检索结果-内蒙古大学图书馆

实验生物学报 2005年第3期38卷 247-256页

作者：杨鹏飞丛笑倩程启康华泽钊吴春芳曹谊林上海理工大学低温生物医学技术研究所上海200093 上海第二医科大学第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海200011

本文采用升降式程序降温仪对人胚胎于细胞进行了程序降温保存,并探讨和比较了降温速率、置核温度、保护剂和投入液氮前温度对冻存复苏后胚胎干细胞的存活率、活力及分化特性的影响。结果表明:采用Me_2SO+血清+DMEM(体积比为1∶3∶6)的... 详细信息

本文采用升降式程序降温仪对人胚胎于细胞进行了程序降温保存,并探讨和比较了降温速率、置核温度、保护剂和投入液氮前温度对冻存复苏后胚胎干细胞的存活率、活力及分化特性的影响。结果表明:采用Me_2SO+血清+DMEM(体积比为1∶3∶6)的保护剂,从0℃开始,以0.5℃/min的速率对细胞悬液降温;至-10℃时对其进行置核,并于-35℃时将其快速投入液氮中保存,复温后效果最佳。冻存复温后细胞存活率可达81.8%,复苏后的胚胎干细胞形态和集落生长方式都与冻前的生长形态相同,且胚胎干细胞标志之一碱性磷酸酶(AKP)反应阳性,同时染色体组型仍正常。

关键词：人胚胎干细胞实验研究保存程序细胞存活率碱性磷酸酶染色体组型降温速率细胞悬液生长形态生长方式细胞形态保护剂升降式核温度体积比 min 复苏冻存液氮投入复温分化活力血清集落

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人软骨细胞的体外培养

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组织工程与重建外科杂志 2005年第5期1卷 293-296页

作者：张艳曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第九人民医院组织工程实验室 200011

软骨组织起源于中胚层,由软骨细胞、基质及纤维构成。根据软骨组织所含纤维不同,可将软骨分为透明软骨、纤维软骨和弹性软骨。透明软骨分布于成人关节、肋软骨及呼吸道一些软骨;

关键词：软骨细胞培养型胶原肋软骨体外培养软骨组织弹性软骨耳软骨细胞活力免疫细胞化学染色原代细胞

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端粒酶与组织工程种子细胞衰老的研究

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国外医学（生物医学工程分册） 2005年第1期28卷 43-47页

作者：沈干王彦丛笑倩刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科组织工程实验室

种子细胞是组织工程基本要素之一,目前种子细胞主要来源是自体的同源细胞,存在容易衰老,不易大量扩增的缺陷。端粒及端粒酶在细胞的衰老过程中扮演着重要角色。通过回顾有关研究,探讨端粒酶在延缓组织工程种子细胞衰老中的作用。

关键词：种子细胞衰老端粒酶

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兔包皮上皮细胞的分离培养和鉴定

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组织工程与重建外科杂志 2005年第2期1卷 66-69页

作者：傅强邓辰亮殷德明崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院泌尿外科上海200011 上海组织工程研究与开发中心上海200235 上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室上海200011

目的:收集兔的小块包皮组织,分离培养上皮细胞,并传代增殖,为组织工程化尿道构建提供细胞来源。方法:取雄性家兔包皮小块组织,酶消化成单细胞悬液,接种后静置培养、传代。并定期观察细胞形态变化及生长增殖情况,免疫组化染色,细胞计数及... 详细信息

目的:收集兔的小块包皮组织,分离培养上皮细胞,并传代增殖,为组织工程化尿道构建提供细胞来源。方法:取雄性家兔包皮小块组织,酶消化成单细胞悬液,接种后静置培养、传代。并定期观察细胞形态变化及生长增殖情况,免疫组化染色,细胞计数及MTT测定以判断细胞增殖能力。结果:分离消化后的上皮细胞生长良好,经免疫组化测定为正常上皮细胞,并传代3代,细胞数量达到植入生物支架并生长的需要。结论:家兔的包皮上皮细胞可在体外培养增殖并传代,并达到相应细胞数量。

