检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2001年第1期18卷 21-22页

作者：赵任郁宝铭郑民华李东华张国驰童善庆邹鸿志上海第二医科大学附属瑞金医院外科 200025 上海第二医科大学微生物教研室

目的　探讨硒对淋巴细胞抗大肠癌过程中凋亡相关基因Fas/FasL表达的影响。方法　以半胱氨酸硒作为影响因素 ,人T淋巴细胞为效应细胞及人结肠癌细胞 (LoVo细胞株 )为靶细胞 ,采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、凋亡细胞荧光计数检测凋亡... 详细信息

目的　探讨硒对淋巴细胞抗大肠癌过程中凋亡相关基因Fas/FasL表达的影响。方法　以半胱氨酸硒作为影响因素 ,人T淋巴细胞为效应细胞及人结肠癌细胞 (LoVo细胞株 )为靶细胞 ,采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、凋亡细胞荧光计数检测凋亡细胞的数量 ,逆转录聚合酶链 (RT PCR)反应、原位杂交技术检测 ,硒对效应细胞杀伤肿瘤细胞过程中Fas/FasL表达的影响。结果　不同浓度的半胱氨酸硒 (0 .5、1.0mg/L)作用 48h后 ,可增强人T淋巴细胞抗肿瘤活性 [分别为 (2 5 .12± 3 .91) % ,(46 .17± 3 .6 8) % ,P <0 .0 5 ] ,且肿瘤细胞的凋亡比例上升 [分别为(18.6± 4.1) % ,(32 .7± 2 .1) % ,P <0 .0 5 ] ;能使免疫效应细胞和肿瘤细胞表达FasL和Fas水平增高。结论　硒可提高淋巴细胞的抗肿瘤作用。

关键词：硒 T淋巴细胞 Fas/Fas配体大肠癌

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核心蛋白聚糖对肾间质成纤维细胞特性作用的研究

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中华肾脏病杂志 2003年第5期19卷 310-314页

作者：王伟铭陈楠卢健陈诗书董德长上海第二医科大学附属瑞金医院肾脏科 200025 上海第二医科大学生化教研室

目的通过基因转染技术,将核心蛋白聚糖(DCN)转染成纤维细胞,观察DCN在成纤维细胞中的表达,及其表达的DCN对肾间质成纤维细胞特性的影响,探索肾脏疾病基因治疗的途径。方法在成功构建重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的基础上,采用Lipofect... 详细信息

目的通过基因转染技术,将核心蛋白聚糖(DCN)转染成纤维细胞,观察DCN在成纤维细胞中的表达,及其表达的DCN对肾间质成纤维细胞特性的影响,探索肾脏疾病基因治疗的途径。方法在成功构建重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的基础上,采用LipofectAMINE脂质体介导质粒DNA转染逆转录病毒包装细胞PA317,进行逆转录病毒的包装。以NIH 3T3细胞作为指标靶细胞进行病毒滴度测定。重组逆转录病毒在Polybrene的辅佐下感染正常大鼠肾间质成纤维细胞,并应用G418筛选。所得抗G418细胞克隆FB(LDCNSN)应用PCR和逆转录-PCR分析外源基因的整合和表达。采用Western印迹检测转基因细胞FB(LDCNSN)培养细胞上清液中DCN蛋白的检测。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪分别测定细胞增殖和细胞周期,观察DCN对肾间质成纤维细胞增殖和细胞周期的影响。结果重组逆转录病毒载体pL(DCN)SN的质粒DNA经LipofectAMINE介导,转染PA317包装细胞。G418筛选出抗性克隆,扩增。收集含重组逆转录病毒细胞上清液,在Polybrene的辅佐下感染大鼠肾间质成纤维细胞,并获得抗G418的细胞克隆FB(LDCNSN)。PCR和逆转录-PCR分析外源基因DCN的整合和表达,电泳可见1.1kb的条带。Western印迹分析FB(LDCNSN)细胞培养上清液中DCN蛋白质,证实FB(LDCNSN)表达DCN蛋?

