的指标检测:采用显微荧光分光光度计测定细胞老化指标脂褐素水平(相对荧光值)反映细胞老化程度;以比色法测定细胞内丙二醛浓度评估细胞脂质过氧化程度,亚硝酸盐比色法得出超氧化物歧化酶活性反映细胞的抗氧化能力。结果:①细胞内脂褐素相对荧光值:培养1,7和14d组分别是(11.55±0.9)%,(22.41±1.99)%和(29.51±4.57)%,组间比较差异显著(F=478.04,P<0.01)。②丙二醛浓度:培养1,7和14d组分别是(0.90±0.20),(1.91±0.19)和(2.98±0.20)μmol/L;组间比较差异显著(F=148.31,P<0.01)。③超氧化物歧化酶活性:培养1,7和14d组分别是(685.30±107.85),(372.07±74.35)和(175.04±29.67)μkat/L:组间比较差异显著(F=66.10,P<0.01)。结论:①随着无血清培养天数的增加,小鼠神经母细胞瘤细胞A2细胞内脂褐素逐渐增多,细胞在不断衰老。②细胞内丙二醛浓度随细胞老化而不断增加,而超氧化物歧化酶活性却随着细胞老化而下降。说明神经细胞的老化与细胞内脂质过氧化反应呈正相关,与细胞的抗氧化能力呈负相关。③体外神经细胞老化实验研究模型是科学和客观的,具有很强的应用价值。

关键词：细胞衰老脂褐素丙二醛超氧化物歧化酶脂质过氧化反应神经细胞老化超氧化歧化酶活性细胞内老化过程超氧化物歧化酶活性

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用多聚酶链反应诊断弓形虫病

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1992年第3期10卷 171-175页

作者：夏爱娣王克敏董泰忠张惠民吴兆平陈诗书杨惠珍徐克继钱宗立上海第二医科大学生化教研室上海第二医科大学分子生物学实验室上海第二医科大学寄生虫学教研室

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS_2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应诊断弓形虫病的方法。不同来源的弓形虫株和7例畸形胎儿DNA经体外基因扩增,扩增产物经电泳检测,均出现特异... 详细信息

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS_2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应诊断弓形虫病的方法。不同来源的弓形虫株和7例畸形胎儿DNA经体外基因扩增,扩增产物经电泳检测,均出现特异的扩增条带。对42例肝炎综合症的婴儿和33例不良生育史的孕妇的外周血白细胞DNA检测,分别为6例和4例阳性。50例正常人外周血白细胞DNA检测均为阴性。对扩增产物进行Southern印迹分析,以^(32)P标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针,能与阳性病例特异的扩增条带杂交,而不与阴性样品的扩增产物杂交。本法并与其它检测方法的结果相比较,具高度特异、敏感且快速的优点。

关键词：聚合酶链反应 DNA诊断弓形体病

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神经降压素对实验性神经细胞内兴奋性氨基酸含量影响的研究

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上海医学 1996年第3期19卷 132-134页

作者：孙晓江蔡琰苏敏王珺张毅邓锦波孙九伶高燕军上海第二医科大学附属仁济医院神经生物学实验室承德医学院附属医院神经生物学实验室

本研究采用小鼠神经母细胞瘤细胞（ＮＢＡ２）无血清培养建立神经细胞实验研究模型。以氨基酸自动分析术观察神经降压素（ＮＴ）对实验性神经细胞内氨基酸类神经递质的影响。结果发现：ＮＴ可使细胞内天门冬氨酸（Ａｓｐ）和谷氨酸（Ｇ... 详细信息

本研究采用小鼠神经母细胞瘤细胞（ＮＢＡ２）无血清培养建立神经细胞实验研究模型。以氨基酸自动分析术观察神经降压素（ＮＴ）对实验性神经细胞内氨基酸类神经递质的影响。结果发现：ＮＴ可使细胞内天门冬氨酸（Ａｓｐ）和谷氨酸（Ｇｌｕ）这两种兴奋性氨基酸含量显著降低（Ｐ＜０．０１），而对抑制性氨基酸中的甘氨酸（Ｇｌｙ）和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）的影响不大（Ｐ＜０．０５）。结果提示：ＮＴ使兴奋性氨基酸Ａｓｐ和Ｇｌｕ含量降低的作用可能是其延缓实验性神经细胞老化的机制之一。

关键词：神经降压素神经细胞天门冬氨酸谷氨酸

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神经递质释放过程中的可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)和相关蛋白

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生物化学与生物物理进展 2002年第1期29卷 35-38页