关键词：包皮上皮细胞

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组织工程技术修复犬腹主动脉缺损的初步研究

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组织工程与重建外科杂志 2005年第4期1卷 210-213页

作者：刘阳张燕中刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科、上海第二医科大学组织工程重点实验室 200011

目的探讨应用组织工程学技术修复犬腹主动脉缺损的可行性。方法将体外培养、扩增的犬自体血管平滑肌细胞与内皮细胞接种于管型PGA支架上,形成细胞-材料复合物,将该复合物回植修复自体犬腹主动脉缺损,术后螺旋CT等检测血流通畅情况。结... 详细信息

目的探讨应用组织工程学技术修复犬腹主动脉缺损的可行性。方法将体外培养、扩增的犬自体血管平滑肌细胞与内皮细胞接种于管型PGA支架上,形成细胞-材料复合物,将该复合物回植修复自体犬腹主动脉缺损,术后螺旋CT等检测血流通畅情况。结果对照组血管在回植后24小时内即发生了栓塞,而实验组则维持血流通畅至少达术后1周。结论应在组织工程化血管体外培养过程中加入适当力学刺激促使其成熟后再回植修复缺损。

关键词：组织工程血管内皮细胞平滑肌细胞生物材料犬血管移植

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大鼠小肠上皮类器官单位的分离培养鉴定

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组织工程与重建外科杂志 2005年第4期1卷 214-216页

作者：周莹胡学庆周广东徐福姚晓虹施诚仁上海第二医科大学附属新华医院小儿外科 200092 上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室 200011 上海第二医科大学附属新华医院病理科 200092

目的采用机械分离和酶消化相结合的方法分离小肠上皮类器官单位(IOUs),并进行形态及功能鉴定,建立稳定的分离培养技术。方法采用机械法剪碎小肠组织,中性蛋白酶和胶原酶联合消化分离组织碎片,差速沉淀法获得IOUs,通过相差显微镜观察IOU... 详细信息

目的采用机械分离和酶消化相结合的方法分离小肠上皮类器官单位(IOUs),并进行形态及功能鉴定,建立稳定的分离培养技术。方法采用机械法剪碎小肠组织,中性蛋白酶和胶原酶联合消化分离组织碎片,差速沉淀法获得IOUs,通过相差显微镜观察IOUs形态,组织学、免疫组化证实其增殖特性及上皮刷状缘完整性,原代二维培养观察IOUs体外增殖及细胞群体组成。结果分离的IOUs大部分形态完整,PAS染色显示连续的刷状缘,并可见杯状细胞, PCNA染色阳性并呈梯度改变,IOUs体外培养可见构成小肠的各胚层细胞。结论采用机械分离和酶消化相结合的方法可以得到形态完整、增殖活跃的IOUs,有望为组织工程小肠构建提供种子细胞。

关键词：组织工程小肠上皮类器官单位体外培养

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犬骨髓基质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石皮下成骨的实验研究

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中国口腔颌面外科杂志 2005年第3期3卷 207-211页

作者：袁捷殷德民王敏许锋崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程实验室上海200011 上海市组织工程研发中心上海200235

目的:犬自体皮下非受力部位植入犬骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)复合珊瑚羟基磷灰石(corallinehydroxyapatite,CHA),观察成骨情况及其转归。方法:体外分离培养、成骨诱导、扩增犬BMSCs,并通过细胞化学、免疫细胞化学检... 详细信息

目的:犬自体皮下非受力部位植入犬骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)复合珊瑚羟基磷灰石(corallinehydroxyapatite,CHA),观察成骨情况及其转归。方法:体外分离培养、成骨诱导、扩增犬BMSCs,并通过细胞化学、免疫细胞化学检测成骨表型。将第2代细胞接种于CHA上,形成细胞-材料复合物,植于9只犬右侧腹部皮下,并在对称部位植入CHA作为对照。术后4、12、26周取材,HE染色,观察新生组织结构;通过形态计量学分析,对成骨情况量化,并行t检验。结果:成骨诱导后,细胞碱性磷酸酶染色阳性,免疫细胞化学显示骨钙蛋白表达阳性。HE染色示植入4周后,无明显骨形成;12周后,实验组有较多新生骨小梁形成,苦味酸-硫堇和Masson染色示骨基质和胶原形成良好;26周后,实验组骨小梁量有减少趋势。图像分析显示,实验组12周成骨量最高,差异有统计学意义。结论:犬BMSCs诱导后具有成骨活性,复合CHA后,可促进形成组织工程化骨。在无应力刺激情况下,随时间延长,局部成骨活动减弱。