关键词：核心蛋白聚糖肾间质成纤维细胞特性转化生长因子逆转录病毒基因疗法

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转化生长因子β1对肾小管上皮细胞中结缔组织生长因子基因启动子活性的影响

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中华肾脏病杂志 2005年第8期21卷 453-457页

作者：陈楠赵青王伟铭卢健上海第二医科大学附属瑞金医院肾脏科 200025 上海第二医科大学生化教研室

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞系HK-2中结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子活性的调控作用,以及丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)途径对该生长因子作用的影响。方法构建含有人类CTGF基因启动子的报告基因pCTGF-luc,... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞系HK-2中结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子活性的调控作用,以及丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)途径对该生长因子作用的影响。方法构建含有人类CTGF基因启动子的报告基因pCTGF-luc,将其瞬时转染HK-2细胞。通过检测荧光素酶的活性观察TGF-β1和MAPK途径抑制剂对CTGF基因启动子活性的影响。结果TGF-β1以剂量和时间依赖方式上调HK-2中CTGF基因启动子的活性。最佳刺激浓度是5ng/ml,最佳刺激时间为12h,荧光素酶相对活性分别为对照组的1.82倍和2.10倍(P<0.05)。应用PD98059、SB203580和SP600125分别特异性抑制MAPK途径的胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、蛋白激酶p38(p38MAPK)和c-Jun-氨基末端激酶(JNK)通路,对TGF-β1上调CTGF启动子活性的作用有不同影响。PD98059显著增加HK-2中pCTGF-luc的基础活性,并在一定浓度范围内(0.5-10μmol/L)促进TGF-β1的上调作用。SB203580对pCTFGF-luc基础活性无影响,但以剂量依赖方式显著抑制TGF-β1的激活效应。而SP600125对基础状态和TGF-β1刺激下CTGF基因启动子活性无影响。结论TGF-β1以剂量和时间依赖方式上调HK-2中CTGF基因启动子活性,在转录水平调节CTGF表达。MAPK途径的ERK和p38MAPK通路可影响TGF-β1的这一调控作用。

关键词：转化生长因子β1 肾小管上皮细胞结缔组织生长因子基因启动子丝裂原激活蛋白激酶

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核心蛋白聚糖基因治疗肾功能衰竭大鼠的实验研究

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中华肾脏病杂志 2003年第6期19卷 355-359页

作者：王伟铭陈楠卢健王朝晖李娅陈诗书董德长上海第二医科大学附属瑞金医院肾脏科 200025 上海第二医科大学生化教研室

目的利用已转染核心蛋白聚糖(DCN)的成纤维细胞可表达DCN,以中和肾功能衰竭(肾衰)大鼠肾组织内增高的TGF-β1活性,探索基因治疗肾功能不全的新途径。方法选用雄性SD大鼠在无菌条件下采用5/6肾脏大部分切除。假手术组(A组)6只,5/6肾切... 详细信息

目的利用已转染核心蛋白聚糖(DCN)的成纤维细胞可表达DCN,以中和肾功能衰竭(肾衰)大鼠肾组织内增高的TGF-β1活性,探索基因治疗肾功能不全的新途径。方法选用雄性SD大鼠在无菌条件下采用5/6肾脏大部分切除。假手术组(A组)6只,5/6肾切除肾衰大鼠模型建立后随机分组,手术对照组(不予任何处理,为B组)10只,空白对照组[成纤维细胞FB(LXSN)细胞处理组,为C组110只,治疗组[FB(LDCNSN)细胞处理组,为D组]10只。4周后观察体重、血脂、肾功能、肾组织病理学变化,并应用免疫组织化学方法检测肾组织内TGF-β1和DCN的表达。结果经不同处理4周后,各组大鼠在体重和血脂方面各组之间差异无显著性意义。D组大鼠BUN、Scr水平与C组相比有显著下降(P<0.05),而与其基础值相比较虽有所升高,但差异无显著性意义。D组肾衰大鼠4周后,DCN在肾组织内的表达明显增加,与各组比较,差异有显著性意义;而TGF-β1的表达与B组和C组比较差异无显著性意义。同时,病理上也显示D组大鼠肾间质损害明显减轻,与B组和C组比较,差异有显著性意义。结论通过转染DCN的成纤维细胞转导至肾脏,可在肾脏局部表达DCN。高表达的DCN可改善肾纤维化,延缓肾衰的进程。

关键词：核心蛋白聚糖基因治疗肾功能衰竭实验研究基因转染肾间质

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小金丸加减为主治疗中晚期胃癌术后患者疗效观察

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中西医结合杂志 1990年第6期10卷 343-344页

