检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2003年第6期20卷 497-498页

作者：张艳柴岗崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重点实验室上海组织工程研究开发中心 200011

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细... 详细信息

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细胞数 ,得原代细胞获得率。体外单层培养 6代 ,观察形态学改变 ,群体倍增时间 (PDT ) ,免疫细胞化学染色及逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测Ⅱ型胶原和Aggrecan评定软骨细胞老化规律。结果　人残耳软骨组织平均细胞获得率为 ( 1.5 4± 0 .14 )× 10 6/ g ,肋软骨平均获得率为 ( 0 .46± 0 .0 9)× 10 6/ g ,两类软骨细胞P1的PDT最短 ,前 3代增殖力较强 ,P3 以后PDT明显延长 ,P6代细胞不再增殖。免疫细胞化学及RT PCR均证实耳软骨细胞 3代内、肋软骨细胞 4代内软骨细胞表型稳定。结论　第 2代的耳软骨细胞与第 3代肋软骨细胞可作为人体内组织工程化软骨构建的种子细胞。

关键词：软骨细胞体外生物学特性组织工程种子细胞

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重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒的构建

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中国修复重建外科杂志 2003年第3期17卷 230-232页

作者：周海文周曾同杨雯君刘德莉李卿胡洪亮刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科口腔研究所上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

目的　构建具有绿色荧光蛋白报道 (GFP)基因的端粒酶真核质粒载体 ,为转染细胞、延长细胞寿命提供基础。　方法　酶切含人端粒酶逆转录酶 (h TRT)基因的 p GRN14 5质粒获取 h TRT片段 ,插入经酶切及磷酸化处理的 GFP载体 p EGFP- C1,形... 详细信息

目的　构建具有绿色荧光蛋白报道 (GFP)基因的端粒酶真核质粒载体 ,为转染细胞、延长细胞寿命提供基础。　方法　酶切含人端粒酶逆转录酶 (h TRT)基因的 p GRN14 5质粒获取 h TRT片段 ,插入经酶切及磷酸化处理的 GFP载体 p EGFP- C1,形成 8.1kb质粒 ,经 Hind 、Not 酶切电泳筛选、鉴定并测序。　结果　经酶切电泳分析得到3.4 kb及 4 .7kb大小的两片段 ;测序结果显示接头两端序列正确。　结论　重组端粒酶 p EGFP- h TRT质粒的成功构建 ,可用于细胞转染 ,对进一步研究组织工程种子细胞的衰老问题具有重要意义。

关键词：端粒酶 pEGFP-hTRT质粒构建重组质粒绿色荧光蛋白

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骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第1期18卷 12-14页

作者：夏万尧商庆新崔磊徐蓉丁小邦曹谊林上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传... 详细信息

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传代后以高糖DMEM无血清特定培养液诱导 (含胰岛素 2mg L、转铁蛋白 3mg L、丙酮酸 10 0mg L、地塞米松 10 - 7mol L、TGF β110ng ml) ,在相差显微镜和电镜下进行观察 ,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌 ,原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果　细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形转变 ,透视电镜观察见大量扩张粗面内质网、高尔基体、线粒体。诱导培养后第 7,14dⅡ型胶原免疫组化阳性 ,同时原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达呈阳性。结论　MSCs在特定培养液诱导下能向软骨细胞表型转化 ,并能分泌软骨特异性基质 ,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源的应用前景。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞分化软骨细胞表型动物实验

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壳聚糖作为组织工程软骨支架的实验研究

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中华显微外科杂志 2002年第1期25卷 34-37页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春钟伟 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科复旦大学高分子科学系

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚... 详细信息

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚糖胶原上的黏附率及壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架对细胞的增殖、功能的影响。　结果　软骨细胞能够在壳聚糖、壳聚糖胶原支架上黏附、伸展、增殖和发挥正常功能 ,MTT测得细胞黏附率分别为 81 2 5 %和 87 5 0 % ,MTT测得软骨细胞在壳聚糖胶原支架中的增殖能力较强。　结论　壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架与软骨细胞具有较好的相容性 ,壳聚糖胶原复合多孔支架更适合作为软骨组织工程中的细胞培养支架。

关键词：组织工程软骨细胞壳聚糖支架细胞培养

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肌腱构建与组织工程技术研究新进展

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生物医学工程与临床 2002年第3期6卷 166-169页

作者：曹德君曹谊林刘伟上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

本文综述组织工程化肌腱领域中取得的多项成果 ,如肌腱组织替代物、种子细胞、组织工程用生物材料及转基因技术应用研究等。论述建立生长、增殖可调的肌腱种子细胞系可行性。

关键词：组织工程技术肌腱组织替代物研究进展

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应用可注射性生物材料再生自体组织工程化软骨组织的实验研究

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中华整形外科杂志 2001年第5期17卷 302-305页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春刘德莉徐蓉吴娟娟上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究中心重点实验室上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海200011

