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重组牛痘病毒介导的微小基因表达产物OVA257～264在真核细胞中的抗原呈递效率

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第6期34卷 719-724页

作者：钱丽钱关祥上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室上海200025 上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的... 详细信息

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的诱导能力。结果表明四聚体的构建是成功的 ,进一步用已被重组牛痘病毒感染的L92 9 Kb 细胞作为抗原呈递细胞以诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的产生 ,并对活化后特异性CTL进行检测 ,从胞外IFN γ的分泌情况看 ,诱导后的整个群体细胞发生了活化与增殖 ,H 2Kb OVA四聚体对特异性T细胞进行的结合分析与经典的细胞毒效应相一致。可见 ,重组牛痘病毒介导的微小基因产物OVA2 57～ 2 64不仅能为MHC I类分子的合成提供更有效的肽来源 ,且能更有效诱导特异性CTL的产生。

关键词：四聚体重组牛痘病毒微小基因 CTL 抗原肽

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神经末梢突触囊泡释放神经递质过程的调控蛋白

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生理科学进展 2003年第1期34卷 6-10页

作者：蔡倩陆佩华盛祖杭上海第二医科大学神经生物学实验室上海200025

神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个复杂且受到精细调控的过程 ,涉及多种蛋白质间的相互作用。位于突触囊泡膜上的突触囊泡蛋白 /突触囊泡相关膜蛋白 (synaptobrevin/VAMP) ,与位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白SNAP 2 5 ,... 详细信息

神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个复杂且受到精细调控的过程 ,涉及多种蛋白质间的相互作用。位于突触囊泡膜上的突触囊泡蛋白 /突触囊泡相关膜蛋白 (synaptobrevin/VAMP) ,与位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白SNAP 2 5 ,三者聚合形成的可溶性N 甲基马来酰胺敏感因子 (NSF)附着蛋白受体 (SNARE)核心复合物是突触囊泡胞吐过程中的核心成分。本文主要围绕参与突触囊泡胞吐过程 ,以及调节SNARE核心复合物的形成 ,解离及其功能的蛋白质。

关键词：神经递质胞吐突触囊泡 SNARE蛋白调控蛋白

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神经营养因子与神经干细胞

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生理科学进展 2002年第4期33卷 313-316页

作者：孙勇侍坚陆佩华上海第二医科大学神经生物学实验室上海200025

生长因子在神经干细胞的增殖、分化和存活过程中有重要作用。神经营养因子是其中的一类,它包括神经生长因子(NGF)家族、胶质源性神经营养因子(GDNF)家族和其它神经营养因子。NGF家族包括NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5和NT-6。这一家族可促进 ... 详细信息

生长因子在神经干细胞的增殖、分化和存活过程中有重要作用。神经营养因子是其中的一类,它包括神经生长因子(NGF)家族、胶质源性神经营养因子(GDNF)家族和其它神经营养因子。NGF家族包括NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5和NT-6。这一家族可促进 epidermic growth facter (EGF)反应性海马及前脑室管膜下区神经干细胞的存活和分化。GDNF家族包括GDNF、NTN、PSP和ART。GDNF家族促神经发育的作用主要在外周,它促进肠神经嵴前体细胞的存活和增殖,且对外周感觉神经的发育至关重要。其它生长因子如bFGF和EGF,它们能促进神经干细胞增殖和存活;CNTF和LIF等在神经干细胞的分化中也有重要作用。

关键词：神经营养因子神经干细胞神经发育

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氟哌啶醇在增强脑膜与依托啡结合的同时加强针刺镇痛

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生理学报 1994年第4期46卷 313-319页

作者：汪海宏朱燕华许绍芬上海医科大学神经生物学教研室上海第二医科大学生理教研室

用氚标记依托啡［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ与兔脑匀浆蛋白作受体结合试验，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析的结果显示兔脑内的阿片受体有高低两种亲和力结合，对照组兔脑高亲和力解离常数Ｋｄｌ为２．５７±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ，氟哌... 详细信息

用氚标记依托啡［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ与兔脑匀浆蛋白作受体结合试验，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析的结果显示兔脑内的阿片受体有高低两种亲和力结合，对照组兔脑高亲和力解离常数Ｋｄｌ为２．５７±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ，氟哌啶醇（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ，ｈａｌ）或针刺引起镇痛时，Ｋｄｌ值分别降至１．４４±０．０３ｎｍｏｌ／Ｌ和１．５３±０．０５ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）；当ｈａｌ和针刺合用进一步加强镇痛时，Ｋｄｌ值进一步降至１．２５±０．３３ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１），提示在ｈａｌ加强针刺镇痛时兔脑阿片受体的亲和力提高。兔脑同［３Ｈ］－ｅｔｏｒｐｈｉｎｅ作体外受体结合放射自显影，结果显示ｈａｌ加强针刺镇痛时，尾核、视前外侧区、丘脑室旁核、中央正中核、丘脑背外侧核和中脑导水管周围灰质等脑区的阿片受体结合密度均有显著提高。上述结果提示，多巴胺受体拮抗剂ｈａｌ加强针刺镇痛的机制之一，可能是由于产生了脑内阿片受体的上行调节。