作者：周阿高丁钰熊陈梅芳黄大慰李德华江绍基上海第二医科大学中医学教研室上海200025 上海第二医科大学附属仁济医院

运用小金丸加减为主治疗中晚期胃癌(术后)患者44例,并与对照组28例进行对比观察,取得了较好的近期疗效。结果显示,小金丸加减能明显提高胃癌患者1年,2年生存率( P均<0.05);降低紫舌阳性率(P<0.001);改善 AT-Ⅲ.Fn、Fa 和ⅧR:Ag ... 详细信息

运用小金丸加减为主治疗中晚期胃癌(术后)患者44例,并与对照组28例进行对比观察,取得了较好的近期疗效。结果显示,小金丸加减能明显提高胃癌患者1年,2年生存率( P均<0.05);降低紫舌阳性率(P<0.001);改善 AT-Ⅲ.Fn、Fa 和ⅧR:Ag 等血凝指标(P 均<0.05)。说明该方能增强机体抗凝-纤溶能力,改善血瘀状态,提高生存率。

关键词：小金丸胃癌紫舌阳性率生存率

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小鼠巨细胞病毒模型的建立

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第1期12卷 58-60页

作者：季育华朱月秋陈淑云周越川上正也徐桂林上海第二医科大学附属瑞金医院检验科上海第二医科大学微生物教研室日本北里大学医学部

目的为了探讨巨细胞病毒的致病机理。方法４周龄Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠腹腔内接种小鼠巨细胞病毒（ＭＣＭＶ）。结果导致小鼠急性感染期体重下降，生长迟缓，唾液腺肿胀以至于死亡。唾液腺中检出高滴度感染性病毒（２．０×１０５ＰＦＵ... 详细信息

目的为了探讨巨细胞病毒的致病机理。方法４周龄Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠腹腔内接种小鼠巨细胞病毒（ＭＣＭＶ）。结果导致小鼠急性感染期体重下降，生长迟缓，唾液腺肿胀以至于死亡。唾液腺中检出高滴度感染性病毒（２．０×１０５ＰＦＵ／ｍｌ）。在小鼠３Ｔ３／Ｓｗｉｓａｌｂｉｎｏ细胞单层上形成的空斑清晰，易判断计数、镜检组织切片可见脑神经原细胞胞浆内包涵体。结论小鼠巨细胞病毒模型的建立为抗－ＣＭＶ有效药物的筛选以及对ＣＭＶ感染的预防、治疗提供了资料。

关键词：巨细胞病毒包涵体小鼠模型空斑形成单位

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大鼠烫伤创面愈合过程中皮肤基底膜层黏连蛋白的变化

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中华创伤杂志 2002年第7期18卷 410-412页

作者：丁韧贾生贤赵雁飞陈玉英易静汤雪明第二医科大学附属瑞金医院烧伤研究所上海200025 上海第二医科大学病理教研室上海第二医科大学细胞生物学教研室

目的　研究烫伤愈合过程中层黏连蛋白 (LN)的表达。　方法　采用免疫组化方法在大鼠浅Ⅱ度烫伤 (伤后 1 ,3 ,5 ,7,1 0 ,1 4d组 )、Ⅲ度烫伤切痂混合移植模型 (大张异体皮移植 3 ,5 ,7,1 4 ,2 1 ,2 8d组 )上研究了愈合过程中LN的变化。... 详细信息

目的　研究烫伤愈合过程中层黏连蛋白 (LN)的表达。　方法　采用免疫组化方法在大鼠浅Ⅱ度烫伤 (伤后 1 ,3 ,5 ,7,1 0 ,1 4d组 )、Ⅲ度烫伤切痂混合移植模型 (大张异体皮移植 3 ,5 ,7,1 4 ,2 1 ,2 8d组 )上研究了愈合过程中LN的变化。　结果　正常皮肤基底膜中含有LN ,而创伤后表皮细胞迁移缘LN消失 ,愈合后表皮下LN又出现。混合移植后 7d出现异体皮排异反应 ,表现为异体表皮细胞逐渐被铲除 ,而异体表皮下仍可见LN阳性表达。异体皮移植后 1 0d ,从自体皮迁移来的表皮细胞下有零星LN ,而异体表皮细胞被完全铲除 ,异体皮基底膜处LN仍基本保持完整。异体皮移植后 2 1d ,自体表皮已基本覆盖异体皮区 ,此时LN表达已基本完整。

