检索结果-内蒙古大学图书馆

组织工程与重建外科杂志 2005年第3期1卷 138-142页

作者：祝联周广东陈付国刘德莉崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究中心 200011

目的探讨BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外、体内的生物学功能影响。方法抽取羊的骨髓,分离、培养骨髓基质干细胞。用重组骨形成蛋白7腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein 7;Adeno-BMP7)转染(M．O．I=100)70... 详细信息

目的探讨BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外、体内的生物学功能影响。方法抽取羊的骨髓,分离、培养骨髓基质干细胞。用重组骨形成蛋白7腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein 7;Adeno-BMP7)转染(M．O．I=100)70％-80％融合时的第二代细胞,三天后分别进行透射电镜观察、流式细胞仪检测、Western-blot、钙结节染色以及珊瑚和细胞复合物皮下回植。结果在体外:细胞超微结构观察显示Adeno-BMP7基因转染后的BMSCs的物质合成代谢功能活跃;流式细胞仪检测表明Adeno-BMP7基因转染对BMSCs的细胞周期无明显影响;Western-blot检测证明转染Adeno-BMP7后的BMSCs有BMP7在蛋白水平上的表达;染色表明转染Adeno-BMP7后的BMSCs可形成较大的钙结节。在体内:转染Adeno-BMP7的BMSCs可明显促进新骨的形成,与没转染Adeno-BMP7的BMSCs有差异。结论Adeno-BMP7转染可促进BMSCs的体外成骨定向分化,Adeno-BMP7转染后的BMSCs具有更强的体内成骨能力。

关键词：重组腺病毒骨形成蛋白7 骨髓基质干细胞组织工程

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组织工程学在外科领域中的应用

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临床外科杂志 2005年第1期13卷 33-36页

作者：曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究中心200011

组织工程学(tissue engineering)是一门将细胞生物学和材料学相结合进行体外或体内构建组织或器官的新兴学科。当具有特定功能的种子细胞(seed cell)与可降解生物材料(biodegradable polymer)混合并在体外培养一段时间或植入体内后。随... 详细信息

组织工程学(tissue engineering)是一门将细胞生物学和材料学相结合进行体外或体内构建组织或器官的新兴学科。当具有特定功能的种子细胞(seed cell)与可降解生物材料(biodegradable polymer)混合并在体外培养一段时间或植入体内后。随着种子细胞的不断增殖、细胞外基质分泌和生物材料的逐渐降解、吸收，最终形成具有正常结构和功能的特定组织或器官。组织工程技术的产生是外科修复技术的一项创新，它的深入发展将有可能改变传统“以创伤修复创伤”的治疗模式，使外科创伤与病损的治疗从组织器官移植走向组织器官制造，实现外科治疗领域的一次重大变革。

关键词：组织工程学外科应用

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力学刺激影响猪骨髓基质干细胞体外软骨形成的初步研究

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中华医学杂志 2004年第23期84卷 1997-2001页

作者：刘天一周广东苗春雷魏娴陈付国崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究中心 200011

目的　研究力学刺激对猪骨髓基质干细胞 (BMSC)体外构建组织工程化软骨的影响。方法　取第二代猪BMSC以 5× 10 7/cm3 的密度接种于聚羟基乙酸 /聚羟基乳酸 (PGA/PLA)圆盘形支架上 ,一周后均改用软骨诱导液 [高糖DMEM培养基含 10 %... 详细信息

