检索结果-内蒙古大学图书馆

各种原因引起的皮肤缺损是临床上常见的疾病,应用组织工程方法构建人工皮肤并修复缺损是研究的热点。在组织工程化皮肤的构建过程中,种子细胞来源是主要的问题,干细胞是器官自体平衡和修复的细胞基础,有很强的再生潜能,因此以皮肤角质干细胞为种子细胞构建组织工程化皮肤是研究的重要方向。皮肤角质干细胞主要包括表皮干细胞和毛囊干细胞,皮肤角质干细胞 (keratinocyte stem cells,KSC)的不断增殖分化是维持细胞内环境稳定的基本条件,包括表皮和毛囊

关键词：毛囊干细胞型胶原培养皿差速贴壁法粘附细胞外皮蛋白组织工程化皮肤单克隆抗体细胞计数

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组织工程化组织收缩现象的研究进展

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国外医学（生物医学工程分册） 2005年第3期28卷 150-153页

作者：刘广鹏曹谊林崔磊 200011 上海第二医科大学第九人民医院整形外科上海市组织工程研究与开发中心 200011 上海市第二医科大学第九人民医院整形外科上海市组织工程研究开发中心

在组织工程的研究中发现,骨、软骨和肌腱等多种组织工程化组织在体外构建的过程中体积明显缩小,并证实其与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)有关系。α-SMA基因的表达并非细胞“去分化”现象,可能与体外培养条件有关系,并影响细胞外基质的分... 详细信息

在组织工程的研究中发现,骨、软骨和肌腱等多种组织工程化组织在体外构建的过程中体积明显缩小,并证实其与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)有关系。α-SMA基因的表达并非细胞“去分化”现象,可能与体外培养条件有关系,并影响细胞外基质的分泌。组织材料体积的缩小影响组织的构建与修复,因此通过调节α-SMA基因的表达,以及提高支架材料抵抗收缩的能力来控制组织材料收缩是非常必要的。

关键词：组织收缩 α-平滑肌肌动蛋白组织工程化组织体外培养条件 α-SM 组织材料细胞外基质体外构建支架材料 A基因去分化非细胞体积

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兔包皮上皮细胞的分离培养和鉴定

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组织工程与重建外科杂志 2005年第2期1卷 66-69页

作者：傅强邓辰亮殷德明崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院泌尿外科上海200011 上海组织工程研究与开发中心上海200235 上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室上海200011

目的:收集兔的小块包皮组织,分离培养上皮细胞,并传代增殖,为组织工程化尿道构建提供细胞来源。方法:取雄性家兔包皮小块组织,酶消化成单细胞悬液,接种后静置培养、传代。并定期观察细胞形态变化及生长增殖情况,免疫组化染色,细胞计数及... 详细信息

目的:收集兔的小块包皮组织,分离培养上皮细胞,并传代增殖,为组织工程化尿道构建提供细胞来源。方法:取雄性家兔包皮小块组织,酶消化成单细胞悬液,接种后静置培养、传代。并定期观察细胞形态变化及生长增殖情况,免疫组化染色,细胞计数及MTT测定以判断细胞增殖能力。结果:分离消化后的上皮细胞生长良好,经免疫组化测定为正常上皮细胞,并传代3代,细胞数量达到植入生物支架并生长的需要。结论:家兔的包皮上皮细胞可在体外培养增殖并传代,并达到相应细胞数量。

关键词：包皮上皮细胞

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组织工程研究进展与发展趋势

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中国实用美容整形外科杂志 2005年第4期16卷 193-194页

作者：张文杰曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究与开发中心上海200011

很久以来人们一直梦想人体的器官组织能象机器一样,一旦出现问题,可以用"新的零件"更换.组织工程学的提出、建立和发展,为实现这一梦想提供了可能,它能以少量种子细胞经体外扩增后与生物材料结合,构建出新的组织或器官,用于... 详细信息

很久以来人们一直梦想人体的器官组织能象机器一样,一旦出现问题,可以用"新的零件"更换.组织工程学的提出、建立和发展,为实现这一梦想提供了可能,它能以少量种子细胞经体外扩增后与生物材料结合,构建出新的组织或器官,用于替代和修复病变、缺损的组织器官,重建生理功能.