作者：王堰婷陆佩华盛祖杭上海第二医科大学神经生物学实验室上海200025 美国国家健康研究院突触功能研究室

近年来 ,对突触小泡释放神经递质分子机制的研究迅速发展 ,发现了大量位于神经末梢的蛋白质 .它们之间的相互作用与突触小泡释放神经递质相关 ,特别是位于突触小泡膜上的突触小泡蛋白 /突触小泡相关膜蛋白(synaptobrevin/VAMP) ,位于突... 详细信息

近年来 ,对突触小泡释放神经递质分子机制的研究迅速发展 ,发现了大量位于神经末梢的蛋白质 .它们之间的相互作用与突触小泡释放神经递质相关 ,特别是位于突触小泡膜上的突触小泡蛋白 /突触小泡相关膜蛋白(synaptobrevin/VAMP) ,位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白 (synaptosome associatedproteinof2 5ku) ,三者聚合形成的可溶性NSF附着蛋白受体 (SNARE)核心复合体在突触小泡的胞裂外排、释放递质过程中有重要作用 .而一些已知及未知的与SNARE蛋白有相互作用的蛋白质 ,可通过调节SNARE核心复合体的形成与解离来影响突触小泡的胞裂外排 ,从而可以调节突触信号传递的效率及强度 ,在突触可塑性的形成中起重要作用 .

关键词： SNARE蛋白神经递质释放突触小泡相关蛋白可溶性NSF附着蛋白受体

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神经营养素与免疫细胞的关系

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第1期17卷 95-97页

作者：王堰婷陆佩华上海第二医科大学神经生物学实验室上海市重庆南路280号上海200025

神经营养素家族（ｎｅｕｒｏｔｒｏｎｈｉｎｆａｍｉｌｙ）是近几年发现的神经营养因子（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ）家族，为一类对中枢和外周神经系统都有营养活性的蛋白质。其主要功能是促进神经系统的生长发育，维持... 详细信息

神经营养素家族（ｎｅｕｒｏｔｒｏｎｈｉｎｆａｍｉｌｙ）是近几年发现的神经营养因子（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ）家族，为一类对中枢和外周神经系统都有营养活性的蛋白质。其主要功能是促进神经系统的生长发育，维持神经元的存活，促进神经元的生长和分化。最近发现，它们与其它系统尤其是免疫系统的关系非常密切。各种免疫细胞都有神经营养素及其受体表达，因此，神经营养素可能是神经系统与免疫系统相互联系、相互影响的重要物质基础。本文中就神经营养素及其受体，以及与某些免疫细胞的关系、相互作用的特点等进行了综述。１神经营养素家族概述神经营养素家族是一类神经营养因子。目前，已发现的家族成员包括：神经生

关键词：神经营养素受体免疫细胞神经生长因子脑源性神经营养因子

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NIH3T3细胞中PTPα基因高表达激活Src的早期细胞表型变化

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生物化学与生物物理学报 2002年第2期34卷 193-198页

作者：杨劲松郑新民陈诗书上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心美国康奈尔大学上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心上海200025 纽约14850

利用蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)基因转染NIH3T3细胞 ,研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化 ,为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型。用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导 2 4h后 ,用RT PCR和蛋白质印迹法证实PT... 详细信息

利用蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)基因转染NIH3T3细胞 ,研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化 ,为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型。用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导 2 4h后 ,用RT PCR和蛋白质印迹法证实PTPα在诱导细胞中的表达高于未诱导细胞 ,用RT PCR及蛋白质印迹法发现内源性Src的表达水平在诱导与未诱导细胞中没有变化 ,而Src激酶的活性在诱导细胞中增高 ,并且在诱导细胞中Src的酪氨酸磷酸化水平降低。再用透射式电子显微镜和流式细胞技术观察到诱导细胞的表型已发生变化 ,实验结果表明PTPα诱导 2 4h使细胞的表型开始发生转化 ,这种变化很可能与PTPα表达水平升高使SrcC末端的pTyr52 7去磷酸化而激活Src相关

关键词： PTPα Src 转化

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PTPα高表达致NIH3T3细胞恶变早期相关基因的筛选与鉴定

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生物化学与生物物理学报 2002年第5期34卷 601-607页

利用已建立的蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)诱导表达模型筛选NIH3T3细胞中PTPα诱导表达前后的差别表达基因 ,有利于探索肿瘤早期形成的机制。诱导PTPα表达 2 4h ,用差异显示逆转录PCR获得 6 5条差异片段 ,利用生物信息学方法分析这些... 详细信息