关键词：针刺疗法止痛氟哌啶醇依托啡

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蛋白质在神经元突起的局部合成

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生理科学进展 2004年第3期35卷 259-261页

作者：鲁立陆佩华盛祖杭上海第二医科大学神经生物学实验室上海200025

神经元是有极性的细胞 ,从胞体发出树突和轴突分别作为其信息的接受端和输出端。这些远离胞体的突起可根据神经元活动或外界环境的变化进行不依赖胞体的蛋白质局部合成。

关键词：神经元蛋白质树突轴突发育神经再生

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少突胶质细胞生物学功能与相关疾病研究进展

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生理科学进展 2004年第1期35卷 39-41页

作者：胡建国陆佩华徐晓明上海第二医科大学神经生物学实验室上海200025

长期以来认为 ,少突胶质细胞的作用仅限于形成中枢神经系统髓鞘。但近年的研究表明 ,少突胶质细胞也可分泌一些神经营养因子和生长因子 ,并表达多种轴突生长抑制分子 ,在生理和病理状态下广泛发挥作用。少突胶质细胞与多发性硬化症、创... 详细信息

长期以来认为 ,少突胶质细胞的作用仅限于形成中枢神经系统髓鞘。但近年的研究表明 ,少突胶质细胞也可分泌一些神经营养因子和生长因子 ,并表达多种轴突生长抑制分子 ,在生理和病理状态下广泛发挥作用。少突胶质细胞与多发性硬化症、创伤性脊髓损伤、少突胶质细胞瘤等中枢神经系统疾病密切相关 ,参与这些疾病的病理过程。少突胶质细胞移植有望成为治疗中枢神经系统脱髓鞘疾病的新策略 ,目前。

关键词：少突胶质细胞生物学功能中枢神经系统疾病细胞移植

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我国彝族另一新的DR15(2)等位基因的核苷酸序列分析

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第2期19卷 156-157页

作者：蒋伟宏邹嫣琼林标扬陆嫣费虹明陈仁彪上海第二医科大学生物学教研室

目的对在用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法作我国彝族群体样本ＨＬＡＤ区寡核苷酸分型中发现的１例ＤＲＢ１的杂合子进行等位基因序列分析。方法用ＤＲＢ基因类引物扩增该特殊的ＤＲＢ１杂合子细胞基因组的ＤＲＢ基因的第二外显子。扩增产物经纯化... 详细信息

目的对在用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法作我国彝族群体样本ＨＬＡＤ区寡核苷酸分型中发现的１例ＤＲＢ１的杂合子进行等位基因序列分析。方法用ＤＲＢ基因类引物扩增该特殊的ＤＲＢ１杂合子细胞基因组的ＤＲＢ基因的第二外显子。扩增产物经纯化转染大肠杆菌ＪＭ１０１，克隆后再经酚／氯仿抽提后得到单链Ｍ１３ＤＮＡ。利用ＡＢＩ３７７测序仪自动测序。结果彝族这一特殊的ＤＲＢ１杂合子细胞的ＤＲＢ１基因阳性克隆，经序列分析证实了该ＤＲＢ１杂合子中一个等位基因确为ＤＲＢ１＊１２０２，与ＰＣＲ／ＳＳＯ分型一致；另一个新等位基因ＤＲＢ１＊１５Ｙ２（暂定）等位基因在第二外显子的４７位由编码苯丙氨酸的ＴＴＣ（ＤＲＢ１＊１５０２）变为编码酪氨酸的ＴＡＣ。结论在云南彝族样本中发现的ＤＲＢ１＊１５Ｙ２，其４７位由ＴＡＣ（酪氨酸）置换了相应于ＤＲＢ１＊１５０２的ＴＴＣ（苯丙氨酸）。在我国这样一个多民族国家中，就ＨＬＡ系统而言，可能还有更多新等位基因有待鉴定。

关键词： HLA抗原聚合酶链反应彝族碱基序列

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大鼠胚胎神经干细胞的冷冻复苏

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中国神经科学杂志 2003年第2期19卷 122-126页