关键词：层粘连蛋白伤口愈合免疫组织化学混合移植大鼠烫伤皮肤基底膜

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肾小球薄基底膜病的超微病理诊断

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电子显微学报 2002年第6期21卷 874-878页

作者：朱平史浩张岚郝翠兰陈新宇上海第二医科大学细胞生物学教研室上海200025 上海第二医科大学附属瑞金医院上海200025

对 110 0例肾活检中 5 2例 (4 7% )肾小球薄基底膜病 (TBMD)进行回顾性总结。 5 2例TBMD中 ,4 6例为儿童(88 5 % ) ,6例为成人 (11 5 % )。TBMD电镜下以基底膜弥漫变薄为特征。成人和儿童正常GBM厚度不同 ,因此诊断TBMD标准亦不相同。对... 详细信息

对 110 0例肾活检中 5 2例 (4 7% )肾小球薄基底膜病 (TBMD)进行回顾性总结。 5 2例TBMD中 ,4 6例为儿童(88 5 % ) ,6例为成人 (11 5 % )。TBMD电镜下以基底膜弥漫变薄为特征。成人和儿童正常GBM厚度不同 ,因此诊断TBMD标准亦不相同。对于TBMD的诊断必须密切结合临床和病理检查 ,应符合以下几点 :1、临床表现为单纯复发性血尿 ,2、光镜和免疫荧光正常 ,3、电镜下无电子致密物沉积 ,仅表现基底膜弥漫变薄 :成人GBM厚度 <2 5 0nm ,6～ 10岁儿童GBM厚度 <2 0 0nm ,5岁以内GBM厚度 <15 0nm。

关键词：病理诊断肾小球薄基底膜病 TBMD 超微结构电镜观察

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氧化酚砷对血液肿瘤细胞系的体外效应

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癌症 2000年第1期19卷 27-30页

作者：孙岳平贾培敏蔡循黄莺杨洁沈玉雷余韵王振义陈国强上海第二医科大学生物学教研室上海200025 上海第二医科大学附属瑞金医院上海200025

目的：了解氧化酚砷（Ｐｈｅｎｙｌａｒｓｉｎｅｏｘｉｄｅ，ＰＡＯ）对血液肿瘤细胞系的影响。方法：８种血液肿瘤系经０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０.０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ处理达一定时间后，经台盼蓝排除法计... 详细信息

目的：了解氧化酚砷（Ｐｈｅｎｙｌａｒｓｉｎｅｏｘｉｄｅ，ＰＡＯ）对血液肿瘤细胞系的影响。方法：８种血液肿瘤系经０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０.０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ处理达一定时间后，经台盼蓝排除法计数细胞活力和应用流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量分布。结果和结论：在生长抑制和诱导凋亡方面，ＰＡＯ对血液肿瘤细胞的效应谱相对较广，０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ能抑制某些血液肿瘤细胞的生长，并诱导其凋亡。但是，不同来源的血液肿瘤细胞系对ＰＡＯ的敏感性不完全相同。

关键词：氧化酚砷血液肿瘤细胞凋亡体外效应

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用基因芯片研究同一血管瘤增生和消退期差异表达基因

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中华整形外科杂志 2003年第6期19卷 452-455页

作者：张莉王炜祁佐良董佳生宋怀东杨劲松林晓曦上海第二医科大学附属九院整形外科 200011 上海第二医科大学附属瑞金医院分子中心上海第二医科大学生化教研室

目的　利用基因表达谱芯片技术寻找血管瘤增生期到消退期之间差异表达的基因 ,初步探索血管瘤增生与自然消退的分子机制。方法　将 4 0 96条cDNA用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片 ;将同一血管瘤患儿的增生期和消退期瘤体组织的m... 详细信息

目的　利用基因表达谱芯片技术寻找血管瘤增生期到消退期之间差异表达的基因 ,初步探索血管瘤增生与自然消退的分子机制。方法　将 4 0 96条cDNA用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片 ;将同一血管瘤患儿的增生期和消退期瘤体组织的mRNA逆转录为cDNA、分别标记Cy3和Cy5两种荧光 ,制备成cDNA探针 ,与表达谱芯片杂交 ,通过计算机扫描、数据处理筛选出差异表达的基因。结果　差异表达的基因有 194条 ,其中 115基因条上调 ,79条下调 :①增生期一些细胞因子和生长因子高表达 ;②消退期细胞凋亡因子表达增加 ;③血管形成和原癌基因参与血管瘤的增生 ;④线粒体激活的细胞凋亡通路和Wnt β catenin通路可能与血管瘤的发生和发展有关。结论　血管瘤的发生可能是细胞增殖和凋亡比例失调所致。

关键词：基因芯片表达谱血管瘤细胞增殖细胞凋亡差异表达基因

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