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 ... 详细信息

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 0 ,60和 70× 10 6 ml,并将其接种于猪自体腹外侧壁皮下 ,于第 6周取材 ,分别进行大体、组织学、氨基糖氨多糖 (GAG)和Ⅱ型胶原含量检测 ,对再生软骨组织进行评价。结果　细胞浓度为 5 0× 10 6 ml时 ,再生的软骨组织 ,软骨细胞均匀分布 ,包埋在软骨陷窝内 ,与正常软骨组织有相似的组织学特征。而细胞浓度为 10× 10 6 ml、3 0× 10 6 ml则形成软骨组织不完全 ,软骨细胞散在分布 ,并被未降解的生物材料分隔。对所有样本称重 ,在 3 0～ 110mg之间 ,各样本GAG含量在 5 .8%～ 9.2 %之间 ,正常耳软骨含量为 9.2 %。WesternBlot证实所有样本都有Ⅱ型胶原。结论　利用组织工程技术可在具有免疫功能的自体动物内形成软骨组织 ,并确定了软骨组织形成的最佳细胞接种浓度为 5 0× 10 6 ml。

关键词：软骨细胞软骨组织组织工程生物材料软骨修复动物实验

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同种异体组织工程化软骨组织形成的初步研究

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中华整形外科杂志 2000年第5期16卷 264-266页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春王倬崔磊王健上海市第二医科大学组织工程研究中心 200011 上海市组织工程研究重点实验室 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮... 详细信息

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮下，每隔２周取材，连续半年对所取标本进行大体观察、称重，并作ＨＥ、ＳａｆｒａｎｉｎＯ、Ｍａｓｓｏｎ’ｓｔｒｉｃｈｒｏｍｅ染色，对再生的软骨组织进行评价。结果在同种异体动物体内能形成软骨组织，所形成软骨组织的氨基多糖和胶原分布与正常羊关节软骨组织有相似的组织学特性。组织学结果可见第２，４周的软骨组织有一定程度的免疫排斥反应和炎症细胞浸润。第６周后软骨组织基本成熟，免疫反应减轻，但未消退。结论　应用组织工程技术可在同种异体动物体内再生软骨组织，再生的组织周围存在一定程度的免疫反应，随接种时间的延长逐渐减弱。

关键词：软骨细胞软骨组织同种异体组织工程化复合物

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组织工程研究中的胚胎干细胞问题

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世界科技研究与发展 2000年第6期22卷 54-59页

作者：曹谊林汪铮李晓红商庆新上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海200011

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组... 详细信息

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组织工程种子细胞问题的具体步骤 ;指出了每项具体研究中所要解决的关键问题。

关键词：组织工程胚胎干细胞治疗性克隆核移植

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专家论坛：生物工程领域的崭新前沿组织工程

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中国社区医学 2000年第2期6卷 5-6页

作者：商庆新曹谊林张涤生上海第二医科大学组织工程研究中心，上海200011 上海市组织工程研究重点实验室，上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科，上海200011

组织工程是在组织水平上操作的生物工程，主要致力于组织和器官的形成和再生。组织工程的提出和建立只有10年时间，却得到了迅猛的发展。软骨、骨、肌腱等组织再生的成功，已展示了它广阔的发展前景；血管、器管等复合组织的再生，标志... 详细信息

组织工程是在组织水平上操作的生物工程，主要致力于组织和器官的形成和再生。组织工程的提出和建立只有10年时间，却得到了迅猛的发展。软骨、骨、肌腱等组织再生的成功，已展示了它广阔的发展前景；血管、器管等复合组织的再生，标志着组织工程已由单一组织再生向复合组织预制迈出重大一步，而在胰腺、肝脏等组织再生研究中取得的突破性进展，更向人们展示了人类有能力再生具有复杂组织结构和生理功能的器官。随着组织工程研究的不断深入和发展，它必将给生命科学带来革命性变化。

关键词：组织工程组织再生肌腱软骨血管胰腺肝脏复合组织展示生理功能

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组织工程学的回顾和未来的研究方向

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中国创伤骨科杂志 2000年第4期2卷 308-310页

作者：刘伟曹谊林商庆新上海第医科大学组织工程研究中心上海市200011 上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科

组织工程学是一门新兴的学科,它应用细胞生物学和工程学的原理在体外或在体内制造组织和器官从而达到修复损伤组织和改善其功能的目的。组织工程学的提出和建立虽然只有10多年的时间,但其迅猛发展的势头展示出在未来医学发展中的重要作... 详细信息

组织工程学是一门新兴的学科,它应用细胞生物学和工程学的原理在体外或在体内制造组织和器官从而达到修复损伤组织和改善其功能的目的。组织工程学的提出和建立虽然只有10多年的时间,但其迅猛发展的势头展示出在未来医学发展中的重要作用。组织工程的建立和发展大约在十多年以前,美国哈佛大学外科医生Vacanti JP因器官供应来源的问题在大海边上瞑思苦想之际,碰到了麻省理工学院的化学生物工程师Robert Langer。Langer向Vacanti建议把细胞放在可吸收的合成材料中来形成组织或器官。这次偶然的海边相遇引发了组织工程在美国的兴起和在全世界的扩展和发展。1987年,美国国家科学基金会正式提出“组织工程”一词并确定这一门新兴学科的建立。早期的组织工程主要集中在单一组织的构建。1988年,Vacanti等用分离的软骨细胞和可降解的生物材料首先在动物皮下构建成透明软骨,这一研究成果具有重要的意义。由于在体内,软骨损伤之后很难使透明软骨得到再生和修复,采用组织工程手段构建成具有功能的透明软骨无疑为将来的组织和器官的修复开辟了一条重要的途径。以后,Kim和Vacanti等又用PGA和PLA在裸鼠皮下构建成软骨组织。

关键词：发展史组织工程学研究方向

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