关键词：组织工程研究创伤修复器官组织功能重建器官缺损组织工程学生物材料体外扩增种子细胞

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组织工程软骨构建的临床初步研究

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中国美容医学 2005年第5期14卷 530-531页

作者：张艳柴岗刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海组织工程研究开发中心上海市200011

目的:探讨利用组织工程技术在人体内构建软骨组织的可行性。方法:将体外培养扩增的第二代人肋软骨细胞,以细胞浓度50×106/ml与30%Pluronic-F127混匀,注入人耳后皮下或耳屏部位,3～6个月后在二期手术时部分取材,通过大体观察、组织... 详细信息

目的:探讨利用组织工程技术在人体内构建软骨组织的可行性。方法:将体外培养扩增的第二代人肋软骨细胞,以细胞浓度50×106/ml与30%Pluronic-F127混匀,注入人耳后皮下或耳屏部位,3～6个月后在二期手术时部分取材,通过大体观察、组织学、电镜以及免疫组化等方法对新生软骨进行初步评价。结果:在3～6个月的随访中,观察到注射于耳后皮下的患者皮下有明显隆起,组织学检测显示有软骨陷窝和同源软骨细胞现象为成熟软骨组织,免疫组化染色有特异性的Ⅱ型胶原分泌。结论:采用体外培养的第二代人肋软骨细胞和Pluronic在人体内可构建组织工程软骨,证实了组织工程技术在人体内构建软骨组织的可行性。

关键词：组织工程人软骨细胞种子细胞

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组织工程软骨生物反应器的设计

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组织工程与重建外科杂志 2005年第6期1卷 340-343页

作者：李宏周广东吕晓杰安琦刘伟崔磊曹谊林上海组织工程研究与开发中心 200234 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011 华东理工大学 200237

目的根据流体力学原理优化反应器内腔结构,并设计一套组织工程软骨生物反应器。方法采用计算机仿真的方法对反应器内腔流场进行仿真计算,通过流场分析确定内腔结构,最终构建一套完整的生物反应器系统。结果确定了,生物反应器的内腔结构... 详细信息

目的根据流体力学原理优化反应器内腔结构,并设计一套组织工程软骨生物反应器。方法采用计算机仿真的方法对反应器内腔流场进行仿真计算,通过流场分析确定内腔结构,最终构建一套完整的生物反应器系统。结果确定了,生物反应器的内腔结构．生物反应器由控制系统和细胞培养室两部分构成,能置于培养箱中对软骨细胞材料复合物进行动态培养。结论反应器内腔的结构是合理的。整个生物反应器系统运行可靠。

关键词：组织工程软骨细胞计算流体动力学生物反应器

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软骨形态发生蛋白1诱导真皮成纤维细胞表达软骨细胞表型的实验研究

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中华医学杂志 2004年第15期84卷 1304-1309页

作者：崔磊尹烁邓辰亮杨光辉陈富国刘伟刘德莉曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的应用软骨形态发生蛋白(CDMP)生长因子,体外诱导真皮成纤维细胞向成软骨细胞表型分化,探讨其作为组织工程化软骨种子细胞的可行性。方法取包皮环切术后丢弃真皮组织共3例,成纤维细胞体外培养扩增至第二代,以1×104/cm2密度接种... 详细信息

目的应用软骨形态发生蛋白(CDMP)生长因子,体外诱导真皮成纤维细胞向成软骨细胞表型分化,探讨其作为组织工程化软骨种子细胞的可行性。方法取包皮环切术后丢弃真皮组织共3例,成纤维细胞体外培养扩增至第二代,以1×104/cm2密度接种,12 h后加入细胞诱导液(10％胎牛血清F-12培养液,CDMP1终浓度为100 ng/ml)单层培养,未加的成纤维细胞培养用CDMP1为对照。诱导7 d后观察细胞形态变化,Image Plus图像分析软件计算细胞长宽比例。激光共聚焦显微镜分别观察诱导前后细胞内Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原表达及分布,Western印迹检测诱导前后细胞Ⅱ型胶原蛋白表达。反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测诱导后成软骨相关的Sox9、聚集蛋白聚糖与Ⅱ、Ⅸ型胶原mRNA表达;同时检测与成骨相关的Ⅹ型胶原、碱性磷酸酶(AKP)mRNA表达。培养第二代细胞以2×107个细胞/ml细胞密度进行离心管法培养,诱导14 d后行阿辛蓝与Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果诱导后可见单层培养的成纤维细胞形态由长梭形向软骨细胞样多角形转变,Image Plus图像分析软件计算细胞诱导后的长宽比例为(1.40±0.15),较诱导前(7.40±1.30)差异有显著意义(P<0.05);与正常软骨细胞(1.29±0.24)差异无显著意义。免疫荧光激光共聚焦观察发现诱导后细胞内出现Ⅱ型胶原表达,Ⅰ、Ⅲ?