目的　研究力学刺激对猪骨髓基质干细胞 (BMSC)体外构建组织工程化软骨的影响。方法　取第二代猪BMSC以 5× 10 7/cm3 的密度接种于聚羟基乙酸 /聚羟基乳酸 (PGA/PLA)圆盘形支架上 ,一周后均改用软骨诱导液 [高糖DMEM培养基含 10 %胎牛血清 (FBS)、转化生长因子 (TGF) β110ng/ml、胰岛素样生长因子 (IGF) I 5 0ng/ml、地塞米松 4 0ng/ml]体外培养。根据不同的施加力分为 3组 :离心组设定离心力 10 0g ,2次 /d ,30min/次 ,间隔 12h ;摇床组设定为 80r/min ,每天施力 8h ;静止培养作为对照组。分别于第 4周、第 8周进行大体观察、组织学、组织化学、免疫组织化学 ,蛋白聚糖(GAG)定量等检测 ,比较不同力学刺激对诱导BMSC体外软骨形成的影响。结果第 4周时两实验组 ,即摇床组及离心组形成的细胞材料复合物基本保持原来的体积与外形 ,软骨陷窝形成 ,呈结节状或巢状分布并伴有GAG沉积及胶原合成 ,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。静止组体积缩小 ,有少量软骨陷窝结构形成 ;8周时两实验组形成的细胞材料复合物形状保持良好 ,浅灰白色 ,光泽好 ;HE染色结果显示大量成熟软骨陷窝形成 ,核仁清楚并有多处分裂相 ,细胞外基质沉积均匀 ;Safranin O染色显示有大量的GAG形成 ,Masson染色显示有较多新生胶原组织形成 ,免疫?

关键词：力学刺激猪骨髓基质干细胞体外软骨形成组织工程

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骨髓基质细胞修复猪膝关节非负重区软骨与骨复合缺损的实验研究

引用

中华医学杂志 2004年第11期84卷 925-931页

作者：周广东王晓云苗春雷刘天一祝联刘德莉崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海组织工程研究中心 200011

目的　探讨猪骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSC)复合聚羟基乙酸 /聚乳酸(PGA/PLA)支架修复关节软骨与骨复合缺损的可行性。方法　杂交猪 18只 ,抽取股骨骨髓 ,体外培养、扩增BMSC并分别经地塞米松诱导 (A组 )或地塞米松与转... 详细信息

目的　探讨猪骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSC)复合聚羟基乙酸 /聚乳酸(PGA/PLA)支架修复关节软骨与骨复合缺损的可行性。方法　杂交猪 18只 ,抽取股骨骨髓 ,体外培养、扩增BMSC并分别经地塞米松诱导 (A组 )或地塞米松与转化生长因子 β1(TGFβ1)联合诱导 (B组 ) ,以免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测其软骨分化表型。其中有 2只猪部分BMSC经绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染标记。诱导后的细胞分别接种到PGA/PLA支架 ,体外培养 1周后植入猪自体股骨下端非负重面软骨及骨复合缺损处 ,单纯支架植入 (C组 )及空白不处理 (D组 )作为对照。上述动物分别于 3( 6只 )、6 ( 10只 )个月时取材 ,进行大体观察、修复结果分级、组织学检查、葡糖氨基聚糖 (GAG)含量测定及生物力学测定。含GFP标记细胞的 2只猪 7个月时取材 ,共聚焦显微镜观察植入细胞的分布。结果　诱导后BMSC均能表达软骨特征性的Ⅱ型胶原与聚集蛋白聚糖 (aggrecan) ,两组细胞均与支架材料黏附良好。术后大体观察与组织学检查显示 :A组缺损以不完全修复为主 ,多数缺损软骨修复不良 ,而骨缺损基本修复 ,组织学主要为纤维性软骨及松质骨 ;B组缺损以完全修复为主 ,组织学表现为透明软骨及松质骨 ,少部分标本修复组织中含有纤维?

关键词：骨髓基质细胞细胞修复猪膝关节非负重区软骨骨复合缺损 BMSC 荧光抗体技术

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组织工程技术构建兔角膜基质组织的实验研究

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中华眼科杂志 2004年第8期40卷 517-521页

作者：胡晓洁王敏柴岗张艳李伟国刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海组织工程研究中心 200011

目的探讨应用组织工程技术构建兔角膜基质层组织的可行性。方法新西兰大白免40只,即母兔及其亲生子兔共20对。分离获取新生子兔角膜基质细胞,扩增、培养,汇合后,接种于聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,移植于对应的母兔角膜... 详细信息