作者：马政文富赛里尹岚徐晓明陆佩华上海第二医科大学神经生物学实验室

目的 :建立大鼠胚胎神经干细胞冷冻复苏方法 ,探讨冻存后神经干细胞的活力及生物学特性。方法 :采用 10 %BSA + 7.5 %DMSO作冷冻保护剂 ,于液氮中冻存 ;采用细胞培养和间接免疫荧光染色方法对冻存后细胞的活力、形态及分化能力作鉴定... 详细信息

目的 :建立大鼠胚胎神经干细胞冷冻复苏方法 ,探讨冻存后神经干细胞的活力及生物学特性。方法 :采用 10 %BSA + 7.5 %DMSO作冷冻保护剂 ,于液氮中冻存 ;采用细胞培养和间接免疫荧光染色方法对冻存后细胞的活力、形态及分化能力作鉴定。结果 :不同的冻存时间、细胞代数、组织来源以及神经营养因子对冻存后细胞存活率没有明显差异 (P >0 .0 5 )。冷冻保存复苏后培养的大鼠胚胎神经干细胞能够存活 ,能在体外多次传代 ,并能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论 :大鼠神经干细胞的冻存复苏并不影响其原有的生物学特性包括其正常的形态、增殖能力和多向分化能力。

关键词：大鼠胚胎神经干细胞冷冻复苏

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柯萨奇B组病毒VP1胞质表达系统的建立

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第1期19卷 46-48页

作者：陈洪刘晶星陈淑云何平胡宝瑜李振红上海第二医科大学病原生物学教研室 200025

目的　利用T7RNA聚合酶介导的胞质表达系统增加目的抗原的表达量 ,提高基因疫苗的免疫效果。方法　 (1)构建带有T7启动子、脑心肌炎病毒 (EMCV) 5′非编码区和柯萨奇B组病毒衣壳蛋白VP1的质粒pT7EMCVP1。将该质粒和编码T7RNA酶的pAR 313... 详细信息

目的　利用T7RNA聚合酶介导的胞质表达系统增加目的抗原的表达量 ,提高基因疫苗的免疫效果。方法　 (1)构建带有T7启动子、脑心肌炎病毒 (EMCV) 5′非编码区和柯萨奇B组病毒衣壳蛋白VP1的质粒pT7EMCVP1。将该质粒和编码T7RNA酶的pAR 3132共转染HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞 ;(2 )将上述质粒分别转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,让带有不同质粒的两种载体细菌共感染小鼠腹腔巨噬细胞。结果　 (1)经共转染 ,在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞中 ,目的抗原VP1在胞质中的表达比单独转染真核表达质粒pcDNA3VP1增加 2～ 4倍 ;(2 )两种质粒载体细菌感染小鼠巨噬细胞后 ,目的抗原VP1也能在细胞中较好表达。结论　pT7EMCVP1和pAR 3132能在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞胞质中表达。

关键词： VP1 小鼠腹腔巨噬细胞柯萨奇B组病毒 HeLa细胞抗原质粒共转染胞质种质表达量

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维生素C增强氧化砷联用二甲萘醌诱导的U937细胞凋亡及其机制

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中华血液学杂志 2002年第1期23卷 9-11页

作者：高飞易静史桂英李慧石学耕王志伟汤雪明上海第二医科大学细胞生物学教研室 200025

目的　探讨维生素C是否可增强三氧化二砷 (As2 O3 )联用二甲萘醌 (DMNQ)对白血病细胞株U937的促凋亡效应及其机制。方法　以As2 O3 、维生素C、DMNQ不同组合孵育细胞 ,采用流式细胞仪及电镜检测细胞凋亡 ,并设立各种对照。结果　维生素... 详细信息

目的　探讨维生素C是否可增强三氧化二砷 (As2 O3 )联用二甲萘醌 (DMNQ)对白血病细胞株U937的促凋亡效应及其机制。方法　以As2 O3 、维生素C、DMNQ不同组合孵育细胞 ,采用流式细胞仪及电镜检测细胞凋亡 ,并设立各种对照。结果　维生素C可增加As2 O3 联用DMNQ(10 μmol/L)诱导U937细胞发生凋亡的比例 (不加和加用维生素C细胞凋亡率分别为 35 .2 4%和 6 1.2 0 % ) ;过氧化氢酶可逆转这一效应 ;维生素C对DMNQ(2 0 μmol/L)单独诱导U937细胞凋亡无影响。结论　维生素C在As2 O3 存在的情况下 ,通过活性氧依赖的途径。

关键词：砷剂抗坏血酸细胞凋亡活性氧组分维生素C

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