利用已建立的蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)诱导表达模型筛选NIH3T3细胞中PTPα诱导表达前后的差别表达基因 ,有利于探索肿瘤早期形成的机制。诱导PTPα表达 2 4h ,用差异显示逆转录PCR获得 6 5条差异片段 ,利用生物信息学方法分析这些差异片段 ,发现其中含有 2 9种已知基因、1 2种已知EST、6种未知EST ;对已知基因进行功能查询和分析 ,发现它们分别与信号转导、细胞骨架及粘附、转录与翻译、能量代谢、凋亡及核糖体蛋白质相关 ,其中G蛋白基因、TCR基因、类Trx基因、小窝蛋白 1 (caveolin 1 )基因经RT PCR及Northern印迹实验证实了差异表达的真实性。结果表明 ,PTPα诱导表达 2 4h后多种基因发生了表达变化 ,涉及细胞生理多方面的功能 ,其中一些基因在癌变的早期起重要的作用 ,这为深入探讨肿瘤早期形成机制打下基础 ,也可为基因治疗候选靶点的选择提供依据

关键词：蛋白质酪氨酸磷酸酶α 差别表达肿瘤形成机制

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氟哌啶醇在增强脑膜与依托啡结合的同时加强针刺镇痛

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生理学报 1994年第4期46卷 313-319页

作者：汪海宏朱燕华许绍芬上海医科大学神经生物学教研室上海第二医科大学生理教研室

用氚标记依托啡［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ与兔脑匀浆蛋白作受体结合试验，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析的结果显示兔脑内的阿片受体有高低两种亲和力结合，对照组兔脑高亲和力解离常数Ｋｄｌ为２．５７±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ，氟哌... 详细信息

用氚标记依托啡［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ与兔脑匀浆蛋白作受体结合试验，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析的结果显示兔脑内的阿片受体有高低两种亲和力结合，对照组兔脑高亲和力解离常数Ｋｄｌ为２．５７±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ，氟哌啶醇（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ，ｈａｌ）或针刺引起镇痛时，Ｋｄｌ值分别降至１．４４±０．０３ｎｍｏｌ／Ｌ和１．５３±０．０５ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）；当ｈａｌ和针刺合用进一步加强镇痛时，Ｋｄｌ值进一步降至１．２５±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１），提示在ｈａｌ加强针刺镇痛时兔脑阿片受体的亲和力提高。兔脑同［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ作体外受体结合放射自显影，结果显示ｈａｌ加强针刺镇痛时，尾核、视前外侧区、丘脑室旁核、中央正中核、丘脑背外侧核和中脑导水管周围灰质等脑区的阿片受体结合密度均有显著提高。上述结果提示，多巴胺受体拮抗剂ｈａｌ加强针刺镇痛的机制之一，可能是由于产生了脑内阿片受体的上行调节。

关键词：针刺疗法止痛氟哌啶醇依托啡

来源：评论

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SLE患者CD45RA^＋和CD45RO^＋T细胞亚群的变化

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中国免疫学杂志 1995年第6期11卷 374-376页

作者：周同江永梯姚建董德长石学耕史桂英汤雪明上海第二医科大学附属瑞金医院上海第二医科大学细胞生物学实验室

利用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞亚群。结果表明，ＳＬＥ患者ＣＤ４￣＋细胞降低，ＣＤ８￣＋细胞增高，ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋降低；ＣＤ... 详细信息

利用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞亚群。结果表明，ＳＬＥ患者ＣＤ４￣＋细胞降低，ＣＤ８￣＋细胞增高，ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋降低；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋细胞在病情活动期降低，在稳定期回升；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞则在活动期有增高倾向，在稳定期下降；ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋及ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞均在活动期增高，又均在稳定期降至正常水平。提示ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞在ＳＬＥ发病机理中可能占有重要意义。

关键词： SLE CD45 流式细胞术红斑狼疮 T淋巴细胞亚群

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精氨酸加压素对实验性神经细胞老化过程中细胞周期和细胞总蛋白的影响

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中国病理生理杂志 1996年第2期12卷 117-120页

作者：孙晓江蔡琰苏敏王朱华陆钦池邓锦波张毅上海第二医科大学附属仁济医院神经生物学实验室河北省承德医学院附属医院神经生物学实验室

采用小鼠神经母细胞瘤细胞无血清培养，建立神经细胞老化实验研究模型。以流式细胞光度术观察精氨酸加压素（ＡＶＰ）对老化过程中实验性神经细胞的细胞周期和细胞总蛋白的影响。结果发现ＡＶＰ可产生延缓细胞老化的细胞周期和细胞总蛋... 详细信息

采用小鼠神经母细胞瘤细胞无血清培养，建立神经细胞老化实验研究模型。以流式细胞光度术观察精氨酸加压素（ＡＶＰ）对老化过程中实验性神经细胞的细胞周期和细胞总蛋白的影响。结果发现ＡＶＰ可产生延缓细胞老化的细胞周期和细胞总蛋白的变化。提示ＡＶＰ通过使细胞周期、ＤＮＡ和细胞总蛋白等发生变化来发挥其延缓实验性神经细胞老化的作用。

关键词：精氨酸加压素细胞周期神经细胞细胞老化老化

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