目的探讨应用组织工程技术构建兔角膜基质层组织的可行性。方法新西兰大白免40只,即母兔及其亲生子兔共20对。分离获取新生子兔角膜基质细胞,扩增、培养,汇合后,接种于聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,移植于对应的母兔角膜基质层。绿色荧光蛋白(GFP)标记角膜基质细胞,示踪角膜基质构建过程。同时,对侧角膜仅行PGA移植,作为材料对照组。8周后取材,行组织学切片,Western blot检测Ⅰ型胶原及电镜下测定胶原纤维直径分布。结果术后8周,实验侧角膜逐渐恢复透明,形成新生角膜基质样组织,胶原与角膜表面平行,排列较整齐,组织学结构接近正常基质组织。实验组Western blot检测提示新生组织中基质细胞表达Ⅰ型胶原;电镜下胶原纤维直径[(29.0±4.7)nm]与正常角膜基质组织比较[(28.5±3.5)nm],差异无显著意义(P>0.05)。对照组正常角膜无新生基质组织形成。GFP标记角膜基质细胞,示踪角膜基质第8周时,荧光显微镜下可见新生组织呈绿色,提示GFP表达。结论应用组织工程技术可以在兔受体角膜内构建角膜基质层组织。(中华眼科杂志,2004,40:517-521)

关键词：组织工程兔角膜基质组织实验聚羟基乙酸角膜移植

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下颌骨缺损修复方法的研究进展

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上海口腔医学 2004年第2期13卷 137-140页

作者：袁捷翁雨来曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究中心上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心

下颌骨缺损可由多种疾病引起。近年来随着骨科学、生物材料学、细胞生物学的研究进步,下颌骨缺损修复方法也有一定的发展。作者系统回顾了近年来一些下颌骨缺损修复方法的研究和应用情况,并阐述了组织工程化骨在这方面的应用前景。

关键词：下颌骨缺损骨牵引术骨组织工程修复方法

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骨髓基质干细胞与珊瑚复合物体内回植时间的研究

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中华实验外科杂志 2004年第1期21卷 10-11页

作者：祝联周广东陈付国崔磊刘伟曹谊林上海市组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011

目的　探索骨髓基质干细胞和珊瑚复合物的体内回植时间。方法　骨髓基质干细胞经成骨诱导分化后与珊瑚复合 ,体外培养 1、3、5、7d时行相差显镜镜、扫描电镜观察 ,并行裸鼠皮下回植。结果　 3d时 ,骨髓基质干细胞与珊瑚达到较好的复合状... 详细信息

目的　探索骨髓基质干细胞和珊瑚复合物的体内回植时间。方法　骨髓基质干细胞经成骨诱导分化后与珊瑚复合 ,体外培养 1、3、5、7d时行相差显镜镜、扫描电镜观察 ,并行裸鼠皮下回植。结果　 3d时 ,骨髓基质干细胞与珊瑚达到较好的复合状态 ,皮下回植有新骨形成。结论骨髓基质干细胞与珊瑚复合后体外培养 3d时就可以体内回植。

关键词：骨髓基质干细胞珊瑚物体内回植组织工程

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反义Smad3腺病毒表达载体的构建及体外表达

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上海第二医科大学学报 2004年第8期24卷 600-602页

作者：吴娟娟王丹茹陆峻泓刘伟刘德莉曹谊林张涤生上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究中心上海200011

目的构建在体外细胞中高效表达的反义Smad3腺病毒载体,探讨应用于基因治疗病理性瘢痕的可行性。方法用DNA直接克隆连接的方法,构建反义Smad3腺病毒重组质粒,再用293细胞包装。重组腺病毒经扩增、纯化后,感染体外培养的瘢痕疙瘩成纤维... 详细信息