关键词：骨髓基质干细胞珊瑚羟基磷灰石组织工程应力犬复合珊瑚羟基磷灰石成骨诱导皮下实验研免疫细胞化学

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脱细胞异体神经材料复合雪旺细胞的体外三维构建的活性研究

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中国实用美容整形外科杂志 2005年第3期16卷 185-187页

作者：韩克军王者生高景恒周广东崔磊刘伟曹谊林中国医科大学附属第一医院沈阳110001 辽宁省人民医院上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室

目的探讨雪旺细胞在AECM支架材料上体外三维培养的生长活性。方法将培养的雪旺细胞悬液接种在支架材料上,用MTT法、倒置相差显微镜、流式细胞仪、扫描电镜、RT-PCR、测定雪旺细胞的活性。结果AECM上的雪旺细胞各项指标与正常培养的雪旺... 详细信息

目的探讨雪旺细胞在AECM支架材料上体外三维培养的生长活性。方法将培养的雪旺细胞悬液接种在支架材料上,用MTT法、倒置相差显微镜、流式细胞仪、扫描电镜、RT-PCR、测定雪旺细胞的活性。结果AECM上的雪旺细胞各项指标与正常培养的雪旺细胞活性比较,差异无显著意义(P>0.05),实验组雪旺细胞DNA无损伤,且能合成分泌GDNF。结论AECM适于构建具有雪旺细胞活性的组织工程化人工神经。

关键词：雪旺细胞组织工程 AECM 人工神经

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人骨髓基质细胞表面标志的研究

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组织工程与重建外科杂志 2005年第5期1卷 263-264,277页

作者：柴岗张艳刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室 200011

目的研究人骨髓基质干细胞经体外培养后细胞的表型。方法8例成年志愿者(无系统性疾病,20～40岁)髂前上嵴骨穿法得人骨髓,密度梯度法分离骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell,hMSC),单纯DMEM培养液,分别培养至第2代... 详细信息

目的研究人骨髓基质干细胞经体外培养后细胞的表型。方法8例成年志愿者(无系统性疾病,20～40岁)髂前上嵴骨穿法得人骨髓,密度梯度法分离骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell,hMSC),单纯DMEM培养液,分别培养至第2代细胞,免疫荧光和流式细胞仪鉴定hMSCs细胞表型,CD105,CD166,CD29的表达。结果第二代细胞可见明显CD105,CD166,CD29表达,第二代细胞CD105阳性率78±6％,CD166阳性率43±7％,CD29阳性率69±12％。结论人MSC体外经传代培养后可表达干细胞特征表型。

关键词：骨髓基质干细胞组织工程表面标志

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中国组织工程学研究现状与未来

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组织工程与重建外科杂志 2005年第4期1卷 185-188页

作者：张文杰周广东曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重点实验室 200011

组织工程学(tissue engineering)从1987年正式提出到目前,在短短不到二十年中已取得了突飞猛进的发展,不仅在免疫缺陷的小动物体内构建出各种组织工程化组织,而且成功地修复了免疫功能完全的大型哺乳类动物各种组织缺损,更重要的是部分... 详细信息

组织工程学(tissue engineering)从1987年正式提出到目前,在短短不到二十年中已取得了突飞猛进的发展,不仅在免疫缺陷的小动物体内构建出各种组织工程化组织,而且成功地修复了免疫功能完全的大型哺乳类动物各种组织缺损,更重要的是部分组织工程化组织已在初步的临床应用中取得了稳定而持久的疗效。

关键词：组织工程材料种子细胞组织工程学组织构建骨髓基质干细胞胚胎干细胞缺损修复生物材料工程技术成体干细胞

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