关键词：软骨形态发生蛋白1 CDMP 生长因子真皮成纤维细胞基因表达软骨细胞细胞表型抗原

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表皮细胞体外增殖与增殖表型细胞含量变化规律的实验研究

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中华整形外科杂志 2004年第6期20卷 451-453页

作者：邓辰亮崔磊杨光辉杨军刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的研究人表皮细胞(humanepidermalcells,hECs)体外扩增与增殖表型细胞含量变化规律。方法收集2～3岁健康幼儿包皮共20例,对标本拍照,软件分析照片中标本面积,分离、收集表皮细胞,计算原代(P0)细胞获得率(5例)。记录不同代次细胞生长曲... 详细信息

目的研究人表皮细胞(humanepidermalcells,hECs)体外扩增与增殖表型细胞含量变化规律。方法收集2～3岁健康幼儿包皮共20例,对标本拍照,软件分析照片中标本面积,分离、收集表皮细胞,计算原代(P0)细胞获得率(5例)。记录不同代次细胞生长曲线,细胞直径,克隆形成率(5例)。对不同代次细胞的角蛋白19(keratin,K19)和外皮蛋白(involucrin)的mRNA表达情况及阳性细胞率分别进行RTPCR检测(5例)和流式细胞仪(FACS)分析(5例)。结果原代细胞平均获得率为(164±0297)×106cm2。hECs最大可扩增(700±37)倍,第5代(P5)的扩增倍数为(243±13)倍。P0克隆形成率为(45±4)%,随传代依次降低,至第5代(P5)时为(9±2)%,至第6代(P6)时消失。RTPCR检测发现K19mRNA在P5及P5之前表达,P6未见表达;Involucrin各代均表达。FACS检测各代hECs中K19阳性细胞百分率逐渐降低,P0时为(6697±314)%,P6为(465±138)%;外皮蛋白表达阳性细胞百分率逐渐增高,P0时为(1165±162)%,P6为(9703±266)%。结论体外扩增至第5代的幼儿包皮来源的表皮细胞,维持着增殖细胞表型,符合组织工程表皮种子细胞的要求。表皮细胞体外扩增能力逐渐降低与增殖表型细胞含量减少有关。

关键词：表型表皮细胞阳性细胞体外扩增表达克隆形成率包皮体外增殖标本 RNA

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人角质形成细胞体外扩增与生物学特征变化

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上海第二医科大学学报 2004年第4期24卷 299-301,318页

作者：邓辰亮杨光辉崔磊杨军刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心上海200235

目的研究人角质形成细胞体外扩增过程中生物学特征的变化,观察其角蛋白19(K19)mRNA表达及克隆形成率与扩增受限的关系。方法取2-3岁健康儿童包皮20例,通过2.4 U/mL dispase和0.05％胰酶(tripsin)分离,获得角质形成细胞体外培养。细胞... 详细信息

目的研究人角质形成细胞体外扩增过程中生物学特征的变化,观察其角蛋白19(K19)mRNA表达及克隆形成率与扩增受限的关系。方法取2-3岁健康儿童包皮20例,通过2.4 U/mL dispase和0.05％胰酶(tripsin)分离,获得角质形成细胞体外培养。细胞计数仪计数描绘生长曲线。光镜观察细胞体外扩增过程中形态学改变,同时计数克隆形成率。RT-PCR检测角质形成细胞K19和Involucrin的mRNA表达情况。结果儿童包皮角质形成细胞体外平均最大扩增能力为(700±37)倍。细胞平均获得率为(1.64±0.297)×106/cm2包皮。角质形成细胞原代(P0)、第2代(P2)、第4代(P4)、第5代(P5)克隆形成率分别为:(45±4)％,(37±4)％,(28±3)％,(9±2)％,第6代(P6)克隆形成率消失。RT-PCR检测发现P0、P2、P4、P5有K19 mRNA表达,P6未见表达;Involucrin各代均可见表达。结论人角质形成细胞体外扩增能力随传代逐渐降低,扩增受限与角质形成细胞中K19 mRNA表达及克隆形成率消失相关。

关键词：角质形成细胞组织工程体外扩增生物学特征皮肤组织缺损

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