目的构建在体外细胞中高效表达的反义Smad3腺病毒载体,探讨应用于基因治疗病理性瘢痕的可行性。方法用DNA直接克隆连接的方法,构建反义Smad3腺病毒重组质粒,再用293细胞包装。重组腺病毒经扩增、纯化后,感染体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞,RT-PCR检测细胞中反义Smad3 mRNA的转录。结果经酶切和PCR鉴定证实反义Smad3重组腺病毒质粒构建成功,RT-PCR证实瘢痕疙瘩细胞中有腺病毒载体介导的反义Smad3 mRNA的表达。结论所构建的反义Smad3腺病毒表达载体可在瘢痕疙瘩成纤维细胞中表达,可进一步应用于瘢痕疙瘩基因治疗的研究。

关键词：反义Smad3 腺病毒基因表达载体体外表达成纤维细胞基因治疗

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软骨细胞与骨髓基质细胞共培养体外软骨形成的实验研究

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中华医学杂志 2004年第20期84卷 1716-1720页

作者：周广东苗春雷王晓云刘天一崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海组织工程研究中心 200011 潍坊医学院整形外科研究所

目的　探讨软骨细胞与骨髓基质细胞 (BMSC)共培养体外构建软骨的可行性 ,以阐明软骨细胞能否诱导BMSC向软骨细胞分化并形成软骨组织。方法　分别培养猪的BMSC与耳软骨细胞 ,将 2种细胞按 8:2 (BMSC :软骨细胞 )比例混匀 ,以 5 0× ... 详细信息

目的　探讨软骨细胞与骨髓基质细胞 (BMSC)共培养体外构建软骨的可行性 ,以阐明软骨细胞能否诱导BMSC向软骨细胞分化并形成软骨组织。方法　分别培养猪的BMSC与耳软骨细胞 ,将 2种细胞按 8:2 (BMSC :软骨细胞 )比例混匀 ,以 5 0× 10 7/ml的终浓度接种于聚羟基乙酸 /聚乳酸支架 (PGA/PLA ,直径 9mm ,高 3mm)作为共培养组 ,相同终浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSC分别接种于相同支架作为阳性对照及阴性对照 ,1 0× 10 7/ml(相当于共培养组中软骨细胞数 )的单纯软骨细胞接种作为低浓度软骨细胞对照。每组各接种 6例标本 ,每例接种细胞悬液 2 0 0 μl。全部标本均于体外培养 8周后取材 ,通过大体观察、湿重测定、蛋白多糖含量测定、组织学及免疫组织化学等相关检测对新生软骨进行评价。结果各组细胞均与材料支架黏附良好。共培养组及阳性对照组 (软骨细胞组 )体外培养 8周后均形成了成熟的软骨组织 ,并基本保持了复合物初始的大小和形状 ,2组新生软骨外观及组织学特征基本相同 ,免疫组织化学也显示 2组均表达软骨特异性细胞外基质Ⅱ型胶原。定量测定结果表明 ,共培养组的平均湿重和蛋白多糖含量均达到阳性对照组的 80 %以上。阴性对照组 (单纯BMSC组 )在体外培养过程中逐渐皱缩变形 ,仅在组织块边缘的局部区?

关键词：软骨细胞体外培养 BMSC 共培养软骨形成骨髓基质细胞软骨组织阳性对照细胞悬液标本

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组织工程人工肌腱的研究进展

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国外医学（生物医学工程分册） 2004年第2期27卷 104-107页

作者：翟华玲刘伟曹谊林 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科 200011 上海市第二医科大学组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科

本文对目前组织工程肌腱的研究成果作一综述,主要从细胞支架、种子细胞、生长因子、周期性张力等各方面进行了阐述。今后,对材料进行合理改进,使之能供给肌腱细胞最适合的生存环境,解决种子细胞的来源问题,加入适当的生长因子,并施以符... 详细信息

本文对目前组织工程肌腱的研究成果作一综述,主要从细胞支架、种子细胞、生长因子、周期性张力等各方面进行了阐述。今后,对材料进行合理改进,使之能供给肌腱细胞最适合的生存环境,解决种子细胞的来源问题,加入适当的生长因子,并施以符合生理条件的周期性张力,组织工程化肌腱将成为修复肌腱缺损的一种理想而可靠的方法。

关键词：细胞支架肌腱细胞肌腱组织工程

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